Cellules Hep3B : recherche et découverte sur le carcinome hépatocellulaire
HEP3B est une lignée cellulaire immortalisée dérivée de carcinome hépatocellulaire humain. Elle est largement utilisée dans la recherche sur l'hépatotoxicité et le métabolisme des médicaments. L'efficacité de transfection de HEP3B est importante ; par conséquent, ces cellules sont couramment utilisées pour étudier le développement, la progression et les interventions thérapeutiques du cancer du foie. Cet article couvre toutes les informations nécessaires sur la lignée cellulaire HEP3B pour vous aider à l'utiliser. Il comprendra principalement :
- Milieu de culture
- Un milieu EMEM contenant 10 % de FBS, 2,2 g/L de NaHCO3, 2 mM de L-glutamine et une solution saline équilibrée d'Earle (EBSS) est utilisé pour cultiver les cellules HEP3B.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules HEP3B est d'environ 36 heures.
- Type de croissance
- Cette lignée cellulaire d'hépatome est adhérente.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander HEP3B
- Caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
- Lignée cellulaire HEP3B : avantages et limites
- Applications des cellules HEP3B dans la recherche
- Publications sur la lignée cellulaire HEP3B
- Ressources pour la lignée cellulaire HEP3B : protocoles, vidéos et plus encore
- Caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
- Lignée cellulaire HEP3B : avantages et limites
- Applications des cellules HEP3B dans la recherche
- 5. Publications sur la lignée cellulaire HEP3B
- Ressources pour la lignée cellulaire HEP3B : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
Les informations essentielles dont vous avez besoin concernant une lignée cellulaire sont son origine et ses caractéristiques générales. Elles peuvent vous aider à déterminer son utilisation dans votre recherche et à la manipuler. Cette section de l'article couvre toutes les informations essentielles sur l'origine et les caractéristiques de HEP3B. Vous apprendrez ici : Qu'est-ce que la lignée cellulaire HEP3B ? Quelle est l'origine des cellules HEP3B ? Quelle est la morphologie des cellules HEP3B ?
- HEP3B, une lignée cellulaire continue d'hépatome humain, provient du tissu hépatique d'un garçon africain de 8 ans atteint d'un carcinome hépatocellulaire (CHC). Elle a été établie par Aden et ses collègues en 1979 au laboratoire de Barbara B. Knowles, à l'Institut Wistar de Philadelphie, aux États-Unis [1].
- Les cellules HEP3B présentent une intégration du génome du virus de l'hépatite B (VHB) dans leur chromosome.
- Ces cellules de carcinome hépatocellulaire présentent une morphologie épithéliale.
- Les cellules HEP3B ont un nombre modal de chromosomes de 60. Contrairement aux cellules HepG2, elles ne présentent pas de réarrangement du chromosome 1.
Quelle est la différence entre les cellules HepG2 et HEP3B ?
Les cellules HepG2 et HEP3B diffèrent par le nombre de chromosomes par cellule. Les cellules HEP3B contiennent 60 chromosomes, tandis que les cellules HepG2 en possèdent en moyenne 55. De plus, les cellules HepG2 sont non tumorigènes et négatives pour l'hépatite B, alors que les cellules HEP3B sont tumorigènes et positives pour le VHB.
Informations sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
Connaître les informations relatives à la culture d'une lignée cellulaire peut vous faciliter la tâche. Cette section couvre tous les points clés de la culture de la lignée cellulaire HEP3B HBV, notamment : Quel est le temps de doublement des cellules HEP3B ? Quelles sont les conditions de culture des cellules HEP3B ? Comment cultiver les cellules HEP3B HCC ?
Points clés pour la culture des cellules HEP3B
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules HEP3B est d'environ 36 heures.
Adhérentes ou en suspension :
Cette lignée cellulaire d'hépatome est adhérente.
Rapport de division :
Les cellules HEP3B sont repiquées à un rapport de 1:2 à 1:4. Les cellules HEP3B adhérentes sont rincées avec du PBS 1x, puis incubées avec la solution de dissociation Accutase. Après 8 à 10 minutes, on ajoute du milieu frais et on centrifuge les cellules. Les cellules récoltées sont ensuite soigneusement remises en suspension et versées dans des flacons contenant du milieu de culture selon le rapport de division recommandé.
Milieu de croissance :
Un milieu EMEM contenant 10 % de FBS, 2,2 g/L de NaHCO₃, 2 mM de L-glutamine et une solution saline équilibrée d'Earle (EBSS) est utilisé pour cultiver les cellules HEP3B.
Conditions de culture :
Les cellules HEP3B sont cultivées dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport continu de 5 % de CO2.
Conservation :
Les cellules HEP3B congelées sont conservées à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique ou en phase vapeur d'azote liquide.
Procédé et milieu de congélation :
Le milieu de congélation recommandé pour les cellules HEP3B est le CM-1 ou le CM-ACF. Les cellules sont congelées selon un processus de congélation lente qui ne permet qu'une baisse de température de 1 °C par minute afin de préserver la viabilité cellulaire.
Procédé de décongélation :
Les cellules congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37 °C pendant 40 à 60 secondes. Elles sont ensuite ajoutées au milieu de culture frais et centrifugées pour éliminer les éléments du milieu de congélation. Les cellules recueillies sont remises en suspension et réparties dans de nouveaux flacons pour la culture.
Niveau de biosécurité :
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est requis pour la culture des cellules HEP3B.
Lignée cellulaire HEP3B : avantages et limites
HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire largement utilisée. Cette section se concentrera sur certains avantages et limites clés de ces cellules d'hépatome.
Avantages
Les principaux avantages des cellules HEP3B sont les suivants :
Faciles à cultiver
Les cellules HEP3B ne présentent pas d'exigences particulières en matière de culture cellulaire, ce qui les rend faciles à manipuler et à entretenir dans un laboratoire de recherche. Cela simplifie les procédures expérimentales.
Efficacité de transfection élevée
Les cellules HEP3B présentent une efficacité de transfection remarquable, ce qui explique leur large utilisation dans les études liées à la manipulation génétique et à l'expression génique.
Tumorigénicité
HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire tumorigène capable de former des tumeurs lorsqu'elle est injectée à une souris immunodéprimée. Cela facilite l'étude de la progression et du développement du cancer à l'aide de modèles de xénogreffes HEP3B.
Statut P53 des cellules HEP3B
Les cellules HEP3B possèdent une mutation du gène P53 similaire à celle observée dans le carcinome hépatocellulaire (CHC) et d'autres cancers, ce qui les rend pertinentes pour l'étude des effets de la mutation P53 sur la croissance, le développement et la progression du cancer.
Limites
La limitation associée à la lignée cellulaire HEP3B est la suivante :
Modèle cellulaire in vitro
La lignée cellulaire HEP3B sert de modèle in vitro pour les cellules de carcinome hépatocellulaire (CHC). Cependant, elle peut ne pas refléter pleinement la complexité du CHC telle qu'elle se présente dans les organismes vivants. Par conséquent, les résultats expérimentaux in vitro peuvent différer de ceux observés in vivo.
Applications des cellules HEP3B dans la recherche
La lignée cellulaire HEP3B offre plusieurs applications dans la recherche biomédicale. Parmi les principales applications de recherche des cellules HEP3B, on peut citer :
- Biologie du cancer : HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire humain. Il s'agit d'un modèle cellulaire inestimable pour étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents au développement et à la progression du CHC. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier les mutations génétiques, les processus cellulaires et les voies de signalisation cellulaire associés au cancer du foie. Une étude a par exemple utilisé des cellules HEP3B et a montré que le microARN-223-3p régule les composants de l'inflammasome NLRP3, inhibe la prolifération et favorise l'apoptose des cellules de carcinome hépatocellulaire HEP3B [2].
- Criblage et développement de médicaments : la lignée cellulaire HEP3B est également utilisée pour tester, cribler et développer de nouveaux traitements contre le carcinome hépatique. De plus, elle sert à évaluer la toxicité et l'efficacité de différents médicaments et traitements anticancéreux. Les chercheurs ont également utilisé ces cellules d'hépatome pour étudier le métabolisme des médicaments. Ils ont utilisé des cellules HEP3B et évalué le potentiel cytotoxique de l'extrait de la plante Cotinus coggygria sur des cellules de carcinome hépatocytaire HEP3B [3].
- Infections virales : HEP3B est une lignée cellulaire positive au virus de l'hépatite B ; elle est donc employée pour étudier les infections virales pouvant conduire au développement d'un cancer du foie, à savoir le VHB et le VHC. Cela peut aider à mieux comprendre les infections virales et à développer des traitements antiviraux potentiels. Par exemple, une étude a utilisé des cellules cancéreuses hépatocytaires HEP3B et a examiné l'importance de l'ubiquitination dans la propagation du virus de l'hépatite C. Les résultats suggèrent que la protéase 15 spécifique de l'ubiquitine (USP15) est impliquée dans la propagation du VHC via la régulation de fonctions spécifiques aux hépatocytes, notamment la formation de gouttelettes lipidiques et la traduction de l'ARN du VHC [4].
5. Publications sur la lignée cellulaire HEP3B
Cette section de l'article présente quelques publications de recherche intéressantes sur les cellules HEP3B.
Cette publication parue dans Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) suggère que le stress du réticulum endoplasmique induit par la lutéoline pourrait exercer des effets antitumoraux sur les cellules HEP3B déficientes en P53, de manière indépendante de P53.
Ciblage potentiel des cellules cancéreuses hépatiques HEP3B par le lupéol isolé d'Avicennia marina
Cette étude publiée dans Archiv der Pharmazie (2021) a proposé un triterpénoïde pentacyclique, le lupéol, comme agent anticancéreux potentiel contre les cellules HEP3B.
Cet article est publié dans Molecular Medicine Reports (2017). Les résultats de l'étude indiquent que l'extrait éthanolique de Cnidium monnieri (L.) Cusson induit la mort cellulaire (apoptose) et l'arrêt du cycle cellulaire dans les cellules de carcinome hépatocellulaire HepG2 et HEP3B par la régulation de la voie de signalisation p53 et Akt/GSK-3β.
Cette étude publiée dans Biomolecules and Therapeutics (2020) a suggéré que l'auranofin présente une activité synergique et favorise l'apoptose induite par le sulforaphane des cellules HEP3B via l'activation de la voie PI3K/AKT.
Cet article de recherche publié dans BioFactors (2023) suggère que l'ARN circulaire-0072309 exerce des effets antitumoraux sur les cellules de carcinome hépatocellulaire HEP3B en ciblant le miARN-665.
Ressources sur la lignée cellulaire HEP3B : protocoles, vidéos et plus encore
Voici quelques ressources disponibles sur les cellules HEP3B :
- Transfection des cellules HEP3B : cette vidéo explique le protocole de transfection des cellules HEP3B.
- Efficacité de la transfection des cellules HEP3B : ce lien vous aidera à connaître la composition du milieu DMEM pour HEP3B, le repiquage des cellules et le protocole de transfection pour les cellules HEP3B. De plus, il fournit des informations pour optimiser l'utilisation du réactif Lipofectamine 3000 dans votre protocole de transfection.
Le lien suivant contient le protocole de culture cellulaire HEP3B :
- Conditions de culture des cellules HEP3B : ce lien vous aidera à découvrir le protocole de manipulation et d'entretien des cultures de cellules Huh7 et HEP3B.
- Cellules HEP3B : ce site web contient de nombreuses informations sur les cellules HEP3B, notamment sur les milieux HEP3B, le protocole de division cellulaire, la décongélation et la manipulation des cultures prolifératives et cryoconservées.
Références
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origine et propriétés des lignées cellulaires de carcinome hépatocellulaire. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8) : p. 1040.
- Wan, L., et al., Le miRNA-223-3p régule NLRP3 pour favoriser l'apoptose et inhiber la prolifération des cellules Hep3B. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. et S. Selen-Isbilir, Effet cytotoxique de l'extrait de Cotinus coggygria sur la lignée cellulaire cancéreuse Hep3B. Natural Product Research, 2022 : p. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., L'USP15 participe à la propagation du virus de l'hépatite C par la régulation de la traduction de l'ARN viral et de la formation de gouttelettes lipidiques. Journal of Virology, 2019. 93(6) : p. 10.1128/jvi.01708-18.