RBL-2H3-solut - RBL-2H3:n merkitys allergisessa vasteessa ja immunologisissa tutkimuksissa
RBL-2H3-solulinja on rottien basofiilinen leukemiasolulinja, jota käytetään immunologisissa tutkimuksissa. Se toimii mallijärjestelmänä mastosolujen fysiologian, käyttäytymisen ja toimintojen tutkimiseen. Näitä soluja käytetään myös allergisten reaktioiden, immunologisten prosessien sekä lääkkeiden testauksen ja kehittämisen tutkimiseen.
Artikkelissa kerrotaan RBL-2H3:n alkuperästä, yleisistä ominaisuuksista, viljelyvaatimuksista ja tutkimussovelluksista.
RBL-2H3-solut: Alkuperää ja yleisiä ominaisuuksia
Ennen kuin käytät basofiilisolulinjaa tutkimuksessasi, sinun on hyvä tietää sen alkuperä ja yleiset ominaisuudet. Tässä artikkelin osassa kerrotaan RBL-2H3-solujen perusasioista. Kuten: Mitä RBL-2H3-mastosolut ovat? Miksi käyttää RBL-2H3-soluja? Mitä RBL-2H3-solut ovat rotan basofiilisessa leukemiassa? Mikä on RBL-2H3-solujen morfologia? Ovatko RBL-2H3-solut kuolemattomia?
- RBL-2H3-solut ovat basofiilisia leukemiasoluja, jotka on johdettu Wistar-rottien basofiilisoluista vuonna 1978 Kansallisen hammaslääketieteellisen tutkimuslaitoksen immunologian laboratoriossa.
- RBL-2H3-soluilla on c-kit-reseptorityrosiinikinaasi- ja syöttösoluproteaasi II (RMCP-II) -reseptorit, mikä tekee niistä mahdollisen syöttösolumallin. Siksi niitä kutsutaan yleisesti mastosoluiksi, vaikka ne ovat peräisin rotan basofiileistä [1].
- Ne vapauttavat histamiinia ja muita välittäjäaineita aktivoituessaan ja ilmentävät korkea-affiniteettisia IgE-reseptoreita.
- RBL-2H3-soluilla on fibroblastien kaltainen morfologia.
RBL-2H3-solut: RBL-2R-2: Viljelytiedot
Tässä osiossa kerrotaan joitakin RBL-2H3-solulinjan viljelyyn liittyviä keskeisiä seikkoja. Saat tietää: Mikä on RBL-2H3-solujen kaksinkertaistumisaika? Mikä on RBL-2H3-solujen kylvötiheys? Mikä on RBL-2H3-soluviljelyprotokolla? Mikä on RBL-2H3-solulinjan pakastusmedia?
RBL-2H3-solujen viljelyä koskevat tärkeimmät seikat
|
Populaation kaksinkertaistumisaika: |
RBL-2H3-mastosolujen kaksinkertaistumisaika on noin 50-60 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
RBL-2H3 on tarttuva solulinja. |
|
Osaviljelysuhde: |
RBL-2H3-solujen jakosuhde pidetään välillä 1:2-1:4. Tarttuvat solut pestään magnesium- ja kalsiumvapaalla 1 x PBS-liuoksella. Lisätään Accutase-passaging-liuosta, ja soluja pidetään huoneenlämmössä 10 minuuttia, jotta ne irtoavat viljelyastian pohjasta. Lisätään tuoretta elatusainetta, ja solut sentrifugoidaan. Kerätyt solut suspendoidaan varovasti uudelleen tuoreeseen elatusaineeseen ja kaadetaan uusiin kasvualustaa sisältäviin pulloihin. |
|
Kasvualusta: |
RBL-2H3-solujen viljelyyn käytetään EMEM-mediaa, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2 mM L-Glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3:a ja EBSS-suolaa. Kasvualusta on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
RBL-2H3-soluja viljellään kostutetussa inkubaattorissa, joka on asetettu 37 °C:n lämpötilaan ja kytketty 5 %:nCO2-lähteeseen. |
|
Varastointi: |
Solut säilytetään nestemäisen typen höyryfaasissa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä pakastimessa solujen elinkelpoisuuden suojaamiseksi pitkällä aikavälillä. |
|
Pakastusprosessi ja -media: |
RBL-2H3-solujen jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa käyttäen hidasta jäädytysprosessia. Lyhyesti sanottuna tämä menetelmä mahdollistaa 1 °C:n lämpötilan laskun minuutissa ja suojaa soluja sokilta. |
|
Sulatusprosessi: |
RBL-2H3-solut sulatetaan esiasetetussa vesihauteessa (37 °C) noin 60 sekunnin ajan. Tämän jälkeen solut lisätään tuoreeseen elatusaineeseen ja sentrifugoidaan. Tämä vaihe on välttämätön jäädytysmedian komponenttien poistamiseksi. Seuraavaksi solupelletti suspendoidaan uudelleen kasvualustaan, ja solut annostellaan kolviin viljelyä varten. |
|
Bioturvallisuustaso: |
RBL-2H3-soluja olisi säilytettävä bioturvallisuustaso 1 -laboratorioissa. |
RBL-2H3 basofiilisen solulinjan edut ja rajoitukset
RBL-2H3-soluja käytetään yleisesti immunologisissa tutkimuksissa. Tässä jaksossa esitetään niiden tärkeimmät edut ja rajoitukset.
Edut
- Helppo viljellä: RBL-2H3-soluja voidaan helposti viljellä ja ylläpitää laboratorioympäristössä. Tämä helpottaa kustannustehokkaita ja toistettavia kokeita, mikä tekee niistä suositun valinnan immunologian alkututkimuksiin.
Rajoitukset
- Muualta kuin ihmisestä peräisin olevat solut: RBL-2H3-solut eivät välttämättä jäljittele tarkasti ihmisen biologisia prosesseja, mikä voi rajoittaa niiden soveltuvuutta ihmiskohtaisiin tutkimuksiin. Tämä edellyttää tietojen varovaista tulkintaa, kun tuloksia ekstrapoloidaan ihmisjärjestelmiin.
- Yksinkertaistettu syöttösolumalli: Vaikka nämä solut tarjoavat perusmallin syöttösolujen toimintojen tutkimiseen, ne eivät täysin edusta syöttösolujen vuorovaikutuksen monimutkaista luonnetta ihmisen immuunijärjestelmässä. Näin ollen ne eivät välttämättä mallinna riittävästi mastosolujen monitahoista roolia immuunivasteissa tai sairaustiloissa in vivo.
RBL-2H3-solulinja: Immunologisen tutkimuksen kulmakivi
Basofiilien ja syöttösolujen tutkimus RBL-2H3-solulinjaa käyttäen
Rattus norvegicus-lajista peräisin oleva RBL-2H3-solulinja toimii keskeisenä mallina basofiilien ja syöttösolujen biologian tutkimisessa. Nämä rotan syöttösolut tarjoavat keskeistä tietoa syöttösolujen välittäjäaineiden vapautumisesta, mikä on ratkaisevan tärkeää allergisten tilojen, kuten allergisen nuhan, ymmärtämiseksi. Näiden solujen avulla tutkijat tutkivat solureseptorien dynamiikkaa ja immunologisten synapsien muodostumista, jotka ovat keskeisiä immuunijärjestelmän vasteessa allergeeneille. 2019 julkaistussa mielenkiintoisessa tutkimuksessa käytettiin RBL-2H3-solulinjaa ja tutkittiin mekanismeja Qingkailing-injektion tuottamien pseudoallergisten reaktioiden taustalla. Tutkimuksessa havaittiin, että PI3K-RAC1-signalointikaskadi saa osittain aikaan tämän allergisen vasteen soluissa [2]
Immunologisen synapsin dynamiikka allergiatutkimuksessa
RBL-2H3-solut, joita käytetään laajasti immunologisessa tutkimuksessa, ovat erityisen tehokkaita immunologisen synapsidynamiikan tutkimiseen. Tämä auttaa selvittämään immuunijärjestelmän viestintäprosesseja, ja sitä voidaan soveltaa sekä perifeerisen veren että peritoneaalisten syöttösolujen tutkimiseen. Tällainen tutkimus on elintärkeää immuunivasteen kokonaisvaltaisen ymmärtämisen kannalta sekä systeemisissä että paikallisissa yhteyksissä
Lääkkeiden seulonta ja myrkyllisyyden testaus
Lääkkeiden seulonnassa ja testauksessa hyödynnetään RBL-solujen reagointikykyä erilaisiin ärsykkeisiin, mukaan lukien tutkimus siitä, miten H2O2 estää IgE-välitteisiä vasteita. Näillä soluilla on tärkeä rooli kehitettäessä hoitoja sairauksiin, kuten streptokokki-infektioihin, joissa mitis-ryhmän streptokokit estävät syöttösolujen aktivoitumista. Tämän lisäksi tutkijat arvioivat erilaisten aineiden, kuten kemikaalien, lääkkeiden ja nanohiukkasten, toksisia vaikutuksia tämän RBL 2H3 mc -mallin avulla. Esimerkiksi äskettäisessä tutkimuksessa (2022) arvioitiin polystyreenimikromuovien sytotoksisuutta RBL-2H3-soluihin. He havaitsivat, että mikromuovit vaurioittavat RBL-2H3-solun organelleja ja edistävät solukuolemaa [3]. Toisessa vuonna 2021 tehdyssä tutkimuksessa arvioitiin luonnontuotteen, neferiinin, antiallergista ja anti-inflammatorista potentiaalia käyttäen RBL 2H3 -mc-mallia. Tutkimus paljasti yhdisteen hyvät antiallergiset ja anti-inflammatoriset ominaisuudet [4]
Immunologisten mittausten kehittyneet menetelmät
RBL-2H3-soluista vapautuvien välittäjäaineiden johdonmukainen ja mitattavissa oleva vapautuminen tekee niistä ihanteellisia sopivaan fluorimetriaan, mikä helpottaa täsmällisiä ja tarkkoja mittauksia, jotka ovat ratkaisevan tärkeitä sairauksien tutkimisessa ja terapeuttisten aineiden arvioinnissa.
RBL-2H3-solulinja, joka on peräisin Rattus norvegicus-lajista, on korvaamaton voimavara sekä immunologian alan perus- että soveltavassa tutkimuksessa. Se tarjoaa syvällisiä mahdollisuuksia immunologisten sairauksien tuntemuksen ja hoidon edistämiseen
RBL-2H3-solulinja kehittyneeseen immunologiseen tutkimukseen
RBL-2H3-solut: RBL2R-2H2: Tutkimusjulkaisut: Tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on joitakin jännittäviä tutkimusjulkaisuja, joissa käsitellään RBL-2H3-mastosoluja:
RBL-2H3-solujen degranulaatiota estävä narirutiinin vaikutus RBL-2H3-solujen degranulaatioon
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Immunopharmacology and Immunotoxicology -lehdessä (2021). Tutkimuksessa ehdotettiin, että narirutiini, luonnollinen yhdiste, vaikuttaa inhiboivasti RBL 2H3:n degranulaatioon säätelemällä NF-κB:tä, MAPK:ta ja tyrosiinikinaasin signaalireittiä.
Tässä International Journal of Molecular Sciences -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että apigeniiniyhdiste tukahduttaa merkittävästi RBL-2H3- ja RAW264.7-solujen allergisia ja tulehdusreaktioita. Siksi se voi toimia potentiaalisena aineena immuunijärjestelmään liittyvien sairauksien torjunnassa.
Tässä International Journal of Molecular Sciences -lehdessä (2021) julkaistussa tutkimusartikkelissa arvioitiin luonnontuotteen, saponariinin, antiallergisia ja anti-inflammatorisia vaikutuksia käyttäen eri solulinjoja, mukaan lukien RBL-2H3.
Tässä näyttöön perustuvassa täydentävän ja vaihtoehtoisen lääketieteen tutkimuksessa (2014) todettiin, että Benchalokawichian-uutteilla ja joillakin aktiivisilla ainesosilla on potentiaalisia estäviä vaikutuksia RBL 2H3:n ß-heksosaminidaasin vapautumiseen.
Tämä artikkeli julkaistiin vuonna 2018 International Journal of Biological Macromolecules -lehdessä. Tutkimuksessa todettiin, että spirulina maxima, luonnontuote, estää RBL 2H3:n degranulaatiota estämällä MAPKs- ja AKT-fosforylaatiota.
RBL-2H3-solulinjaa koskevat resurssit: RBL2R-2H2: protokollat, videot ja muuta
RBL-2H3 on laajalti käytetty syöttösolulinja. Käytettävissä olevat resurssit, jotka kattavat RBL-2H3:n viljely- ja transfektioprotokollat, mainitaan tässä:
- RBL 2H3 MC-malli: Tämä tutkimusartikkeli sisältää RBL-2H3-viljelmien ylläpitoon ja RBL-2H3-transfektioon liittyvät protokollat.
Tässä on joitakin resursseja, joissa selitetään RBL-2H3-soluviljelyprotokollaa:
- RBL-2H3-solut: RBL-2H3-solulinjan soluviljelyprotokollien oppimisessa on hyötyä tästä verkkosivustosta. Lisäksi se sisältää tietoa RBL 2H3-solujen väliaineista ja viljelyolosuhteista.
RBL-2H3-solulinja: RBL2 RBL: Essential FAQs for Researchers: Essential FAQs for Researchers (usein kysytyt kysymykset tutkijoille)
Viitteet
- Passante, E. ja N. Frankish, RBL-2H3-solulinja: sen alkuperä ja soveltuvuus syöttösolujen malliksi. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Qingkailing-injektion aiheuttama pseudoallerginen reaktio osittain PI3K-Rac1-signalointireitin kautta RBL-2H3-soluissa. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Polystyreenimikro(nano)muovit vahingoittavat RBL-2H3-solujen organelleja ja edistävät MOAP-1:n indusoimaa apoptoosia. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Neferiinin antiallergiset ja anti-inflammatoriset vaikutukset RBL-2H3-soluihin. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.