Ligne cellulaire HT22

HT22 est une lignée cellulaire neuronale murine couramment utilisée dans la recherche en neurosciences. Elle est précieuse pour étudier les troubles neurogénératifs et tester les thérapies ou traitements neuroprotecteurs potentiels. En outre, les cellules HT22 sont sensibles au glutamate et sont donc utilisées pour étudier la toxicité induite par le glutamate ou les lésions neuronales.

Cet article met en lumière les aspects impératifs des cellules HT22 qui peuvent vous aider dans votre travail de recherche. Il aborde principalement les points suivants

Caractéristiques générales et origine des cellules HT22
Informations sur la culture de la lignée cellulaire HT22
Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire HT22
Applications de la lignée cellulaire HT22 dans la recherche
Publications de recherche sur les cellules HT22
Ressources pour les cellules HT22 : Protocoles, vidéos et autres

1. Caractéristiques générales et origine des cellules HT22

Cette section de l'article met en lumière l'origine et les caractéristiques générales des cellules HT22. Il est nécessaire de connaître ces informations sur une lignée cellulaire avant de commencer à travailler dessus. Vous apprendrez ainsi : Qu'est-ce que les cellules HT22 ? Quelle est la morphologie des cellules hippocampiques HT22 ? Quelle est la taille des cellules HT22 ?

HT22 est une lignée cellulaire continue dérivée de la région de l'hippocampe du cerveau de la souris. Il s'agit d'un sous-clone de la lignée cellulaire parentale HT-4 développée par immortalisation de tissus neuronaux murins via un antigène T du polyomavirus simien 40 (SV40) sensible à la température.

Ces cellules diffèrent des cellules hippocampiques matures car elles sont dépourvues de récepteurs glutamate et cholinergiques comme les neurones matures d'origine hippocampique. Elles ne conviennent donc pas aux études sur la mémoire [1].

Les cellules HT22 ont l'apparence de cellules épithéliales.

Plaques amyloïdes se formant entre les neurones dans la maladie d'Alzheimer.

2. Informations sur la culture de la lignée cellulaire HT22

Les cellules HT22 sont utilisées dans les laboratoires de recherche en neurosciences. Avant de cultiver ces cellules, les chercheurs recherchent des informations essentielles sur la culture cellulaire afin de rendre leur travail plus facile et plus efficace. Cette section couvre tous les points clés de la culture des cellules HT22. Vous saurez Quel est le temps de doublement des cellules HT22 ? Comment cultiver les cellules HT22 ? Quel est le protocole de culture des cellules HT22 ? Quel est le milieu de culture des cellules HT22 ?

Points clés pour la culture des cellules HT22

Temps de doublement :	Le temps de doublement des cellules HT22 est d'environ 15 heures.
Adhérentes ou en suspension :	Les cellules HT22 sont adhérentes.
Rapport de sous-culture :	Le rapport de sous-culture pour les cellules hippocampiques HT22 est de 1:3 à 1:6. Brièvement, le milieu est éliminé et les cellules adhérentes sont rincées avec 1 x PBS. La solution de dissociation de l'Accutase est ajoutée dans le flacon et les cellules sont incubées pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Ensuite, du milieu de culture frais est ajouté et les cellules sont recueillies dans un flacon pour être centrifugées. Le culot cellulaire obtenu est soigneusement remis en suspension et les cellules sont distribuées dans un flacon de culture pour la croissance.
Milieu de croissance :	Le milieu DMEM est utilisé pour la culture des cellules HT22. Il est supplémenté avec 10% de FBS, 4,5 g/L de glucose, 4 mM de L-Glutamine, 1,5 g/L de NaHCO3, et 1,0 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale.
Conditions de croissance :	Les cultures de cellules HT22 sont conservées dans un incubateur humidifié (température de 37 °C) avec un_{apport de}5 % de_CO2.
Stockage :	Les cellules HT22 congelées peuvent être conservées à une température inférieure à -150 °C, soit dans la phase vapeur de l'azote liquide, soit dans un congélateur électrique à ultra-basse température pour le long terme.
Processus de congélation et milieu :	Les cellules HT22 peuvent être congelées dans les milieux CM-1 ou CM-ACF en utilisant une méthode de congélation lente. Ce procédé ne permet qu'une diminution de 1 °C de la température de l'échantillon par minute, protège les cellules contre les chocs et contribue à maintenir leur viabilité.
Processus de décongélation :	Les cellules sont décongelées dans un bain-marie à 37 °C pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Ensuite, le milieu de culture est ajouté aux cellules et celles-ci sont centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Le culot cellulaire est remis en suspension et les cellules sont versées dans le nouveau flacon contenant le milieu de culture. Les cellules sont ensuite incubées à 37 °C dans un incubateur pendant au moins 24 heures.
Niveau de biosécurité :	La culture des cellules HT22 doit obligatoirement se faire dans un laboratoire de niveau de biosécurité 1.

monocouches confluentes à 30 % et 90 % de cellules HT22 en culture cellulaire.

3. Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire HT22

Les cellules hippocampiques HT22 présentent des avantages et des inconvénients qui les différencient des autres lignées cellulaires neuronales. Quelques avantages et inconvénients notables de la lignée cellulaire sont mentionnés ici.

Avantages

Les avantages de la lignée cellulaire neuronale murine HT22 sont les suivants :

Taux de croissance rapide
Les cellules HT22 ont un temps de doublement de 15 heures, ce qui permet une expérimentation rapide et efficace et favorise l'obtention de résultats de recherche dans les délais impartis.
Immortalisation
HT22 est une lignée cellulaire immortalisée, assurant une croissance continue pendant de longues périodes. Cela permet une disponibilité constante des cellules, réduit les délais et les coûts, et facilite les expériences à long terme avec des résultats cohérents.

Inconvénients

Les inconvénients des cellules HT22 sont les suivants :

Origine murine
La lignée cellulaire HT22 a été dérivée du tissu de l'hippocampe du cerveau de la souris, qui peut ne pas représenter entièrement la complexité de la physiologie et du comportement des cellules neuronales humaines, ce qui limite leur pertinence translationnelle.

4) Applications de la lignée cellulaire HT22 à la recherche

Les cellules HT22 sont largement utilisées dans la recherche en neurobiologie. Quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire sont discutées dans cette section de l'article :

Recherche en neurosciences : Les cellules HT22 sont largement utilisées dans la recherche sur les maladies neurodégénératives, c'est-à-dire les maladies d'Alzheimer et de Parkinson. Elles sont considérées comme un outil de recherche précieux pour étudier les mécanismes de neurotoxicité et de stress oxydatif liés à ces maladies. Des recherches menées en 2020 ont montré que la voie PI3K/AKT/CREB est impliquée dans la toxicité neuronale induite par l'hyperglycémie dans les cellules HT22 [2]. De même, une étude récente a proposé que la voie Nrf2/HO-1 et l'axe de signalisation NF- κB jouent un rôle important dans la toxicité de la bêta-amyloïde dans les cellules HT22 [3].
Criblage de médicaments : Les cellules HT22 sont largement utilisées pour tester et cribler les médicaments. Elles aident les chercheurs à identifier des agents thérapeutiques potentiels présentant des effets neuroprotecteurs pour lutter contre les maladies neurodégénératives. Une étude menée en 2019 a exploré le potentiel neuroprotecteur du composé tétrahydro curcumine dans les cellules hippocampiques HT22 traitées au glutamate. Le glutamate induit un stress oxydatif dans les cellules HT22 et provoque la mort cellulaire en activant les protéines kinases activées par les mitogènes [4].

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5. Publications de recherche sur les cellules HT22

Voici quelques articles de recherche intéressants sur la lignée cellulaire HT22 :

Étude des effets neuroprotecteurs de la crocine via les activités antioxydantes dans les cellules HT22 et chez les souris atteintes de la maladie d'Alzheimer

Cette étude parue dans l'International Journal of Molecular Medicine (2019) propose le potentiel neuroprotecteur de la crocine, un composé isolé du Crocus sativus L. dans lescellules HT22endommagéespar le L-glutamate.

De nouveaux dérivés d'oxindole préviennent la mort cellulaire induite par le stress oxydatif dans les cellules HT22 de l'hippocampe de souris

Cette publication dans Neuropharmacology (2018) rapporte que les dérivés d'oxindole protègent contre la mort cellulaire HT22 induite par le stress oxydatif.

Le ginsénoside Rb2 supprime le stress oxydatif médié par le glutamate et la mort cellulaire neuronale dans les cellules HT22

Cet article de recherche a été publié dans le Journal of Ginseng Research en 2019. Cette étude a exploré les effets neuroprotecteurs d'un produit naturel, le ginsénoside Rb2, en utilisant la lignée cellulaire HT22. L'étude a révélé que le ginsénoside rb2 réduisait efficacement le stress oxydatif induit par le glutamate et la mort cellulaire dans les cellules hippocampiques murines HT22.

Les nanoparticules d'argent ont induit une cytotoxicité dans les cellules HT22 par l'autophagie et l'apoptose via la voie de signalisation PI3K/AKT/mTOR

Cette étude parue dans Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) a évalué le potentiel cytotoxique des nanoparticules d'argent dans la lignée cellulaire HT22.

La ferrostatine-1 protège les cellules HT-22 de la toxicité oxydative

Cet article de recherche a été publié en 2020 dans la revue Neural regeneration research. Il propose que la ferrostatine-1, un inhibiteur de la ferroptose, prévienne la toxicité oxydative dans les cellules hippocampiques HT22.

6. Ressources pour les cellules HT22 : Protocoles, vidéos et autres

Certaines ressources en ligne sur les cellules HT22 expliquent leurs protocoles de transfection, de différenciation et de culture cellulaire :

HT22 transfection: Ce document contient un protocole optimisé pour la transfection des cellules HT22 dans des plaques de culture cellulaire à 24 et 96 puits.
Différenciation des cellules HT22 : Cet article vous guidera de manière exhaustive sur le protocole de différenciation des cellules HT22.

Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules HT22 :

Sous-culture de cellules HT22: Ce lien vous aidera à apprendre le protocole de sous-culture pour la lignée cellulaire HT22. De plus, il vous aidera à apprendre le protocole d'induction de la neurotoxicité dans les cellules.
Cellules hippocampiques HT22 : Ce site web contient de nombreuses informations utiles sur le temps de doublement des cellules HT22, les milieux et les protocoles de culture cellulaire.

Références

He, M., et al, Differentiation rend susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14) : p. 1297-306.
Zhang, S., et al, Fisetin prevents HT22 cells from high glucose-induced neurotoxicity via PI3K/Akt/CREB signaling pathway. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
Zhang, R.-l., et al, Protective effects of berberine against β-amyloid-induced neurotoxicity in HT22 cells via the Nrf2/HO-1 pathway. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
Park, C.-H., et al, Neuroprotective effects of tetrahydrocurcumin against glutamate-induced oxidative stress in hippocampal HT22 cells. Molecules, 2019. 25(1) : p. 144.