Cellules COS-1 : Un cheval de bataille cellulaire pour les études d'expression génétique

La lignée cellulaire COS-1 est une cellule de type fibroblaste qui provient du tissu rénal d'un singe et qui est fréquemment utilisée par les chercheurs pour étudier le virus du singe, le SV40. Ces cellules sont facilement transfectées et souvent utilisées pour créer des protéines recombinantes pour diverses expériences biochimiques, moléculaires et de biologie cellulaire.

Cet article fournit des détails complets sur la lignée cellulaire COS-1, couvrant toutes les informations essentielles dont vous avez besoin. Plus précisément, vous acquerrez des connaissances sur les points suivants :

Lignée cellulaire COS-1 : Origine et informations générales.
Avantages et inconvénients des cellules COS-1
Applications de la recherche sur les cellules COS-1
Cellules COS-1 : Publications
Ressources pour la lignée cellulaire COS-1, y compris des protocoles, des vidéos, etc
Culture des cellules COS-1

1.lignée cellulaire COS-1 : Origine et informations générales.

Avant de commencer tout travail avec une lignée cellulaire, il est essentiel d'avoir une compréhension fondamentale de la lignée cellulaire elle-même. Cela inclut des informations telles que l'origine des cellules, la manière dont elles ont été isolées et leurs caractéristiques. Dans cette section, nous allons nous pencher sur les bases des cellules COS-1.

Qu'est-ce que la lignée cellulaire COS-1 ?

La lignée cellulaire COS-1 comprend des cellules de type fibroblaste que J.W.F. Cowell et ses collègues ont créées pour la première fois en 1981. Ces cellules ont été générées en transformant une lignée de cellules épithéliales de singe vert, appelée CV-1, avec une forme mutante du virus simien SV40. Par la suite, la lignée cellulaire COS-1 établie a été caractérisée de manière approfondie pour restaurer la région du génome du SV40 qui avait été précédemment supprimée de l'origine de réplication. Ces cellules expriment de grands antigènes T et d'autres protéines nécessaires à la réplication correcte des génomes circulaires, tels que les plasmides.

Chlorocebus aethiops (singe vert africain)

Les cellules COS-1 ont une morphologie de type fibroblaste et adhèrent aux surfaces, s'étalant en monocouche. Il n'existe actuellement aucune variante génétique connue de la lignée cellulaire COS-1. Cependant, une lignée cellulaire apparentée, COS-7, est également issue des cellules CV-1 et présente des caractéristiques similaires.

2.avantages et inconvénients des cellules COS-1

La lignée cellulaire COS-1 présente des avantages et des limites uniques, que nous examinerons ci-dessous.

Avantages

Possibilité de transfection : La lignée cellulaire COS-1 est facilement transfectée à l'aide de diverses méthodes, y compris des approches physiques et chimiques.
Production de lentivirus : La lignée cellulaire COS-1 est un hôte de conditionnement approprié pour la production de particules de lentivirus recombinantes de haute qualité sans étapes de purification supplémentaires. Ces cellules adhèrent fermement aux surfaces en plastique, ce qui empêche la contamination des surnageants de transfection contenant des particules virales [1].
Expression génétique: La lignée cellulaire COS-1 est largement utilisée pour les études d'analyse de l'expression transitoire et stable, produisant de nombreuses protéines recombinantes par transfection avec des plasmides circulaires contenant l'origine de réplication SV40 [2].

Limites

Lignée cellulaire non humaine : Les cellules COS-1 provenant de primates non humains, les protéines recombinantes produites par cette lignée cellulaire ne conviennent qu'aux expériences de laboratoire et ne peuvent être recommandées pour un usage humain.

3.applications des cellules COS-1 dans la recherche

L'une des considérations les plus importantes lorsque l'on parle d'une lignée cellulaire est son application à la recherche. Cette section explore les applications les plus importantes des cellules COS-1 dans le domaine de la recherche.

Production de protéines recombinantes : La lignée cellulaire COS-1 est largement utilisée pour la production de protéines recombinantes par transfection transitoire ou stable de vecteurs circulaires contenant l'origine de réplication SV40. Dans une étude récente, des biologistes ont utilisé la lignée cellulaire COS-1 pour produire de la gonadotrophine chorionique équine, une hormone de reproduction recombinante destinée à des applications dans le domaine de la reproduction [3]. De même, une autre étude a utilisé des cellules COS-1 pour produire un anticorps monoclonal recombinant de type poulet contre un type spécifique de virus de la grippe [4].
Production de particules de type viral : Les cellules COS-1 servent d'hôtes de conditionnement pour la production de lentivirus de haute qualité et peuvent être utilisées pour générer des vaccins viraux. Une étude a utilisé la lignée cellulaire COS-1 pour produire des particules de type virus de la dengue non infectieuses mais hautement immunogènes, qui sont des candidats vaccins efficaces [5].

430,00 €*

Contenu : 1.5 milliliter

Prix hors taxes plus frais d'expédition

cryovial

Numéro de produit : 305005

4.cellules COS-1 : Publications

Quelques publications notables sur les cellules COS-1 sont :

Production and Purification of Dengue Virus-like Particles from COS-1 Cells (Production et purification de particules semblables au virus de la dengue à partir de cellules COS-1) : Cette publication dans Bio-Protocol explique l'utilisation des cellules COS-1 pour produire des particules hautement immunogènes semblables au virus de la dengue.
Analyse de l'expression de la gonadotrophine chorionique équine recombinante dans trois systèmes hôtes - E. coli BL21C, lysat de cellules d'insecte Sf et cellules mammaliennes COS-1: Dans cette étude, les chercheurs ont comparé la production et la modification post-traductionnelle d'une hormone de reproduction recombinante, par exemple la gonadotrophine chorionique équine, dans différents systèmes d'expression, y compris les cellules mammaliennes COS-1.
Étude des particules de type Flaviviral transmises par les tiques en tant que système d'administration pour la thérapie génique: Cette étude a utilisé des cellules COS-1 pour produire des particules semblables au virus de l'encéphalite à tiques (TBEV). Ces particules sont proposées comme navette pour délivrer les réplicons nécessaires (c'est-à-dire les gènes thérapeutiques).
Génération d'un anticorps monoclonal recombinant de type poulet contre la neuraminidase du virus H9N2 de la grippe aviaire: Cet article publié dans le journal AMB Express a utilisé des cellules COS-1 pour produire des anticorps monoclonaux recombinants de type poulet contre la neuraminidase du virus de la grippe aviaire de type H9N2.
Solubilisation sans détergent de canaux Kv humains exprimés dans des cellules de mammifères: Dans cette étude, la lignée cellulaire mammalienne COS-1 a été utilisée pour exprimer les canaux Kv humains afin de réaliser certaines expériences de solubilisation.

Cellules COS-1 à confluence élevée et faible

5.ressources pour la lignée cellulaire COS-1, y compris des protocoles, des vidéos et plus encore

Protocoles de culture cellulaire

Culture de cellules COS-1 : Ce lien contient des informations précieuses sur la division, la congélation et la décongélation des cellules COS-1.
Cellules COS-1 : Ce lien contient des informations de base sur la lignée cellulaire COS-1.

Protocoles de transfection

Voici quelques sources décrivant la méthode de transfection des cellules COS-1.

Transfection transitoire de cellules COS-1 : Ce document comprend un protocole de transfection transitoire de la lignée cellulaire COS-1.

Vidéos relatives à la lignée cellulaire COS-1

Les ressources vidéo suivantes peuvent aider à obtenir des informations générales sur la culture, la maintenance et la transfection des cellules COS-1.

Passage des cellules : Cette vidéo traite des pratiques de culture de base pour les lignées cellulaires de mammifères.
Congélation des cellules adhérentes : Cette vidéo contient des informations sur la congélation des lignées cellulaires adhérentes.
Protocole de transfection: Cette vidéo présente une procédure de transfection des cellules de mammifères.

6.culture des cellules COS-1

Caractéristiques	Information
Temps de doublement	Environ 48 heures
Adhérentes ou en suspension	Les cellules vivantes se développent en monocouche à la surface de la fiole de culture
Densité d'ensemencement	2 à 4 x 10^4 cellules/cm² ; les cellules adhérentes sont lavées avec 1x PBS, traitées avec Accutase, centrifugées, remises en suspension et distribuées dans un nouveau flacon
Milieu de croissance	Milieu Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) contenant 10% de FBS ; le milieu doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine
Conditions de croissance (température, CO2)	Nécessite un incubateur humidifié avec 5 % de CO2 et une température de 37 °C
Stockage	Température inférieure à -150°C dans la phase vapeur de l'azote liquide
Processus et milieu de congélation	Méthode de congélation lente avec une baisse de température de seulement 1 °C en utilisant les milieux CM-1 ou CM-ACF
Processus de décongélation	Décongeler les cellules congelées en les incubant dans un bain-marie réglé à 37°C pendant 40 à 60 secondes avec une agitation rapide. Centrifuger les cellules pour éliminer le milieu de congélation, remettre le culot en suspension et le distribuer dans un flacon de culture avec du milieu frais. L'adhésion prend environ 24 heures.
Niveau de biosécurité	Le niveau de biosécurité 1 est recommandé pour la manipulation des cellules COS-1

Nous espérons que cet article vous a fourni une quantité suffisante d'informations pour vous aider à commencer à travailler avec des cellules COS-1. N'hésitez pas à nous passer commande si vous souhaitez utiliser cette lignée cellulaire dans le cadre de vos recherches.

Références

Smith, S.L. et T. Shioda, Advantages of COS-1 monkey kidney epithelial cells as packaging host for small-volume production of high-quality recombinant lentiviruses. Journal of virological methods, 2009. 157(1) : p. 47-54.
MacKenzie, C.J. et T. Shioda, COS-1Cells as Packaging Host for Production of Lentiviruses. Current protocols in cell biology, 2011. 50(1) : p. 26.7. 1-26.7. 15.
Bhardwaj, A., et al, Expression analysis of recombinant equine chorionic gonadotropin in three host systems : E. coli BL21C, lysat de cellules d'insectes Sf et cellules de mammifères COS-1. Indian Journal of Animal Research, 2021. 55(1) : p. 40-45.
Wang, F., et al, Generation of a recombinant chickenized monoclonal antibody against the neuraminidase of H9N2 avian influenza virus. AMB Express, 2020. 10: p. 1-7.
Galula, J.U., G.-J.J. Chang, et D.-Y. Chao, Production and Purification of Dengue Virus-like Particles from COS-1 Cells. Bio-protocol, 2019. 9(12) : p. e3280-e3280.