Cellules DU-145 - Guide complet à l'intention des chercheurs
DU-145 est une lignée cellulaire de carcinome prostatique humain largement utilisée dans la recherche biomédicale. Ces cellules constituent un modèle inestimable pour l'étude de la biologie du cancer de la prostate, les essais de médicaments et le développement thérapeutique. En outre, les chercheurs utilisent également les cellules DU-145 pour étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents au développement, à la croissance et à la progression du cancer de la prostate.
- Milieu de culture
- EMEM (milieu minimal essentiel d'Eagle) avec des suppléments, à savoir 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO3 et de l'EBSS. Le milieu est renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement de la lignée DU-145 varie entre 30 et 40 heures.
- Type de croissance
- La lignée cellulaire DU-145 est une lignée cellulaire adhérente.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander DU-145
- Informations générales et origine de la lignée cellulaire DU-145
- Culture des cellules DU-145
- Lignée cellulaire DU-145 : avantages et limites
- Applications de recherche des cellules DU-145
- 5. Publications de recherche consacrées aux cellules DU-145
- Ressources pour la lignée cellulaire DU-145 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Informations générales et origine de la lignée cellulaire DU-145
Il est essentiel de comprendre les caractéristiques fondamentales et l'origine d'une lignée cellulaire avant de commencer à l'utiliser. Cette section vous permettra de bien comprendre les caractéristiques et l'origine de la lignée cellulaire DU-145. Vous apprendrez : Que sont les cellules cancéreuses DU-145 ? Quelle est la morphologie des cellules DU-145 ? Quelle est la différence entre les lignées PC-3 et DU-145 ?
- La lignée cellulaire DU-145, issue d'un cancer de la prostate humain, a été isolée à partir du cerveau d'un homme de type caucasien (âgé de 69 ans) atteint d'un carcinome prostatique métastatique. Ces cellules ont été déposées pour la première fois par K.R. Stone et ses collègues en 1978.
- Tout comme les cellules cancéreuses de la prostate PC-3, les cellules DU-145 expriment également des récepteurs androgéniques. Cependant, lorsqu'elles sont soumises à un traitement par un ligand androgénique, elles ne présentent aucune activité des gènes sensibles aux récepteurs androgéniques et sont donc considérées comme des cellules androgéno-indépendantes.
- Les cellules DU-145 possèdent une morphologie épithéliale.
- Les cellules DU-145 sont hypotriploïdes et ont un nombre modal de chromosomes de 64. Elles présentent plusieurs chromosomes marqueurs, tels que del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) et del (9) (p11).
PC-3 vs DU145
Ces deux lignées cellulaires de cancer de la prostate sont indépendantes des récepteurs androgéniques. Elles diffèrent en termes de potentiel tumorigène et métastatique. Lorsqu’elle est injectée à une souris immunodéprimée, la lignée cellulaire PC-3 forme un adénocarcinome de grade IV hautement métastatique. En revanche, la lignée cellulaire DU-145 développe un cancer de la prostate présentant un potentiel métastatique modéré [1].
Culture des cellules DU-145
La lignée cellulaire DU-145 est largement utilisée dans les laboratoires de recherche sur le cancer de la prostate. Il est important de connaître les points clés suivants pour faciliter une culture simple et efficace. Cette section comprend des informations sur le milieu de culture DU-145, le temps de doublement, les conditions de culture cellulaire et les protocoles.
Points clés pour la culture des cellules DU-145
Temps de doublement de la population :
Le temps de doublement des cellules DU-145 varie entre 30 et 40 heures.
Adhérentes ou en suspension :
La lignée cellulaire DU-145 est une lignée cellulaire adhérente.
Densité d'ensemencement :
Les cellules DU-145 sont ensemencées à une densité recommandée de 2 x 10⁴ cellules/cm². À cette densité, les cellules forment une monocouche confluente en près de 4 jours. Pour l'ensemencement, les cellules sont lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate 1x et incubées avec une solution de repiquage, Accutase. Après 8 à 10 minutes d'incubation à température ambiante, les cellules sont ajoutées à un milieu de culture frais et centrifugées. Le culot cellulaire recueilli est soigneusement remis en suspension, et les cellules sont transférées dans de nouvelles flacons de culture pour la croissance.
Milieu de croissance :
EMEM (milieu minimal essentiel d'Eagle) avec des suppléments, à savoir 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO3 et de l'EBSS. Le milieu est renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de culture :
Les cultures de DU-145 sont conservées dans un incubateur humidifié à 37 °C avec une source de CO₂ à 5 %.
Conservation :
Les cellules DU-145 sont conservées en phase vapeur d'azote liquide ou à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique afin de maintenir la viabilité cellulaire à long terme.
Procédé et milieu de congélation :
Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF sont recommandés pour les cellules de cancer de la prostate DU-145. Une méthode de congélation lente, permettant à la température de baisser progressivement de 1 °C, est privilégiée pour congeler les cellules. Cela évite tout choc aux cellules et contribue à maintenir leur viabilité.
Procédé de décongélation :
Les flacons de cellules DU-145 congelées sont rapidement décongelés dans un bain-marie à 37 °C pendant 40 à 60 secondes. Ensuite, les cellules sont ajoutées à un milieu de culture et centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Les cellules récoltées sont remises en suspension dans un milieu de croissance et versées dans le flacon pour la culture. La récupération après congélation prend près de 24 heures.
Niveau de biosécurité :
Des installations de niveau de biosécurité 1 sont requises pour cultiver la lignée cellulaire DU145 indépendante du récepteur des androgènes.
Lignée cellulaire DU-145 : avantages et limites
Comme d'autres lignées cellulaires, la lignée cellulaire DU-145 du cancer de la prostate présente des avantages et des inconvénients. Ces caractéristiques peuvent vous aider à décider de son utilisation dans vos recherches. Les principaux avantages et inconvénients des cellules DU-145 sont mentionnés ci-dessous.
Avantages
Les avantages des cellules DU-145 sont les suivants :
Tumorigénicité
DU-145 est une lignée cellulaire de cancer de la prostate tumorigène agressive présentant un potentiel métastatique modéré. Elle est utilisée pour développer le modèle de xénogreffe DU-145 chez des souris immunodéprimées afin d'étudier la biologie, le développement et la croissance du cancer de la prostate in vitro et in vivo.
Indépendance vis-à-vis des récepteurs androgéniques
Les cellules cancéreuses de la prostate DU-145 sont indépendantes des récepteurs androgéniques. Elles ne dépendent pas des androgènes pour leur croissance et ne présentent aucune réponse aux niveaux cellulaire et moléculaire lorsqu'elles sont traitées avec des androgènes. Idéales pour la recherche sur les mécanismes du cancer de la prostate indépendant des hormones.
Limites
Les limites de la lignée cellulaire DU-145 sont les suivantes :
Modèle in vitro
DU-145 est un modèle cellulaire in vitro de carcinome prostatique métastatique ; il peut donc ne pas refléter pleinement la complexité des tumeurs prostatiques primaires. De plus, il peut ne pas être représentatif de tous les types et sous-types de cancer de la prostate en raison de caractéristiques spécifiques telles que l'indépendance vis-à-vis des récepteurs androgéniques.
Applications de recherche des cellules DU-145
La lignée cellulaire DU-145 du cancer de la prostate offre un large éventail d'applications de recherche. Quelques applications prometteuses sont énumérées ci-dessous.
- Biologie du cancer de la prostate : la lignée cellulaire DU-145 constitue un modèle pertinent pour étudier la biologie du cancer de la prostate. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier les mécanismes moléculaires à l'origine du développement, de la progression et des métastases du cancer. De plus, les altérations génétiques couramment associées au cancer de la prostate sont également étudiées. Des recherches menées en 2021 ont examiné les cellules DU-145 afin d'identifier des biomarqueurs potentiels pour des applications diagnostiques et thérapeutiques efficaces. L'étude a suggéré que l'actine gamma 1 (ACTG1) pourrait être un biomarqueur potentiel du cancer de la prostate, car elle favorise la prolifération des cellules cancéreuses et régule les métastases via l'activation de la voie MAPK/ERK [2].
- Criblage et développement de médicaments : les cellules cancéreuses de la prostate DU-145 sont largement utilisées pour tester la cytotoxicité et l'efficacité de médicaments anticancéreux potentiels. Cela aide les chercheurs à identifier de nouveaux médicaments, à comprendre la résistance aux médicaments et les mécanismes moléculaires sous-jacents. Une étude menée en 2022 a exploré l'effet cytotoxique d'un mélange résineux, la propolis ou colle d'abeille, sur les lignées cellulaires de cancer de la prostate PC-3 et DU-145. L'étude a montré des effets inhibiteurs de croissance de cette substance naturelle dans les deux lignées cellulaires et a suggéré son potentiel anticancéreux [3]. Une autre étude a été menée en 2019 afin d'étudier les effets antiprolifératifs d'un composé naturel, la bétaïne, sur les cellules cancéreuses de la prostate DU-145. La recherche a montré que la bétaïne exerce des activités anti-prolifératives en augmentant la mort cellulaire et l'inflammation induites par le stress oxydatif dans les cellules DU-145 [4].
5. Publications scientifiques consacrées aux cellules DU-145
Voici quelques publications de recherche sur la lignée cellulaire DU-145.
Cette étude, publiée dans Biological Trace Element Research en 2020, suggère que le sulfate de zinc (ZnSO₄) exerce des effets antiprolifératifs sur les cellules DU-145 en induisant l'apoptose, des changements morphologiques, des dommages oxydatifs et une inflammation.
Cet article de recherche a été publié dans BMC Complementary Medicine and Therapies en 2020. Cette étude a exploré le potentiel cytotoxique et anti-métastatique d'un extrait d'écorce de la plante Annona muricata L. et de son composant bioactif, l'annonacine, sur la lignée cellulaire DU-145.
Cette publication parue dans IUBMB Life (2019) a proposé que l'interaction de l'ARN non codant long LOXL1-AS1 avec miR-let-7a-5p et la voie EGFR régule la résistance à la doxorubicine dans les cellules cancéreuses de la prostate DU-145.
Cet article publié dans Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) indique que la régulation à la baisse du gène du récepteur à domaine discoïdine 1 (DDR1) provoque la mort des cellules DU-145 et inhibe la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT) via l'activation de la voie Pyk2/MKK7.
Cette étude publiée dans le Journal of Food Biochemistry (2019) a suggéré que la casticine, une polyméthoxyflavone, inhibe la migration et l'invasion des cellules DU-145 en régulant la signalisation Ras/Akt/NF-κB.
Ressources sur la lignée cellulaire DU-145 : protocoles, vidéos et plus encore
De nombreuses ressources en ligne sont disponibles sur la lignée cellulaire DU-145 du cancer de la prostate. Cette section mentionne quelques ressources expliquant la manipulation, la maintenance et le protocole de transfection de ces cellules :
- Transfection des cellules DU-145 : ce tutoriel vidéo est un guide étape par étape permettant d'apprendre le protocole de transfection des cellules DU-145.
Le protocole de culture cellulaire DU-145 est présenté ici.
- Sous-culture des cellules DU-145 : ce lien vous aidera à apprendre le protocole de sous-culture des cellules DU-145.
- Cellules DU-145 : ce site web contient de nombreuses informations utiles sur la lignée cellulaire DU-145, notamment le milieu de culture DU-145, le protocole de repiquage et la manipulation des cultures prolifératives et cryoconservées.
Références
- Lima, A.R., et al., Discrimination entre l'exométabolome des cellules prostatiques humaines normales et cancéreuses par GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1) : p. 5539.
- Xiao, L., et al., La suppression de l'expression de l'ACTG1 induit la transition épithélio-mésenchymateuse du cancer de la prostate par la voie de signalisation MAPK/ERK. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Effets anticancéreux d’extraits de propolis obtenus par la méthode de séparation à froid sur les lignées cellulaires de cancer de la prostate PC-3 et DU-145. Molecules, 2022. 27(23) : p. 8245.
- Kar, F., et al., La bétaïne inhibe la prolifération cellulaire en augmentant l'apoptose et l'inflammation induites par le stress oxydatif dans la lignée cellulaire DU-145 de cancer de la prostate humain. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24 : p. 871-881.