Cellules P19 - Recherche sur le carcinome embryonnaire à l'aide des cellules P19
P19 est une lignée cellulaire de carcinome embryonnaire murin. Elle est largement utilisée dans la recherche biomédicale, principalement pour l'étude de la biologie du développement, de la biologie des cellules souches, de la différenciation cellulaire et du criblage de médicaments. Les cellules P19 possédant une capacité de différenciation, elles peuvent s'avérer utiles pour l'étude de processus biologiques complexes tels que la formation des tissus et le développement embryonnaire précoce. Dans cet article, nous aborderons les principes fondamentaux des cellules P19 d'origine murine.
- Milieu de culture
- Milieu DMEM/Ham's F12 contenant 5 % de sérum fœtal bovin, 3,1 g/L de glucose, 1,6 mM de L-glutamine, 1,0 mM de pyruvate de sodium, 15 mM d’HEPES et 1,2 g/L de NaHCO₃ est utilisé pour la culture des cellules P19.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement rapporté pour la lignée cellulaire P19 est d'environ 2 à 3 jours.
- Type de croissance
- La lignée cellulaire de carcinome embryonnaire P19 est adhérente.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander la lignée P19
- Caractéristiques générales et origine des cellules P19
- Informations sur la culture des cellules P19
- Lignée cellulaire P19 : avantages et inconvénients
- Applications de recherche des cellules P19
- Achetez votre lignée cellulaire P19 dès aujourd’hui
- Cellules P19 : publications scientifiques
- Ressources sur la lignée cellulaire P19 : protocoles, vidéos et plus encore
- Découvrir la lignée cellulaire P19 : Foire aux questions
- Références
- Foire aux questions
Caractéristiques générales et origine des cellules P19
Il est essentiel de connaître les caractéristiques générales et l'origine d'une lignée cellulaire avant de commencer à l'utiliser. Cette section abordera les points suivants : Qu'est-ce que la lignée cellulaire P19 ? Quelle est la taille d'une cellule P19 ? Quelle est l'origine des cellules P19 ?
- La lignée P19 est constituée de cellules de carcinome embryonnaire pluripotentes issues à l’origine d’un tératocarcinome développé chez une souris de souche C3H/He. Cette lignée cellulaire a été établie pour la première fois en 1982 par McBurney et Rogers.
- Les cellules P19 peuvent se multiplier de manière continue dans un milieu de culture enrichi en sérum. Elles peuvent être différenciées en d’autres types cellulaires lorsqu’elles sont exposées à des substances non toxiques telles que l’acide rétinoïque et le diméthylsulfoxyde (DMSO) [1].
- Ces cellules de carcinome murin présentent une morphologie de type épithélial.
- La lignée cellulaire P19 présente un caryotype masculin euploïde (n = 40 ; XY).
Informations sur la culture des cellules P19
La lignée cellulaire P19 est largement cultivée dans les laboratoires de recherche en raison de ses caractéristiques uniques. Sa culture est facile et simple à gérer. Cette section présente toutes les informations essentielles dont vous avez besoin pour entretenir et développer une culture de cellules P19. Nous verrons : quel est le temps de doublement des cellules P19 ? Comment cultiver la lignée cellulaire P19 ? La lignée P19 est-elle une lignée cellulaire adhérente ?
Points clés pour la culture des cellules P19
Temps de doublement :
Le temps de doublement rapporté pour la lignée cellulaire P19 est d’environ 2 à 3 jours.
Adhérente ou en suspension :
La lignée cellulaire de carcinome embryonnaire P19 est adhérente.
Rapport de repiquage :
Les cellules P19 doivent être repiquées toutes les 48 heures, et un rapport de division de 1:10 doit être maintenu pour ces cellules. Les cellules adhérentes sont lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate 1X, puis incubées avec de l'Accutase jusqu'à ce qu'elles se dissocient. Les cellules sont ajoutées au milieu de culture, puis récoltées par centrifugation. Les cellules recueillies sont soigneusement remises en suspension et réparties dans de nouveaux flacons.
Milieu de croissance :
milieu DMEM/Ham's F12 contenant 5 % de sérum fœtal bovin, 3,1 g/L de glucose, 1,6 mM de L-glutamine, 1,0 mM de pyruvate de sodium, 15 mM d’HEPES et 1,2 g/L de NaHCO₃ est utilisé pour la culture des cellules P19.
Conditions de culture :
Un incubateur humidifié réglé à 37 °C avec un apport de 5 % de CO₂ est indispensable à la croissance et à la culture de la lignée cellulaire de carcinome embryonnaire P19.
Conservation :
Les flacons de cellules P19 congelés doivent être conservés à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur ou dans la phase vapeur d’azote liquide afin de préserver la viabilité des cellules à long terme.
Procédé de congélation et milieu :
Les milieux CM-1 ou CM-ACF peuvent être utilisés pour congeler les cellules P19 selon une méthode de congélation lente qui protège les cellules de tout choc et préserve leur viabilité.
Procédure de décongélation :
Les cellules P19 congelées peuvent être décongelées dans un bain-marie à 37 °C en agitant rapidement le flacon pendant 40 à 60 secondes. On ajoute un milieu frais aux cellules, puis on les centrifuge pour éliminer les résidus du milieu de congélation. Le culot cellulaire est à nouveau remis en suspension, puis les cellules sont transférées dans un nouveau flacon pour la culture.
Niveau de biosécurité :
La lignée cellulaire P19 nécessite un laboratoire de niveau de biosécurité 1.
Lignée cellulaire P19 : avantages et inconvénients
Cette section présente les avantages et les inconvénients de la lignée cellulaire P19.
Avantages
- Potentiel de différenciation : les cellules P19 peuvent se différencier en divers types cellulaires, notamment en cardiomyocytes, en neurones et en cellules microgliales. Leur différenciation nécessite l’utilisation de substances non toxiques, telles que l’acide rétinoïque et le diméthylsulfoxyde (DMSO). L'acide rétinoïque induit le développement de neurones, de microglies et d'astrocytes, tandis que le DMSO déclenche le développement de cardiomyocytes contractiles et de cellules musculaires lisses. Ainsi, les cellules P19 sont utiles pour étudier la différenciation cellulaire et les processus de développement.
- Système modèle : La lignée cellulaire P19, issue d’un carcinome embryonnaire pluripotent, constitue un modèle précieux pour l’étude du développement embryonnaire précoce. Les chercheurs utilisent les cellules P19 pour élucider les voies de signalisation cellulaire ainsi que les mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans ces processus.
Inconvénients
- Origine murine : P19 est une lignée cellulaire de carcinome embryonnaire murin. Par conséquent, les résultats des études menées à partir de ces cellules peuvent ne pas être entièrement transposables à la biologie et aux processus humains.
Applications de recherche des cellules P19
Les cellules P19 présentent plusieurs applications de recherche en raison de leur capacité de différenciation et de leur pertinence pour la biologie du développement et la recherche sur les cellules souches. Parmi les principales applications de recherche des cellules de carcinome embryonnaire P19, on peut citer :
- Études sur la différenciation cellulaire : comme on le sait, les cellules P19 peuvent se différencier en neurones, en cellules microgliales, en cellules musculaires lisses et en cardiomyocytes ; elles sont donc largement utilisées pour étudier les processus de différenciation cellulaire. De plus, elles permettent d’étudier le développement neural et cardiaque ainsi que les mécanismes sous-jacents. Une étude menée en 2018 a montré que les espèces réactives de l’oxygène (ERO) orientent la différenciation des cellules P19 vers des types cellulaires spécifiques et empêchent l’induction d’autres types [3]. Une autre étude a exploré le processus de différenciation neuronale médiée par l’acide rétinoïque et a mis en évidence l’implication de la voie de signalisation PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Biologie du développement : les cellules P19 constituent un modèle inestimable pour l’étude du développement embryonnaire précoce. Elles aident les chercheurs à comprendre des processus biologiques complexes, tels que la formation des tissus au cours du développement embryonnaire. La recherche a utilisé des cellules P19 et a étudié les facteurs moléculaires contribuant à la formation d’une communication interventriculaire (CIV). Les résultats ont révélé qu’un ARN non codant long, le SNHG6, contribue à la formation de la CIV en régulant négativement le miARN-101 et en activant la voie Wnt/β-caténine [5].
- Criblage de médicaments : la lignée cellulaire de carcinome embryonnaire de souris P19 est également utilisée pour cribler des candidats-médicaments potentiels. Une étude a utilisé des neurones dérivés de cellules P19 différenciées et a examiné les effets neuroprotecteurs, par inhibition de l’acétylcholinestérase, de la L-Dopa synthétique et de l’extrait aqueux de graines de Mucuna pruriens. Les résultats ont montré que l’extrait végétal présentait des résultats prometteurs par rapport à la L-Dopa [6].
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Cellules P19 : Publications scientifiques
Cette section de l'article présentera quelques publications de recherche intéressantes consacrées aux cellules P19.
Cet article a été publié dans Oncology Reports en 2017. L'étude a suggéré que les hormones sexuelles hypophysaires régulent l'adhésion, la prolifération et la migration des lignées cellulaires de tératocarcinome, y compris les cellules P19.
Cette publication parue dans la revue *Experimental & Molecular Medicine* (2018) a utilisé des cellules P19 pour étudier la fonction de l’ARN non codant long uc.4. Les résultats ont révélé que l’uc.4 affecte la différenciation cellulaire en modulant la voie de signalisation du TGF-bêta.
Cet article de recherche a été publié en 2018 dans le Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. L’étude a montré qu’un extrait naturel de tissu cérébral et une culture cellulaire en 3D peuvent accélérer la différenciation des cellules de carcinome embryonnaire P19 en cellules neurales.
Cette étude a été publiée en 2020 dans le Journal of Ethnopharmacology. Elle suggère que l’extrait de feuilles de Cichorium intybus L. peut induire la différenciation des cellules de carcinome embryonnaire P19 en cellules β pancréatiques productrices d’insuline.
Cette recherche a été publiée dans la revue *Molecules* (2022). Cette étude a exploré les effets neuroprotecteurs et inhibiteurs de l'acétylcholinestérase de l'extrait de graines de *Mucuna pruriens* sur les neurones de la lignée cellulaire P19.
Ressources sur la lignée cellulaire P19 : protocoles, vidéos et plus encore
Voici quelques ressources sur les cellules P19.
- Protocole de différenciation neuronale des cellules P19 : cet article présente le protocole de différenciation neuronale des cellules P19 ainsi que d’autres informations utiles sur la différenciation de ces cellules.
- Transfection des cellules P19 : ce lien vous permettra de découvrir le protocole de transfection des cellules P19.
Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules P19.
- Cellules P19 : ce site web contient toutes les informations utiles sur la lignée cellulaire P19, notamment ses conditions de culture, les milieux de culture des cellules P19, la division cellulaire et bien plus encore.
Exploration de la lignée cellulaire P19 : Questions fréquemment posées
Références
- McBurney, M.W., Cellules de carcinome embryonnaire P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1) : p. 135-40.
- Bressler, J., et al., Lignée cellulaire de carcinome embryonnaire P19 : un modèle pour étudier les interactions gène-environnement. Cell Culture Techniques, 2011 : p. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey et G. Rödel, « Les ROS mitochondriaux orientent la différenciation des cellules P19 pluripotentes murines ». Stem Cell Research, 2018. 30 : p. 180-191.
- Fu, F., et al., L’acide tout-trans-rétinoïque induit la différenciation des cellules P19 en neurones impliqués dans la voie de signalisation PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11) : p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., L’ARN non codant long SNHG6 contribue à la formation d’une communication interventriculaire via la régulation négative de miR-101 et l’activation de la voie Wnt/β-caténine. Die Pharmazie – Revue internationale des sciences pharmaceutiques, 2019. 74(1) : p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., L’extrait aqueux de graines de Mucuna pruriens présente des effets neuroprotecteurs et inhibiteurs de l’acétylcholinestérase supérieurs à ceux de la L-dopa synthétique. Molecules, 2022. 27(10) : p. 3131.