La lignée cellulaire RAW 264.7 dans la recherche sur les macrophages et l’immunologie
La lignée cellulaire RAW 264.7 constitue un modèle in vitro robuste pour les macrophages murins, essentiel dans le domaine de la recherche immunologique. Issu d’une souris BALB/c mâle, ces cellules ont été transformées par le virus de la leucémie murine d’Abelson, donnant naissance à une lignée cellulaire de type macrophage. En raison de leur stabilité fonctionnelle et de leur capacité inhérente à effectuer à la fois la phagocytose et la pinocytose, les cellules RAW 264.7 sont essentielles à l’étude des interactions hôte-pathogène, ce qui en fait une pierre angulaire de la recherche en immunologie [1,2].
- Milieu de culture
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- Temps de doublement
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- Type de croissance
- Adhérent
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander RAW 264.7
Caractéristiques morphologiques et comportement de croissance
À l'examen, les cellules RAW 264.7 présentent une croissance semi-adhérente et ont tendance à former à la fois des cellules adhérentes fusiformes et des cellules viables sphériques en suspension, dont le diamètre cellulaire varie entre 10 et 20 µm. Cette nature polymorphe et cette adaptabilité aux conditions de culture font des cellules RAW 264.7 un outil polyvalent pour les manipulations expérimentales et l’observation.
Fonction immunologique et présentation des antigènes
En tant que cellules présentatrices d’antigènes, les cellules RAW 264.7 jouent un rôle essentiel dans le système immunitaire. Leur fonction va au-delà de la simple reconnaissance des agents pathogènes pour s’étendre au traitement et à la présentation des antigènes aux lymphocytes T, orchestrant ainsi une réponse immunitaire globale. Cette dynamique permet de mieux comprendre comment le système immunitaire identifie et neutralise les entités étrangères.
Polarisation des macrophages : le paradigme M0, M1 et M2
Les cellules RAW 264.7, à l’état basal en tant que macrophages M0, possèdent la capacité remarquable de se polariser soit vers le phénotype pro-inflammatoire M1, soit vers le phénotype anti-inflammatoire M2. Cette capacité de polarisation offre aux chercheurs un modèle permettant d’étudier les influences et les effets de diverses cytokines et de facteurs environnementaux sur la fonction des macrophages et les réponses immunitaires [3,4].
Ostéoclastogenèse et remodelage osseux
Bien qu’elles ne soient pas des ostéoclastes à proprement parler, les cellules RAW 264.7 ont joué un rôle déterminant dans l’étude de l’ostéoclastogenèse, c’est-à-dire le processus de formation des ostéoclastes. Ces cellules facilitent l’étude de l’expression génique ostéoclastique et de leur réactivité à l’activation des récepteurs. Ces recherches ont des implications profondes pour la compréhension de la physiopathologie de pathologies telles que l’ostéoporose, caractérisée par un remodelage osseux dérégulé.
Informations sur la culture cellulaire des cellules RAW 264.7
Avant de commencer vos expériences, vous devez connaître certaines informations de base sur cette puissante lignée cellulaire. Connaissez-vous le temps de doublement des cellules RAW 264.7 ? Quelle est la densité d'ensemencement de ces cellules, et sont-elles adhérentes ? De plus, quelles sont les conditions de culture optimales pour la lignée RAW 264.7 ? Poursuivez votre lecture pour découvrir toutes les réponses dont vous avez besoin pour travailler avec cette incroyable lignée cellulaire !
Informations sur la culture cellulaire
Lignée cellulaire RAW 264.7
Temps de doublement de la population
11 à 30 heures
Adhérentes ou en suspension
Principalement adhérente, avec quelques populations de cellules en suspension
Densité d'ensemencement
4 × 10⁴ cellules/cm²
Milieu de culture recommandé
RPMI 1640 complété par 10 % de sérum fœtal bovin et de la L-glutamine (2,5 mM)
Conditions de culture optimales
Incubateur humidifié avec 5 % de CO₂ et une température de 37 °C
Remplacement du milieu
2 à 3 fois par semaine
Conservation
Phase vapeur d’azote liquide
CM-1 ou CM-ACF
Procédé de congélation
Congélation lente
Procédé de décongélation
Agitation rapide dans un bain-marie à 37 °C
Niveau de biosécurité
Laboratoire de niveau BSL-2 recommandé
Macrophages murins RAW 264.7 à différents degrés de confluence.
Avantages et inconvénients des cellules RAW 264.7
Avantages
- Culture aisée : la lignée cellulaire RAW 264.7 est facile à cultiver et à entretenir en laboratoire, sans exigences particulières.
- Bien caractérisée : la lignée cellulaire RAW 264.7 est bien caractérisée, ce qui signifie qu’elle présente des caractéristiques phénotypiques et fonctionnelles stables.
- Modèle in vitro de macrophages : les cellules RAW 264.7 étant des macrophages, elles présentent des fonctions essentielles propres aux macrophages, telles que la phagocytose et la pinocytose. Elles sont donc souvent utilisées comme modèle in vitro de macrophages.
- Différenciation en ostéoclastes : les cellules RAW 264.7 peuvent être différenciées en ostéoclastes à l’aide de facteurs moléculaires spécifiques. Ces cellules différenciées sont capables d’effectuer un remodelage osseux, à l’instar des ostéoclastes.
Inconvénients
- Représentation insuffisante des macrophages primaires : en tant que lignée cellulaire transformée, la lignée RAW 264.7 peut ne pas refléter fidèlement les caractéristiques des macrophages primaires et présenter certaines différences au niveau de l’expression génique, du phénotype et de la fonction.
- Limites dans le criblage de médicaments : les cellules RAW 264.7 ne sont pas forcément adaptées à tous les types de tests de criblage de médicaments, et leurs réponses à certains médicaments peuvent différer de celles des macrophages primaires.
- Forte adhérence cellulaire : les cellules RAW 264.7 adhèrent fortement à la surface du flacon de culture et peuvent parfois être difficiles à détacher.
Applications des cellules RAW 264.7 dans la simulation des macrophages et les études immunologiques
Modélisation des réponses immunologiques cellulaires
La lignée cellulaire RAW 264.7, qui reflète les fonctionnalités des macrophages authentiques, constitue un modèle clé pour l’étude des réponses cellulaires aux agents pathogènes et aux stimuli immunologiques. Une étude mettant en évidence cet aspect a évalué les effets immunomodulateurs et antioxydants de bactéries lactiques tuées par la chaleur sur ces cellules, fournissant des résultats significatifs concernant la régulation du système immunitaire [5 ].
En complément, des recherches menées en 2019 ont mis en lumière l’impact immunologique de l’exposition des cellules RAW 264.7 aux polysaccharides issus de la plante Polygonatum sibiricum. L’étude a conclu que ces composés déclenchent une réponse immunitaire par l’activation des voies de signalisation NF-κB/MAPK, offrant ainsi une compréhension moléculaire approfondie [6].
Étude de l’ostéoclastogenèse
Servant de modèle pour les études sur la différenciation des ostéoclastes, les cellules RAW 264.7 contribuent à élucider le comportement des ostéoclastes et leurs voies de différenciation. Ces recherches élargissent nos connaissances sur les mécanismes de résorption osseuse et la pathogenèse de l’ostéoporose. Des techniques d’imagerie avancées sont souvent utilisées pour surveiller les changements intracellulaires et analyser le métabolisme de l’hème au sein de ces cellules.
Approfondissement des connaissances moléculaires sur l’ostéoclastogenèse
Bien qu’elles servent principalement de modèle de macrophages, les cellules RAW 264.7 sont également utilisées pour la recherche in vitro sur l’ostéoclastogenèse. En induisant des caractéristiques de type ostéoclastique dans ces cellules, les chercheurs acquièrent des connaissances sur le processus de différenciation et le comportement des pré-ostéoclastes, bien qu’il soit essentiel de tenir compte des caractéristiques inhérentes à la lignée cellulaire et de son origine dans ces études.
Criblage de la bioactivité des produits naturels
Le criblage de la bioactivité des produits naturels est une autre application dans laquelle les cellules RAW 264.7 excellent. Par exemple, leur utilisation dans une étude coréenne portant sur les propriétés immunostimulantes d’un mélange à base de plantes a démontré l’efficacité de cette lignée cellulaire pour identifier des composés bioactifs dans des substances naturelles [7 ].
Faites avancer vos recherches grâce à nos cellules RAW 264.7
Publications scientifiques utilisant la lignée cellulaire RAW 264.7
De nombreuses publications scientifiques sont disponibles sur la lignée cellulaire de macrophages de souris RAW 264.7 :
- Les polysaccharides issus de Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute induisent une réponse immunitaire dans la lignée cellulaire RAW 264.7 via la voie NF-κB/MAPK : Cette étude a suggéré que les polysaccharides issus de la plante Polygonatum sibiricum peuvent déclencher une réponse immunitaire dans la lignée cellulaire de macrophages de souris RAW 264.7 en régulant la cascade de signalisation NF-κB/MAPK.
- Effets immunomodulateurs de l’extrait de Tinospora crispa et de ses principaux composés sur les fonctions immunitaires des macrophages RAW 264.7 : Cet article, publié dans la revue International Immunopharmacology, décrit que l’extrait de la plante Tinospora crispa et ses principaux constituants ont un effet immunomodulateur et immunostimulateur sur la lignée cellulaire de macrophages RAW 264.7.
- Les bactéries lactiques tuées par la chaleur inhibent la production d’oxyde nitrique via la synthase inductible de l’oxyde nitrique et la cyclooxygénase-2 dans les cellules RAW 264.7 : Cette étude suggère que les bactéries lactiques tuées par la chaleur pourraient potentiellement être utilisées dans la synthèse de produits probiotiques, car elles possèdent des propriétés immunomodulatrices et antioxydantes. Les chercheurs ont utilisé des cellules RAW 264.7 pour étudier ces activités biologiques.
- Effet d’une formulation à base de plantes sur le renforcement de la réponse immunitaire dans les macrophages RAW 264.7 : Cette étude a utilisé des cellules RAW 264.7 pour étudier l’effet immunostimulant d’une formulation à base de plantes nommée KM1608. L’étude a suggéré que le KM1608 pourrait constituer un agent potentiel de renforcement de la réponse immunitaire.
- Un criblage des plantes utilisées en médecine traditionnelle colombienne a révélé le potentiel anti-inflammatoire des calices de Physalis angulata : cet article publié dans le Saudi Journal of Biological Sciences a étudié le potentiel anti-inflammatoire de 10 plantes traditionnelles colombiennes couramment utilisées à l’aide de cellules RAW 264.7 stimulées par le LPS.
Cellules RAW 264.7 : ressources, protocoles, vidéos et plus encore
Les cellules RAW 264.7 sont souvent utilisées dans les études de transfection. Les ressources suivantes expliquent les différentes méthodes de transfection utilisées pour la lignée cellulaire RAW 264.7.
- Transfection des cellules RAW 264.7 : ce site web fournit un protocole de transfection des macrophages RAW 264.7 à l’aide d’un réactif Lipofectamine.
- Protocole de transfection : cet article publié décrit un protocole détaillé pour la transfection des cellules RAW 264.7.
- Méthode de transfection efficace pour les cellules RAW 264.7 : ce document décrit une autre approche pratique de transfection utilisant les cellules RAW 264.7.
Vidéos relatives à la lignée cellulaire RAW 264.7
- Culture des cellules RAW 264.7 : cette vidéo explique le protocole de repiquage des cellules RAW 264.7.
- Méthode de transfection : cette vidéo traite de la transfection de cellules RAW 264.7 avec un gène rapporteur.
FAQ indispensable sur la lignée cellulaire RAW 264.7 : aperçu des recherches sur la mimique des macrophages et l'ostéoclastogenèse
La lignée cellulaire RAW 264.7 a été dérivée des ascites d'une tumeur induite par le virus de la leucémie murine d'Abelson (A-MuLV) chez une souris BALB/c mâle.
Les cellules RAW 264.7 sont utilisées comme modèle pour les macrophages en raison de leur capacité à exécuter des fonctions clés telles que la phagocytose et la pinocytose, qui sont indicatives des réponses immunitaires innées.
Oui, bien que les cellules RAW 264.7 ne soient pas des ostéoclastes, elles peuvent être utilisées pour étudier le processus d'ostéoclastogenèse et l'expression des gènes ostéoclastogènes, ce qui contribue à notre compréhension de la santé osseuse et de maladies telles que l'ostéoporose.
Les cellules RAW 264.7 répondent aux stimuli microbiens en imitant les réponses des macrophages, ce qui les rend idéales pour étudier les interactions hôte-pathogène et les réponses cellulaires à divers systèmes biologiques.
La production de cytokines dans les cellules RAW 264.7 est essentielle pour comprendre le processus inflammatoire et les voies de signalisation cellulaire impliquées dans les réponses immunitaires, telles que les voies NF-κB/MAPK.
Non, les cellules RAW 264.7 ne sont pas des cellules primaires ; il s'agit d'une lignée cellulaire immortalisée. Les cellules primaires sont des cellules prélevées directement sur un tissu vivant et ont une durée de vie limitée en culture.
Les cellules RAW 264.7 sont cultivées dans des milieux spécifiques qui favorisent leur croissance et sont maintenues dans des conditions de température et d'atmosphère contrôlées afin de garantir leur stabilité fonctionnelle en vue d'une utilisation expérimentale.
Les cellules RAW 264.7, dans leur état basal (M0), peuvent être polarisées pour présenter des propriétés pro-inflammatoires de type M1 ou anti-inflammatoires de type M2, en fonction des stimuli auxquels elles sont exposées dans la culture.
Oui, les cellules RAW 264.7 sont fréquemment utilisées pour évaluer la bioactivité des produits naturels, y compris les composés d'origine végétale, pour leurs effets immunomodulateurs ou thérapeutiques potentiels.
Les marqueurs typiques comprennent F4/80 et CD11b, qui sont couramment utilisés pour confirmer le phénotype macrophagique des cellules RAW 264.7, ainsi que leurs marqueurs fonctionnels tels que la phosphatase acide résistante et l'activité phagocytaire.
Références
- Taciak, B., et al., Évaluation de la stabilité phénotypique et fonctionnelle de la lignée cellulaire RAW 264.7 au cours de passages successifs. PloS one, 2018. 13(6) : p. e0198943.
- Wang, S., et al., Les macrophages inflammatoires interrompent la maturation et la minéralisation des ostéocytes en régulant la voie de signalisation Notch. Molecular Medicine, 2022. 28(1) : p. 102.
- Orekhov, A.N., et al., Différenciation des monocytes et polarisation des macrophages. Vessel Plus, 2019. 3 : p. 10.
- Khabipov, A., et al., Polarisation des macrophages RAW 264.7 par des cellules cancéreuses pancréatiques : un modèle pour l’étude des macrophages favorisant la tumeur. Anticancer Research, 2019. 39(6) : p. 2871-2882.
- Kang, C.-H., et al., Les bactéries lactiques tuées par la chaleur inhibent la production d’oxyde nitrique via la synthase inductible de l’oxyde nitrique et la cyclooxygénase-2 dans les cellules RAW 264.7. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6) : p. 1530-1538.
- Zhang, J., et al., Les polysaccharides issus de Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute induisent une réponse immunitaire dans la lignée cellulaire RAW264.7 via une voie NF-κB/MAPK. RSC Advances, 2019. 9(31) : p. 17988-17994.
- Trinh, T.A., et al., Effet d’une formulation à base de plantes sur le renforcement de la réponse immunitaire dans les macrophages RAW 264.7. Biomolecules, 2020. 10(3) : p. 424.