Cellules DLD-1 : Applications et perspectives des cellules DLD-1 dans la recherche sur le cancer colorectal

DLD-1 est une lignée cellulaire humaine de carcinome colorectal couramment utilisée dans la recherche sur le cancer. C'est un outil précieux pour étudier divers aspects du cancer du côlon, notamment le développement et la progression des tumeurs, les mécanismes moléculaires sous-jacents et la réponse aux agents thérapeutiques. Le DLD-1 est donc un outil exceptionnel pour comprendre la maladie et développer des stratégies de traitement potentielles.

Cet article fournit des informations importantes sur la lignée cellulaire DLD-1 que vous devez connaître avant de travailler avec elle. Il aborde les points suivants

  1. Les caractéristiques générales et l'origine des cellules DLD-1
  2. Informations sur la culture de la lignée cellulaire DLD-1
  3. La lignée cellulaire DLD-1 : Avantages et limites
  4. Applications de la lignée cellulaire DLD-1 à la recherche
  5. Publications de recherche sur les cellules DLD-1
  6. Ressources pour la lignée cellulaire DLD-1 : Protocoles, vidéos et autres

1. Caractéristiques générales et origine des cellules DLD-1

Avant de travailler sur une lignée cellulaire, le chercheur s'intéresse d'abord à son origine et à ses caractéristiques générales. Cette section de l'article est une introduction détaillée à la lignée cellulaire DLD-1. Elle répondra aux questions les plus fréquemment posées : Que sont les cellules DLD-1 ? Qu'est-ce qu'une lignée cellulaire cancéreuse DLD-1 ? Quelles sont les mutations de la lignée cellulaire DLD-1 ? Quelle est la taille d'une cellule DLD-1 ? Quelle est la morphologie des cellules DLD-1 ?

  • DLD-1, une lignée cellulaire de cancer du côlon, provient du gros intestin d'un homme de 67 ans atteint d'un adénocarcinome colorectal. Elle a été isolée par D.L. Dexter et ses collègues en 1977-1979. Cette lignée cellulaire a la même origine que les lignées cellulaires HCT-8, HCT-15 et HRT-18.
  • Comme les cancers colorectaux, les cellules DLD-1 présentent un phénotype d'instabilité des microsatellites [1].
  • Les mutations du DLD-1 comprennent KRAS, P53, BRAF, BRCA1 et BRCA2. En raison de leur statut P53, de leur mutation BRCA, BRCA2 et KRAS, les cellules DLD-1 sont considérées comme idéales pour les études sur le cancer.
  • Ces cellules possèdent une morphologie de type épithélial.
  • La taille de la lignée cellulaire DLD-1 est d'environ 15 µm.
  • La lignée cellulaire humaine de cancer colorectal DLD-1 possède un caryotype pseudodiploïde. Environ 86 % des cellules possèdent un nombre modal de chromosomes de 46. Cependant, la polyploïdie peut également exister dans 17,1 % de la population cellulaire.

rendu 3D d'une colonographie ou d'une tomodensitométrie du gros intestin affichée à l'écran pour le diagnostic du cancer du gros intestin, du cancer du côlon et du cancer colorectal.

2.informations sur la culture de la lignée cellulaire DLD-1

Avant de cultiver une lignée cellulaire, vous devez connaître ses exigences de base en matière de culture cellulaire. Cette section met en évidence les points importants à connaître avant de commencer à travailler sur la lignée cellulaire DLD-1. Ces points sont les suivants Quel est le temps de doublement du DLD-1 ? Quel est le milieu de culture du DLD-1 ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules DLD-1 ? Comment cultiver les cellules DLD-1 ?

Points clés pour la culture des cellules DLD-1

Temps de doublement :

Le temps de doublement des cellules DLD-1 est d'environ 15 heures.

Adhérentes ou en suspension :

Le DLD-1 est une lignée cellulaire humaine adhérente de cancer du côlon. Les cellules se développent en monocouche.

Densité d'ensemencement :

Les cellules DLD-1 sont ensemencées à une densité de 1 à 2 x104 cellules/cm2. Les cellules adhérentes sont lavées avec une solution saline au tampon phosphate (PBS) et incubées avec une solution de passage (Accutase) à température ambiante. Après une incubation de 8 à 10 minutes, les cellules détachées sont ajoutées au milieu de culture et centrifugées. Le culot cellulaire est ensuite soigneusement remis en suspension et les cellules sont versées dans de nouveaux récipients de culture contenant du milieu de croissance.

Milieu de croissance :

Pour la culture des cellules DLD-1, on utilise le milieu RPMI 1640 avec des suppléments de milieu, notamment 10 % de sérum bovin fœtal FBS, 2,1 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO3. Le milieu doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine.

Conditions de croissance :

Les cultures de DLD-1 sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37°C avec un apport de 5% de CO2.

Stockage :

Les cellules DLD-1 sont conservées dans la phase vapeur de l'azote liquide ou dans un congélateur électrique à ultra-basse température (à une température inférieure à -150°C).

Processus de congélation et milieu :

Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF peuvent être utilisés pour congeler les cellules DLD-1. Il est toujours recommandé de procéder à une congélation lente, permettant une diminution progressive de la température de 1°C, afin d'éviter le choc des cellules et de protéger leur viabilité.

Processus de décongélation :

Les cellules congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37 °C pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Ensuite, les cellules sont ajoutées à un milieu frais et centrifugées. Cette étape est nécessaire pour éliminer les composants du milieu de congélation des cellules. Les cellules collectées sont remises en suspension dans un milieu de croissance et distribuées dans le flacon pour la croissance.

Niveau de biosécurité :

La lignée cellulaire DLD-1 est maintenue dans les laboratoires de niveau de biosécurité 1.

Cellules DLD-1 observées à un grossissement de 10x et 20x, révélant leur morphologie épithéliale caractéristique.

3.lignée cellulaire DLD-1 : Avantages et limites

Dans cette section de l'article, nous allons passer en revue les avantages et les limites de la lignée cellulaire de cancer du côlon DLD-1.

Avantages

Les principaux avantages de la lignée cellulaire DLD-1 sont les suivants :

Modèle de cancer colorectal

Les cellules DLD-1 possèdent des mutations communément trouvées chez les patients atteints de cancer colorectal, telles que la mutation KRAS du DLD-1, le BRCA du DLD-1 et le BRCA2 du DLD-1. Cette pertinence en fait un modèle cellulaire cliniquement approprié pour l'étude de cette maladie.

Lignée cellulaire tumorigène

Les cellules DLD-1 sont tumorigènes. Elles peuvent provoquer des tumeurs lorsqu'elles sont injectées à des souris nude. Les chercheurs utilisent donc ces cellules pour développer des modèles de xénogreffes tumorales qui permettent d'étudier la formation, le développement et la progression des tumeurs in vivo.

Limites

Les limites associées aux cellules DLD-1 sont les suivantes :

Hétérogénéité

Les populations de cellules cancéreuses du côlon DLD-1 présentent une hétérogénéité génétique et phénotypique. Cela peut influencer la généralisation des résultats de la recherche.

4.applications de la lignée cellulaire DLD-1 dans la recherche

La lignée cellulaire DLD-1 offre un large éventail d'applications dans la recherche sur le cancer. Certaines applications importantes sont abordées dans cette section.

  • Étude du cancer : Les cellules DLD-1 constituent un modèle in vitro précieux pour comprendre les mécanismes moléculaires qui sous-tendent la croissance, le développement et la progression du cancer colorectal. En outre, elles sont utilisées pour étudier l'expression des gènes, les voies de signalisation et l'influence de mutations génétiques spécifiques sur le comportement des cellules cancéreuses. Des recherches menées en 2022 ont permis d'observer que la cascade de signalisation PI3K/Akt/YAP régule la migration et l'invasion de la lignée cellulaire de cancer colorectal DLD-1 [2].
  • Développement de médicaments : Les chercheurs utilisent la lignée cellulaire DLD-1 pour tester l'efficacité des médicaments anticancéreux et évaluer leur potentiel pour le traitement du cancer du côlon. Cela permet de développer des médicaments et de lutter efficacement contre la maladie. Une étude réalisée en 2022 a utilisé la lignée cellulaire cancéreuse DLD-1 et a exploré l'activité anticancéreuse des phtalocyanines de silicium, des composés synthétisés chimiquement. Les résultats de l'étude suggèrent que ces composés sont de puissants agents anticancéreux [3]. Il est intéressant de noter qu'une autre recherche a mis en évidence le potentiel anticancéreux d'une protéine P8 dérivée d'un probiotique sur des cellules DLD-1 [4].

5.publications de recherche sur les cellules DLD-1

Cette section présente quelques publications intéressantes et fréquemment citées concernant la lignée cellulaire de carcinome du côlon DLD-1.

Le glycoside flavonoïde diosmine induit l'apoptose et l'arrêt du cycle cellulaire dans la lignée cellulaire humaine de cancer du côlon DLD-1

Cette publication est parue dans le Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). L'étude a révélé que la diosmine, un flavonoïde, induit la mort cellulaire dans les cellules DLD-1 et provoque également l'arrêt du cycle cellulaire ; elle peut donc être un agent anticancéreux potentiel.

La broméline supprime efficacement le cancer colorectal mutant Kras en stimulant la ferroptose

Cette étude parue dans Animal Cells and Systems (2018) propose que la bromélaïne, une enzyme, réprime la mutation KRAS de DLD-1 et exerce de puissants effets cytotoxiques.

Le bergaptène induit un arrêt G1 et une cascade pro-apoptotique dans les cellules cancéreuses colorectales en associant l'axe p53/p21/PTEN

Cet article de recherche a été publié en 2019 dans la revue "Environmental Toxicology". L'étude a exploré les effets antitumoraux d'un composé naturel, le bergaptène, à l'aide d'une lignée cellulaire corectale DLD-1.

Fabrication écologique d'un composite nanocurcumine/nano oxyde de fer : Activité anticancéreuse in vitro améliorée contre les lignées cellulaires DLD-1

Cette étude publiée dans le Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) a montré que les nanocomposites curcumine/oxyde de fer sont très efficaces contre les cellules cancéreuses colorectales DLD-1.

L'épibrassinolide active l'AKT pour déclencher l'autophagie avec le métabolisme des polyamines dans les lignées cellulaires SW480 et DLD-1 du cancer du côlon

Cet article de recherche a été publié en 2020 dans le Turkish Journal of Biology. L'étude propose qu'un produit naturel, l'activation de l'AKT par l'épibrassinolide dans les cellules DLD-1, stimule l'autophagie liée aux polyamines.

6.ressources pour la lignée cellulaire DLD-1 : Protocoles, vidéos et autres

Voici quelques ressources sur les cellules DLD-1 :

  • Transfection des cellules DLD-1: Ce tutoriel vidéo est un guide complet sur le protocole de transfection in vitro des cellules DLD-1.
  • Cellules DLD-1 : Ce document de recherche décrit brièvement les exigences de culture des cellules DLD-1, y compris les milieux et les conditions de culture. En outre, il peut vous aider à apprendre le protocole de transfection utilisé pour les cellules DLD-1.

Les liens suivants contiennent le protocole de culture des cellules DLD-1, cellules cancéreuses du côlon d'origine humaine.

  • Lignée cellulaire DLD-1 : Ce site web fournit des informations de base sur la lignée cellulaire DLD-1. Il vous aidera à apprendre les différents protocoles de culture des cellules DLD-1, y compris la sous-culture et la manipulation des cultures cryoconservées et en prolifération.

Références

  1. Gavrilas, L.I., et al, Pro-apoptotic genes as new targets for single and combinatorial treatments with resveratrol and curcumin in colorectal cancer. Food & function, 2019. 10(6) : p. 3717-3726.
  2. Takeda, T., et al, PI3K/Akt/YAP signaling promotes migration and invasion ofDLD-1colorectal cancer cells. Oncology Letters, 2022. 23(4) : p. 1-9.
  3. Farajzadeh, N., et al, Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41) : p. 19863-19873.
  4. An, B.C., et al, Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12) : p. 9857.

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