NCI-H1299-solut: NCI-H1299-keuhkosyöpäsolujen tutkimus ja kliiniset vaikutukset: NCI-H1299-keuhkosyöpäsolujen tutkimus ja kliiniset vaikutukset
NCI-H1299 on kuolematon ihmisen ei-pienisoluisen keuhkosyövän solulinja, jota käytetään laajalti immunosykologian, syövän ja lääkekehityksen tutkimuksessa. Lisäksi tutkijat ovat käyttäneet näitä soluja tutkiakseen lääkeherkkyyttä, taustalla olevia signaalireittejä ja keuhkosyöpään liittyviä molekyylimekanismeja. Lisäksi näitä soluja käytetään virusinfektioiden, kuten SARS-CoV-2:n, tutkimiseen.
NCI-H1299-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Ensimmäinen asia, joka solulinjasta on hyvä tietää, on sen alkuperä ja yleiset ominaisuudet, sillä ne auttavat sinua suunnittelemaan sen käyttöä tutkimuksessasi. Tämä artikkelin osa auttaa sinua oppimaan joitakin tärkeitä tietoja NCI-H1299:n alkuperästä ja ominaisuuksista. Esimerkiksi, mitä ovat NCI-H1299-keuhkosyöpäsolut? Minkä tyyppinen solu on NCI-H1299? Mikä on NCI-H1299-solujen koko? Mitä eroa on A549- ja NCI-H1299-soluilla?
- NCI-H1299-solulinja on peräisin 43-vuotiaan valkoihoisen miespotilaan keuhkosyövän imusolmukemetastaasista.
- Näillä soluilla on p53-geenin homotsygoottinen osittainen deleetio, joten ne eivät ilmentäisi p53-proteiinia. NCI-H1299:n p53-proteiinin ilmentymisen puute vaikuttaa osaltaan H1299-keuhkosyöpäsolujen proliferatiiviseen taipumukseen.
- P53:n lisäksi näillä kuolemattomilla soluilla on raportoitu olevan NCI-H1299 KRAS-mutaatio, joka on vastuussa niiden kasvusta, proliferaatiosta, migraatiosta ja invasiosta.
- NCI-H1299:n karyotyyppi on lähes diploidi.
- NCI-H1299-soluilla on epiteelisolujen kaltainen morfologia.
- Nämä solut ovat litteitä, ja niiden paksuus on alle 5 µm.
NCI-H1299 ja A549
NCI-H1299 ja A549 ovat muita kuin pieniä keuhkosyöpäsolulinjoja. NCI-H1299-solut ovat aggressiivisempia ja herkempiä kuin A549-solut. Molemmissa on suhteellisen samanlaisia mutaatioita, kuten KRAS. Toisin kuin NCI-H1299-solut, A549-solut ilmentävät kuitenkin P53-geeniä.
Viljelytiedot
Solulinjaviljelmän ylläpitäminen ei ole helppoa, ennen kuin tiedät kaikki sitä koskevat keskeiset tiedot, kuten: Mikä on NCI-H1299:n kaksinkertaistumisaika? Mikä on NCI-H1299:n kylvötiheys? Mikä on NCI-H1299-solualusta? Miten NCI-H1299-solulinjoja viljellään? Tässä osiossa saat vastaukset kaikkiin näihin NCI-H1299-solujen viljelyä koskeviin kysymyksiin.
NCI-H1299-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
NCI-H1299-solujen kaksinkertaistumisaika vaihtelee 22-30 tunnin välillä. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
NCI-H1299 on tarttuva solulinja. |
|
Osaviljelysuhde: |
NCI-H1299-soluja subkultivoidaan suositellussa suhteessa 1:3-1:6. Kylvöä varten adherentit solut pestään 1x PBS:llä ja inkuboidaan Accutase passaging -liuoksella 8-10 minuuttia huoneenlämmössä. Irronneet solut lisätään tuoreeseen elatusaineeseen ja sentrifugoidaan. Solupelletti suspendoidaan uudelleen ja solut kaadetaan uusiin kasvualustaa sisältäviin pulloihin. |
|
Kasvualusta: |
RPM1 1640 on ihanteellinen NCI-H1299-solujen kasvatusmedia. Se on täydennetty 10 %:lla naudan sikiöseerumia, 4500 mg/l glukoosia, 2,0 mM L-glutamiinia, 1 mM natriumpyruvaattia, 1500 mg/l NaHCO3:a ja 10 mM HEPES:ää. Väliaine on uusittava 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
NCI-H1299-keuhkosyöpäsoluviljelmiä pidetään kostutetussa inkubaattorissa 37 °C:n lämpötilassa, jossa on 5 % CO2. |
|
Varastointi: |
NCI-H1299-solulinja voidaan säilyttää pitkäaikaisesti nestemäisen typen höyryfaasissa tai ultramatalan lämpötilan pakastimissa alle -150 °C:n lämpötilassa. |
|
Pakastusprosessi ja -media: |
CM-1 tai CM-ACF ovat NCI-H1299-solujen pakastusmedioita. Solut pakastetaan käyttämällä hidasta pakastusprosessia, joka sallii vain yhden asteen lämpötilan laskun minuutissa solujen elinkelpoisuuden suojelemiseksi. |
|
Sulatusprosessi: |
Jäädytettyjä NCI-H1299-soluja sekoitetaan nopeasti esilämmitetyssä vesihauteessa 37 celsiusasteen lämpötilassa 40-60 sekunnin ajan, kunnes pieni jääpala jää jäljelle. Sulatetut solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen ja niitä voidaan viljellä suoraan uusissa pulloissa tai sentrifugoida. Ensin mainitussa tapauksessa väliaine on vaihdettava 24 tunnin inkubaation jälkeen. Sentrifugointi auttaa poistamaan jäätyvät väliaineen osat. Sen jälkeen kerätyt solut suspendoidaan uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja annostellaan uuteen kolviin viljelyä varten. |
|
Bioturvallisuustaso: |
NCI-H1299-soluviljelmien käsittelyyn tarvitaan bioturvallisuustaso 1 -laboratorio. |
Osta NCI-H1299-solulinja: Korkealaatuiset tutkimusvälineet keuhkosyövän biologian tutkimiseen
NCI-H1299-solujen edut ja haitat
Kuten muillakin ihmisen syöpäsolulinjoilla, myös NCI-H1299-soluilla on joitakin erottuvia ominaisuuksia, joihin liittyy erityisiä etuja ja haittoja. Tässä on esitetty yhteenveto muutamista merkittävistä ominaisuuksista.
Edut
NCI-H1299 ei-pienisoluisen keuhkosyövän solulinjan tärkeimmät edut ovat:
-
In vitro keuhkosyöpämalli
NCI-H1299-solulinjat on kehitetty keuhkosyövän imusolmukemetastaaseista, joten niillä on suhteellisen samanlaiset ominaisuudet. Siksi nämä solut voivat toimia in vitro -mallina keuhkosyövän biologian, solu- ja molekyylimekanismien tutkimisessa sekä mahdollisten terapeuttisten aineiden seulomisessa ja testaamisessa.
-
Helppo viljellä
NCI-H1299-soluja on helppo viljellä ja ylläpitää tutkimuslaboratoriossa. Huolellisia soluviljelyvaatimuksia ja -menettelyjä ei ole.
-
NCI-H1299 P53 ja NCI-H1299 KRAS-mutaatio
NCI-H1299-soluista puuttuu p53-geenin ilmentyminen, mikä mahdollistaa solujen voimakkaan lisääntymisen. Lisäksi niillä on KRAS-mutaatio, joka edistää solujen kasvua, lisääntymistä, invaasiota ja migraatiota. Nämä seikat huomioon ottaen tutkijat käyttävät H1299-soluja KRAS- ja P53-mutaatioihin liittyvien molekyylimekanismien tutkimiseen.
Haitat
NCI-H1299-solujen haitat ovat seuraavat:
-
Kudospesifisyys
NCI-H1299 on peräisin keuhkokudoksesta. Siksi sen soveltuvuus rajoittuu lähinnä keuhkokarsinooman tutkimukseen. Se ei välttämättä edusta täysin muiden syöpätyyppien heterogeenisuutta ja yleisiä ominaisuuksia.
NCI-H1299-solujen tutkimussovellukset
NCI-H1299-solulinjaa käytetään laajalti keuhkosyöpätutkimuksessa. Tässä mainitaan muutamia tämän solulinjan lupaavia sovelluksia.
- Syöpäbiologia: NCI-H1299-solut toimivat erinomaisena tutkimusvälineenä syövän kehityksen, etenemisen ja niihin liittyvien solu- ja molekyylimekanismien tutkimisessa. Nämä solut varustautuvat tietyillä mutaatioilla, minkä ansiosta tutkijat voivat tutkia syöpäsolujen käyttäytymistä, signaalireittejä ja geeniekspressioprofiileja. Useissa tutkimuksissa on käytetty NCI-H1299-pienisoluista keuhkosyöpäsolulinjaa keuhkosyövän biologian tutkimiseen. Esimerkiksi vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa tutkittiin keuhkosyöpäsolujen apoptoosiin osallistuvia signaalireittejä NCI-H1299-solujen avulla. Tutkijat havaitsivat, että PI3K/AKT-reitti edistää solujen lisääntymistä, ja sen estäminen voi aiheuttaa syöpäsolujen kuoleman [1]. Samoin toisessa tutkimuksessa tutkittiin NCI-H1299-solujen epiteeli-mesenkymaaliseen siirtymään (EMT) liittyviä mekanismeja. Tässä tutkimuksessa ehdotettiin, että solunulkoinen proteiini SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) vaikuttaa NCI-H1299 EMT:hen ja migraatioon ja edistää siten kasvainten syntyä soluissa - SPARC-proteiini toimii TGF-β1-signaalin välittäjänä [2].
- Lääkkeiden löytäminen ja seulonta: NCI-H1299 on ihmisen keuhkosyöpäsolulinja, jota käytetään laajalti mahdollisten lääkkeiden toksisuuden ja tehokkuuden arviointiin. Lisäksi tutkijat käyttävät sitä kasvainlääkkeiden vaikutusmekanismien tutkimiseen. Tutkimuksissa näitä soluja on käytetty myös mahdollisten lääkekohteiden ja resistenssimekanismien tunnistamiseen. Esimerkiksi Xiao-Yun Shenin ja kollegoiden tekemässä tutkimuksessa selvitettiin luonnollisen yhdisteen Bruceine D:n (BD) syöpää ehkäisevää potentiaalia. Tulokset osoittivat, että BD estää merkittävästi NCI-H1299-solujen proliferaatiota, invaasiota ja migraatiota. Siksi sitä voidaan pitää mahdollisena liitännäishoitona ei-pienisoluisen keuhkosyövän hoidossa [3]. Vastaavasti tutkimuksessa arvioitiin ksantohumolin sytotoksisia vaikutuksia yksinään ja yhdessä sisplatiinikemoterapeuttisen lääkkeen kanssa NCI-H1299-keuhkosyöpäsoluihin [4].
NCI-H1299-soluja sisältävät tutkimusjulkaisut
Tässä on joitakin merkittäviä ja eniten siteerattuja tutkimusjulkaisuja NCI-H1299-keuhkokarsinoomasolulinjasta.
Tämä artikkeli on julkaistu Human and Experimental Toxicology -lehdessä (2021). Tutkimuksessa ehdotettiin, että indoli-3-karbinoli indusoi apoptoosia H1299-syövän soluissa reaktiivisten happilajien (ROS) tasojen nousun kautta.
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2018 Cellular Physiology and Biochemistry -lehdessä. Tutkimustulokset paljastivat, että kahvihapon ja paklitakselin yhdistelmällä on synergistinen syövänvastainen vaikutus ei-pienisoluisen keuhkosyövän solulinjassa NCI-H1299.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Molecular Medicine Reports -lehdessä (2018). Tutkimuksessa arvioitiin triterpenoidisaponiini tubeimosidi-1:n kasvainvastaista vaikutusta ja sen taustalla olevia mekanismeja NCI-H1299-solulinjassa.
Pristimerin indusoi apoptoosia ja estää proliferaatiota, migraatiota H1299-keuhkosyöpäsoluissa
Tässä Journal of Cancer -lehdessä (2020) julkaistussa artikkelissa ehdotetaan, että Pristimerin, luonnollinen yhdiste, estää NCI-H1299-solujen proliferaatiota ja migraatiota.
Ihmisen keuhkojen adenokarsinooma H1299 -solujen VIPR1-geenin säätelymekanismi
Tässä Medical Oncology -lehdessä (2019) julkaistussa tutkimuksessa tutkittiin VIPR1-geenin yliekspression mahdollisia vaikutuksia NCI-H1299-adenokarsinoomasolulinjaan.
NCI-H1299-solulinjan resurssit: Protocols, Videos, and More
Seuraavassa on joitakin NCI-H1299-solulinjaa esitteleviä online-resursseja.
- NCI-H1299 transfektio: Tämä video selittää NCI-H1299-solulinjan ohimenevän transfektioprotokollan protokollan.
- Tarttuvan solulinjan subkultivointi: Tämä video auttaa sinua oppimaan adheerisen solulinjan yleisen subkulturointimenettelyn.
Seuraavassa linkissä on tietoa NCI-H1299-solujen soluviljelystä.
- NCI-H1299-solulinja: Tämä linkki auttaa sinua tutustumaan NCI-H1299-solujen passage- ja transfektioprotokollaan.
Usein kysytyt kysymykset NCI-H1299-solulinjasta
Viitteet
- Gu, J., et al., Tutkimus EGCG:n aiheuttamasta apoptoosista keuhkosyöpäsoluissa estämällä PI3K/Akt-signalointireittiä. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC toimii TGF-β1:n välittäjänä edistettäessä epiteeli-mesenkymaalista siirtymää A549- ja H1299-keuhkosyöpäsoluissa. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Tutkimus Bruceine D:n mekanismista ei-pienisoluisen keuhkosyövän H1299-solujen hoidossa. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Xanthohumolin ja sen ja sisplatiinin yhdistelmän sytotoksiset vaikutukset ihmisen metastaattiseen keuhkosyöpä H1299-soluihin. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.