Cellules DU-145 - Guide complet du chercheur
DU-145 est une lignée cellulaire humaine de carcinome de la prostate largement utilisée dans la recherche biomédicale. Ces cellules constituent un modèle inestimable pour l'étude de la biologie du cancer de la prostate, l'essai et le développement de médicaments. En outre, les chercheurs utilisent également les cellules DU-145 pour étudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent le développement, la croissance et la progression du cancer de la prostate.
Cet article vous donnera des informations précieuses sur les cellules DU-145 du cancer de la prostate. En particulier, il couvrira les points suivants
- Informations générales et origine de la lignée cellulaire DU-145
- Culture des cellules DU-145
- La lignée cellulaire DU-145 : Avantages et limites
- Applications des cellules DU-145 dans la recherche
- Publications scientifiques mettant en vedette les cellules DU-145
- Ressources pour la lignée cellulaire DU-145 : Protocoles, vidéos et autres
1. Informations générales et origine de la lignée cellulaire DU-145
Il est essentiel de comprendre les caractéristiques fondamentales et l'origine d'une lignée cellulaire avant de commencer à travailler avec elle. Cette section fournit une compréhension complète des caractéristiques et de l'origine de la lignée cellulaire DU-145. Vous apprendrez à connaître : Que sont les cellules cancéreuses DU145 ? Quelle est la morphologie des cellules DU145 ? Quelle est la différence entre PC-3 et DU145 ?
- DU-145, une lignée cellulaire humaine de cancer de la prostate, a été dérivée du cerveau d'un homme caucasien (69 ans) atteint d'un carcinome métastatique de la prostate. Ces cellules ont été déposées pour la première fois par K.R. Stone et ses collègues en 1978.
- Comme les cellules cancéreuses de la prostate PC-3, DU-145 exprime également des récepteurs d'androgènes. Cependant, lorsque ces cellules sont soumises à un traitement par ligand androgénique, elles ne montrent aucune activité des gènes répondant aux récepteurs androgéniques et sont donc considérées comme des cellules androgéno-indépendantes.
- Les cellules DU-145 possèdent une morphologie épithéliale.
- Les cellules DU-145 sont hypotriploïdes et ont un nombre modal de chromosomes de 64. Elles présentent plusieurs chromosomes marqueurs, tels que del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) et del (9) (p11).
PC-3 vs DU145
Les deux lignées cellulaires du cancer de la prostate sont indépendantes des récepteurs androgéniques. Elles diffèrent en termes de potentiel tumorigène et métastatique. Injectée dans une souris immunodéprimée, la lignée cellulaire PC-3 forme un adénocarcinome de grade IV hautement métastatique. En revanche, la lignée cellulaire DU-145 développe un cancer de la prostate avec un potentiel métastatique modéré [1].
2. culture des cellules DU-145
La lignée cellulaire DU-145 est largement utilisée dans les laboratoires de recherche sur le cancer de la prostate. Vous devez connaître les points clés suivants pour faciliter sa culture et la rendre plus efficace. Cette section comprend des informations sur le milieu DU145, le temps de doublement, les conditions de culture des cellules et les protocoles.
Points clés pour la culture des cellules DU-145
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Temps de doublement de la population : |
Le temps de doublement des cellules DU-145 varie entre 30 et 40 heures. |
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Adhérentes ou en suspension : |
DU-145 est une lignée cellulaire adhérente. |
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Densité d'ensemencement : |
Les cellules DU-145 sont ensemencées à une densité recommandée de 2 x104 cellules/cm2. À cette densité, les cellules produisent une monocouche confluente en presque 4 jours. Pour l'ensemencement, les cellules sont lavées avec une solution saline tampon phosphate 1 x et incubées avec une solution de passage, Accutase. Après 8 à 10 minutes d'incubation à température ambiante, les cellules sont ajoutées à un milieu de culture frais et centrifugées. Le culot cellulaire recueilli est soigneusement remis en suspension et les cellules sont versées dans de nouveaux flacons de culture pour la croissance. |
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Milieu de croissance : |
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) avec des suppléments de milieu, c'est-à-dire 10% de sérum bovin fœtal (FBS), 2 mM L-Glutamine, 2,2 g/L NaHCO3, et EBSS. Le milieu est renouvelé 2 à 3 fois par semaine. |
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Conditions de croissance : |
Les cultures DU-145 sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37°C avec une source de CO2 à 5%. |
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Stockage : |
Les cellules DU-145 sont conservées dans la phase vapeur de l'azote liquide ou à une température inférieure à -150°C dans un congélateur électrique afin de maintenir la viabilité des cellules à long terme. |
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Processus de congélation et milieu : |
Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF sont recommandés pour les cellules DU-145 du cancer de la prostate. Pour congeler les cellules, on opte pour une méthode de congélation lente qui permet à la température de baisser progressivement de 1 °C. Cette méthode permet d'éviter tout choc pour les cellules et de les aider à rester viables à long terme. Cela permet d'éviter tout choc et de maintenir la viabilité des cellules. |
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Processus de décongélation : |
Les flacons de cellules DU-145 congelées sont rapidement décongelés dans un bain-marie à 37°C pendant 40 à 60 secondes. Ensuite, les cellules sont ajoutées au milieu de culture et centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Les cellules récoltées sont remises en suspension dans un milieu de croissance et versées dans le flacon pour la croissance. La reprise de la congélation prend près de 24 heures. |
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Niveau de biosécurité : |
Des paramètres de biosécurité de niveau 1 sont nécessaires pour cultiver la lignée cellulaire DU145 indépendante des récepteurs androgéniques. |
3. lignée cellulaire DU-145 : Avantages et limites
Comme d'autres lignées cellulaires, la lignée cellulaire DU-145 pour le cancer de la prostate présente des avantages et des inconvénients. Ces caractéristiques peuvent vous aider à décider de son utilisation dans votre recherche. Les principaux avantages et inconvénients des cellules DU-145 sont mentionnés ci-dessous.
Avantages
Les avantages des cellules DU-145 sont les suivants
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Tumorigénicité |
DU-145 est une lignée cellulaire agressive et tumorigène de cancer de la prostate avec un potentiel métastatique modéré. Elle est utilisée pour développer le modèle de xénogreffe DU145 chez des souris immunodéprimées afin d'étudier la biologie, le développement et la croissance du cancer de la prostate in vitro et in vivo. |
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Indépendance vis-à-vis des récepteurs des androgènes |
Les cellules cancéreuses de la prostate DU-145 sont indépendantes des récepteurs d'androgènes. Elles ne dépendent pas des androgènes pour leur croissance et ne présentent aucune réponse aux niveaux cellulaire et moléculaire lorsqu'elles sont traitées avec des androgènes. Ces cellules sont idéales pour la recherche sur les mécanismes du cancer de la prostate indépendant des hormones. |
Limites
Les limites de la lignée cellulaire DU-145 sont les suivantes :
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Modèle in vitro |
DU-145 est un modèle cellulaire in vitro de carcinome métastatique de la prostate, qui peut donc ne pas représenter entièrement la complexité des tumeurs primaires de la prostate. En outre, il peut ne pas représenter tous les types et sous-types de cancer de la prostate en raison de caractéristiques spécifiques telles que l'indépendance à l'égard du récepteur des androgènes. |
4. applications de la recherche sur les cellules DU-145
La lignée cellulaire DU-145 pour le cancer de la prostate a un large éventail d'applications pour la recherche. Quelques applications prometteuses sont énumérées ici.
- Biologie du cancer de la prostate : DU-145 est un modèle pertinent pour étudier la biologie du cancer de la prostate. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier les mécanismes moléculaires à l'origine du développement, de la progression et de la métastase du cancer. En outre, les altérations génétiques communément associées au cancer de la prostate sont également étudiées. Des recherches menées en 2021 ont examiné les cellules DU-145 afin d'identifier des biomarqueurs potentiels pour des implications diagnostiques et thérapeutiques efficaces. L'étude a suggéré que l'actine gamma 1 (ACTG1) était un biomarqueur potentiel du cancer de la prostate, car elle favorise la prolifération des cellules cancéreuses et régule les métastases par l'activation de la voie MAPK/ERK [2].
- Dépistage et développement de médicaments : Les cellules cancéreuses de la prostate DU-145 sont largement utilisées pour tester la cytotoxicité et l'efficacité de médicaments anticancéreux potentiels. Cela aide les chercheurs à identifier de nouveaux médicaments, à comprendre la résistance aux médicaments et les mécanismes moléculaires sous-jacents. Une étude menée en 2022 a exploré l'effet cytotoxique d'un mélange résineux, la propolis ou colle d'abeille, sur les lignées cellulaires PC-3 et DU-145 du cancer de la prostate. L'étude a montré les effets inhibiteurs de croissance de cette substance naturelle sur les deux lignées cellulaires et a proposé son potentiel anticancéreux [3]. Une autre étude a été menée en 2019 sur les effets anti-prolifératifs d'un composé naturel, la bétaïne, sur les cellules cancéreuses de la prostate DU-145. La recherche a montré que la bétaïne exerce des activités anti-prolifératives en augmentant la mort cellulaire médiée par le stress oxydatif et l'inflammation dans les cellules DU-145 [4].
5.publications de recherche sur les cellules DU-145
Voici quelques publications de recherche sur la lignée cellulaire DU-145.
Cette étude publiée dans Biological Trace Element Research, 2020, propose que le sulfate de zinc (ZnSo4) exerce des effets anti-prolifératifs sur les cellules DU-145 en induisant l'apoptose, des changements morphologiques, des dommages oxydatifs et une inflammation.
Cet article de recherche a été publié dans BMC Complementary Medicine and Therapies en 2020. Cette étude a exploré le potentiel cytotoxique et anti-métastatique d'une plante, l'extrait d'écorce d'Annona muricata L., et de son bioactif, l'annonacine, dans la lignée cellulaire DU-145.
Cette publication dans IUBMB Life (2019) propose que l'interaction du long ARN non codant LOXL1-AS1 avec miR-let-7a-5p et la voie EGFR régule la résistance à la doxorubicine dans les cellules cancéreuses de la prostate DU-145.
Cet article paru dans Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) indique que la régulation à la baisse du gène Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) entraîne la mort des cellules DU-145 et inhibe la transition épithéliale-mésenchymateuse (EMT) par l'activation de la voie Pyk2/MKK7.
Cette étude parue dans le Journal of Food Biochemistry (2019) propose que la casticine, une polyméthoxyflavone, inhibe la migration et l'invasion des cellules DU-145 en régulant la signalisation Ras/Akt/NF-κB.
6. ressources pour la lignée cellulaire DU-145 : Protocoles, vidéos et autres
De nombreuses ressources en ligne sont disponibles sur la lignée cellulaire DU-145 du cancer de la prostate. Cette section mentionne quelques ressources expliquant la manipulation, la maintenance et le protocole de transfection de ces cellules :
- Transfection DU-145 : Ce tutoriel vidéo est un guide étape par étape pour apprendre le protocole de transfection des cellules DU-145.
Le protocole de culture des cellules DU-145 est mentionné ici.
- Sous-culture des cellules DU-145 : Ce lien vous aidera à apprendre le protocole de sous-culture des cellules DU-145.
- Cellules DU-145: Ce site web contient de nombreuses informations utiles sur la lignée cellulaire DU-145, y compris le milieu DU145, le protocole de sous-culture et la manipulation des cultures prolifératives et cryopréservées.
Références
- Lima, A.R., et al, Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1) : p. 5539.
- Xiao, L., et al, Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11) : p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al, Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines. Molecules, 2022. 27(23) : p. 8245.
- Kar, F., et al, La bétaïne supprime la prolifération cellulaire en augmentant l'apoptose médiée par le stress oxydatif et l'inflammation dans la lignée cellulaire humaine DU-145 du cancer de la prostate. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.