Ligne cellulaire BEWO

BeWo est une lignée cellulaire dérivée d'un choriocarcinome humain largement utilisée dans la recherche biomédicale. Elle constitue un modèle in vitro précieux pour explorer le processus complexe du développement placentaire et de la syncytialisation des trophoblastes humains. Les chercheurs utilisent également ces cellules pour étudier le comportement des cellules du trophoblaste, la production d'hormones et le transport de substances à travers le placenta. En outre, les cellules BeWo offrent également des applications dans les études de toxicologie, d'infection et de transmission de maladies.

Cet article présente les connaissances fondamentales sur les cellules BeWo qui peuvent vous aider à les utiliser dans vos recherches. Il comprendra

  1. Caractéristiques générales et origine des cellules BeWo
  2. Lignée cellulaire BeWo : Informations sur la culture
  3. Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire BeWo
  4. Applications des cellules BeWo dans la recherche
  5. Publications de recherche sur les cellules BeWo
  6. Ressources pour la lignée cellulaire BeWo : Protocoles, vidéos et autres

1. Caractéristiques générales et origine des cellules BeWo

La connaissance préalable de l'origine et des caractéristiques générales d'une lignée cellulaire est cruciale pour son utilisation dans votre recherche. Cette partie de l'article explore l'origine de la lignée cellulaire BeWo, ses caractéristiques et bien plus encore. Vous apprendrez ainsi : Qu'est-ce que la lignée cellulaire de choriocarcinome BeWo ? Qu'est-ce que la syncytialisation de BeWo ? D'où viennent les cellules BeWo ? Quelle est la morphologie des cellules BeWo ? Quelle est la ploïdie de BeWo ?

  • La lignée cellulaire placentaire BeWo provient du choriocarcinome gestationnel malin d'un placenta fœtal mâle en 1968 [1]. Elle constitue donc un modèle inestimable pour la recherche sur le placenta.
  • Les cellules de BeWo présentent une morphologie de type épithélial.
  • Les cellules de BeWo sont relativement petites, entre 20 et 30 µM [2].
  • Les cellules BeWo présentent un caryotype stable. Leur nombre de lignes souches est hypotétraploïde. Le nombre modal de chromosomes des cellules BeWo est de 86. Il peut varier de 71 à 178.
  • Les cellules BeWo produisent plusieurs hormones, à savoir la somatomammotropine chorionique humaine, la gonadotropine chorionique humaine (hCG) et des hormones stéroïdes.
  • Les cellules BeWo expriment des marqueurs moléculaires, notamment la CK 7, la E-cadhérine et la VE-cadhérine.

Sous-ligne B30

B30 est la sous-lignée des cellules BeWo. Elle est utilisée pour étudier l'absorption et le transport des nutriments. Cela est dû à leur croissance vigoureuse sur des membranes poreuses.

BeWo et JEG-3

Les lignées cellulaires BeWo JEG-3 sont dérivées de choriocarcinomes et sont utilisées dans la recherche sur le placenta. Les cellules BeWo produisent des hormones à des niveaux inférieurs à ceux de JEG-3, comme la gonadotrophine chorionique humaine (hCG) et l'œstradiol.

Visualisation en temps réel de la fertilité d'un ovule humain, illustrant les étapes de la formation d'un blastocyste, telle qu'observée au microscope.

2. Lignée cellulaire BeWo : Informations sur la culture

Le maintien d'une culture cellulaire peut s'avérer délicat si l'on ne connaît pas les détails essentiels. Par exemple : Quel est le temps de doublement de la lignée cellulaire BeWo ? Qu'est-ce que le milieu cellulaire BeWo ? Comment cultiver la lignée cellulaire BeWo ? et Comment congeler les cellules BeWo ?

Points clés pour la culture des cellules BeWo

Temps de doublement :

Le temps de doublement de la population des cellules BeWo est d'environ 30 heures.

Adhérentes ou en suspension :

BeWo est une lignée cellulaire adhérente.

Densité d'ensemencement des cellules :

La densité d'ensemencement recommandée pour les cellules BeWo est de 1 x104 cellules/cm2. Pour l'ensemencement, l'ancien milieu est retiré des cellules et les cellules sont rincées avec 1 x PBS. Ensuite, l'Accutase (solution de passage) est ajoutée et les cellules sont incubées pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Ensuite, les cellules détachées sont ajoutées au milieu de culture et centrifugées. Les cellules récoltées sont ensuite remises en suspension et versées dans un nouveau flacon.

Milieu de croissance :

Le milieu F12K de Ham contenant 10 % de FBS, 2,0 mM de L-Glutamine, 2,0 mM de pyruvate de sodium et 2,5 g/L de NaHCO3 est utilisé pour cultiver les cellules BeWo. Le milieu de culture des cellules BeWo doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine.

Conditions de croissance :

Les cellules BeWo sont maintenues dans un incubateur humidifié à une température de 37 degrés Celsius et avec un apport de 5 % de CO2.

Stockage :

Les cellules BeWo congelées sont conservées à une température inférieure à -150°C dans un congélateur électrique à ultra-basse température ou dans la phase vapeur de l'azote liquide.

Processus de congélation et milieu :

Il est recommandé de congeler les cellules BeWo dans le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF. Les cellules sont congelées selon une méthode de congélation lente. Cette méthode ne permet qu'une baisse de température d'un degré par minute, évitant ainsi tout choc et protégeant la viabilité des cellules.

Processus de décongélation :

Les cellules congelées sont décongelées en les immergeant dans un bain-marie préréglé à 37°C pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Un milieu de croissance frais est ensuite ajouté et les cellules sont centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Le culot cellulaire recueilli est remis en suspension et distribué dans un flacon de culture pour la croissance.

Niveau de biosécurité :

Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est nécessaire pour manipuler et entretenir les cultures de cellules BeWo.

Capture de la morphologie épithéliale et polygonale et de la croissance en îlot de la lignée cellulaire humaine de choriocarcinome, BEWO, à un grossissement de 10x et 20x sous le microscope.

3. Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire BeWo

Les cellules BeWo présentent des caractéristiques uniques et s'accompagnent d'avantages et d'inconvénients spécifiques. Dans cette section, nous examinerons certains d'entre eux qui méritent d'être soulignés.

Avantages

Les principaux avantages de la lignée cellulaire de choriocarcinome BeWo sont les suivants :

  • Modèle de cellules placentaires in vitro

    Les cellules BeWo constituent un modèle in vitro pour l'étude du comportement des cellules du trophoblaste et de la syncytialisation du placenta, reproduisant des processus difficiles à observer in vivo.

  • Production d'hormones

    Les cellules BeWo sécrètent des hormones, telles que la hCG et le lactogène placentaire, ce qui les rend précieuses pour les études de régulation hormonale et la recherche en biologie de la reproduction.

Inconvénients

Les inconvénients des cellules trophoblastes BeWo sont les suivants :

  • Lignée cellulaire cancéreuse

    Les cellules BeWo sont dérivées d'un choriocarcinome, qui est une tumeur placentaire. Cette origine peut ne pas représenter entièrement la fonction normale des cellules placentaires.

4. Applications des cellules BeWo dans la recherche

La lignée cellulaire BeWo est largement utilisée dans la recherche sur le placenta. Quelques applications spécifiques de cette lignée cellulaire sont mentionnées ici :

  • Recherche sur le placenta et la grossesse : Les cellules BeWo jouent un rôle essentiel dans la recherche sur le placenta et la grossesse. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier le transport de substances, notamment de médicaments, de nutriments et de toxines, à travers la barrière placentaire. Ils étudient également la production et la régulation des hormones, notamment la gonadotrophine chorionique humaine (hCG), le lactogène placentaire et les hormones stéroïdiennes. Cette étude est importante pour comprendre les changements hormonaux au cours de la grossesse. La recherche menée en 2018 a étudié l'effet des retardateurs de flamme bromés (RFB) sur l'activité de la sulfotransférase dans la lignée cellulaire trophoblastique humaine (BeWo). Cette enzyme est impliquée dans la régulation des niveaux intracellulaires de l'hormone thyroïdienne [3].
  • Recherche sur les infections et les maladies : Les cellules BeWo sont également utilisées pour étudier l'interaction entre les agents pathogènes et les cellules placentaires. Cette recherche est précieuse pour comprendre les maladies qui peuvent être transmises de la mère au fœtus et pour développer des stratégies visant à protéger la santé du fœtus. En outre, cette lignée cellulaire aide les chercheurs à étudier les complications qui surviennent pendant la grossesse, telles que la pré-éclampsie. Par exemple, une étude menée par Michalina Bralewska en 2023 a utilisé le modèle cellulaire du trophoblaste BeWo et a découvert que la chromogranine A (CgA) et le peptide qui en est dérivé, la catestatine (CST), peuvent jouer un rôle dans le processus complexe de la pathogenèse de la prééclampsie (PE) [4]. Une autre étude a exploré le potentiel anticancéreux de la trichosanthine en utilisant la lignée cellulaire de choriocarcinome BeWo. La recherche a également fait un effort supplémentaire pour découvrir des biomarqueurs en effectuant une analyse protéomique comparative avant et après l'expérience [5].

5. Publications de recherche sur les cellules BeWo

Voici quelques publications de recherche importantes concernant les cellules de trophoblaste BeWo.

La signalisation AMPK régule la mitophagie et la production d'ATP mitochondriale dans la lignée cellulaire trophoblastique humaine BeWo

Cette étude publiée dans Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) propose que la signalisation AMPK active la mitophagie dans les cellules trophoblastes BeWo par l'intermédiaire des voies de mitophagie FUNDC1 et PRKN. Par conséquent, la mitophagie contribue à maintenir la production d'ATP et le potentiel de la membrane mitochondriale.

L'éthylparabène induit la mort cellulaire apoptotique dans les cellules du placenta humain BeWo par la voie de la Caspase-3

Cet article a été publié dans la revue Animal Cells and Systems (2020). L'étude a proposé que l'éthylparabène agisse comme médiateur de l'apoptose des cellules BeWo en régulant la voie de la caspase 3.

Caractérisation du potentiel d'élimination des xénobiotiques et des stéroïdes du tissu placentaire humain et des lignées cellulaires (BeWo, JEG-3, JAR et HTR-8/SVneo) par protéomique quantitative

Cette étude parue dans la revue Drug Metabolism and Disposition (2023) a utilisé des lignées cellulaires placentaires, notamment BeWo, JAR, JEG-3 et HTR-8/SVneo, pour étudier le dépôt de xénobiotiques et de stéroïdes dans les cellules.

Apeline et récepteur de l'apeline dans le placenta humain : Expression, voie de signalisation et régulation de la prolifération et du cycle cellulaire des cellules trophoblastiques JEG-3 et BeWo

Cet article de recherche publié dans l'International Journal of Molecular Medicine (2020) propose que l'apeline, le ligand du récepteur APJ, favorise la prolifération des cellules BeWo par le biais de l'APJ et de la signalisation ERK1/2, stat3 et AMPK. Il pourrait donc s'agir d'une adipokine essentielle qui régule le développement du placenta.

Médicaments anticonvulsivants et nutriments fœtaux : effets sur les transporteurs de choline dans une lignée cellulaire placentaire humaine

Cette étude publiée dans Epilepsia (2021) a exploré les effets des nutriments fœtaux et des anti-convulsivants sur les transporteurs de choline dans la lignée cellulaire trophoblastique dérivée de l'homme, BeWo.

6. Ressources pour la lignée cellulaire BeWo : Protocoles, vidéos et autres

Voici quelques ressources en ligne disponibles sur les cellules BeWo :

  • Transfection in vitro : Cette vidéo vous aidera à apprendre le protocole de transfection in vitro de l'ADN plasmidique pour les cellules adhérentes.

Le lien suivant contient des informations sur la culture cellulaire des cellules BeWo :

  • Cellules BeWo : Ce site web contient des informations essentielles sur la culture cellulaire de la lignée cellulaire BeWo. Il contient notamment des informations sur les milieux cellulaires et les conditions de culture. Il contient également des protocoles de sous-culture et de manipulation des cultures cryoconservées et prolifératives.

Références

  1. Weber, M., et al, Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al., Caractéristiques des trophoblastes en culture à long terme. Bulletin de biologie et de médecine expérimentales, 2017. 164: p. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt, et H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha, et A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8) : p. 7124.
  5. Hu, Y., et al, Comparative proteomic analysis of drug trichosanthin addition to BeWo cell line. Molecules, 2022. 27(5) : p. 1603.

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