Cellules HK-2 - Étude de la fonction et de la pathologie rénales à l'aide des cellules HK-2 dans la recherche rénale
HK-2 est une lignée cellulaire épithéliale rénale humaine immortalisée couramment utilisée dans la recherche en toxicologie. Les chercheurs évaluent les effets des toxines environnementales sur ces cellules rénales. De plus, ils utilisent également les cellules HK-2 pour étudier les maladies rénales et leurs mécanismes sous-jacents.
- Milieu de culture
- Un milieu pour lignée cellulaire kératinocytaire contenant 10 % de sérum fœtal bovin, 0,05 mg/ml d'extrait hypophysaire bovin (BPE) et 5 ng/ml de facteur de croissance épidermique (EGF) constitue le milieu idéal pour les cellules HK-2. Le milieu doit être renouvelé tous les 2 à 3 jours.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules HK-2 varie entre 47,3 h et 61,7 h.
- Type de croissance
- La lignée cellulaire épithéliale rénale HK-2 est adhérente.
- Niveau de biosécurité
- BSL-2
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander HK-2
- Cellules HK-2 : origine et caractéristiques générales
- Lignée cellulaire HK-2 : informations sur la culture
- Avantages et limites des cellules HK-2
- Applications de la lignée cellulaire HK-2 dans la recherche
- 5. Cellules HK-2 : publications scientifiques
- Ressources pour la lignée cellulaire HK-2 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Cellules HK-2 : origine et caractéristiques générales
Il est indispensable de connaître l'origine et les caractéristiques générales d'une lignée cellulaire pour assurer sa manipulation, sa conservation et son utilisation correctes. Cette section de l'article abordera les points suivants : Que sont les cellules HK-2 du rein humain 2 ? Quel est le rôle des cellules HK-2 ? Que sont les cellules HK-2 ? Quelle est l'origine de la lignée cellulaire HK-2 ? Quelles sont la taille et la morphologie des cellules HK-2 ?
- Les cellules Human Kidney 2 (HK-2) sont un type de cellules tubulaires proximales issues du tissu rénal normal d'un adulte européen. La lignée cellulaire HK-2 a été établie par transfection de cellules rénales avec un rétrovirus recombinant comprenant les gènes E6/E7 du papillomavirus humain de type 16. Cette expérience a entraîné l'immortalisation et l'établissement d'une lignée cellulaire épithéliale rénale HK-2 en croissance continue.
- Les cellules HK-2 présentent une morphologie épithéliale.
- La taille des cellules HK-2 varie entre 17,4 et 18,6 µm de diamètre. Le diamètre moyen est de 18,2 µm [1].
Lignée cellulaire HK-2 : informations sur la culture
Les informations relatives à la culture de la lignée cellulaire rénale humaine 2 peuvent vous être d'une grande aide avant de commencer à travailler avec celle-ci. Les informations indispensables sur la culture des cellules HK-2 sont mentionnées dans cette section de l'article. Vous apprendrez : Les cellules HK-2 sont-elles adhérentes ? Quel est le temps de doublement des cellules HK-2 ? Quel milieu est utilisé pour cultiver les cellules HK-2 ?
Points clés pour la culture des cellules HK-2
Temps de doublement de la population :
Le temps de doublement des cellules HK-2 varie entre 47,3 h et 61,7 h.
Adhérentes ou en suspension :
La lignée cellulaire épithéliale rénale HK-2 est adhérente.
Rapport de repiquage :
Les cellules HK-2 sont repiquées à un rapport de 1:2 à 1:4. Les cellules HK-2 adhérentes sont lavées avec du PBS 1x et incubées à température ambiante pendant 8 à 10 minutes après l'ajout de la solution d'Accutase. Le milieu de culture est ajouté aux cellules dissociées, puis le tout est centrifugé. Les cellules recueillies sont soigneusement remises en suspension et transférées dans de nouvelles flacons pour la culture.
Milieu de croissance :
Un milieu pour lignées cellulaires kératinocytaires contenant 10 % de sérum fœtal bovin, 0,05 mg/ml d'extrait hypophysaire bovin (BPE) et 5 ng/ml de facteur de croissance épidermique (EGF) constitue le milieu idéal pour les cellules HK-2. Le milieu doit être renouvelé tous les 2 à 3 jours.
Conditions de croissance :
Les cultures de la lignée cellulaire rénale humaine 2 sont conservées dans un incubateur humidifié avec un apport de 5 % de CO₂ à 37 °C.
Conservation :
Les cellules congelées sont conservées en phase vapeur d'azote liquide ou à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur à très basse température.
Procédé et milieu de congélation :
Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF sont idéaux pour la congélation des cellules HK-2. En bref, on opte pour une méthode de congélation lente permettant une baisse de température de seulement 1 °C par minute et protégeant les cellules de tout choc.
Procédé de décongélation :
Les cellules congelées sont décongelées dans un bain-marie réglé à 37 °C. Ces cellules sont ajoutées à un milieu de culture frais et remises en suspension. Ensuite, les cellules sont transférées dans un nouveau flacon contenant un milieu de croissance. Après 24 heures, le milieu est remplacé pour éliminer les composants du milieu de congélation.
Niveau de biosécurité :
Les cultures cellulaires HK-2 sont maintenues dans des laboratoires de niveau de biosécurité 1.
Avantages et limites des cellules HK-2
La lignée cellulaire HK-2 est une lignée cellulaire épithéliale du tubule proximal humain largement utilisée. À l'instar d'autres lignées cellulaires, elle présente également certains avantages et certaines limites. Cette section aborde les principaux avantages et inconvénients de la lignée cellulaire rénale humaine 2.
Avantages
Les principaux avantages de la lignée cellulaire HK-2 sont les suivants :
Bien caractérisée
La lignée cellulaire HK-2 est largement caractérisée en termes de morphologie, de taille et de génome. De nombreuses études ont été menées sur ces cellules rénales normales.
Immortalisée
HK-2 est une lignée cellulaire continue dotée d'une durée de vie prolongée, ce qui lui permet d'être multipliée au cours de plusieurs passages. Cette caractéristique garantit un approvisionnement continu en cellules pour les expériences en laboratoire.
Caractéristiques épithéliales du tubule proximal
Les cellules HK-2 présentent un phénotype bien différencié, caractéristique des cellules du tubule proximal (PTC) présentes dans le rein humain. Cette particularité unique fait des cellules HK-2 un modèle in vitro précieux pour l'étude de la physiologie rénale, des processus cellulaires et des réponses à divers stimuli.
Limites
Voici quelques limites de la lignée cellulaire HK-2 :
Modèle in vitro
La lignée HK-2 sert de modèle in vitro de cellules rénales normales, présentant notamment les caractéristiques des cellules épithéliales du tubule proximal. Cependant, elle peut ne pas reproduire entièrement la complexité du tissu rénal humain et du microenvironnement in vivo.
Applications de la lignée cellulaire HK-2 dans la recherche
La lignée cellulaire HK-2 a de nombreuses applications dans la recherche en toxicologie. Nous avons abordé ici certaines utilisations spécifiques et importantes de cette lignée cellulaire tubulaire proximale humaine dans le domaine de la recherche.
- Physiologie rénale : les cellules HK-2 sont couramment utilisées pour étudier la physiologie et les fonctions rénales normales. Les chercheurs utilisent ces cellules épithéliales du tubule proximal pour étudier les canaux ioniques, les processus de transport et d'autres mécanismes cellulaires régulant l'homéostasie rénale. Par exemple, des chercheurs ont étudié le rôle des canaux TRPC6 (Transient Receptor Potential Channel 6) dans la mort cellulaire induite par le (+)-Conocarpan (CNCP), un néolignan, dans les cellules épithéliales rénales HK-2 [2].
- Maladies rénales : La lignée cellulaire rénale humaine 2 est utilisée pour étudier différentes maladies rénales, telles que l'insuffisance rénale aiguë et la néphropathie diabétique, ainsi que leurs mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents. Des recherches ont notamment montré que les niveaux de méthylation de la protéine Klotho sont liés aux lésions rénales. La diminution de la méthylation du promoteur du gène Klotho peut renforcer son expression et atténuer les lésions rénales induites chez des modèles murins diabétiques db/db et des cellules HK-2 traitées à une concentration élevée de glucose [3].
- Études toxicologiques : les cellules HK-2 constituent un excellent outil de recherche pour évaluer les effets potentiels de divers médicaments, produits chimiques et polluants environnementaux. Ces études peuvent aider les chercheurs à évaluer la sécurité des médicaments et leurs effets secondaires sur les cellules rénales. Par exemple, une étude publiée en 2022 a évalué les effets potentiels des polysaccharides et de l'extrait aqueux de l'herbe naturelle Polygonatum kingianum (PK) sur la néphrotoxicité induite par l'uranium dans les cellules HK-2. Ils ont découvert que le PK exerce des effets protecteurs et prévient l'intoxication à l'uranium dans les cellules rénales [4].
5. Cellules HK-2 : publications scientifiques
Voici quelques publications de recherche intéressantes consacrées aux cellules épithéliales rénales HK-2.
Cette étude publiée dans Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) suggère que l'ARN circulaire HIPK3 peut atténuer l'inhibition de la prolifération des cellules HK-2 causée par la toxicité du glucose élevé. De plus, il peut inhiber la mort cellulaire en régulant la cascade miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.
Cette publication de recherche parue dans Nanomedicine (2020) a évalué différents mécanismes de toxicité des nanoparticules d'or (AuNPs) dans les cellules cancéreuses 786-0 et les cellules épithéliales tubulaires proximales HK-2.
Cet article a été publié dans Renal Failure (2022). Les résultats indiquent que le microARN-320c peut réduire la toxicité induite par une glycémie élevée dans les cellules rénales (HK-2) en ciblant PTEN et en inhibant la voie de signalisation PI3K/AKT.
Cette étude publiée dans Tissue Engineering Part A (2022) suggère que les exosomes dérivés de cellules souches mésenchymateuses empêchent la transition épithélio-mésenchymateuse des cellules rénales HK-2.
Un article publié dans le Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) indique que le lncRNA TapSAKI renforce la réponse inflammatoire et la mort cellulaire des cellules HK-2 en régulant la voie de signalisation microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.
Ressources pour la lignée cellulaire HK-2 : protocoles, vidéos et plus encore
HK-2 est une lignée cellulaire bien connue. Voici quelques ressources décrivant le protocole de culture cellulaire HK-2.
- Culture cellulaire HK-2 : ce site web regorge d'informations sur la culture cellulaire HK-2. Il fournit notamment la recette du milieu de culture HK-2, le protocole de repiquage, ainsi que le protocole de manipulation et de maintenance des cultures prolifératives et cryoconservées.
- Passage de cellules : cette vidéo vous aidera à apprendre un protocole général de division ou de passage pour les lignées cellulaires adhérentes.
Références
- Handl, J., et al., L'effet des repiquages répétés sur la sensibilité des cellules HK-2 du tubule proximal humain aux composés toxiques. Physiological Research, 2020. 69(4) : p. 731.
- Yang, G., et al., L'activation des canaux TRPC6 contribue à la mort cellulaire apoptotique induite par le (+)-conocarpan dans les cellules HK-2. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129 : p. 281-290.
- Yang, X.H., et al., L'EGCG atténue les lésions rénales en inversant l'hyperméthylation du gène klotho chez les souris diabétiques db/db et les cellules HK-2. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
- Li, W., et al., Effets protecteurs des polysaccharides et de l'extrait aqueux de Polygonatum kingianum sur la toxicité induite par l'uranium dans les cellules rénales humaines (HK-2). International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202 : p. 68-79.