Cellules Hep3B : Recherche et découverte sur le carcinome hépatocellulaire
HEP3B est une lignée cellulaire immortalisée de carcinome hépatocytaire d'origine humaine. Elle est largement utilisée dans la recherche sur l'hépatotoxicité et le métabolisme des médicaments. L'efficacité de la transfection de HEP3B est considérable ; ces cellules sont donc couramment utilisées pour étudier le développement et la progression du cancer du foie, ainsi que les interventions thérapeutiques. Cet article couvre toutes les informations nécessaires sur la lignée cellulaire HEP3B pour vous aider à travailler avec elle. Il comprendra principalement
- Caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
- Lignée cellulaire HEP3B : Avantages et limites
- Applications des cellules HEP3B dans la recherche
- Publications sur la lignée cellulaire HEP3B
- Ressources pour la lignée cellulaire HEP3B : Protocoles, vidéos et autres
1.caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
Les principales informations dont vous avez besoin concernant une lignée cellulaire sont son origine et ses caractéristiques générales. Elles peuvent vous aider à décider de son utilisation dans le cadre de votre recherche et vous aider à la manipuler. Cette section de l'article couvre toutes les informations essentielles sur l'origine et les caractéristiques des cellules HEP3B. Vous apprendrez ici : Qu'est-ce qu'une lignée cellulaire Hep 3B ? Quelle est l'origine des cellules Hep3B ? Quelle est la morphologie des cellules HEP3B ?
- HEP3B, une lignée cellulaire continue d'hépatome humain, provient du tissu hépatique d'un garçon africain de 8 ans atteint d'un carcinome hépatocellulaire (CHC). Elle a été créée par Aden et ses collègues en 1979 dans le laboratoire de Barbara B. Knowles, à l'Institut Wistar de Philadelphie, aux États-Unis [1].
- Les cellules HEP3B présentent une intégration du génome du virus de l'hépatite B (VHB) dans leur chromosome.
- Ces cellules de carcinome hépatocytaire présentent une morphologie épithéliale.
- Les cellules HEP3B ont un nombre modal de chromosomes de 60. Contrairement à HepG2, elles ne possèdent pas de chromosome 1 réarrangé.
Quelle est la différence entre HepG2 et Hep3B ?
HepG2 et HEP3B diffèrent par le nombre de chromosomes par cellule. HEP3B contient 60 chromosomes, alors que les cellules HepG2 ont en moyenne 55 chromosomes. De plus, HepG2 est non tumorigène et négatif à l'hépatite B, alors que HEP3B est tumorigène et positif au VHB.
2.informations sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
La connaissance des informations relatives à la culture d'une lignée cellulaire peut vous faciliter la tâche. Cette section couvre tous les points clés de la culture de la lignée cellulaire HEP3B HBV, y compris : Quel est le temps de doublement des cellules Hep3B ? Quelles sont les conditions de culture de HEP3B ? Comment cultiver les cellules HEP3B HCC ?
Points clés pour la culture des cellules HEP3B
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Temps de doublement : |
Le temps de doublement des cellules HEP3B est d'environ 36 heures. |
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Adhérentes ou en suspension : |
Cette lignée de cellules d'hépatome est adhérente. |
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Rapport de division : |
Les cellules HEP3B sont sous-cultivées dans un rapport de 1:2 à 1:4. Les cellules HEP3B adhérentes sont rincées avec 1 x PBS puis incubées avec la solution de dissociation Accutase. Après 8 à 10 minutes, du milieu frais est ajouté et les cellules sont centrifugées. Les cellules récoltées sont ensuite soigneusement remises en suspension et versées dans des flacons contenant du milieu de culture selon le ratio recommandé. |
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Milieu de croissance : |
Le milieu EMEM contenant 10 % de FBS, 2,2 g/L de NaHCO3, 2 mM de L-Glutamine et la solution saline équilibrée de Earle (EBSS) est utilisé pour la culture des cellules HEP3B. |
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Conditions de croissance : |
Les cellules HEP3B sont cultivées dans un incubateur humidifié à 37°C avec un apport continu de 5% de CO2. |
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Stockage : |
Les cellules HEP3B congelées sont conservées à une température inférieure à -150°C dans un congélateur électrique ou dans la phase vapeur de l'azote liquide. |
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Processus de congélation et milieu : |
Le milieu de congélation recommandé pour les cellules HEP3B est CM-1 ou CM-ACF. Les cellules sont congelées à l'aide d'un processus de congélation lent qui ne permet qu'une baisse de température de 1°C par minute afin de protéger la viabilité des cellules. |
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Processus de décongélation : |
Les cellules congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37°C pendant 40 à 60 secondes. Ensuite, ces cellules sont ajoutées au milieu de croissance frais et centrifugées pour éliminer les éléments du milieu de congélation. Les cellules collectées sont remises en suspension et distribuées dans de nouveaux flacons pour la croissance. |
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Niveau de biosécurité : |
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est nécessaire pour la culture des cellules HEP3B. |
3.lignée cellulaire HEP3B : Avantages et limites
HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire largement utilisée. Cette section se concentre sur les principaux avantages et limites de ces cellules d'hépatome.
Avantages
Les principaux avantages des cellules HEP3B sont les suivants :
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Facilité de culture |
Les cellules HEP3B n'ont pas d'exigences particulières en matière de culture cellulaire, ce qui les rend faciles à manipuler et à entretenir dans un laboratoire de recherche. Cela simplifie les procédures expérimentales. |
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Grande efficacité de transfection |
Les cellules HEP3B présentent une efficacité de transfection remarquable, ce qui les rend largement utilisées dans les manipulations génétiques et les études liées à l'expression des gènes. |
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Tumorigénicité |
HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire tumorigène capable de former des tumeurs lorsqu'elle est injectée dans une souris immunodéprimée. Cela permet d'étudier la progression et le développement du cancer à l'aide de modèles de xénogreffes HEP3B. |
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Statut P53 de HEP3B |
Les cellules HEP3B présentent une mutation du gène P53 similaire à celle du carcinome hépatocellulaire (CHC) et d'autres cancers, ce qui les rend pertinentes pour l'étude des effets de la mutation P53 sur la croissance, le développement et la progression du cancer. |
Limites
La limite associée à la lignée cellulaire HEP3B est la suivante :
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Modèle cellulaire in vitro |
La lignée cellulaire HEP3B sert de modèle in vitro de cellules de carcinome hépatocellulaire (CHC). Cependant, elle peut ne pas représenter entièrement la complexité du CHC telle qu'on la trouve dans les organismes vivants. Par conséquent, les résultats expérimentaux in vitro peuvent différer de ceux observés in vivo. |
4.applications des cellules HEP3B dans la recherche
La lignée cellulaire HEP3B offre plusieurs applications en recherche biomédicale. Parmi les principales applications des cellules HEP3B, on peut citer
- Biologie du cancer : HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire humain. Il s'agit d'un modèle cellulaire inestimable pour étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires qui sous-tendent le développement et la progression du carcinome hépatocellulaire. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier les mutations génétiques, les processus cellulaires et les voies de signalisation cellulaire associées au cancer du foie. Par exemple, une étude utilisant des cellules HEP3B a révélé que le microARN-223-3p régule les composants de l'inflammasome NLRP3, inhibe la prolifération et renforce l'apoptose des cellules d'hépatocarcinome HEP3B [2].
- Dépistage et développement de médicaments : La lignée cellulaire HEP3B est également utilisée pour tester, cribler et développer de nouvelles thérapies contre le carcinome hépatique. En outre, elle est utilisée pour évaluer la toxicité et l'efficacité de différents médicaments et traitements anticancéreux. Les chercheurs ont également utilisé ces cellules d'hépatome pour étudier le métabolisme des médicaments. Les chercheurs ont utilisé des cellules HEP3B et ont évalué le potentiel cytotoxique de l'extrait végétal de Cotinus coggygria sur les cellules de carcinome hépatocytaire HEP3B [3].
- Infections virales : HEP3B est une lignée cellulaire positive au virus de l'hépatite B ; elle est donc utilisée pour étudier les infections virales susceptibles d'entraîner le développement d'un cancer du foie, c'est-à-dire le VHB et le VHC. Cela peut aider à mieux comprendre les infections virales et à développer des traitements antiviraux potentiels. Par exemple, une étude a utilisé des cellules hépatocytaires cancéreuses HEP3B et a étudié l'importance de l'ubiquitination pour la propagation du virus de l'hépatite C. Les résultats suggèrent que l'ubiquitination est un facteur important dans le développement du cancer du foie. Les résultats suggèrent que la protéase 15 spécifique de l'ubiquitine (USP15) est impliquée dans la propagation du VHC en régulant les fonctions spécifiques des hépatocytes, y compris la formation de gouttelettes lipidiques et la traduction de l'ARN du VHC [4].
5.publications sur la lignée cellulaire HEP3B
Cette section de l'article couvre quelques publications de recherche intéressantes sur les cellules HEP3B.
Cette publication dans Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) a proposé que le stress du réticulum endoplasmique induit par un composé de lutéoline puisse exercer des effets antitumoraux dans les cellules HEP3B nuls de P53 de manière indépendante de P53.
Ciblage potentiel des cellules hépatiques cancéreuses Hep3B par le lupéol isolé d'Avicennia marina
Cette étude publiée dans Archiv der Pharmazie (2021) propose un triterpénoïde pentacyclique, le lupéol, comme agent anticancéreux potentiel contre les cellules HEP3B.
Cet article est publié dans Molecular Medicine Reports (2017). Les résultats de l'étude indiquent que l'extrait d'éthanol de Cnidium monnieri (L.) Cusson induit la mort cellulaire (apoptose) et l'arrêt du cycle cellulaire dans les cellules d'hépatocarcinome HepG2 et HEP3B par la régulation de la voie de signalisation p53 et Akt/GSK-3β.
Cette recherche publiée dans Biomolecules and Therapeutics (2020) propose que l'auranofin présente une activité synergique et favorise l'apoptose des cellules HEP3B médiée par le sulforaphane via l'activation de la voie PI3K/AKT.
Cet article de recherche paru dans BioFactors (2023) propose que l'ARN-0072309 circulaire exerce des effets antitumoraux sur les cellules de carcinome hépatocellulaire HEP3B en ciblant le miARN-665.
6.ressources pour la lignée cellulaire HEP3B : Protocoles, vidéos et autres
Voici quelques ressources disponibles sur les cellules HEP3B :
- Transfection des cellules HEP3B : Cette vidéo explique le protocole de transfection des cellules HEP3B.
- Efficacité de la transfection des cellules HEP3B : Ce lien vous aidera à apprendre la composition du milieu DMEM HEP3B, le passage des cellules et le protocole de transfection pour les cellules HEP3B. En outre, il fournit des informations pour optimiser le réactif HEP3B lipofectamine 3000 dans votre protocole de transfection.
Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules HEP3B :
- Conditions de culture HEP3B : Ce lien vous aidera à apprendre le protocole de manipulation et de maintien des cultures Huh7 et HEP3B.
- Cellules HEP3B : Ce site web contient de nombreuses informations sur les cellules HEP3B, y compris les milieux HEP3B, le protocole pour la division des cellules, la décongélation et la manipulation des cultures prolifératives et cryoconservées.
Références
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al, Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8) : p. 1040.
- Wan, L., et al, miRNA-223-3p regulates NLRP3 to promote apoptosis and inhibit proliferation of hep3B cells. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3) : p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. et S. Selen-Isbilir, Cytotoxic effect of Cotinus coggygria extract on Hep3B cancer cell line. Natural Product Research, 2022 : p. 1-4.
- Kusakabe, S., et al, USP15 participe à la propagation du virus de l'hépatite C par la régulation de la traduction de l'ARN viral et la formation de gouttelettes lipidiques. Journal of Virology, 2019. 93(6) : p. 10.1128/jvi. 01708-18.