Cellules de Ramos - Recherche sur le lymphome à cellules B : L'importance des cellules de Ramos

Les cellules deRamos sont une lignée de lymphocytes B largement utilisée dans la recherche biomédicale. Elles trouvent notamment des applications principales dans les études d'immunologie et de cancérologie. Les chercheurs utilisent ces cellules pour évaluer les médicaments cytotoxiques et étudier les antigènes de surface des lymphocytes B, les mutations et les mécanismes apoptotiques.

Origine et caractéristiques générales des cellules de Ramos s

La compréhension de l'origine et des caractéristiques essentielles d'une lignée cellulaire joue un rôle crucial dans la décision de l'adapter à votre recherche. Il est donc conseillé d'évaluer soigneusement ces informations avant d'entamer tout travail sur cette lignée. Cette section répond aux questions les plus fréquemment posées : Qu'est-ce que la lignée cellulaire cancéreuse Ramos ? Qu'est-ce que la lignée cellulaire Ramos CD19 ? Qu'est-ce que la lignée cellulaire Ramos CD20 ? Quelle est l'origine des cellules Ramos ? Quels sont les marqueurs de la lignée cellulaire Ramos ? Quelle est la taille des cellules Ramos ? Quelle est la morphologie de la lignée cellulaire Ramos ?

  • La lignée cellulaire de Ramos a été créée en 1972. Ces cellules ont été dérivées du liquide ascitique d'un garçon caucasien de 3 ans atteint d'un lymphome de Burkitt de type américain [1].
  • Elles expriment les principaux marqueurs des cellules B, notamment l'immunoglobuline M (IgM), le CD19, le CD20 et le CD22.
  • Les cellules de Ramos sont négatives pour le virus d'Epstein. Cependant, elles peuvent être transformées de façon permanente en cellules positives au virus d'Epstein-Barr.
  • Ces cellules lymphoblastes B possèdent une morphologie ronde.

Cellules bleues de Ramos et cellules B de Ramos

Les cellules bleues de Ramos et les cellules B de Ramos sont toutes deux des cellules de lymphome de Burkitt humain. Elles sont toutes deux négatives pour le virus d'Epstein. La différence entre ces cellules est que les cellules bleues de Ramos expriment un gène rapporteur inductible par NF-κB/AP-1 appelé SEAP (phosphate alcalin embryonnaire sécrété), alors que les cellules blanches de Ramos ne l'expriment pas.

Animation 3D haute résolution illustrant la dynamique d'un lymphocyte B.

Culture des cellules de Ramos

Cette section de l'article est consacrée à vous aider à obtenir des informations impératives sur la culture des cellules Ramos. Ici, vous apprendrez à connaître : Quel est le temps de doublement de la lignée cellulaire ? Quel est le milieu recommandé ? Comment cultiver les cellules Ramos ?

Points clés pour la culture des cellules Ramos

Temps de doublement :

Le temps de doublement des cellules Ramos est d'environ 20,4 ± 1,5 heures. Cependant, il peut varier en fonction des conditions de culture cellulaire fournies.

Adhérentes ou en suspension :

Les cellules Ramos se développent en suspension.

Densité cellulaire :

La densité cellulaire optimale pour la lignée cellulaire Ramos est de 3 x105 cellules/ml . Pour la sous-culture, les cellules en suspension sont recueillies par centrifugation. Les cellules sont ajoutées à du milieu frais et remises en suspension avec précaution. Ensuite, les cellules sont versées dans un nouveau flacon à une densité de 3 à 9 x105 cellules/ml .

Milieu de croissance :

RPMI 1640 supplémenté avec 10% de sérum bovin fœtal, 2,1 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO3 est utilisé pour la culture des cellules Ramos. Le milieu doit être remplacé 2 fois par semaine.

Conditions de croissance :

La lignée cellulaire humaine de lymphome de Burkitt (Ramos) est conservée dans un incubateur humidifié à 5% de CO2 et à une température de 37°C.

Stockage :

Les cellules Ramos congelées sont conservées à une température inférieure à -150 degrés Celsius ou dans la phase vapeur de l'azote liquide afin de protéger la viabilité des cellules à long terme.

Processus de congélation et milieu :

Le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF est recommandé pour les cellules Ramos. Un processus de congélation lente est utilisé, permettant une diminution progressive de la température de 1 degré Celsius par minute. Cette congélation lente protège les cellules de tout choc et améliore leur viabilité.

Processus de décongélation :

Pour la décongélation, les cellulescongelées sont maintenues dans un bain d'eau préchauffé à 37°C pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Ensuite, du milieu frais est ajouté et les cellules sont centrifugées pour éliminer les éléments du milieu de congélation. Le culot est à nouveau remis en suspension et les cellules sont distribuées dans un nouveau flacon contenant du milieu de culture.

Niveau de biosécurité :

Le laboratoire de niveau de biosécurité 1 est essentiel pour maintenir les cultures de cellules de Ramos négatives au virus d'Epstein-Barr. Cependant, le niveau de biosécurité passe à 2 lorsque les cellules Ramos sont transformées de manière permanente en cellules positives au virus d'Epstein-Barr.

Lignée de lymphocytes B proliférants de Ramos en suspension, grossissement 10x et 20x.

Ramos : Avantages et limites

Comme les autres lignées cellulaires, les cellules Ramos présentent également des avantages et des limites distincts. Cette section examine certains d'entre eux qui peuvent influencer de manière significative leur utilisation dans la recherche.

Avantages

  • Modèle cellulaire de lymphome de Burkitt : Les cellules Ramos ont été développées à partir d'un patient atteint d'un lymphome de Burkitt, ce qui en fait un modèle cellulaire pertinent pour l'étude des tumeurs malignes lymphoïdes
  • Culture facile : Les cellules de Ramos sont faciles à cultiver et à maintenir en laboratoire. Les exigences et les conditions de culture cellulaire sont simples

Limites

  • Modèle in vitro : Les cellules Ramos peuvent ne pas représenter complètement la complexité génétique des tumeurs des patients, ce qui limite leur applicabilité. En outre, les résultats des expériences utilisant la lignée cellulaire Ramos peuvent ne pas refléter entièrement les conditions in vivo, ce qui peut entraîner des problèmes de transposition

applications des cellules Ramos dans la recherche

Ramos offre des applications prometteuses dans le domaine biomédical. Voici quelques-unes des utilisations impératives des cellules Ramos dans la recherche :

  • Biologie des lymphomes : Les cellules Ramos sont largement utilisées pour étudier la biologie du lymphome. Elles sont utilisées pour explorer les facteurs génétiques et moléculaires qui sous-tendent les tumeurs malignes lymphoïdes. En outre, ces cellules de lymphome de Burkitt permettent aux chercheurs de mieux comprendre l'initiation, la progression et l'hétérogénéité de la maladie. Les mutations génétiques et les voies de signalisation sont également étudiées, ce qui pourrait conduire au développement d'approches diagnostiques et thérapeutiques plus précises. Une étude menée en 2019 a montré que l'inhibition de l'histone acétyltransférase GCN5 (General control non-depressible 5) diminue la tumorigénicité des cellules humaines du lymphome de Burkitt (Ramos) en perturbant la signalisation BCR. Par conséquent, GCN5 est considéré comme une cible possible pour le développement d'une thérapie médicamenteuse contre le lymphome [2].
  • Dépistage et test des médicaments : La lignée cellulaire Ramos est largement utilisée pour le dépistage et les tests de médicaments. Les chercheurs évaluent l'efficacité des composés thérapeutiques potentiels dans l'inhibition de la prolifération et de la croissance cellulaires et dans l'induction de la mort cellulaire dans les cellules de lymphome. Cela permet d'identifier des médicaments candidats prometteurs, facilitant ainsi le développement de traitements ciblés pour les patients atteints de lymphome. Cette recherche a montré que l'extrait méthanolique de la peau, de la pulpe et des graines du fruit d'Annona exerçait des effets modérés sur la prolifération des cellules de Ramos, tandis que l'extrait chloroformique avait des effets robustes sur cette même prolifération. L'étude a donc proposé que les fruits d'Annona s'avèrent efficaces dans la prévention et le traitement du lymphome [3].

Des cellules de Ramos pour votre recherche

Publications mettant en vedette les cellules Ramos

Cette section de l'article présente quelques publications de recherche intéressantes concernant la lignée cellulaire Ramos :

La signalisation continue de CD 79b et CD 19 est nécessaire à la bonne santé des cellules B du lymphome de Burkitt

Cette recherche a été publiée dans la revue The EMBO en 2018. L'étude a révélé que les cellules B de Ramos ont besoin de l'expression des marqueurs CD19 et CD79b (composant de signalisation BCR Igβ) pour leur condition physique et leur croissance compétitive.

Les mimétiques de Smac et TRAIL coopèrent pour induire une nécroptose dépendante de MLKL dans les lignées cellulaires du lymphome de Burkitt

Cette étude publiée dans Neoplasia (2021) utilise des cellules Ramos et propose que le domaine de la kinase de lignée mixte (MLKL) soit épigénétiquement régulé dans les cellules de lymphome de Burkitt (Ramos). Il s'agit donc d'un marqueur pronostique prometteur pour le succès des traitements liés à la nécroptose.

La phosphorylation de PBK/TOPK Tyr74 par JAK2 favorise la croissance des tumeurs du lymphome de Burkitt

Cet article de recherche paru dans Cancer Letters (2022) suggère que l'axe de signalisation JAK2/TOPK/histone H3 joue un rôle crucial dans la prolifération des lignées cellulaires de lymphome B in vitro.

Le stress ER induit par la vérotoxine-1 déclenche des voies apoptotiques ou de survie dans les cellules du lymphome de Burkitt

Cet article a été publié en 2020 dans Toxins. L'étude propose que le traitement à la vérotoxine-1 induise un stress du réticulum endoplasmique (RE) dans les cellules B de Ramos. Cela conduit à l'initiation de la signalisation apoptotique ou de survie dans les lignées cellulaires de lymphome.

La silymarine inhibe l'expression du gène du récepteur Toll-like 8 et l'apoptose dans la lignée cellulaire cancéreuse Ramos

Cette étude publiée dans l'Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) indique qu'un composé naturel, la silymarine, supprime l'expression du TLR8 (Toll-like receptor 8) et l'apoptose dans la lignée cellulaire Ramos.


Ressources pour la lignée cellulaire Ramos : Protocoles, vidéos et autres

Voici quelques ressources en ligne sur les cellules Ramos :

Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules Ramos :

  • Cellules de Ramos : Ce site web contient des informations de base sur la lignée cellulaire Ramos. Il contient également un protocole de sous-culture des cellules Ramos et de manipulation des cultures proliférantes et cryoconservées. En outre, des informations concernant les milieux de culture des cellules Ramos, le temps de doublement et la densité cellulaire sont également disponibles.

Aperçu des cellules de Ramos : Questions fréquemment posées

Références

  1. Kerntke, C.G., Analyse de l'organisation et de la capacité de signalisation de l'IgE membranaire lors de son interaction avec CD19 et CD23 dans les lymphocytes B. 2021, Université Georg-August de Göttingen.
  2. Farria, A.T., et al, L'inhibition de GCN5 HAT réduit la survie des cellules humaines du lymphome de Burkitt en réduisant l'expression du gène cible MYC et en entravant les voies de signalisation BCR. Oncotarget, 2019. 10(56) : p. 5847.
  3. Al-Shaya, H.M., et al, Profil phytochimique et activité antioxydante du fruit d'annona et son effet sur la prolifération des cellules de lymphome. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1) : p. 58-68.

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