Cellules B16 - Guide fondamental sur les cellules de mélanome B16 dans la recherche oncologique
B16 est une lignée cellulaire de cancer de la peau (mélanome) d'origine murine. Cette lignée cellulaire constitue un modèle in vitro efficace pour l'étude des cancers de la peau chez l'homme. Elle est fréquemment utilisée pour étudier la formation de tumeurs solides et les métastases des cellules cancéreuses.
- Milieu de culture
- Les cellules B16 sont cultivées dans un milieu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) contenant 10 % de sérum fœtal bovin (FBS). Le milieu de culture doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement moyen de la population de cellules B16 est estimé à 24 heures.
- Type de croissance
- Les cellules B16 sont adhérentes et se développent en monocouches.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander B16
Cet article vous aidera à comprendre les bases de la lignée cellulaire de mélanome B16. Plus précisément, il abordera les points suivants :
- Caractéristiques générales et origine de la lignée cellulaire B16
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire B16
- Lignée cellulaire B16 : avantages et inconvénients
- Applications des cellules B16
- 5. Publications de recherche consacrées aux cellules B16
- Ressources sur la lignée cellulaire B16 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Caractéristiques générales et origine de la lignée cellulaire B16
Cette section de l'article traite des caractéristiques de la lignée cellulaire de mélanome B16. Vous y trouverez les réponses aux questions fréquemment posées suivantes : Qu'est-ce que la lignée cellulaire cancéreuse B16 ? D'où proviennent les cellules B16 ? Quelle est la taille des cellules B16 ?
- La lignée cellulaire B16 a été établie en 1954. Ces cellules proviennent de souris C57BL/6J qui ont développé spontanément une tumeur cutanée aux laboratoires Jackson, dans le Maine.
- Il s'agit de cellules épithéliales productrices de mélanine capables de métastaser dans la rate, le foie et les poumons.
- Les cellules de mélanome B16 se développent en monocouches et présentent une morphologie cellulaire de type épithélial et fusiforme.
- La taille des cellules de la lignée B16 est d'environ 15,4 μm.
- Il existe des sous-clones distincts de cellules B16, notamment B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 et B16F10. Ces sous-lignées diffèrent des cellules B16 parentales et conservent certaines caractéristiques spécifiques. Elles présentent notamment des différences de morphologie, de taille cellulaire et d'autres propriétés. La lignée B16F10 possède une forte capacité de métastases pulmonaires, et la lignée B164A5 est la lignée cellulaire de cancer de la peau la plus agressive par rapport aux lignées B16F10, B16-GMCSF et B16FLT3 [1].
Informations sur la culture de la lignée cellulaire B16
Avant de maintenir ou de cultiver une lignée cellulaire, vous pouvez rechercher des informations clés concernant le temps de doublement, le type de cellules, les milieux de culture, les conditions de culture, etc. Cette section contient toutes les informations nécessaires à la culture des cellules B16.
Points clés pour la culture des cellules B16
Temps de doublement de la population :
Le temps de doublement moyen de la population des cellules B16 est estimé à 24 heures.
Adhérentes ou en suspension :
Les cellules B16 sont adhérentes et se développent en monocouches.
Densité d'ensemencement :
Il est recommandé d'ensemencer les cellules B16 à une densité de 1 à 2 x 10⁴ cellules/cm². Les cellules B16 adhérentes sont rincées avec du PBS 1x et dissociées de la surface à l'aide d'une solution d'Accutase. Les cellules sont centrifugées, et le culot cellulaire est remis en suspension dans le milieu de croissance. Ces cellules sont ensuite transférées dans un nouveau flacon pour la culture.
Milieu de croissance :
Les cellules B16 sont cultivées dans un milieu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) contenant 10 % de sérum fœtal bovin (FBS). Le milieu de croissance doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de culture :
La lignée cellulaire B16 est cultivée dans un incubateur humidifié avec un apport de 5 % de CO₂ et une température de 37 °C.
Conservation :
Ces cellules sont conservées à une température inférieure à -150 °C ou en phase vapeur d'azote liquide afin de préserver leur viabilité.
Procédé et milieu de congélation :
Le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF est utilisé pour congeler les cellules B16 selon un processus de congélation lente.
Procédé de décongélation :
Les cellules B16 congelées sont décongelées à 37 °C dans un bain-marie contenant un agent antimicrobien. Les cellules décongelées peuvent être directement mises en culture en les transférant dans des flacons contenant un milieu de croissance. Par ailleurs, ces cellules peuvent être centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation, puis mises en culture dans un nouveau milieu.
Niveau de biosécurité :
La lignée cellulaire B16 doit être manipulée ou conservée dans un laboratoire de niveau de biosécurité 1.
Lignée cellulaire B16 : avantages et inconvénients
Comme d'autres lignées cellulaires, la lignée B16 présente un ensemble unique d'avantages et d'inconvénients. Certains avantages et inconvénients significatifs de cette lignée cellulaire de mélanome sont énumérés dans cette section.
Avantages
La lignée B16 est le premier outil murin efficace largement utilisé dans la recherche sur les métastases en raison des avantages qu'elle offre. Voici quelques-uns des avantages de cette lignée cellulaire de cancer de la peau :
Facile à cultiver
La lignée cellulaire B16 est facile à cultiver dans les laboratoires de recherche. Elle est largement utilisée pour étudier la biologie des cellules cancéreuses, les voies de signalisation, et bien plus encore.
Croissance rapide
La lignée cellulaire de mélanome B16 présente un taux de prolifération élevé, ce qui la rend adaptée à l'étude des processus de division et de croissance cellulaires.
Tumorigénicité
La lignée B16 est une lignée cellulaire tumorigène présentant des propriétés tumorales telles que l'invasion, la migration et la prolifération. Elle est précieuse pour l'étude de la formation, de la progression et des métastases tumorales.
Inconvénients
Les inconvénients associés à la lignée cellulaire B16 sont les suivants :
Manque de pertinence pour l'être humain
La lignée B16 étant une lignée cellulaire de mélanome de souris, elle pourrait ne pas refléter fidèlement la biologie du cancer de la peau chez l'humain, ce qui limite la transposabilité des résultats de la recherche.
Hétérogénéité
Les cellules B16 sont hétérogènes et présentent des propriétés génétiques et phénotypiques variées au sein d'une même culture. Cela peut avoir un impact sur la fiabilité et la reproductibilité des résultats.
Applications des cellules B16
La lignée cellulaire B16 est largement utilisée dans les études de recherche. Voici quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire :
- Biologie tumorale : cette lignée cellulaire murine de cancer de la peau est tumorigène et largement utilisée pour comprendre la biologie tumorale. Plusieurs études ont été menées pour explorer les mécanismes cellulaires sous-jacents à la croissance, à la prolifération et aux métastases des cellules tumorales à l'aide de cellules B16. Une étude menée en 2020 a utilisé des cellules B16 pour étudier le rôle de l'ARN non codant long, LncRNA MEG3, dans la formation, la croissance et les métastases du mélanome. Cette recherche a montré que l'ARN non codant module l'axe miRNA-21/E-cadhérine pour stimuler ces événements cellulaires [2]. De même, des recherches ont été menées pour étudier le rôle potentiel de la signalisation Notch1 dans l'immunosuppression induite par la tumeur à l'aide de cellules B16 [3].
- Découverte de médicaments : les cellules B16 sont utilisées pour valider et tester les effets thérapeutiques potentiels de candidats-médicaments. Une étude a évalué l'effet antitumoral de l'acide néogambogique, un composé naturel, à l'aide d'une lignée cellulaire B16. Les résultats de l'étude ont révélé que ce composé module la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR pour provoquer la mort des cellules cancéreuses [4]. Une autre étude a examiné l'effet antimélanome du ginsénoside Rg3, une saponine, à l'aide de la lignée cellulaire B16. La recherche a suggéré que ce composé naturel exerçait une activité antitumorale en régulant à la baisse les voies ERK et Akt [5].
5. Publications scientifiques portant sur les cellules B16
Voici quelques publications de recherche importantes consacrées à la lignée cellulaire de mélanome B16.
Cette publication parue dans la revue Cancer Cell International (2020) suggère que l'ARN non codant long MEG3 favorise la formation, la croissance et les métastases des cellules de mélanome B16 en modulant l'axe miRNA-21/E-cadhérine.
Cet article a été publié dans l'International Journal of Molecular Medicine en 2018. Cette étude a examiné l'effet mélanogénique et les mécanismes d'un dérivé du psoralène, le 4-méthyl-6-phényl-2H-furo[3,2-g]chromén-2-one (MPFC), dans les cellules B16. L'étude a suggéré que ce dérivé favorise la mélanogénèse en stimulant la signalisation cellulaire PKA et p38 MAPK.
Cette recherche a été publiée en 2018 dans le Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Les résultats de l'étude suggèrent que l'activation de la signalisation Notch1 dans les cellules B16 pourrait empêcher l'immunité antitumorale en augmentant l'expression du gène TGF-β1.
Cette étude a été menée par Chunlan Wu et ses collègues en 2020 et publiée dans la revue Acta Biochimica Polonica. Cette recherche indique que l'acide néogambogique, un composé naturel, peut provoquer la mort des cellules de mélanome B16 en modulant la cascade de signalisation PI3K/Akt/mTOR.
Cet article de recherche a été publié dans l'European Journal of Medicinal Chemistry en 2018. Dans cette étude, les chercheurs ont étudié l'activité anticancéreuse d'un composé, un complexe d'iridium (III), en utilisant des cellules de mélanome B16.
Cette étude a suggéré qu'un bioactif végétal, l'ailanthone, possède un potentiel anticancéreux, car il peut induire l'apoptose et l'arrêt du cycle cellulaire dans les cellules de mélanome B16 et A375. Cet article a été publié dans Biomolecules en 2019.
Ressources pour la lignée cellulaire B16 : protocoles, vidéos et plus encore
Les ressources disponibles sur la lignée cellulaire B16 expliquant ses protocoles de culture et de transfection sont limitées.
- Culture de cellules de mélanome : cette vidéo fournit des conseils précieux pour la culture de lignées cellulaires de mélanome.
- Sous-culture d'une lignée cellulaire : cette vidéo explique un protocole général de sous-culture pour une lignée cellulaire.
- Transfection de la lignée cellulaire B16F10 : cette vidéo explique le protocole de transfection d'une sous-lignée de cellules de mélanome B16. Elle peut vous aider à optimiser le protocole de transfection pour les cellules B16.
Voici quelques protocoles de culture cellulaire pour les cellules B16.
- Culture des cellules B16 : ce site web contient toutes les informations nécessaires à la culture des cellules B16, notamment les milieux de croissance, la repiquage, la décongélation et la congélation des cellules.
Références
- Danciu, C., et al., Comportement de quatre sous-lignées différentes de cellules de mélanome murin B16 : peau de C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2) : p. 73-80.
- Wu, L., et al., L'ARN lnc MEG3 favorise la croissance, les métastases et la formation du mélanome en modulant l'axe miR-21/E-cadhérine. Cancer Cell International, 2020. 20 : p. 1-14.
- Yang, Z., et al., La signalisation Notch1 dans les cellules de mélanome favorise l'immunosuppression induite par la tumeur via la régulation à la hausse du TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1) : p. 1-13.
- Wu, C., et al., L'acide néogambogique induit l'apoptose des cellules de mélanome B16 via la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2) : p. 197-202.
- Meng, L., et al., Activité antitumorale du ginsénoside Rg3 dans le mélanome par la régulation à la baisse des voies ERK et Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6) : p. 2069-2079.