Ramos-solut - B-solulymfoomatutkimus: Ramos-solujen merkitys
Ramos-solut ovat B-lymfosyyttisolulinja, jota käytetään laajasti biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Niitä käytetään ensisijaisesti immunologian ja syöpätutkimusten alalla. Tutkijat käyttävät näitä soluja sytotoksisten lääkkeiden arviointiin ja B-solujen pinta-antigeenien, mutaatioiden ja apoptoottisten mekanismien tutkimiseen.
Ramos-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet s
Solulinjan alkuperän ja keskeisten ominaisuuksien ymmärtäminen on ratkaisevassa asemassa päätettäessä sen soveltuvuudesta tutkimukseen. Sen vuoksi on suositeltavaa arvioida nämä tiedot perusteellisesti ennen kuin aloitat työskentelyn sen parissa. Tässä osassa käsitellään seuraavia usein kysyttyjä kysymyksiä: Mikä on Ramosin syöpäsolulinja? Mikä on Ramos-solulinjan CD19? Mikä on Ramos-solulinja CD20? Mikä on Ramos-solujen alkuperä? Mitkä ovat Ramos-solulinjan merkkiaineet? Mikä on Ramos-solulinjan koko? Mikä on Ramos-solulinjan morfologia?
- Ramos-solulinja perustettiin vuonna 1972. Nämä solut saatiin 3-vuotiaan valkoihoisen pojan, jolla oli amerikkalaistyyppinen Burkittin lymfooma, askitaalisesta nesteestä [1].
- Ne ilmentävät keskeisiä B-solujen merkkiaineita, kuten immunoglobuliini M (IgM), CD19, CD20 ja CD22.
- Ramos-solut ovat Epstein-baarivirus-negatiivisia soluja. Ne voivat kuitenkin muuttua pysyvästi Epstein-Barr-viruspositiivisiksi soluiksi.
- Näillä B-lymfoblastisoluilla on pyöreä morfologia.
Ramosin siniset solut vs. Ramosin B-solut
Ramosin siniset solut ja Ramosin B-solut ovat molemmat ihmisen Burkittin lymfoomasoluja. Molemmat ovat negatiivisia Epstein-baariviruksen suhteen. Erona näiden solujen välillä on se, että Ramosin siniset solut ilmentävät NF-κB/AP-1-indusoitavaa reportterigeeniä nimeltä SEAP (secreted embryonic alkaline phosphate), kun taas valkoiset Ramosin solut eivät ilmentäisi.
Ramos-solujen viljely
Tämä osa artikkelista on omistettu auttamaan sinua oppimaan Ramos-soluja koskevia välttämättömiä soluviljelytietoja. Täältä saat tietää: Mikä on solulinjojen kaksinkertaistumisaika? Mikä on suositeltava väliaine? Miten Ramos-soluja viljellään?
Ramos-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
Ramos-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 20,4 ± 1,5 tuntia. Se voi kuitenkin poiketa annetuista soluviljelyolosuhteista riippuen. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
Ramos-solut kasvavat suspensiossa. |
|
Solutiheys: |
Ramos-solulinjan optimaalinen solutiheys on 3 x105 solua/ml . Subkultivointia varten suspendoituneet solut kerätään sentrifugoimalla. Soluihin lisätään tuoretta elatusainetta ja ne suspendoidaan uudelleen huolellisesti. Tämän jälkeen solut kaadetaan uuteen pulloon tiheydellä 3-9105 solua/ml . |
|
Kasvualusta: |
Ramos-solujen viljelyyn käytetään RPMI 1640:tä, jota on täydennetty 10 %:lla naudan sikiöseerumilla, 2,1 mM stabiililla glutamiinilla ja 2,0 g/l NaHCO3:lla. väliaine on vaihdettava 2 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
Ihmisen Burkitt-lymfooma-solulinjaa (Ramos) pidetään kostutetussa inkubaattorissa 5 % CO2:ssa ja 37 °C:n lämpötilassa. |
|
Varastointi: |
Pakastetut Ramos-solut säilytetään alle -150 celsiusasteen lämpötilassa tai nestemäisen typen höyryfaasissa solujen elinkelpoisuuden suojaamiseksi pidempään. |
|
Pakastusprosessi ja väliaine: |
Ramos-soluille suositellaan CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. Käytetään hidasta jäädytysprosessia, jossa lämpötila laskee asteittain yhden celsiusasteen minuutissa. Tämä hidas jäädytys suojaa soluja mahdolliselta sokilta ja parantaa niiden elinkelpoisuutta. |
|
Sulatusprosessi: |
Sulattamista varten jäädytettyjä solujapidetään esilämmitetyssä vesihauteessa 37 °C:n lämpötilassa 40-60 sekuntia, kunnes jäljellä on pieni jäämöhkäle. Tämän jälkeen lisätään tuoretta väliaineita ja solut sentrifugoidaan pakastusmedian osien poistamiseksi. Pelletti suspendoidaan uudelleen ja solut annostellaan uuteen pulloon, joka sisältää kasvatusmediaa. |
|
Bioturvallisuustaso: |
Bioturvallisuustaso 1 -laboratorio on välttämätön Epstein-Barr-virusnegatiivisten Ramos-soluviljelmien ylläpitämiseksi. Bioturvallisuustaso siirretään kuitenkin tasolle 2, kun Ramos-solut muutetaan pysyvästi Epstein-Barr-viruspositiivisiksi. |
Ramos: Ramos: Edut ja rajoitukset
Kuten muillakin solulinjoilla, myös Ramos-soluilla on omat etunsa ja rajoituksensa. Tässä jaksossa tarkastellaan joitakin merkittäviä niistä, jotka voivat vaikuttaa merkittävästi niiden tutkimuskäyttöön.
Edut
- Burkittin lymfooman solumalli: Ramos-solut kehitettiin Burkittin lymfoomapotilaasta, mikä tekee niistä relevantin solumallin lymfaattisten maligniteettien tutkimiseen
- Helppo viljellä: Ramos-soluja on helppo viljellä ja ylläpitää laboratoriossa. Niiden soluviljelyvaatimukset ja -olosuhteet ovat yksinkertaiset
Rajoitukset
- In vitro -malli: Ramos-solut eivät välttämättä edusta täysin potilaiden kasvainten geneettistä monimutkaisuutta, mikä rajoittaa niiden soveltuvuutta. Lisäksi Ramos-solulinjaa käyttävien kokeiden tulokset eivät välttämättä vastaa täysin in vivo -olosuhteita, mikä voi johtaa translaatiohaasteisiin
ramos-solujen sovellukset tutkimuksessa
Ramos tarjoaa lupaavia sovelluksia biolääketieteen alalla. Joitakin Ramos-solujen välttämättömiä tutkimuskäyttöjä ovat mm. seuraavat:
- Lymfooman biologia: Ramos-soluja käytetään laajasti lymfooman biologian tutkimiseen. Niitä käytetään lymfaattisten pahanlaatuisten sairauksien taustalla olevien geneettisten ja molekulaaristen tekijöiden tutkimiseen. Lisäksi tutkijat saavat näiden Burkittin lymfoomasolujen avulla tietoa taudin alkamisesta, etenemisestä ja heterogeenisyydestä. Geneettisiä mutaatioita ja signaalireittejä tutkitaan myös, mikä saattaa johtaa tarkempien diagnostisten ja terapeuttisten lähestymistapojen kehittämiseen. Vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa havaittiin, että GCN5:n (General control non-depressible 5) histoniasetyylitransferaasin esto vähentää ihmisen Burkittin lymfoomasolujen (Ramos) kasvainherkkyyttä häiritsemällä BCR-signalointia. Siksi GCN5:tä ehdotetaan toteuttamiskelpoiseksi kohteeksi lymfooman lääkehoidon kehittämiseksi [2].
- Lääkkeiden seulonta ja testaus: Ramos-solulinjaa hyödynnetään laajalti lääkkeiden seulontaan ja testaukseen. Tutkijat arvioivat mahdollisten terapeuttisten yhdisteiden tehoa solujen lisääntymisen ja kasvun estämisessä ja solukuoleman indusoimisessa lymfoomasoluissa. Tämä auttaa tunnistamaan lupaavia lääkeaihioita, mikä helpottaa kohdennettujen hoitojen kehittämistä lymfoomapotilaille. Esimerkiksi tutkimus osoitti, että Annona-hedelmän kuoren, hedelmälihan ja siementen metanolinen uute vaikutti kohtalaisesti, kun taas kloroformiuute vaikutti voimakkaasti Ramos-solujen lisääntymiseen. Näin ollen tutkimuksessa ehdotettiin, että Annona-hedelmät voisivat osoittautua tehokkaiksi lymfooman ehkäisyssä ja hoidossa [3].
Ramos-solut tutkimustasi varten
Ramosin soluja sisältävät julkaisut
Tässä artikkelin osassa luetellaan muutamia mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja, joissa on Ramos-solulinja:
Tämä tutkimus julkaistiin The EMBO -lehdessä vuonna 2018. Tutkimuksessa todettiin, että Ramosin B-solut tarvitsevat Ramos-solujen CD19- ja CD79b-merkkien (BCR-signalointikomponentti Igβ) ilmentymistä kuntoon ja kilpailukykyiseen kasvuun.
Tässä Neoplasia-lehdessä (2021) julkaistussa tutkimuksessa käytettiin Ramos-soluja ja ehdotettiin, että sekalinjan kinaasidomeeni (MLKL) on epigeneettisesti säädelty Burkittin lymfoomasoluissa (Ramos). Näin ollen se on lupaava ennusteellinen markkeri nekroptoosiin liittyvien hoitojen hoitomenestyksen kannalta.
PBK/TOPK:n Tyr74:n fosforylaatio JAK2:n toimesta edistää Burkitt-lymfooman kasvaimen kasvua
Tässä Cancer Letters -lehdessä julkaistussa tutkimusartikkelissa (2022) ehdotettiin, että JAK2/TOPK/histoni H3 -signalointiakselilla on ratkaiseva rooli B-lymfooman solulinjojen lisääntymisessä in vitro.
Tämä artikkeli julkaistiin vuonna 2020 julkaisussa Toxins. Tutkimuksessa ehdotettiin, että verotoksiini-1-käsittely indusoi endoplasmisen retikulumin (ER) stressiä Ramosin B-soluissa. Tämä johtaa apoptoottisen tai selviytymissignaalin käynnistymiseen lymfoomasolulinjoissa.
Tässä Avicenna Journal of Phytomedicine -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa raportoitiin, että luonnollinen yhdiste, silymariini, estää TLR8-geenin (Toll-like receptor 8) ilmentymistä ja apoptoosia Ramos-solulinjassa.
Ramos-solulinjan resurssit: Ramos: protokollat, videot ja muuta
Seuraavassa on muutamia Ramos-solulinjaa koskevia verkkolähteitä:
- Ramos-solujen transfektio: Ramos-solulinjan transfektioprotokolla.
Seuraava linkki sisältää Ramos-soluviljelyprotokollan:
- Ramos-solut: Tämä verkkosivusto sisältää perustietoa Ramos-solulinjasta. Se sisältää myös protokollan Ramos-solujen subkultivoimiseksi sekä proliferoivien ja kryosäilöttyjen viljelmien käsittelemiseksi. Lisäksi saatavilla on tietoja Ramos-solujen elatusaineista, kaksinkertaistumisajasta ja solutiheydestä.
Ramos-soluja koskevat keskeiset näkemykset: Ramos-järjestelmä: Usein kysytyt kysymykset: Usein kysytyt kysymykset: Usein kysytyt kysymykset
Viitteet
- Kerntke, C.G., Analyysi kalvo-IgE:n organisaatiosta ja signalointikyvystä sen vuorovaikutuksessa CD19:n ja CD23:n kanssa B-lymfosyyteissä. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al., GCN5 HAT:n esto vähentää ihmisen Burkittin lymfoomasolujen eloonjäämistä vähentämällä MYC-kohdegeenin ilmentymistä ja estämällä BCR-signalointireittejä. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al., Annona-hedelmän fytokemiallinen profiili ja antioksidatiivinen aktiivisuus sekä sen vaikutus lymfoomasolujen proliferaatioon. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): p. 58-68.