Cellules B16 - Guide fondamental sur les cellules de mélanome B16 dans la recherche oncologique

B16 est la lignée cellulaire du cancer de la peau (mélanome) d'origine murine. Cette lignée cellulaire est un modèle in vitro efficace pour l'étude des cancers cutanés humains. Elle est fréquemment utilisée pour étudier la formation de tumeurs solides et les métastases des cellules cancéreuses.

Cet article vous aidera à comprendre les bases de la lignée cellulaire de mélanome B16. Plus précisément, il abordera les points suivants :

1.caractéristiques générales et origine de la lignée cellulaire B16

Cette section de l'article couvre les caractéristiques de la lignée cellulaire de mélanome B16. Vous apprendrez les réponses aux questions fréquemment posées. Qu'est-ce que la lignée cellulaire cancéreuse B16 ? D'où proviennent les cellules B16 ? Quelle est la taille des cellules B16 ?

La lignée cellulaire B16 a été créée en 1954. Ces cellules ont été dérivées de souris C57BL/6J qui ont spontanément développé une tumeur cutanée aux Laboratoires Jackson dans le Maine.
Ce sont des cellules épithéliales productrices de mélanine qui ont la capacité de métastaser dans la rate, le foie et les poumons.
Les cellules du mélanome B16 se développent en monocouche et présentent une morphologie cellulaire de type épithélial et fusiforme.
La taille de la lignée cellulaire B16 est d'environ 15,4 μm.
Il existe des sous-clones distincts de cellules B16, notamment B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 et B16F10. Ces sous-lignées sont différentes des cellules B16 parentales et conservent certaines caractéristiques spécifiques. Elles présentent notamment des différences de morphologie, de taille des cellules et d'autres propriétés. B16F10 a une capacité métastatique élevée dans les poumons et B164A5 est la lignée cellulaire de cancer de la peau la plus agressive par rapport à B16F10, B16-GMCSF et B16FLT3 [1].

animation 3D d'un gros plan d'un cancer de la peau en croissance, tel que le mélanome malin, qui enflamme les tissus environnants.

2.informations sur la culture de la lignée cellulaire B16

Avant de maintenir ou de cultiver une lignée cellulaire, vous pouvez rechercher des informations clés sur le temps de doublement, le type de cellule, le milieu de croissance, les conditions de culture, etc. Cette section contient toutes les informations nécessaires à la culture des cellules B16.

Points clés pour la culture des cellules B16

Temps de doublement de la population :	Le temps moyen de doublement de la population pour les cellules B16 est estimé à 24 heures.
Adhérentes ou en suspension :	Les cellules B16 sont adhérentes et se développent en monocouche.
Densité d'ensemencement :	Il est recommandé d'ensemencer les cellules B16 à une densité de 1 à 2 x¹⁰⁴ ^cellules/cm2. Les cellules B16 attachées sont rincées avec 1 x PBS et dissociées de la surface à l'aide de la solution Accutase. Les cellules sont centrifugées et le culot cellulaire est remis en suspension dans le milieu de croissance. Plus tard, ces cellules sont distribuées dans un nouveau flacon pour la croissance.
Milieu de croissance :	Les cellules B16 sont cultivées dans un milieu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) contenant 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). Le milieu de croissance doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de croissance :	La lignée cellulaire B16 est cultivée dans un incubateur humidifié à 5 % de_CO2 et à une température de 37 °C.
Stockage :	Ces cellules sont conservées à une température inférieure à -150 °C ou dans la phase vapeur de l'azote liquide pour protéger la viabilité cellulaire.
Processus de congélation et milieu :	Le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF est utilisé pour congeler les cellules B16 en utilisant un processus de congélation lente.
Processus de décongélation :	Les cellules B16 congelées sont décongelées à 37 °C dans un bain d'eau contenant un agent antimicrobien. Les cellules décongelées peuvent être directement cultivées en les distribuant dans des flacons contenant un milieu de croissance. En outre, ces cellules peuvent être centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation, puis cultivées dans un nouveau milieu.
Niveau de biosécurité :	La lignée cellulaire B16 doit être manipulée ou conservée dans un laboratoire de niveau de biosécurité 1.

Couche semi-confluente de cellules de mélanome B16 sous un grossissement de 10x et 20x.

3. lignée cellulaire B16 : Avantages et inconvénients

Comme d'autres lignées cellulaires, la lignée B16 possède un mélange unique d'avantages et d'inconvénients. Cette section présente quelques avantages et inconvénients significatifs de cette lignée cellulaire de mélanome.

Avantages

B16 est le premier outil murin efficace largement utilisé dans la recherche sur les métastases en raison des avantages qu'il offre. Voici quelques-uns des avantages de cette lignée cellulaire de cancer de la peau :

Facile à cultiver	La lignée cellulaire B16 est facile à cultiver dans les laboratoires de recherche. Elle est largement utilisée pour étudier la biologie des cellules cancéreuses, les voies de signalisation, etc.
Croissance rapide	La lignée cellulaire de mélanome B16 présente un taux de prolifération élevé, ce qui la rend adaptée à l'étude des processus de division et de croissance cellulaires.
Tumorigénicité	La lignée cellulaire B16 est tumorigène et présente des propriétés semblables à celles des tumeurs, telles que l'invasion, la migration et la prolifération. Elle est précieuse pour l'étude de la formation, de la progression et de la métastase des tumeurs.

Inconvénients

Les inconvénients associés à la lignée cellulaire B16 sont les suivants :

Manque de pertinence pour l'homme	La lignée cellulaire B16 étant une lignée de mélanome de souris, elle peut ne pas représenter fidèlement la biologie du cancer de la peau chez l'homme, ce qui limite la transposabilité des résultats de la recherche.
Hétérogénéité	Les cellules B16 sont hétérogènes et présentent des propriétés génétiques et phénotypiques variées au sein d'une même culture. Cela peut avoir un impact sur la fiabilité et la reproductibilité des résultats.

4. applications des cellules B16

La lignée cellulaire B16 est largement utilisée dans les études de recherche. Voici quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire :

Biologie des tumeurs : Cette lignée cellulaire de cancer de la peau murin est tumorigène et largement utilisée pour comprendre la biologie des tumeurs. Plusieurs études ont été menées pour explorer les mécanismes cellulaires à l'origine de la croissance, de la prolifération et des métastases des cellules tumorales en utilisant les cellules B16. Une étude menée en 2020 a utilisé des cellules B16 pour étudier le rôle du long ARN non codant, LncRNA MEG3, dans la formation, la croissance et les métastases des mélanomes. Cette recherche a révélé que l'ARN non codant module l'axe miARN-21/E-Cadhérine pour stimuler ces événements cellulaires [2]. De même, des recherches ont été menées pour étudier le rôle potentiel de la signalisation Notch1 dans l'immunosuppression induite par les tumeurs en utilisant des cellules B16 [3].
Découverte de médicaments : Les cellules B16 sont utilisées pour valider et tester les effets thérapeutiques potentiels des médicaments candidats. Une étude a évalué l'effet antitumoral de l'acide néogambogique, un composé naturel, en utilisant une lignée cellulaire B16. Les résultats de l'étude ont révélé que ce composé module la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR pour provoquer la mort des cellules cancéreuses [4]. Une autre étude a examiné l'effet anti-mélanome du ginsénoside Rg3, une saponine, en utilisant la lignée cellulaire B16. La recherche a proposé que ce composé naturel exerce une activité antitumorale en régulant à la baisse les voies ERK et Akt [5].

430,00 €*

Contenu : 1.5 milliliter

Prix hors taxes plus frais d'expédition

cryovial

Numéro de produit : 305154

5.publications de recherche sur les cellules B16

Voici quelques publications de recherche importantes concernant la lignée cellulaire de mélanome B16.

L'ARNnc MEG3 favorise la croissance, les métastases et la formation des mélanomes en modulant l'axe miR-21/E-cadhérine

Cette publication dans le journal Cancer Cell International (2020) propose que le long ARN non codant MEG3 favorise la formation, la croissance et les métastases des cellules de mélanome B16 en modulant l'axe miRNA-21/E-Cadhérine.

Un nouveau dérivé du psoralène, le MPFC, favorise la mélanogenèse par l'activation des voies de signalisation p38 MAPK et PKA dans les cellules B16

Cet article a été publié dans l'International Journal of Molecular Medicine en 2018. Cette étude a examiné l'effet mélanogène et les mécanismes d'un dérivé du psoralène, le 4-méthyl-6-phényl-2H-furo[3,2-g] chromen-2-one (MPFC), dans les cellules B16. L'étude propose que ce dérivé favorise la mélanogénèse en stimulant la signalisation cellulaire PKA et p38 MAPK.

La signalisation Notch1 dans les cellules de mélanome a favorisé l'immunosuppression induite par la tumeur via la régulation à la hausse du TGF-β1

Cette recherche a été publiée en 2018 dans le Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Les résultats de l'étude suggèrent que l'activation de la signalisation Notch1 dans les cellules B16 peut empêcher l'immunité antitumorale en augmentant l'expression du gène TGF-β1.

L'acide néogambogique induit l'apoptose des cellules de mélanome B16 via la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR

Cette étude a été menée par Chunlan Wu et ses collègues en 2020 et publiée dans la revue Acta Biochimica Polonica. Cette recherche indique que l'acide néogambogique, un composé naturel, peut provoquer la mort des cellules de mélanome B16 en modulant la cascade de signalisation PI3K/Akt/mTOR.

Un complexe d'iridium (III), puissant agent anticancéreux, induit l'apoptose et l'autophagie dans les cellules B16 par l'inhibition de la voie AKT/mTOR

Cet article de recherche a été publié dans le European Journal of Medicinal Chemistry en 2018. Dans cette étude, les chercheurs ont étudié l'activité anticancéreuse d'un composé, le complexe d'iridium (III), en utilisant des cellules de mélanome B16.

L'ailanthone induit l'arrêt du cycle cellulaire et l'apoptose dans les cellules de mélanome B16 et A375

Cette étude propose qu'un bioactif végétal, l'ailanthone, possède un potentiel anticancéreux car il peut induire l'apoptose et l'arrêt du cycle cellulaire dans les cellules de mélanome B16 et A375. Cet article a été publié dans Biomolecules en 2019.

6. ressources pour la lignée cellulaire B16 : Protocoles, vidéos et autres

Il existe des ressources limitées sur la lignée cellulaire B16 expliquant ses protocoles de culture et de transfection.

Culture de cellules de mélanome : Cette vidéo fournit des conseils précieux pour la culture des lignées cellulaires de mélanome.
Sous-culture d'une lignée cellulaire : Cette vidéo explique un protocole général de sous-culture pour une lignée cellulaire.
Transfection de la lignée cellulaire B16F10 : Cette vidéo explique le protocole de transfection d'une sous-lignée de cellules de mélanome B16. Elle peut vous aider à optimiser le protocole de transfection des cellules B16.

Voici quelques protocoles de culture cellulaire pour les cellules B16.

Culture de cellules B16 : Ce site web contient toutes les informations nécessaires à la culture des cellules B16, y compris les milieux de croissance, la sous-culture, la décongélation et la congélation des cellules.

Références

Danciu, C., et al, Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines : C57 BL/6J skin. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2) : p. 73-80.
Wu, L., et al, LncRNA MEG3 promotes melanoma growth, metastasis and formation through modulating miR-21/E-cadherin axis. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al, La signalisation Notch1 dans les cellules de mélanome a favorisé l'immunosuppression induite par la tumeur via la régulation à la hausse du TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1) : p. 1-13.
Wu, C., et al, L 'acide néogambogique induit l'apoptose des cellules de mélanome B16 via la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2) : p. 197-202.
Meng, L., et al, Antitumor activity of ginsenoside Rg3 in melanoma through downregulation of the ERK and Akt pathways. International Journal of Oncology, 2019. 54(6) : p. 2069-2079.