Cellules HK-2 - Sonder la fonction et la pathologie rénales avec les cellules HK-2 dans la recherche rénale
HK-2 est une lignée de cellules épithéliales rénales humaines immortalisées couramment utilisée dans la recherche toxicologique. Les chercheurs évaluent les effets des toxines environnementales sur ces cellules rénales. Ils utilisent également les cellules HK-2 pour étudier les maladies rénales et leurs mécanismes sous-jacents.
Cet article présente presque toutes les informations essentielles sur les cellules HK-2, y compris leurs caractéristiques générales, les conditions de culture cellulaire, les applications de recherche, et bien plus encore. Vous apprendrez notamment ce qui suit :
- Les cellules HK-2 : Origine et caractéristiques générales
- Lignée cellulaire HK-2 : Informations sur la culture
- Avantages et limites des cellules HK-2
- Applications de la lignée cellulaire HK-2 dans la recherche
- Cellules HK-2 : Publications de recherche
- Ressources pour la lignée cellulaire HK-2 : Protocoles, vidéos et autres
1.cellules HK-2 : Origine et caractéristiques générales
Il est impératif de connaître l'origine et les caractéristiques générales d'une lignée cellulaire pour pouvoir la manipuler, l'entretenir et l'utiliser correctement. Cette section de l'article couvre les points suivants : Que sont les cellules HK-2 du rein humain 2 ? Quel est le rôle de HK2 ? Que sont les cellules HK2 ? Quelle est l'origine de la lignée cellulaire HK-2 ? Quelles sont la taille et la morphologie des cellules HK-2 ?
- Les cellules du rein humain 2 (HK-2) sont un type de cellules tubulaires proximales provenant du tissu rénal normal d'un adulte européen. La lignée cellulaire HK-2 a été créée en transfectant des cellules rénales avec un rétrovirus recombinant comprenant les gènes E6/E7 du papillomavirus humain 16. Cette expérience a permis l'immortalisation et l'établissement d'une lignée de cellules épithéliales rénales HK-2 à croissance continue.
- Les cellules HK-2 présentent une morphologie épithéliale.
- La taille des cellules HK-2 varie entre 17,4 et 18,6 µm de diamètre. Le diamètre moyen est de 18,2 µm [1].
2.lignée cellulaire HK-2 : Informations sur la culture
Les informations sur la culture de la lignée cellulaire de rein humain 2 peuvent vous aider considérablement avant de travailler avec elle. Les informations indispensables à la culture de la lignée cellulaire HK-2 sont mentionnées dans cette section de l'article. Vous saurez : Les cellules HK-2 sont-elles adhérentes ? Quel est le temps de doublement des cellules HK-2 ? Quel est le milieu utilisé pour cultiver les cellules HK-2 ?
Points clés pour la culture des cellules HK-2
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Temps de doublement de la population : |
Le temps de doublement des cellules HK-2 est compris entre 47,3 h et 61,7 h. |
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Adhérentes ou en suspension : |
La lignée de cellules épithéliales rénales HK-2 est adhérente. |
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Rapport de sous-culture : |
Les cellules HK-2 sont sous-cultivées dans un rapport de 1:2 à 1:4. Les cellules HK-2 adhérentes sont lavées avec 1 x PBS et incubées à température ambiante pendant 8 à 10 minutes après ajout de la solution d'Accutase. Le milieu de culture est ajouté aux cellules dissociées et centrifugé. Les cellules collectées sont soigneusement remises en suspension et versées dans de nouveaux flacons pour la culture. |
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Milieu de croissance : |
Le milieu de la lignée cellulaire kératinocytaire contenant 10 % de sérum bovin fœtal, 0,05 mg/ml d'extrait d'hypophyse bovine (BPE) et 5 ng/ml de facteur de croissance épidermique (EGF) est le milieu idéal pour les cellules HK-2. Le milieu doit être remplacé tous les 2 à 3 jours par semaine. |
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Conditions de croissance : |
Les cultures de la lignée cellulaire HK-2 sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37°C avec un apport de 5% de CO2. |
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Stockage : |
Les cellules congelées sont conservées dans la phase vapeur de l'azote liquide ou à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur à ultra-basse température. |
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Procédé de congélation et milieu : |
Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF sont idéaux pour la congélation des cellules HK-2. En bref, on opte pour une méthode de congélation lente qui ne permet qu'une baisse de température de 1 degré Celsius par minute et protège les cellules de tout choc. |
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Processus de décongélation : |
Les cellules congelées sont décongelées dans un bain-marie réglé à 37 degrés Celsius. Ces cellules sont ajoutées à un milieu de culture frais et remises en suspension. Ensuite, les cellules sont distribuées dans un nouveau flacon contenant du milieu de croissance. Après 24 heures, le milieu est remplacé pour éliminer les composants du milieu de congélation. |
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Niveau de biosécurité : |
Les cultures de cellules HK-2 sont maintenues dans des laboratoires de niveau de biosécurité 1. |
3.avantages et limites des cellules HK-2
HK-2 est une lignée de cellules épithéliales du tubule proximal humain largement utilisée. Comme d'autres lignées cellulaires, elle présente des avantages et des limites. Cette section présente les principaux avantages et inconvénients de la lignée cellulaire HK-2.
Avantages
Les principaux avantages de la lignée cellulaire HK-2 sont les suivants :
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Bien caractérisée |
La lignée cellulaire HK-2 est largement caractérisée en termes de morphologie, de taille et de génome. De nombreuses recherches ont été menées sur ces cellules rénales normales. |
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Immortalisées |
HK-2 est une lignée cellulaire continue dont la durée de vie est prolongée, ce qui lui permet d'être multipliée à plusieurs reprises. Cette caractéristique garantit un approvisionnement continu en cellules pour les expériences de laboratoire. |
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Caractéristiques épithéliales du tubule proximal |
Les cellules HK-2 présentent un phénotype bien différencié, caractéristique des cellules du tubule proximal (CTP) que l'on trouve dans le rein humain. Cette caractéristique unique fait des cellules HK-2 un modèle in vitro précieux pour l'étude de la physiologie rénale, des processus cellulaires et des réponses à divers stimuli. |
Limites
Voici quelques limites de la lignée cellulaire HK-2 :
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Modèle in vitro |
HK-2 sert de modèle in vitro de cellules rénales normales, présentant notamment les caractéristiques des cellules épithéliales du tubule proximal. Cependant, elle ne reproduit pas entièrement la complexité du tissu rénal humain et le microenvironnement que l'on trouve in vivo. |
4.applications de la lignée cellulaire HK-2 dans la recherche
La lignée cellulaire HK-2 a de nombreuses applications dans la recherche toxicologique. Nous présentons ici quelques utilisations spécifiques et importantes de cette lignée cellulaire tubulaire proximale humaine pour la recherche.
- Physiologie rénale : les cellules HK-2 sont couramment utilisées pour étudier la physiologie et les fonctions rénales normales. Les chercheurs utilisent ces cellules épithéliales du tubule proximal pour étudier les canaux ioniques, les processus de transport et d'autres mécanismes cellulaires régulant l'homéostasie rénale. Par exemple, les chercheurs ont étudié le rôle des canaux TRPC6 (Transient Receptor Potential Channel 6) dans la mort cellulaire induite par le (+)-Conocarpan (CNCP), un néolignane, dans les cellules épithéliales rénales HK-2 [2].
- Maladies rénales : La lignée cellulaire HK-2 est utilisée pour étudier différentes maladies rénales, à savoir les lésions rénales aiguës et la néphropathie diabétique, ainsi que leurs mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents. Par exemple, des recherches ont montré que les niveaux de méthylation de la protéine klotho sont liés aux lésions rénales. La diminution de la méthylation du promoteur du gène Klotho peut renforcer son expression et atténuer les lésions rénales induites dans les modèles de souris diabétiques db/db et dans les cellules HK-2 traitées au glucose [3].
- Études toxicologiques : Les cellules HK-2 constituent un excellent outil de recherche pour évaluer les effets potentiels de divers médicaments, produits chimiques et polluants environnementaux. Les études peuvent aider les chercheurs à évaluer la sécurité des médicaments et leurs effets secondaires sur les cellules rénales. Ainsi, une étude publiée en 2022 a évalué les effets potentiels des polysaccharides et de l'extrait aqueux d'une plante naturelle, le Polygonatumkingianum (PK), sur la néphrotoxicité induite par l'uranium dans les cellules HK-2. Ils ont constaté que le PK exerce des effets protecteurs et prévient l'empoisonnement à l'uranium dans les cellules rénales [4].
5.cellules HK-2 : Publications de recherche
Voici quelques publications de recherche intéressantes concernant les cellules épithéliales rénales HK-2.
Cette étude parue dans Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) propose que l'ARN circulaire HIPK3 puisse diminuer l'inhibition de la prolifération des cellules HK-2 causée par la toxicité du glucose. En outre, il peut inhiber la mort cellulaire en régulant la cascade miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.
Cette publication de recherche dans Nanomedicine (2020) a évalué différents mécanismes de toxicité des nanoparticules d'or (AuNPs) dans les cellules cancéreuses 786-0 et les cellules épithéliales du tubule proximal HK-2.
Cet article a été publié dans Renal Failure (2022). Les résultats indiquent que le microARN-320c peut réduire la toxicité induite par le glucose dans les cellules rénales (HK-2) en ciblant PTEN et en inhibant la signalisation PI3K/AKT.
Cette étude parue dans Tissue Engineering Part A (2022) propose que les exosomes dérivés de cellules souches mésenchymateuses empêchent la transition épithéliale-mésenchymateuse des cellules rénales HK-2.
L'article du Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) indique que l'ARNnc TapSAKI renforce la réponse inflammatoire et la mort cellulaire des cellules HK-2 en régulant la voie de signalisation microARN-22/PTEN/TLR4/NF-κB.
6.ressources pour la lignée cellulaire HK-2 : Protocoles, vidéos et autres
Voici quelques ressources décrivant le protocole de culture de la lignée cellulaire HK-2.
- Culture de cellules HK-2 : Ce site web contient de nombreuses informations sur la culture des cellules HK-2. Il fournit notamment la recette du milieu cellulaire HK-2, le protocole de passage et le protocole de manipulation et de maintien des cultures prolifératives et cryoconservées.
- Passage des cellules : Cette vidéo vous aidera à apprendre un protocole général de division ou de passage pour les lignées cellulaires adhérentes.
Références
- Handl, J., et al, The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds. Physiological Research, 2020. 69(4) : p. 731.
- Yang, G., et al, L 'activation des canaux TRPC6 contribue à la mort cellulaire apoptotique induite par le (+)-conocarpan dans les cellules HK-2. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
- Yang, X.H., et al, EGCG atténue les dommages rénaux via l'inversion de l'hyperméthylation klotho chez les souris diabétiques db/db et les cellules HK-2. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
- Li, W., et al, Protective effects of Polygonatum kingianum polysaccharides and aqueous extract on uranium-induced toxicity in human kidney (HK-2) cells (Effets protecteurs des polysaccharides et de l'extrait aqueux de Polygonatum kingianum sur la toxicité induite par l'uranium dans les cellules rénales humaines). International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.