Cellules NIH-3T3 : faire progresser la recherche sur les fibroblastes et les applications des cellules NIH-3T3
La lignée cellulaire NIH-3T3, établie en 1962 à partir du tissu d’un embryon de souris albinos suisse âgé de 17 jours par Howard Green et George Todaro à la faculté de médecine de l’université de New York, est devenue une ressource fondamentale dans la recherche biomédicale. Reconnues pour leur grande sensibilité à la formation de foyers par le virus de la leucémie et le virus du sarcome, les cellules NIH-3T3 constituent un outil essentiel pour une multitude de recherches scientifiques, notamment les études en oncologie virale, l’analyse de l’expression génique et l’étude de la dynamique de croissance cellulaire. La nomenclature « 3T3 » reflète la méthode de culture cellulaire, désignant un intervalle de « transfert tous les 3 jours » avec une densité d'ensemencement initiale de 3 × 10^5 cellules, soulignant ainsi les conditions standardisées dans lesquelles ces cellules ont été cultivées et multipliées pour la première fois.
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Morphologies et applications variées des cellules NIH-3T3
L’une des caractéristiques phares des cellules NIH-3T3 est leur adaptabilité morphologique, qui varie considérablement en fonction de la densité de culture. À faible densité, ces fibroblastes présentent une structure cellulaire solitaire en forme de fuseau, qui évolue vers des motifs denses et tourbillonnants à mesure que la population atteint la confluence. Avec un diamètre moyen d’environ 18 μm, les cellules NIH-3T3 constituent un modèle polyvalent pour des études approfondies en biologie cellulaire, allant des mécanismes de réparation tissulaire aux voies complexes de régulation du cycle cellulaire.
Informations sur la culture
Informations clés sur la culture :
Temps de doublement de la population : environ 20 heures.
Type de croissance : cultures adhérentes.
Densité d'ensemencement : recommandée : 3 à 4 × 10⁴ cellules/cm².
Milieu de culture : DMEM ou Ham's F12, complété par 5 % de sérum fœtal bovin (FBS) et 2,5 mM de L-glutamine.
Conditions de culture : Maintenir à 37 °C dans un incubateur humidifié contenant 5 % de CO₂.
Conservation : conserver à des températures inférieures à -195 °C en phase vapeur d'azote liquide.
Méthode de congélation : utiliser le milieu CM-1 ou CM-ACF ; recourir à une méthode de congélation lente (baisse de température de 1 °C).
Protocole de décongélation : réchauffement rapide dans un bain-marie à 37 °C, suivi d’une centrifugation pour éliminer le milieu de congélation, puis d’une remise en suspension dans le milieu de culture.
Niveau de biosécurité : la culture nécessite un environnement de niveau de biosécurité 1.

Souris albinos suisse dans un laboratoire.
Avantages et inconvénients de l'utilisation des cellules NIH 3T3
Avantages
Efficacité de la transfection : Réputées pour leurs taux de transfection élevés, les cellules NIH-3T3 sont idéales pour les études d’expression génique tant transitoire que stable, et se prêtent à diverses techniques de transfection.
Utilité en tant que couche nourricière : ces cellules servent souvent de couche nourricière de soutien pour les co-cultures avec des cellules telles que les kératinocytes et les cellules souches, grâce à la libération de facteurs de croissance qui favorisent la croissance des cellules en co-culture.
Recherche sur les cellules souches : les cellules NIH-3T3 constituent un choix privilégié dans la recherche sur les cellules souches pour induire la pluripotence sans modification génétique et offrir un environnement propice à la différenciation des cellules souches.
Stabilité de la culture : les cellules NIH-3T3 sont réputées pour leur stabilité et leur faible fréquence de transformation spontanée. Cependant, dans certaines conditions ou après exposition à des oncogènes ou à des mutagènes spécifiques, les cellules NIH-3T3 peuvent subir une transformation spontanée. Cette transformation peut entraîner l’acquisition de propriétés cancéreuses telles qu’une croissance incontrôlée, la perte de l’inhibition par contact et la capacité à former des tumeurs lorsqu’elles sont injectées à des hôtes sensibles.
Inconvénients
Taille cellulaire variable : la morphologie allongée, en forme de fuseau, des cellules NIH-3T3 peut varier, ce qui complique les analyses d’images lors des essais.
Sensibilité aux infections : ces cellules sont sujettes aux infections bactériennes et à celles causées par des mycoplasmes si elles ne sont pas conservées dans des conditions d’asepsie rigoureuses, ce qui peut compromettre l’intégrité des expériences.
Applications de recherche des cellules NIH-3T3
Études de transfection d’ADN : la robustesse des cellules NIH-3T3 les rend idéales pour l’introduction et l’étude de la fonction de divers gènes, comme l’ont démontré des recherches portant sur des protéines telles que NAB2-STAT6 et leur rôle dans les processus cellulaires.
Essais cellulaires : leur fiabilité s’étend à divers essais, notamment ceux portant sur la viabilité, l’apoptose et la formation de foyers, offrant ainsi un aperçu des réponses cellulaires dans différentes conditions expérimentales.
Recherche sur le cycle cellulaire : la manipulation aisée du cycle cellulaire de cette lignée cellulaire via les taux de sérum en fait un modèle puissant pour l’étude de la régulation du cycle cellulaire et de ses anomalies dans le contexte de maladies.
Faites progresser vos recherches grâce aux cellules NIH-3T3
Présentation des principales études menées sur la lignée cellulaire de fibroblastes NIH 3T3
La lignée cellulaire NIH-3T3 a joué un rôle central dans de nombreux projets de recherche couvrant divers aspects de la biologie cellulaire. Voici quelques études importantes utilisant ces cellules :
- Étude de la protéine de fusion NAB2-STAT6 : publiée dans la revue *Biochemical and Biophysical Research Communications*, cette étude examine l’impact de la protéine de fusion NAB2-STAT6 sur les cellules NIH-3T3, et plus particulièrement son rôle dans la stimulation de la croissance et de la migration cellulaires par le biais de la régulation de l’EGR-1.
- Étude de l’APOBEC3 et du virus de la leucémie murine : cette recherche, publiée dans la revue *Virology*, examine l’hypermutation du virus de la leucémie murine AKV dans des cellules NIH-3T3 exprimant le gène APOBEC3 de souris.
- Évaluation du potentiel antimétastatique des médicaments épigénétiques : Publiée dans *Oncotargets and Therapy*, cette étude évalue les effets antimétastatiques de l’hydralazine et de l’acide valproïque sur des cellules NIH-3T3 transformées par RAS.
- Impact de la baicaléine sur la prolifération des cellules NIH-3T3 et la synthèse de collagène : cette recherche utilise des cellules NIH-3T3 pour explorer comment la baicaléine influence la prolifération cellulaire et la production de collagène par la modulation de l’axe miR-9/facteur de croissance analogue à l’insuline-1.
- Étude de la carence en riboflavine et de la tumorigenèse : Cette étude présente des résultats montrant comment une carence en riboflavine dans les cellules NIH-3T3 contribue à la tumorigenèse en favorisant la prolifération cellulaire et en dérégulant les gènes du cycle cellulaire.
Ressources indispensables pour la recherche sur les cellules NIH-3T3
Pour les chercheurs souhaitant travailler avec des cellules NIH-3T3, diverses ressources sont disponibles pour les guider dans les protocoles de culture et d’expérimentation :
- Formation de sphéroïdes à partir de cellules NIH-3T3 : cette vidéo propose un guide détaillé sur la formation de sphéroïdes, une technique de culture cellulaire en 3D qui agrège les cellules NIH-3T3 en grappes, offrant ainsi un modèle plus pertinent sur le plan physiologique pour les études.
- Suivi de la croissance des cellules NIH-3T3 : grâce au système d’imagerie de cellules vivantes JuLI Br, cette vidéo capture la dynamique de croissance des cellules NIH-3T3 sur 65 heures, illustrant la prolifération cellulaire en temps réel.
Ces ressources ont pour objectif de soutenir vos travaux de recherche sur les cellules NIH-3T3, en vous fournissant les bases nécessaires à la réussite de vos expériences et de vos découvertes.
Questions fréquemment posées sur les cellules NIH-3T3
Références
- Rahimi, A.M., M. Cai et S. Hoyer-Fender, « Hétérogénéité de la lignée cellulaire de fibroblastes NIH3T3 ». Cells, 2022. 11(17) : p. 2677.
- Leibiger, C., et al., Première caractérisation cytogénétique moléculaire à haute résolution de la lignée cellulaire NIH 3T3 par bandage multicolore murin. Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4) : p. 306-312.
- Wang, H.-X., et al., Analyse comparative de différentes couches de cellules nourricières avec des fibroblastes 3T3 pour la culture de cellules souches limbiques de lapin. International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7) : p. 1021.
- Wang, Z., et al., Différenciation de cellules neuronales à partir de fibroblastes NIH/3T3 dans des conditions définies. Development, growth & differentiation, 2011. 53(3) : p. 357-365.
- Park, Y.-S., et al., La protéine de fusion NAB2-STAT6 intervient dans la prolifération cellulaire et la progression oncogénique via la régulation de l’EGR-1. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020. 526(2) : p. 287-292.
- Mattsson, M., Expression de la Sloppymerase™ dans les cellules NIH/3T3 : exploration de la polyvalence d’une polymérase de fusion sujette à des erreurs. 2021.
- Sahinturk, V., et al., L’acrylamide exerce sa cytotoxicité sur les fibroblastes NIH/3T3 par apoptose. Toxicology and Industrial Health, 2018. 34(7) : p. 481-489.
- Lusi, E.A. et F. Caicci, Découverte du premier rétrovirus géant humain : description de sa morphologie, de sa kinase rétrovirale et de sa capacité à induire des tumeurs chez la souris. bioRxiv, 2019 : p. 851063.
- Endo, M., et al., La voie de signalisation E2F1-Ror2 assure une régulation transcriptionnelle coordonnée afin de favoriser la transition entre les phases G1 et S dans les fibroblastes NIH/3T3 stimulés par le bFGF. The FASEB Journal, 2020. 34(2) : p. 3413-3428.
- Long, L., et al., La carence en riboflavine favorise la tumorigenèse dans les cellules HEK293T et NIH3T3 en maintenant la prolifération cellulaire et en régulant la transcription des gènes liés au cycle cellulaire. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6) : p. 834-843.
