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Cellules NCI-H1299 : recherche et implications cliniques des cellules de cancer du poumon NCI-H1299

La lignée cellulaire NCI-H1299 est une lignée cellulaire immortalisée issue d’un cancer du poumon non à petites cellules chez l’homme, largement utilisée dans la recherche en immuno-oncologie, en cancérologie et en découverte de médicaments. De plus, les chercheurs ont utilisé ces cellules pour étudier la sensibilité aux médicaments, les voies de signalisation sous-jacentes et les mécanismes moléculaires liés au cancer du poumon. Par ailleurs, ces cellules sont utilisées pour étudier des infections virales telles que le SARS-CoV-2.

📋 Lignée cellulaire NCI-H1299 — En bref
Milieu de culture
Le RPM1 1640 est un milieu de culture idéal pour les cellules NCI-H1299. Il est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin, de 4 500 mg/L de glucose, de 2,0 mM de L-glutamine, de 1 mM de pyruvate de sodium, de 1 500 mg/L de NaHCO₃ et de 10 mM d’HEPES. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Temps de doublement
Le temps de doublement des cellules NCI-H1299 varie entre 22 et 30 heures.
Type de croissance
La lignée cellulaire NCI-H1299 est une lignée cellulaire adhérente.
Niveau de biosécurité
BSL-1

Caractéristiques générales et origine des cellules NCI-H1299

La première chose à savoir sur une lignée cellulaire est son origine et ses caractéristiques générales, car elles vous aident à définir son utilisation dans vos recherches. Cette section de l'article vous aidera à découvrir des informations importantes sur l'origine et les caractéristiques de la lignée NCI-H1299. Par exemple, que sont les cellules de cancer du poumon NCI-H1299 ? De quel type de cellule s'agit-il ? Quelle est la taille des cellules NCI-H1299 ? Quelle est la différence entre les lignées A549 et NCI-H1299 ?

  • La lignée cellulaire NCI-H1299 provient d’une métastase ganglionnaire du poumon d’un patient de sexe masculin, de type caucasien, âgé de 43 ans et atteint d’un cancer.
  • Ces cellules présentent une délétion partielle homozygote du gène p53 ; elles n'expriment donc pas la protéine p53. L'absence d'expression de la protéine p53 dans les cellules NCI-H1299 contribue à la tendance proliférative des cellules cancéreuses pulmonaires H1299.
  • Outre le gène p53, ces cellules immortalisées présenteraient une mutation KRAS, responsable de leurs propriétés de croissance, de prolifération, de migration et d’invasion.
  • Le caryotype des cellules NCI-H1299 est quasi diploïde.
  • Les cellules NCI-H1299 présentent une morphologie de type épithélial.
  • Ces cellules sont aplaties et présentent une épaisseur inférieure à 5 µm.

NCI-H1299 et A549

Les lignées NCI-H1299 et A549 sont des lignées cellulaires de cancer du poumon non à petites cellules. Les cellules NCI-H1299 sont plus agressives et plus sensibles que les cellules A549. Les deux présentent des mutations relativement similaires, telles que KRAS. Cependant, contrairement aux cellules NCI-H1299, les cellules A549 expriment le gène P53.

Animation montrant le virus SARS-CoV-2 dans le corps humain, alors qu'il tente de pénétrer dans une cellule.

Informations sur la culture

Il n'est pas facile d'entretenir une culture de lignée cellulaire tant que l'on ne connaît pas toutes les informations essentielles la concernant, notamment : quel est le temps de doublement de la lignée NCI-H1299 ? Quelle est la densité d'ensemencement de la lignée NCI-H1299 ? Quel est le milieu de culture des cellules NCI-H1299 ? Comment cultiver les lignées cellulaires NCI-H1299 ? Cette section vous aidera à trouver les réponses à toutes ces questions concernant la culture des cellules NCI-H1299.

Points clés pour la culture des cellules NCI-H1299

Temps de doublement :

Le temps de doublement de la lignée NCI-H1299 varie entre 22 et 30 heures.

Adhérentes ou en suspension :

La lignée cellulaire NCI-H1299 est une lignée cellulaire adhérente.

Rapport de repiquage :

Les cellules NCI-H1299 sont repiquées selon un rapport recommandé de 1:3 à 1:6. Pour l'ensemencement, les cellules adhérentes sont lavées avec du PBS 1x et incubées avec la solution de repiquage Accutase pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Les cellules détachées sont ajoutées à un milieu de culture frais, puis centrifugées. Le culot cellulaire est ensuite remis en suspension, et les cellules sont transférées dans de nouveaux flacons contenant un milieu de croissance.

Milieu de croissance :

Le RPM1 1640 est un milieu idéal pour les cellules NCI-H1299. Il est complété par 10 % de sérum fœtal bovin, 4 500 mg/L de glucose, 2,0 mM de L-glutamine, 1 mM de pyruvate de sodium, 1 500 mg/L de NaHCO₃ et 10 mM d’HEPES. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.

Conditions de culture :

Les cultures de cellules de cancer du poumon NCI-H1299 sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO₂.

Conservation :

La lignée cellulaire NCI-H1299 peut être conservée à long terme en phase vapeur d’azote liquide ou dans des congélateurs à très basse température à une température inférieure à -150 °C.

Procédé de congélation et milieu :

Le CM-1 ou le CM-ACF sont des milieux de congélation pour les cellules NCI-H1299. Les cellules sont congelées selon un processus de congélation lente qui ne permet qu’une baisse de température de 1 degré par minute afin de préserver la viabilité cellulaire.

Procédure de décongélation :

Les cellules NCI-H1299 congelées sont agitées rapidement dans un bain-marie préchauffé à 37 °C pendant 40 à 60 secondes, jusqu’à ce qu’il ne reste plus qu’un petit morceau de glace. Les cellules décongelées sont ajoutées à un milieu frais et peuvent être directement mises en culture dans de nouveaux flacons ou centrifugées. Dans le premier cas, le milieu doit être remplacé après 24 heures d’incubation. La centrifugation permet d’éliminer les résidus du milieu de congélation. Ensuite, les cellules récoltées sont remises en suspension dans un milieu frais et transférées dans un nouveau flacon pour la culture.

Niveau de biosécurité :

Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est requis pour manipuler la culture cellulaire NCI-H1299.

H1299 cells

Monocouche adhérente de cellules NCI-H1299 sous un grossissement de 20x et 40x.

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Avantages et inconvénients des cellules NCI-H1299

À l’instar d’autres lignées cellulaires cancéreuses humaines, la lignée NCI-H1299 présente également certaines caractéristiques distinctives associées à des avantages et inconvénients spécifiques. Nous en avons résumé ici quelques-unes parmi les plus significatives.

Avantages

Les principaux avantages de la lignée cellulaire NCI-H1299 de cancer du poumon non à petites cellules sont les suivants :

  • Modèle in vitro du cancer du poumon

    Les lignées cellulaires NCI-H1299 ont été développées à partir de métastases ganglionnaires d’un carcinome pulmonaire et présentent donc des propriétés relativement similaires. Ces cellules peuvent ainsi servir de modèle in vitro pour étudier la biologie du cancer du poumon, ses mécanismes cellulaires et moléculaires, ainsi que pour cribler et tester des traitements potentiels.

  • Facilité de culture

    Les cellules NCI-H1299 sont faciles à cultiver et à entretenir dans un laboratoire de recherche. Leur culture ne nécessite pas de conditions ni de procédures complexes.

  • Mutations P53 et KRAS des cellules NCI-H1299

    Les cellules NCI-H1299 ne présentent pas d’expression du gène p53, ce qui leur permet de proliférer vigoureusement. De plus, elles possèdent une mutation du gène KRAS qui contribue à la croissance, à la prolifération, à l’invasion et à la migration cellulaires. Compte tenu de ces caractéristiques, les chercheurs utilisent les cellules H1299 pour étudier les mécanismes moléculaires liés aux mutations des gènes KRAS et p53.


Inconvénients

Les inconvénients des cellules NCI-H1299 sont les suivants :

  • Spécificité tissulaire

    Les cellules NCI-H1299 proviennent d’un tissu pulmonaire. Par conséquent, leur applicabilité est principalement limitée à la recherche sur le carcinome pulmonaire. Elles peuvent ne pas refléter pleinement l’hétérogénéité et les caractéristiques générales d’autres types de cancer.

Applications de recherche des cellules NCI-H1299

La lignée cellulaire NCI-H1299 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer du poumon. Quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire sont mentionnées ici.

  • Biologie du cancer : les cellules NCI-H1299 constituent un excellent outil de recherche pour étudier le développement et la progression du cancer, ainsi que les mécanismes cellulaires et moléculaires associés. Ces cellules présentent certaines mutations, ce qui permet aux chercheurs d’explorer les comportements des cellules cancéreuses, les voies de signalisation et les profils d’expression génique associés. Plusieurs études ont utilisé la lignée cellulaire NCI-H1299 de carcinome pulmonaire non à petites cellules pour étudier la biologie du cancer du poumon. Par exemple, une étude menée en 2018 a examiné la voie de signalisation impliquée dans l’apoptose des cellules cancéreuses pulmonaires à l’aide de cellules NCI-H1299. Les chercheurs ont découvert que la voie PI3K/AKT contribue à la prolifération cellulaire et que son inhibition peut entraîner la mort des cellules cancéreuses [1]. De même, une autre étude a porté sur les mécanismes impliqués dans la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT) des cellules NCI-H1299. Cette étude a suggéré qu’une protéine extracellulaire, la SPARC (protéine sécrétée acide et riche en cystéine), contribue à l’EMT et à la migration des cellules NCI-H1299, favorisant ainsi la tumorigenèse : la protéine SPARC agit en tant que médiateur de la signalisation du TGF-β1 [2]. 
  • Découverte et criblage de médicaments : la lignée cellulaire NCI-H1299, issue d’un cancer du poumon humain, est largement utilisée pour évaluer la toxicité et l’efficacité de médicaments potentiels. De plus, elle est employée par les chercheurs pour étudier le mécanisme d’action des médicaments antitumoraux. Des études ont également utilisé ces cellules pour identifier des cibles médicamenteuses potentielles et des mécanismes de résistance. Par exemple, des recherches menées par Xiao-Yun Shen et ses collègues ont porté sur le potentiel anticancéreux du composé naturel brucéine D (BD). Les résultats ont révélé que la BD entrave de manière significative la prolifération, l’invasion et la migration des cellules NCI-H1299. Elle pourrait donc être envisagée comme un traitement adjuvant potentiel dans la prise en charge du carcinome pulmonaire non à petites cellules [3]. De même, une étude a évalué les effets cytotoxiques du xanthohumol, seul et en association avec le cisplatine, un médicament chimiothérapeutique, sur les cellules cancéreuses pulmonaires NCI-H1299 [4].

Publications scientifiques consacrées à la lignée cellulaire NCI-H1299

Vous trouverez ici certaines des publications scientifiques les plus importantes et les plus citées concernant la lignée cellulaire de carcinome pulmonaire NCI-H1299.

Induction de l'apoptose dans les cellules H1299 de cancer du poumon traitées à l'indole-3-carbinol via une augmentation du taux d'espèces réactives de l'oxygène (ROS)

Cet article a été publié dans la revue *Human and Experimental Toxicology* (2021). L’étude suggère que l’indole-3-carbinol induit l’apoptose dans les cellules H1299 en augmentant les niveaux d’espèces réactives de l’oxygène (ROS).

L’activité anticancéreuse synergique de l’association de l’acide caféique et du paclitaxel renforce l’apoptose des cellules H1299 du cancer du poumon non à petites cellules in vivo et in vitro

Cette recherche a été publiée en 2018 dans la revue *Cellular Physiology and Biochemistry*. Les résultats de cette étude ont révélé que l’association de l’acide caféique et du paclitaxel exerce un effet anticancéreux synergique sur la lignée cellulaire NCI-H1299 du cancer du poumon non à petites cellules.

Les effets antitumoraux du tubeimoside-1 sur les cellules NCI-H1299 sont médiés par l’inactivation de la voie de signalisation VEGF-A/VEGFR-2/ERK induite par le microARN-126-5p

Cet article de recherche a été publié dans la revue *Molecular Medicine Reports* (2018). L’étude a évalué l’effet antitumoral du tubeimoside-1, une saponine triterpénoïde, ainsi que les mécanismes sous-jacents dans la lignée cellulaire NCI-H1299.

La pristimérine induit l’apoptose et inhibe la prolifération et la migration des cellules cancéreuses pulmonaires H1299

Cet article, publié dans le Journal of Cancer (2020), suggère que la pristimérine, un composé naturel, inhibe la prolifération et la migration des cellules NCI-H1299.

Mécanisme de régulation des cellules d'adénocarcinome pulmonaire humain H1299 par le gène VIPR1

Cette étude publiée dans Medical Oncology (2019) a exploré les effets potentiels de la surexpression du gène VIPR1 sur la lignée cellulaire d’adénocarcinome NCI-H1299.

Ressources sur la lignée cellulaire NCI-H1299 : protocoles, vidéos et plus encore

Voici quelques ressources en ligne consacrées aux cellules NCI-H1299.

Le lien suivant contient des informations sur la culture cellulaire des cellules NCI-H1299. 

  • Lignée cellulaire NCI-H1299 : ce lien vous permettra de vous familiariser avec le protocole de repiquage et de transfection des cellules NCI-H1299.

Questions fréquemment posées sur la lignée cellulaire NCI-H1299

Références

  1. Gu, J., et al., Étude de l’apoptose induite par l’EGCG dans les cellules cancéreuses pulmonaires par inhibition de la voie de signalisation PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14) : p. 4557-4563.
  2. Sun, W., et al., SPARC agit en tant que médiateur du TGF-β1 dans la promotion de la transition épithélio-mésenchymateuse dans les cellules cancéreuses pulmonaires A549 et H1299. Biofactors, 2018. 44(5) : p. 453-464.
  3. Shen, X.-Y., et al., Étude sur le mécanisme d’action de la bruceine D dans le traitement des cellules H1299 du cancer du poumon non à petites cellules. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4) : p. 500.
  4. Long, B., et al., Effets cytotoxiques du xanthohumol et de son association avec le cisplatine sur les cellules H1299 de cancer du poumon métastatique humain. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9) : p. 1-15.

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