Cellules DLD-1 : applications et perspectives des cellules DLD-1 dans la recherche sur le cancer colorectal
La DLD-1 est une lignée cellulaire de carcinome colorectal humain couramment utilisée dans la recherche sur le cancer. Elle constitue un outil précieux pour étudier divers aspects du cancer du côlon, notamment le développement et la progression de la tumeur, les mécanismes moléculaires sous-jacents et la réponse aux agents thérapeutiques. La DLD-1 joue donc un rôle essentiel dans la compréhension de la maladie et l'élaboration de stratégies thérapeutiques potentielles.
- Milieu de culture
- Le milieu RPMI 1640, complété par 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2,1 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO3, est utilisé pour la culture des cellules DLD-1. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement de la lignée DLD-1 est d'environ 15 heures.
- Type de croissance
- La lignée DLD-1 est une lignée cellulaire adhésive de cancer du côlon humain. Les cellules se développent en monocouches.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander DLD-1
- Caractéristiques générales et origine des cellules DLD-1
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire DLD-1
- Lignée cellulaire DLD-1 : avantages et limites
- Applications de recherche de la lignée cellulaire DLD-1
- 5. Publications de recherche sur les cellules DLD-1
- Ressources pour la lignée cellulaire DLD-1 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Caractéristiques générales et origine des cellules DLD-1
Avant de travailler sur une lignée cellulaire, le chercheur s'intéresse tout d'abord à son origine et à ses caractéristiques générales. Cette section de l'article présente en détail la lignée cellulaire DLD-1. Elle répondra aux questions fréquemment posées suivantes : Que sont les cellules DLD-1 ? Qu'est-ce qu'une lignée cellulaire cancéreuse DLD-1 ? Quelles sont les mutations de la lignée cellulaire DLD-1 ? Quelle est la taille d'une cellule DLD-1 ? Quelle est la morphologie des cellules DLD-1 ?
- La DLD-1, une lignée cellulaire de cancer du côlon, provient du gros intestin d'un patient de 67 ans atteint d'un adénocarcinome colorectal. Elle a été isolée par D.L. Dexter et ses collègues entre 1977 et 1979. Cette lignée cellulaire partage la même origine que les lignées cellulaires HCT-8, HCT-15 et HRT-18.
- À l'instar des cancers colorectaux, les cellules DLD-1 présentent un phénotype d'instabilité microsatellitaire [1].
- Les mutations de la lignée DLD-1 comprennent KRAS, P53, BRAF, BRCA1 et BRCA2. En raison du statut P53 de la lignée DLD-1, ainsi que des mutations BRCA, BRCA2 et KRAS de la lignée DLD-1, ces cellules sont considérées comme idéales pour les études sur le cancer.
- Ces cellules présentent une morphologie de type épithélial.
- La taille de la lignée cellulaire DLD-1 est d'environ 15 µm.
- La lignée cellulaire de cancer colorectal humain DLD-1 possède un caryotype pseudodiploïde. Environ 86 % des cellules possèdent un nombre modal de chromosomes de 46. Cependant, une polyploïdie peut également exister chez 17,1 % de la population cellulaire.
Informations sur la culture de la lignée cellulaire DLD-1
Avant de cultiver une lignée cellulaire, vous devez connaître ses exigences de base en matière de culture cellulaire. Cette section mettra en évidence les points importants que vous devez connaître avant de commencer à travailler sur la lignée cellulaire DLD-1. Cela comprend : Quel est le temps de doublement de la lignée DLD-1 ? Quel est le milieu de culture de la DLD-1 ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules DLD-1 ? Comment cultiver les cellules DLD-1 ?
Points clés pour la culture des cellules DLD-1
Temps de doublement :
Le temps de doublement de la lignée DLD-1 est d'environ 15 heures.
Adhérentes ou en suspension :
La DLD-1 est une lignée cellulaire humaine de cancer du côlon adhérente. Les cellules se développent en monocouches.
Densité d'ensemencement :
Les cellules DLD-1 sont ensemencées à une densité de 1 à 2 x 10⁴ cellules/cm². Les cellules adhérentes sont lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) 1x et incubées avec une solution de repiquage (Accutase) à température ambiante. Après une incubation de 8 à 10 minutes, les cellules détachées sont ajoutées au milieu de culture et centrifugées. Le culot cellulaire est ensuite soigneusement remis en suspension, et les cellules sont transférées dans de nouveaux récipients de culture contenant du milieu de croissance.
Milieu de croissance :
Le RPMI 1640 avec des suppléments de milieu, comprenant 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2,1 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO3, est utilisé pour cultiver les cellules DLD-1. Les milieux doivent être remplacés 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de croissance :
Les cultures de DLD-1 sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO₂.
Conservation :
Les cellules DLD-1 sont conservées en phase vapeur d'azote liquide ou dans un congélateur électrique à très basse température (à une température inférieure à -150 °C).
Procédé et milieu de congélation :
Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF peuvent être utilisés pour congeler les cellules DLD-1. Un processus de congélation lente est toujours recommandé, permettant une baisse progressive de la température de 1 °C, ce qui évite un choc thermique aux cellules et préserve leur viabilité.
Procédé de décongélation :
Les cellules congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37 °C pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit morceau de glace. Ensuite, les cellules sont ajoutées à un milieu frais et centrifugées. Cette étape est nécessaire pour éliminer les composants du milieu de congélation des cellules. Les cellules recueillies sont remises en suspension dans un milieu de croissance et distribuées dans le flacon pour la culture.
Niveau de biosécurité :
La lignée cellulaire DLD-1 est conservée dans des laboratoires de niveau de biosécurité 1.
Lignée cellulaire DLD-1 : avantages et limites
Dans cette section de l'article, nous passerons en revue les avantages et les limites de la lignée cellulaire DLD-1 du cancer du côlon.
Avantages
Les principaux avantages de la lignée cellulaire DLD-1 sont les suivants :
Modèle de cancer colorectal
Les cellules DLD-1 présentent des mutations couramment observées chez les patients atteints d'un cancer colorectal, telles que la mutation DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA et DLD-1 BRCA2. Cette pertinence en fait un modèle cellulaire cliniquement approprié pour l'étude de cette maladie.
Lignée cellulaire tumorigène
Les cellules DLD-1 sont tumorigènes. Elles peuvent provoquer des tumeurs lorsqu'elles sont injectées à des souris nues. Par conséquent, les chercheurs utilisent ces cellules pour développer des modèles de tumeurs xénogreffées qui aident à étudier la formation, le développement et la progression des tumeurs in vivo.
Limites
Les limites associées aux cellules DLD-1 sont les suivantes :
Hétérogénéité
Les populations de cellules cancéreuses du côlon DLD-1 présentent une hétérogénéité génétique et phénotypique. Cela peut influencer la généralisation des résultats de la recherche.
Applications de la lignée cellulaire DLD-1 en recherche
La lignée cellulaire DLD-1 offre un large éventail d'applications dans la recherche sur le cancer. Certaines applications majeures sont abordées dans cette section.
- Étude du cancer : les cellules DLD-1 constituent un modèle in vitro précieux pour comprendre les mécanismes moléculaires sous-jacents à la croissance, au développement et à la progression du cancer colorectal. De plus, elles sont utilisées pour étudier l'expression génique, les voies de signalisation et l'influence de mutations génétiques spécifiques sur le comportement des cellules cancéreuses. Des recherches menées en 2022 ont montré que la cascade de signalisation PI3K/Akt/YAP régule la migration et l'invasion de la lignée cellulaire DLD-1 du cancer colorectal [2].
- Développement de médicaments : les chercheurs utilisent la lignée cellulaire DLD-1 pour tester l'efficacité des médicaments anticancéreux et évaluer leur potentiel dans le traitement du cancer du côlon. Cela contribue au développement de médicaments et à la lutte efficace contre la maladie. Une étude menée en 2022 a utilisé la lignée cellulaire cancéreuse DLD-1 et a exploré l'activité anticancéreuse des phtalocyanines de silicium, des composés synthétisés chimiquement. Les résultats de l'étude ont suggéré que ces composés constituaient de puissants agents anticancéreux [3]. Il est intéressant de noter qu'une autre étude a mis en évidence le potentiel anticancéreux d'une protéine P8 dérivée de probiotiques à l'aide de cellules DLD-1 [4].
5. Publications scientifiques sur les cellules DLD-1
Cette section mettra en avant quelques publications intéressantes et fréquemment citées portant sur la lignée cellulaire DLD-1 de carcinome du côlon.
Cette publication figure dans le Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). L'étude a révélé que la diosmine, un flavonoïde, induisait la mort cellulaire dans les cellules DLD-1 et provoquait également un arrêt du cycle cellulaire ; elle pourrait donc constituer un agent anticancéreux potentiel.
La bromélaïne inhibe efficacement le cancer colorectal à mutation Kras en stimulant la ferroptose
Cette étude publiée dans Animal Cells and Systems (2018) suggère que la bromélaïne, une enzyme, réprime la mutation KRAS dans les cellules DLD-1 et exerce de puissants effets cytotoxiques.
Cet article de recherche a été publié en 2019 dans la revue « Environmental Toxicology ». L'étude a exploré les effets antitumoraux d'un composé naturel, le bergaptène, à l'aide d'une lignée cellulaire colorectale DLD-1.
Cette étude, publiée dans le Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023), a montré que les nanocomposites de curcumine et d'oxyde de fer sont très efficaces contre les cellules cancéreuses colorectales DLD-1.
Cet article de recherche a été publié en 2020 dans le Turkish Journal of Biology. L'étude suggère qu'un produit naturel, l'épibrassinolide, active l'AKT dans les cellules DLD-1, ce qui stimule l'autophagie liée aux polyamines.
Ressources sur la lignée cellulaire DLD-1 : protocoles, vidéos et plus encore
Voici quelques ressources sur les cellules DLD-1 :
- Transfection de DLD-1 : ce tutoriel vidéo est un guide complet sur le protocole de transfection in vitro de DLD-1.
- Cellules DLD-1 : cet article de recherche décrit brièvement les exigences de culture des cellules DLD-1, y compris les milieux et les conditions de culture. De plus, il peut vous aider à comprendre le protocole de transfection utilisé pour les cellules DLD-1.
Les liens suivants contiennent le protocole de culture des cellules DLD-1, des cellules de cancer du côlon d'origine humaine.
- Lignée cellulaire DLD-1 : ce site web fournit des informations de base sur la lignée cellulaire DLD-1. Il vous aidera à découvrir différents protocoles de culture des cellules DLD-1, y compris la repiquage et la manipulation de cultures cryoconservées et en prolifération.
Références
- Gavrilas, L.I., et al., Les gènes pro-apoptotiques comme nouvelles cibles pour des traitements simples et combinés à base de resvératrol et de curcumine dans le cancer colorectal. Food & function, 2019. 10(6) : p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., La voie de signalisation PI3K/Akt/YAP favorise la migration et l'invasion des cellules cancéreuses colorectales DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Activité anticancéreuse de nouvelles phtalocyanines de silicium contre la lignée cellulaire d'adénocarcinome colorectal (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41) : p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Rôles anticancéreux de la protéine P8 dérivée de probiotiques dans la lignée cellulaire de cancer colorectal DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12) : p. 9857.