Lignée cellulaire A375 - Guide de la recherche sur le mélanome
A375 est une lignée cellulaire de mélanome humain largement utilisée dans la recherche en toxicologie et en immuno-oncologie. Les chercheurs utilisent cette lignée cellulaire pour étudier la biologie du cancer et les voies de signalisation, pour tester ou cribler des agents anticancéreux potentiels et pour développer de nouvelles thérapies efficaces.
Origine et caractéristiques générales des cellules A375
Connaître l'origine et les caractéristiques générales d'une lignée cellulaire peut vous aider à planifier son utilisation dans la recherche. Cette section de l'article traite de l'origine et des caractéristiques de la lignée cellulaire A375. Par exemple, qu'est-ce que la lignée cellulaire A375 ? Quelles sont les caractéristiques de la lignée cellulaire A375 ? D'où viennent les cellules A375 ? Quelle est la morphologie des cellules de mélanome A375 ? Quelle est la taille des cellules A375 ?
- La lignée cellulaire de cancer de la peau A375 provient de la culture d'un explant d'une tumeur solide d'une femme de 54 ans atteinte d'un mélanome malin [1].
- Les cellules A375 ont une morphologie de type épithélial.
- La taille des cellules A375 est relativement plus petite que celle des autres lignées cellulaires. Elles possèdent en gros un diamètre de 12 µm.
- Les cellules de mélanome A375 sont hypotriploïdes. Le nombre modal de chromosomes pour cette lignée cellulaire est de 62. En général, chaque cellule possède neuf chromosomes marqueurs et une copie des chromosomes normaux N2, N6 et N22.
Cellules A375 : Informations sur la culture cellulaire
Les cultures de cellules A375 sont faciles à entretenir. Elles n'ont pas d'exigences particulières en matière de culture cellulaire. Cette section vous aidera à apprendre les informations nécessaires à la culture cellulaire. Par exemple, quel est le temps de doublement des cellules A375 ? Quel est le milieu de culture de la lignée cellulaire A375 ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules A375 ? Les cellules de mélanome A375 sont-elles adhérentes ?
Points clés pour la culture des cellules A375
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Temps de doublement de la population : |
Le temps de doublement de la population A375 est de 20 heures. |
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Adhérentes ou en suspension : |
A375 est une lignée cellulaire de mélanome humain adhérente. |
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Densité d'ensemencement : |
une densité de 1 x104cellules/cm2 est idéale pour les cultures de cellules A375. Les cellules adhérentes sont rincées avec une solution saline au tampon phosphate (PBS) et incubées avec une solution de passage (Accutase). Ensuite, les cellules sont ajoutées au milieu de culture et centrifugées. Les cellules récoltées sont remises en suspension dans un milieu de culture et distribuées dans de nouveaux flacons pour la croissance. |
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Milieu de croissance : |
Le DMEM est recommandé comme milieu idéal pour l'A375 lorsqu'il est supplémenté avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS), 4,5 g/L de glucose, 1,5 g/L de NaHCO3, 4 mM de L-Glutamine et 1,0 mM de pyruvate de sodium. Le milieu A375 doit être renouvelé 2 à 3 jours par semaine. |
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Conditions de croissance : |
Les cellules de mélanome A375 sont cultivées dans un incubateur humidifié (37°C) avec un apport de 5% de CO2. |
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Stockage : |
Les cellules A375 congelées doivent être conservées à une température inférieure à -150°C dans la phase vapeur de l'azote liquide ou dans un congélateur électrique. |
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Processus de congélation et milieu : |
Les milieux CM-1 ou CM-ACF sont utilisés pour congeler la lignée cellulaire A375. Un processus de congélation lent permettant une diminution progressive de la température de 1°C a été choisi pour protéger la viabilité des cellules. |
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Processus de décongélation : |
Le flacon de cellules de mélanome A375 congelées est agité rapidement au bain-marie pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Les cellules sont ajoutées à du milieu frais et centrifugées pour éliminer les éléments du milieu de congélation. Le culot cellulaire obtenu est à nouveau remis en suspension et versé dans de nouveaux flacons. |
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Niveau de biosécurité : |
Les cultures d'A375 sont manipulées et maintenues dans des laboratoires de niveau de biosécurité 1. |
Avantages et limites de la lignée cellulaire A375
Comme d'autres lignées cellulaires, la lignée cellulaire de mélanome A375 est associée à une combinaison unique d'avantages et de limites, ce qui en fait un outil précieux pour la recherche sur le cancer du mélanome. Cette section n'énumère que quelques avantages et inconvénients significatifs de la lignée cellulaire A375.
Avantages
Les avantages significatifs des cellules A375 sont mentionnés ci-dessous :
- Modèle de tumeur de mélanome: La lignée cellulaire A375 a été dérivée d'une tumeur mélanomateuse maligne, constituant ainsi un modèle tumoral inestimable pour étudier la biologie du mélanome et les interventions thérapeutiques. Ces cellules présentent des propriétés similaires à celles du mélanome, telles qu'un taux de prolifération élevé et un caractère invasif.
- Tumorigénicité: Les cellules A375 sont hautement tumorigènes, c'est-à-dire qu'elles peuvent former des tumeurs. Les cellules A375 produiraient des mélanomes amélanotiques agressifs chez des souris NIH Swiss traitées avec du sérum anti-thymocyte (un agent immunosuppresseur).
- Bien caractérisées: A375 est une lignée cellulaire génétiquement bien caractérisée. Elle possède des mutations génétiques spécifiques au mélanome. Les mutations de A375 incluent l'altération du gène BRAF, ce qui la rend sensible aux inhibiteurs spécifiques de BRAF. Ce profil génétique fait donc des cellules A375 un excellent outil de recherche sur le cancer pour étudier les voies moléculaires sous-jacentes et les thérapies ciblées.
Limites
Les limites associées aux cellules A375 sont les suivantes
- Limites in vitro: A375 est un modèle de tumeur in vitro. Bien qu'il imite les caractéristiques du mélanome, il ne peut pas représenter entièrement la complexité des tumeurs de mélanome. Par conséquent, il convient d'être prudent lorsque les résultats obtenus in vitro sont généralisés aux études cliniques.
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Applications de la lignée cellulaire A375 dans la recherche
La lignée cellulaire A375 a de nombreuses applications dans la recherche sur le cancer. Voici quelques-uns des domaines dans lesquels les cellules A375 sont couramment utilisées.
- Recherche sur le cancer : Les cellules A375 sont largement utilisées dans la recherche sur le mélanome. Les chercheurs ont utilisé ces cellules pour étudier la biologie du cancer de la peau, les processus et les mécanismes de signalisation cellulaire sous-jacents, y compris la prolifération, la migration et l'invasion des cellules. Cela peut également aider les chercheurs à identifier de nouvelles cibles thérapeutiques moléculaires. Une étude menée par Lin Zhu et ses collègues en 2019 a utilisé des cellules de mélanome très agressives A375 et a mis en évidence le rôle du microARN-3662 sur la croissance et l'invasion des cellules de mélanome A375. Les résultats de l'étude indiquent que le microARN-3662 cible le gène ZEB1 et régule la croissance des cellules de mélanome in vitro et in vivo dans le modèle tumoral A375 [2]. De même, des recherches menées en 2018 ont révélé que les voies PI3K/AKT et MAPK/ERK sont impliquées dans la prolifération et la métastase de la lignée cellulaire A375 [3].
- Découverte et test de médicaments : La lignée cellulaire A375 est un modèle tumoral in vitro utile pour tester et cribler des agents anticancéreux potentiels. Les chercheurs évaluent la toxicité et l'efficacité de nouveaux médicaments chimiothérapeutiques, de composés et d'autres thérapies en utilisant ces cellules de mélanome A375. Par exemple, une étude a exploré les propriétés anticancéreuses de micro et nanovésicules dérivées du pamplemousse sur des cellules de mélanome humain A375. Les résultats ont révélé que les micro et nanovésicules induisent l'arrêt du cycle cellulaire et l'apoptose et entravent l'expression des gènes dans la prolifération, la migration et l'invasion des cellules [4].
Cellules A375 : Publications
Quelques publications de recherche importantes concernant les cellules A375 sont mentionnées ici.
Cette étude a été publiée dans le Journal of Oncology en 2019. L'étude propose que le co-traitement avec de la vitamine D et des analogues améliore l'activité anticancéreuse du cisplatine et de la dacarbazine dans les cellules de mélanome A375.
Cette recherche a été publiée dans le Journal of Herbal Medicine en 2022. Cette étude a exploré les effets anti-mélanome du gel d'aloe vera sur les cellules de mélanome A375.
Cette étude parue dans Oncogene (2021) propose que le membre 2 de la famille de la fermitine (FERMT2 ou kindlin-2) favorise la progression du mélanome en activant la MAPK par la liaison avec p-α-Pix et Rac1.
Cette étude parue dans The American Journal of Dermatopathology (2019) propose que FARP1 puisse faciliter le développement et la progression du mélanome cutané. Il peut donc s'agir d'une cible thérapeutique utile.
Cet article de recherche a été publié dans Bioengineered (2019). Cette étude a exploré l'activité cytotoxique et apoptotique d'un extrait végétal de Phyllodium elegans sur des lignées cellulaires de carcinome humain, dont A375.
Ressources pour la lignée cellulaire A375 : Protocoles, vidéos et autres
Voici quelques ressources en ligne concernant les cellules A375.
- Transfection des cellules A375 : Ce tutoriel vidéo vous aidera à apprendre la transfection des cellules A375 étape par étape.
- Culture cellulaire : Cette vidéo contient des informations très utiles sur la culture des lignées cellulaires.
Les protocoles de culture des cellules A375 sont listés ici.
- Lignée cellulaire A375 : Ce lien contient des informations utiles sur la culture et la maintenance de la lignée cellulaire A375, y compris les milieux A375 et la manipulation des cultures A375 congelées et en prolifération.
Foire aux questions (FAQ) pour les cellules A375
Références
- Avram, S., et al, Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice. Oncol Rep, 2017. 38(1) : p. 89-99.
- Zhu, L., et al, MicroRNA-3662 cible ZEB1 et atténue l'invasion de la lignée cellulaire de mélanome très agressive A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al, Oxyfadichalcone C inhibe la prolifération et la métastase des cellules de mélanome A375 via la suppression des voies PI3K/Akt et MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al, Grapefruit-derived micro and nanovesicles show distinct metabolome profiles and anticancer activities in the A375 human melanoma cell line. Cells, 2020. 9(12) : p. 2722.