Cellules B16-F10 - Étude de la lignée cellulaire de mélanome B16-F10 dans la recherche sur les métastases
Les cellules B16-F10 constituent une lignée cellulaire de mélanome dérivée de la souris C57BL/6J. Elles sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer de la peau. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier le développement et la progression des tumeurs ainsi que les interventions thérapeutiques. Cet article abordera les aspects fondamentaux des cellules de mélanome B16-F10. Il comprendra notamment :
- Milieu de culture
- Les cellules B16-F10 sont cultivées dans un milieu DMEM. Le milieu est complété par 10 % de FBS, 4 mM de L-glutamine, 1,5 g/L de NaHCO3, 4,5 g/L de glucose et 1,0 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules B16-F10 est d'environ 20,1 heures. Il peut varier entre 17 et 21 heures, en fonction des conditions de culture.
- Type de croissance
- B16-F10 est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules se développent rapidement et forment des monocouches.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander B16-F10
- Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
- Informations sur la culture des cellules B16-F10
- Cellules B16-F10 : avantages et inconvénients
- Applications de recherche des cellules B16-F10
- Publications consacrées à la lignée cellulaire B16-F10
- Ressources pour la lignée cellulaire B16-F10 : protocoles, vidéos et plus encore
- Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
- Informations sur la culture des cellules B16-F10
- Cellules B16-F10 : avantages et inconvénients
- Applications de recherche des cellules B16-F10
- 5. Publications consacrées à la lignée cellulaire B16-F10
- Ressources pour la lignée cellulaire B16-F10 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
Cette section vous donnera un aperçu de l'origine et des caractéristiques distinctives des cellules tumorales de mélanome B16-F10. Elle vous aidera à utiliser efficacement cette lignée cellulaire dans vos travaux de recherche. Vous apprendrez principalement : Que sont les cellules B16-F10 ? D'où provient la lignée B16-F10 ? Quelle est la morphologie de la lignée cellulaire B16-F10 ? Quelle est la taille des cellules B16-F10 ?
- La B16-F10 est un sous-clone de la lignée cellulaire tumorale B16 dérivée de tissu cutané de souris C57BL/6J. Ici, les cellules de mélanome B16F10 ont été développées après injection intraveineuse de la lignée B16 chez des souris immunodéprimées ou syngéniques. Ces cellules ont été sélectionnées pour leur capacité à former des colonies pulmonaires métastatiques in vivo, puis établies après dix cycles de formation de colonies pulmonaires in vitro [1]. Elle a été développée par Fidler et ses collègues en 1976.
- Les lignées cellulaires B16-F10 ont un aspect épithélial et fusiforme.
- La taille approximative des cellules B16-F10 est de 15,4 ± 1,4 μm [2].
Cellules B16-F1 et B16-F10
Les cellules B16-F1 et B16-F10 sont issues de la lignée cellulaire parentale B16. Toutes deux proviennent de la même source et possèdent des caractéristiques presque similaires. Cependant, la principale différence réside dans leur capacité métastatique. Les cellules B16-F10 ont un potentiel métastatique élevé, tandis que celui des cellules B16-F1 est faible [3].
Informations sur la culture des cellules B16-F10
Avant de manipuler et de cultiver une lignée cellulaire, vous devez connaître son temps de doublement, ses milieux de culture, ses conditions de culture et ses protocoles de culture cellulaire. Cette section abordera les questions suivantes : Quel est le temps de doublement des cellules B16-F10 ? Comment cultiver les cellules B16-F10 ? Quels sont les milieux de culture des cellules B16-F10 ? Quelles sont les conditions de culture recommandées pour les cellules B16-F10 ?
Points clés pour la culture des cellules B16-F10
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules B16-F10 est d'environ 20,1 heures. Il peut varier de 17 à 21 heures, en fonction des conditions de culture.
Adhérentes ou en suspension :
La lignée B16-F10 est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules se développent rapidement et forment des monocouches.
Rapport de division :
Les cellules B16-F10 sont repiquées avec un rapport de division de 1:2 à 1:4. Les cellules sont lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate (1x), puis incubées avec une solution de repiquage Accutase pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Du milieu frais est ajouté aux cellules, qui sont ensuite centrifugées. Le culot cellulaire récolté est à nouveau remis en suspension, et les cellules sont réparties dans un nouveau flacon contenant du milieu de culture frais selon le rapport de division.
Milieu de croissance :
Les cellules B16-F10 sont cultivées dans le milieu DMEM. Le milieu est complété par 10 % de FBS, 4 mM de L-glutamine, 1,5 g/L de NaHCO₃, 4,5 g/L de glucose et 1,0 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de culture :
Les cellules B16-F10 sont cultivées dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO2.
Conservation :
Les cellules congelées sont conservées à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique à très basse température ou en phase vapeur d'azote liquide afin de maintenir la viabilité cellulaire.
Procédé de congélation et milieu :
Les cellules B16-F10 sont congelées dans des milieux CM-1 ou CM-ACF en vue de leur conservation. Pour cela, un processus de congélation lente, ne permettant qu'une baisse de température de 1 °C par minute, est recommandé afin d'éviter tout choc thermique aux cellules.
Procédé de décongélation :
Les cellules B16-F10 congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37 °C pendant 40 à 60 secondes. Ensuite, les cellules sont ajoutées à un milieu frais et centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Les cellules recueillies sont remises en suspension dans un milieu de croissance et versées dans des flacons pour la culture.
Niveau de biosécurité :
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est requis pour manipuler et maintenir la lignée cellulaire B16-F10.
Cellules B16-F10 : avantages et inconvénients
Comme d'autres lignées cellulaires, la lignée B16-F10 présente également certains avantages et inconvénients. Cette section aborde quelques-uns des principaux avantages et inconvénients de cette lignée cellulaire de mélanome cutané.
Avantages
La lignée cellulaire B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer. Les avantages des cellules B16-F10 sont les suivants :
Potentiel métastatique
Les cellules B16-F10 de mélanome cutané présentent un fort potentiel métastatique, ce qui les rend précieuses pour l'étude des métastases cancéreuses et des mécanismes sous-jacents.
Modèle tumoral in vitro
Les cellules B16-F10 servent de modèle in vitro pour l'étude de la progression et de la croissance du cancer, aidant les chercheurs à comprendre les mécanismes cellulaires et moléculaires à l'origine du cancer.
Inconvénients
Les inconvénients associés à la lignée cellulaire B16-F10 sont les suivants :
Lignée cellulaire dérivée de la souris
La lignée B16-F10 est une lignée cellulaire dérivée de la souris, ce qui limite son applicabilité aux études spécifiques à l'être humain. Les résultats de recherche obtenus à partir de ces cellules ne sont pas toujours transposables à la biologie humaine.
Applications de recherche des cellules B16-F10
La lignée cellulaire B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer. Quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire sont présentées ici.
- Recherche sur le cancer : La lignée cellulaire B16-F10 constitue un modèle précieux pour étudier les processus des cellules cancéreuses, notamment la prolifération, l'invasion, la migration et la mort cellulaire ou apoptose. De plus, elle aide les chercheurs à mieux comprendre les mécanismes moléculaires et les voies qui régissent ces processus cellulaires. Une étude menée en 2018 a exploré le rôle du CCR5 (récepteur des chimiokines C-C de type 5) dans la transition épithélio-mésenchymateuse et la métastase des cellules de mélanome. Les résultats ont révélé qu'une déficience en CCR5 limite la croissance tumorale et les métastases, tandis qu'une expression élevée entraîne une croissance et des métastases accrues des cellules B16-F10. Des recherches complémentaires ont montré que le CCR5 régule l'expression du TGFβ1, qui à son tour régule la voie de signalisation PI3K/AKT/GSK3β afin de favoriser la transition épithélio-mésenchymateuse et la migration cellulaire [4].
- Essais et développement de médicaments : les cellules tumorales de mélanome B16F10 sont très agressives et conviennent donc à l'évaluation de médicaments et de traitements antitumoraux potentiels. Les chercheurs utilisent ces cellules pour évaluer l'effet de différents composés sur la croissance, la prolifération et la métastase cellulaires, ce qui facilite le développement de médicaments. Une étude menée en 2018 par Valentina Nanni et ses collègues a examiné les effets thérapeutiques de l'extrait hydroalcoolique de fleurs de Spartium junceum. L'étude a suggéré que l'extrait de fleurs était efficace pour induire la sénescence des cellules B16-F10, ce qui entraîne une suppression de la croissance cellulaire et de la mélanogenèse ; il pourrait donc exercer des activités anticancéreuses potentielles [5].
5. Publications consacrées à la lignée cellulaire B16-F10
Voici quelques publications de recherche importantes mettant en avant la lignée cellulaire de mélanome B16-F10 :
Cette étude a été publiée dans Nutrients (2020). Elle suggère que l'extrait éthanolique de Sorghum bicolor a un effet anti-mélanogénique sur les cellules de mélanome cutané B16F10.
Le calcitriol inhibe la prolifération et induit potentiellement l'apoptose dans les cellules B16-F10
La recherche publiée dans Medical Science Monitor Basic Research (2022) suggère que le calcitriol exerce des effets antitumoraux sur les cellules de mélanome B16-F10 en inhibant leur prolifération et en induisant l'apoptose.
Cet article est publié dans Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Les résultats ont révélé que les cardols, des lipides résorcinoliques, exercent une cytotoxicité intense sur la lignée cellulaire B16-F10.
L'étude publiée dans Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) a exploré le potentiel antimétastatique de l'extrait d'exocarpe de Ginkgo biloba à l'aide de cellules B16-F10.
Cette recherche publiée dans World Neurosurgery (2018) a suggéré que la thymoquinone pourrait constituer un traitement efficace contre les lésions métastatiques intracérébrales, car elle inhibe la croissance des cellules B16-F10 et induit l'apoptose.
Ressources sur la lignée cellulaire B16-F10 : protocoles, vidéos et plus encore
Les cellules endothéliales B16F10 sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer de la peau. Voici quelques ressources en ligne expliquant leurs protocoles de culture et de transfection :
- Transfection des cellules de mélanome B16F10 : ce tutoriel vidéo vous aidera à apprendre le protocole de transfection des cellules B16-F10.
- Transfection des cellules B16-F10 : ce document explique le protocole de transfection d'ADN in vitro pour les cellules de mélanome cutané B16F10.
Le lien suivant contient le protocole de culture cellulaire pour les cellules B16-F10 :
- Sous-culture de B16-F10 : ce site web contient des informations utiles sur les cellules tumorales de mélanome B16F10. Il aborde les milieux de croissance, le temps de doublement, les conditions de culture et le protocole de sous-culture des cellules, ainsi que la manipulation des cultures cryoconservées et prolifératives.
Références
- Poste, G., et al., Comparaison des propriétés métastatiques de clones de mélanome B16 isolés à partir de lignées cellulaires en culture, de tumeurs sous-cutanées et de métastases pulmonaires individuelles. Cancer Research, 1982. 42(7) : p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono et S. Sugita, « Mécanophénotypage de variants de cellules de mélanome B16 pour l'évaluation de l'efficacité du traitement par le (-)-épigallocatéchine gallate à l'aide d'un dispositif microfluidique conique ». Micromachines, 2019. 10(3) : p. 207.
- Danciu, C., et al., Comportement de quatre sous-lignées différentes de cellules de mélanome murin B16 : peau de C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2) : p. 73-80.
- Liu, J., et al., Une expression élevée du CCR5 dans le mélanome favorise la transition épithélio-mésenchymateuse et les métastases via le TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4) : p. 481-493.
- Nanni, V., et al., L'extrait hydroalcoolique de fleurs de Spartium junceum L. inhibe la croissance et la mélanogenèse dans les cellules B16-F10 en induisant la sénescence. Phytomedicine, 2018. 46 : p. 1-10.