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Cellules 4T1 - Aperçu essentiel de la recherche sur les cellules cancéreuses du sein et de leurs applications

La lignée cellulaire 4T1 est une lignée cellulaire murine de cancer du sein transplantable. Elle est largement utilisée comme modèle tumoral in vitro génétiquement identique pour étudier le cancer du sein humain. Les cellules 4T1 sont hautement invasives et tumorigènes ; elles ont tendance à métastaser à partir du site tumoral primaire dans la glande mammaire vers d'autres sites, notamment le foie, les ganglions lymphatiques, les poumons, les os et le cerveau, ce qui les rend idéales pour l'étude des métastases du cancer du sein [1].

📋 Lignée cellulaire 4T1 — En bref
Milieu de culture
Le milieu RPMI 1640 est utilisé pour la culture des cellules 4T1. Du sérum fœtal bovin (FBS) à 10 %, 2,0 g/L de NaHCO3 et 2,1 mM de glutamine stable sont ajoutés au milieu de culture pour une croissance cellulaire optimale.
Temps de doublement
Le temps de doublement moyen de la population rapporté pour les cellules de cancer du sein 4T1 est de 14 heures.
Type de croissance
La lignée 4T1 est une lignée cellulaire adhérente.
Niveau de biosécurité
BSL-1
Disponible auprès de
Cytion — Commander 4T1

Caractéristiques générales et origine des cellules 4T1

Il est essentiel de connaître l'origine et les caractéristiques générales d'une lignée cellulaire avant de travailler avec celle-ci. Dans cette section, nous abordons les notions de base concernant les cellules cancéreuses mammaires 4T1. Par exemple, que sont les cellules 4T1 ? Quelles sont les caractéristiques de la lignée cellulaire 4T1 ? Quelle est l'origine de la lignée cellulaire 4T1 ? Quelle est la morphologie de la lignée cellulaire 4T1 ?

  • La lignée 4T1 est une lignée cellulaire tumorale mammaire issue d'une tumeur mammaire apparue spontanément chez la souche de souris BALB/c. Ces cellules hautement invasives et tumorigènes imitent étroitement le comportement du cancer du sein humain en termes de croissance et de propagation métastatique. Plus précisément, le modèle tumoral 4T1 permet d'étudier le cancer du sein triple négatif (CSTN).
  • Les cellules 4T1 sont adhérentes et présentent une morphologie de type cellulaire épithélial.

Ligne cellulaire 4T1 vs EMT-6

Les lignées 4T1 et EMT-6 sont des modèles cellulaires murins non immunogènes utilisés pour l'étude du cancer du sein triple négatif. Ici, les cellules 4T1 sont plus agressives et invasives que les cellules EMT-6, qui présentent des propriétés moins invasives [2].

Cellules 4T1 vs 4T07

La lignée 4T07 est également une lignée cellulaire cancéreuse murine. La principale différence entre les cellules 4T1 et 4T07 est la suivante : les cellules 4T1 peuvent quitter le site tumoral primaire et se propager pour former des métastases secondaires visibles, tandis que les cellules 4T07 ne peuvent pas former de métastases visibles bien qu'elles quittent le site primaire [3].

Image tomographique au MEB d'une cellule 4T1.

Informations sur la culture de la lignée cellulaire 4T1

La lignée cellulaire 4T1 de cancer du sein offre de nombreuses applications de recherche dans le domaine biomédical. Pour cultiver ces cellules, vous devez prendre connaissance des points clés suivants : qu'est-ce que le temps de doublement des cellules 4T1 ? Comment cultiver les cellules 4T1 ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules 4T1 ?

Points clés pour la culture des cellules 4T1

Temps de doublement :

Le temps de doublement moyen de la population rapporté pour les cellules de cancer du sein 4T1 est de 14 heures.

Adhérentes ou en suspension :

La lignée 4T1 est une lignée cellulaire adhérente.

Rapport de sous-culture :

Un rapport de division de 1:6 et 1:8 est recommandé pour la lignée cellulaire 4T1 de cancer du sein triple négatif. Pour la division, les cellules sont rincées avec du PBS et incubées avec l'enzyme Accutase pendant 8 à 10 minutes. Les cellules dissociées sont recueillies par centrifugation et remises en suspension dans un milieu frais. Les cellules remises en suspension sont transférées dans un nouveau flacon pour la croissance.

Milieu de croissance :

Le milieu RPMI 1640 est utilisé pour la culture des cellules 4T1. 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2,0 g/L de NaHCO3 et 2,1 mM de glutamine stable sont ajoutés au milieu de culture pour une croissance cellulaire optimale.

Conditions de culture :

Les cellules tumorales 4T1 sont conservées dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO2.

Conservation : 

Les cellules 4T1 doivent être conservées à une température inférieure à -150 °C, c'est-à-dire dans un congélateur électrique ou en phase vapeur d'azote liquide, afin de maintenir la viabilité cellulaire.

Procédé et milieu de congélation :

Les milieux CM-1 ou CM-ACF sont recommandés pour la lignée cellulaire 4T1. Une méthode de congélation lente est préférable, car elle préserve la viabilité cellulaire en permettant une baisse progressive de la température de 1 °C.

Procédé de décongélation :

Le flacon de cellules congelées est maintenu dans un bain-marie à 37 °C pendant quelques secondes jusqu'à ce que les cellules soient décongelées et qu'il ne reste plus qu'un petit morceau de glace. Ces cellules sont remises en suspension dans le milieu frais et versées dans le flacon pour la culture. Après 24 heures d'incubation, le milieu est remplacé pour éliminer les composants du milieu de congélation.

Niveau de biosécurité :

Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est recommandé pour la culture des cellules de cancer du sein 4T1.

4t1 cells

Cellules murines de cancer du sein 4T1, grossies 20 et 10 fois.

Lignée cellulaire T1 : avantages et inconvénients

Cette section de l'article traite des avantages et des inconvénients associés au modèle métastatique 4T1.

Avantages

Les principaux avantages de la lignée cellulaire 4T1 sont les suivants :

  • Tumorigénicité :

    La 4T1 est une lignée cellulaire hautement tumorigène. Ces cellules ont la capacité de former un modèle murin syngénique 4T1 pour l'étude du cancer du sein lorsqu'elles sont injectées à une souris. Par conséquent, le modèle 4T1 est idéal pour étudier le développement, la croissance et les métastases tumorales. De plus, il est utile pour le criblage et l'évaluation de médicaments thérapeutiques.

  • Modèle métastatique in vitro :

    Le modèle 4T1 présente une tendance naturelle à la métastase qui permet aux chercheurs d'étudier efficacement les mécanismes et les voies sous-jacents impliqués dans le processus de métastase. De plus, les cellules 4T1 sont résistantes à la 6-thioguanine. Cela permet une détection efficace des cellules micrométastatiques avec une précision améliorée par rapport à d'autres modèles, car cela élimine la nécessité de peser les organes cibles et de compter les nodules.

Inconvénients

L'inconvénient associé à la lignée cellulaire 4T1 est :

  • Agressivité/taux de croissance rapide :

    La lignée cellulaire 4T1 est une lignée cellulaire de cancer du sein triple négatif très agressive. En raison de son taux de croissance rapide, l'utilisation de cette lignée cellulaire dans des expériences à long terme et le contrôle des variables expérimentales deviennent difficiles.

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Lignée cellulaire 4T1 : applications dans la recherche sur le cancer

La lignée cellulaire murine 4T1 est un outil de recherche précieux pour l'étude de la biologie du cancer et l'évaluation de nouveaux traitements. Les principales applications des cellules 4T1 sont énumérées ci-dessous :

Biologie du cancer

La lignée cellulaire 4T1 est largement utilisée pour étudier le développement et la croissance du cancer. Il s'agit d'un modèle in vitro idéal pour étudier et explorer les différents mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans la progression tumorale et les métastases. De plus, elle peut permettre de mettre en lumière le rôle des voies de signalisation cellulaire, du microenvironnement et de l'expression génique dans ces processus. Des recherches menées en 2019 ont utilisé des cellules 4T1 pour découvrir les mécanismes à l'origine de l'invasion et de la migration des cellules cancéreuses. Les résultats ont révélé que les gènes STAT3, MMP2 et MMP9 sont impliqués, et que l'inhibition de ces gènes peut restreindre considérablement la migration et l'invasion des cellules cancéreuses [4]. Des études similaires ont également mis en évidence plusieurs autres voies de signalisation impliquées dans le développement tumoral et les métastases.

De plus, le modèle 4T1 est essentiel pour comprendre le microenvironnement du cancer du sein, notamment l'infiltration des cellules immunitaires et la croissance de la tumeur primaire. Des études axées sur le microenvironnement tumoral 4T1 ont apporté des éclaircissements significatifs sur le rôle des cellules immunitaires et des cytokines, telles que l'expression de CXCL13, dans la progression tumorale. Ce modèle facilite également l'étude des niches métastatiques et des métastases tumorales, en particulier dans le cancer du sein à un stade avancé, où la colonisation par le carcinome mammaire est fréquente.

Recherche en thérapie anticancéreuse

La lignée cellulaire 4T1 est largement utilisée dans la recherche sur le traitement du cancer pour le criblage et l'évaluation de nouveaux traitements. Une étude a exploré le potentiel cytotoxique de nanoparticules de fer synthétisées de manière écologique à partir d'extrait de romarin (Rosemary-FeNPs) et d'extrait pur de romarin sur la lignée cellulaire 4T1. Les résultats de cette recherche suggèrent que les Rosemary-FeNPs sont plus prometteuses que l'extrait pur [5]. De même, une étude menée en 2021 a examiné le potentiel antitumoral de l'extrait de gingembre sur des cellules de cancer du sein 4T1 et un modèle murin 4T1 [6].

Outre les extraits naturels, la lignée cellulaire 4T1 est utilisée pour évaluer l'efficacité des agents chimiothérapeutiques traditionnels. Par exemple, des recherches portant sur l'association du cisplatine à d'autres traitements ont montré une augmentation de la mort cellulaire tumorale et une réduction de la progression tumorale dans le modèle 4T1. L'introduction de la luciférase de luciole dans les cellules 4T1 a permis l'imagerie en temps réel de la croissance tumorale et du phénotype métastatique, facilitant ainsi l'évaluation de l'impact de divers traitements.

De plus, la résistance de la lignée cellulaire 4T1 à la 6-thioguanine a facilité les études sur les cellules micrométastatiques, améliorant ainsi la détection et l'analyse des métastases. Cette lignée cellulaire joue également un rôle crucial dans l'étude de l'immunité antitumorale et des effets de l'immunothérapie, en particulier dans le contexte des modèles murins orthotopiques, où les chercheurs peuvent reproduire fidèlement les cancers humains.

Dans l'ensemble, la lignée cellulaire 4T1 reste un outil indispensable dans la recherche en oncologie, qu'il s'agisse de comprendre les mécanismes fondamentaux de la biologie du cancer ou de développer et de tester de nouvelles stratégies thérapeutiques.

Cellules 4T1 : publications de recherche

Cette section de l'article présentera quelques publications intéressantes et parmi les plus citées sur les cellules 4T1.

Activité antiproliférative potentielle des AgNPs synthétisées à partir de M. longifolia dans la lignée cellulaire 4T1 par la génération de ROS et la détérioration de la membrane cellulaire

Cet article a été publié en 2018 dans le Journal of Photochemistry and Photobiology. La recherche a suggéré que les nanoparticules d'argent synthétisées à partir de Madhuca longifolia exercent un effet anti-prolifératif sur les cellules tumorales 4T1 via la dégradation de la paroi cellulaire et la génération de ROS.

Cytotoxicité et effets apoptotiques du verbascoside sur la lignée cellulaire 4T1 du cancer du sein

Cette étude, publiée dans la revue BMC Pharmacology and Toxicology (2021), a suggéré que le verbascoside, un composé naturel, induisait des effets apoptotiques dans les cellules cancéreuses mammaires 4T1 via la signalisation TLR4.

L'eupatorine a inhibé la progression tumorale et renforcé l'immunité dans un modèle murin de cancer du sein 4T1

Cette recherche a été publiée dans Integrative Cancer Therapies en 2020. Cette étude a utilisé des cellules 4T1 pour développer un modèle murin syngénique 4T1 et a exploré le potentiel anticancéreux de l'eupatorine à l'aide de ce modèle. L'eupatorine a retardé le développement tumoral dans le modèle murin 4T1.

Effet inhibiteur de l'extrait de Viola odorata sur la croissance tumorale et les métastases dans le modèle de cancer du sein 4T1

Cette recherche, publiée dans l'Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), a suggéré qu'une plante médicinale, Viola odorata, avait des effets cytotoxiques potentiels sur les cellules 4T1.

Les nanoparticules lipidiques solides chargées de docétaxel préviennent la croissance tumorale et les métastases pulmonaires des cellules de carcinome mammaire murin 4T1

Cette étude suggère que les nanoparticules lipidiques solides chargées de docétaxel (SLN chargées de DTX) pourraient constituer un agent prometteur pour traiter le cancer du sein et prévenir les métastases, car elles limitent la croissance tumorale et les métastases pulmonaires des cellules 4T1.

Ressources sur la lignée cellulaire 4T1 : protocoles, vidéos et plus encore

Voici quelques ressources sur les cellules 4T1 :

Le lien suivant contient le protocole de culture cellulaire pour les cellules 4T1 :

  • Lignée cellulaire 4T1 : ce lien vers un site web contient toutes les informations utiles concernant la manipulation des cultures 4T1. Il fournit des informations sur les milieux de culture, ainsi que des protocoles de manipulation pour les cultures cryoconservées et les cultures en prolifération.

Questions fréquemment posées sur la lignée cellulaire 4T1

Le blog 4T1 propose des analyses, des mises à jour sur les recherches et des techniques expérimentales liées à la lignée cellulaire de carcinome mammaire 4T1, couramment utilisée dans les études sur la croissance et les métastases du cancer du sein.

Les lignées cellulaires de carcinome mammaire, notamment la lignée 4T1, sont indispensables pour étudier la croissance tumorale et les métastases, ainsi que l'infiltration des cellules immunitaires dans le microenvironnement du cancer du sein.

L'expression de la CXCL13 revêt une importance cruciale dans la recherche sur le cancer du sein, car elle intervient dans l'infiltration des cellules immunitaires et la formation de niches métastatiques, ce qui permet de mieux comprendre la progression tumorale et les métastases.

Le modèle de tumeur glandulaire, tel que le modèle 4T1, sert à simuler un cancer du sein à un stade avancé et la colonisation par un carcinome mammaire, aidant ainsi les chercheurs à comprendre l'évolution de la maladie et les traitements potentiels.

La croissance de la tumeur primaire est un facteur déterminant dans les études sur les métastases cancéreuses ; elle sert de base pour comprendre comment les tumeurs se propagent vers d'autres organes, comme dans le modèle murin intraductal.

Le modèle murin de cancer du sein 4T1 est utilisé pour étudier l'immunité antitumorale, les traitements combinés à base de cisplatine et la mort cellulaire tumorale, offrant ainsi une vision globale de l'efficacité des traitements contre le cancer du sein.

Les modèles murins orthotopiques, notamment le modèle 4T1, sont essentiels pour étudier le microenvironnement tumoral, la réponse immunitaire et les métastases dans un contexte qui reproduit fidèlement le cancer du sein chez l'humain.

Un modèle 4T1 visualisable permet aux chercheurs d'observer en temps réel la croissance tumorale et les métastases, ce qui facilite les études sur les métastases osseuses, le volume des tumeurs 4T1 et l'efficacité de traitements tels que le cisplatine.

L'immunothérapie anticancéreuse cible les niches métastatiques en renforçant la capacité du système immunitaire à combattre les cellules cancéreuses, souvent en association avec d'autres traitements tels que le cisplatine afin d'améliorer l'efficacité globale.

La luciférase de luciole est utilisée pour la transduction des cellules 4T1 afin de surveiller la croissance tumorale et le phénotype métastatique, offrant ainsi aux chercheurs un outil puissant pour étudier la progression du cancer et les interventions thérapeutiques.

Références

  1. Pulaski, B.A. et S. Ostrand-Rosenberg, Modèle murin de tumeur mammaire 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Chapitre 20 : p. Unité 20.2.
  2. Maxwell, K.G., Immunomodulation des cellules cancéreuses mammaires pour la vaccination par tumeur entière. 2016.
  3. Walker, I., et al., Les tumeurs mammaires induisent l'expression de cytokines pro-inflammatoires centrales, mais pas de déficits comportementaux chez les souris Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1) : p. 1-13.
  4. Li, Y., et al., L'inhibition de la voie de signalisation Stat3 par la pectolinarigénine, un produit naturel, atténue les métastases du cancer du sein. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10 : p. 1195.
  5. Farshchi, H.K., et al., Synthèse verte de nanoparticules de fer à partir d’extrait de romarin et évaluation de l’effet cytotoxique sur des lignées cellulaires cancéreuses. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16 : p. 54-62.
  6. Gholizadeh, A.P., et al., Effet de l'extrait de gingembre sur la lignée cellulaire de cancer du sein 4T1 chez la souris Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.

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