Cellules P19 - Recherche sur le carcinome embryonnaire utilisant les cellules P19

P19 est une lignée cellulaire de carcinome embryonnaire murin. Elle est largement utilisée dans la recherche biomédicale, principalement pour étudier la biologie du développement, la biologie des cellules souches, la différenciation cellulaire et le criblage de médicaments. Comme les cellules P19 ont la capacité de se différencier, elles peuvent être utiles pour étudier des processus biologiques complexes tels que la formation des tissus et le développement embryonnaire précoce. Dans cet article, nous aborderons les principes fondamentaux des cellules P19 dérivées de souris.

Caractéristiques générales et origine des cellules P19

Il est essentiel de connaître les caractéristiques générales et l'origine d'une lignée cellulaire avant de commencer à travailler avec elle. Cette section aborde les points suivants : Qu'est-ce que la lignée cellulaire P19 ? Quelle est la taille de la cellule P19 ? Quelle est l'origine des cellules P19 ?

  • La cellule P19 est un type de cellules de carcinome embryonnaire pluripotent obtenu à l'origine à partir d'un tératocarcinome développé chez une souris C3H/He. La lignée cellulaire a été établie pour la première fois en 1982 par McBurney et Rogers.
  • Les cellules P19 peuvent se développer en continu dans un milieu de culture supplémenté en sérum. Elles peuvent se différencier en d'autres types de cellules lorsqu'elles sont exposées à des médicaments non toxiques tels que l'acide rétinoïque et le sulfoxyde de diméthyle (DMSO) [1].
  • Ces cellules de carcinome de souris possèdent une morphologie de type épithélial.
  • La lignée cellulaire P19 présente un caryotype masculin euploïde (n=40 ; XY).

Modélisation de la mitose de cellules souches embryonnaires, agrandie au microscope.

Informations sur la culture des cellules P19

La lignée cellulaire P19 est largement cultivée dans les laboratoires de recherche en raison de ses caractéristiques uniques. Sa culture est facile et gérable. Cette section a mentionné toutes les informations clés dont vous avez besoin pour maintenir et cultiver la culture de cellules P19. Nous saurons : Quel est le temps de doublement des cellules P19 ? Comment cultiver la lignée cellulaire P19 ? La lignée cellulaire P19 est-elle adhérente ?

Points clés pour la culture des cellules P19

Temps de doublement :

Le temps de doublement rapporté pour la lignée cellulaire P19 est d'environ 2 à 3 jours.

Adhérentes ou en suspension :

La lignée cellulaire de carcinome embryonnaire P19 est adhérente.

Ratio de sous-culture :

Les cellules P19 doivent être sous-cultivées toutes les 48 heures, et un ratio de division de 1:10 doit être maintenu pour ces cellules. Les cellules adhérentes sont lavées avec une solution saline tampon phosphate 1 X et incubées avec Accutase jusqu'à ce que les cellules se dissocient. Les cellules sont ajoutées au milieu de culture et récoltées par centrifugation. Les cellules collectées sont soigneusement remises en suspension et distribuées dans de nouveaux flacons.

Milieu de croissance :

Le milieu DMEM/Ham's F12 contenant 5% de sérum bovin fœtal, 3,1 g/L de glucose, 1,6 mM de L-Glutamine, 1,0 mM de pyruvate de sodium, 15 mM d'HEPES et 1,2 g/L de NaHCO3 est utilisé pour cultiver les cellules P19.

Conditions de croissance :

Un incubateur humidifié réglé à 37°C avec un apport de 5% de CO2 est essentiel pour la croissance et la culture de la lignée cellulaire de carcinome embryonnaire P19.

Stockage :

Les flacons de cellules P19 congelées doivent être conservés à une température inférieure à -150°C dans un congélateur ou dans la phase vapeur de l'azote liquide afin de maintenir la viabilité des cellules à long terme.

Processus de congélation et milieu :

Les milieux CM-1 ou CM-ACF peuvent être utilisés pour congeler les cellules P19 en utilisant une méthode de congélation lente qui protège les cellules de tout choc et préserve leur viabilité.

Processus de décongélation :

Les cellules P19 congelées peuvent être décongelées dans un bain-marie à 37°C en agitant rapidement un flacon pendant 40 à 60 secondes. Les cellules sont ajoutées à du milieu frais et centrifugées pour éliminer les éléments du milieu de congélation. La palette de cellules est à nouveau remise en suspension et les cellules sont versées dans le nouveau flacon pour la croissance.

Niveau de biosécurité :

La lignée cellulaire P19 nécessite un environnement de laboratoire de niveau de biosécurité 1.

Couche adhérente et semi-confluente de cellules P19 à un grossissement de 10× et 20×.

Lignée cellulaire P19 : Avantages et inconvénients

Cette section aborde les avantages et les inconvénients de la lignée cellulaire P19.

Avantages

  • Potentiel de différenciation : Les cellules P19 peuvent se différencier en divers types de cellules, y compris les cardiomyocytes, les neurones et les cellules microgliales. Elles ont besoin de médicaments non toxiques pour se différencier, tels que l'acide rétinoïque et le sulfoxyde de diméthyle (DMSO). L'acide rétinoïque induit le développement de neurones, de microglies et d'astroglies, tandis que le DMSO initie le développement de cardiomyocytes battants et de cellules musculaires lisses. Les cellules P19 sont donc utiles pour étudier la différenciation cellulaire et les processus de développement
  • Système modèle : La lignée cellulaire de carcinome embryonnaire pluripotent P19 est un modèle précieux pour l'étude du développement embryonnaire précoce. Les chercheurs utilisent les cellules P19 pour élucider les voies de signalisation cellulaire et les mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans ces processus

Inconvénients

  • Origine murine : P19 est une lignée cellulaire de carcinome embryonnaire murin. Par conséquent, les résultats des études utilisant ces cellules peuvent ne pas être totalement transposables à la biologie et aux processus humains

Applications des cellules P19 dans la recherche

Les cellules P19 ont plusieurs applications de recherche en raison de leur capacité de différenciation et de leur pertinence pour la biologie du développement et la recherche sur les cellules souches. Voici quelques-unes des applications importantes des cellules de carcinome embryonnaire P19 :

  • Études de différenciation cellulaire : Comme nous le savons, les cellules P19 peuvent se différencier en neurones, microglies, cellules musculaires lisses et cardiomyocytes ; elles sont donc largement utilisées pour étudier les processus de différenciation cellulaire. Elles sont donc largement utilisées pour étudier les processus de différenciation cellulaire. En outre, elles aident la recherche à étudier le développement neuronal et cardiaque et les mécanismes sous-jacents. Une étude menée en 2018 a révélé que les espèces réactives de l'oxygène (ROS) dirigent la différenciation des cellules P19 en types cellulaires spécifiques et empêchent l'induction d'autres types cellulaires [3]. Une autre étude a exploré le processus de différenciation neuronale médié par l'acide rétinoïque et a révélé l'implication de la voie de signalisation PI3K/Akt/GSK3β [4].
  • Biologie du développement : Les cellules P19 constituent un modèle inestimable pour l'étude du développement embryonnaire précoce. Elles aident les chercheurs à comprendre des processus biologiques complexes, tels que la formation des tissus pendant le développement de l'embryon. La recherche a utilisé des cellules P19 et a étudié les facteurs moléculaires contribuant à la formation de la communication interventriculaire (CIV). Les résultats ont révélé qu'un long ARN non codant SNHG6 contribue à la formation de la communication interventriculaire en régulant négativement le miARN-101 et en activant la voie Wnt/β-caténine [5].
  • Test de médicaments : La lignée cellulaire de carcinome embryonnaire de souris P19 est également utilisée pour tester des médicaments potentiels. Une étude a utilisé des neurones cellulaires P19 différenciés et a étudié les effets neuroprotecteurs de l'inhibition de l'acétylcholinestérase par la L-Dopa synthétique et l'extrait aqueux de graines de Mucuna pruriens. Les résultats ont montré que l'extrait végétal présentait des résultats prometteurs par rapport à la L-Dopa [6].

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Cellules P19 : Publications de recherche

Cette section d'article couvrira quelques publications de recherche intéressantes concernant les cellules P19.

Nouvelles preuves que les hormones sexuelles hypophysaires régulent la migration, l'adhésion et la prolifération des cellules souches embryonnaires et des cellules de tératocarcinome

Cet article a été publié dans Oncology Reports en 2017. L'étude propose que les hormones sexuelles hypophysaires stimulent l'adhésion, la prolifération et la migration des lignées cellulaires de tératocarcinome, y compris les cellules P19.

Le long ARN non codant uc. 4 influence la différenciation cellulaire par le biais de la voie de signalisation TGF-beta

Cette publication dans la revue Experimental & Molecular Medicine (2018) a utilisé des cellules P19 et a étudié la fonction du long ARN non codant uc.4. Les résultats ont révélé que uc.4 affecte la différenciation cellulaire via la modulation de la voie de signalisation TGF bêta.

Les effets combinés de la culture cellulaire tridimensionnelle et de l'extrait de tissu naturel sur la différenciation neuronale des cellules souches de carcinome embryonnaire P19

Cet article de recherche a été publié en 2018 dans le Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. L'étude a révélé que l'extrait naturel de tissu cérébral et la culture cellulaire en 3D peuvent accélérer la différenciation des cellules de carcinome embryonnaire P19 en cellules neurales.

Induction de la différenciation in vitro de cellules souches de carcinome embryonnaire en cellules productrices d'insuline par l'extrait de feuille de Cichorium intybus L

Cette étude a été publiée dans le Journal of Ethnopharmacology en 2020. L'étude propose que l'extrait de feuille de Cichorium intybus L. puisse induire la différenciation des cellules de carcinome embryonnaire P19 en cellules β pancréatiques productrices d'insuline.

L'extrait aqueux de graines deMucuna pruriens améliore les effets neuroprotecteurs et inhibiteurs de l'acétylcholinestérase par rapport à la L-Dopa synthétique

Cette recherche a été publiée dans Molecules (2022). Cette étude a exploré les effets neuroprotecteurs et inhibiteurs de l'acétylcholinestérase de l'extrait de graines de Mucuna pruriens sur les neurones de la cellule P19.

Ressources pour la lignée cellulaire P19 : Protocoles, vidéos et autres

Voici quelques ressources sur les cellules P19.

Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules P19.

  • Cellules P19 : Ce site web contient toutes les informations utiles sur la lignée cellulaire P19, y compris ses conditions de culture, les milieux de culture des cellules P19, la division des cellules, et bien plus encore.

Exploration de la lignée cellulaire P19 : Questions fréquemment posées

Références

  1. McBurney, M.W., Cellules de carcinome embryonnaire P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1) : p. 135-40.
  2. Bressler, J., et al, P19 Embryonic Carcinoma Cell Line : A Model To Study Gene-Environment Interactions. Cell Culture Techniques, 2011 : p. 223-240.
  3. Pashkovskaia, N., U. Gey, et G. Rödel, Mitochondrial ROS direct the differentiation of murine pluripotent P19 cells. Stem Cell Research, 2018. 30: p. 180-191.
  4. Fu, F., et al, L'acide all-trans-rétinoïde induit la différenciation des cellules P19 en neurones impliqués dans la voie de signalisation PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11) : p. 4386-4396.
  5. Jiang, Y., et al, Long noncoding RNA SNHG6 contributes to ventricular septal defect formation via negative regulation of miR-101 and activation of Wnt/β-catenin pathway. Die Pharmazie-An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2019. 74(1) : p. 23-28.
  6. Kamkaen, N., et al, Mucuna pruriens seed aqueous extract improved neuroprotective and acetylcholinesterase inhibitory effects compared with synthetic L-dopa. Molecules, 2022. 27(10) : p. 3131.

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