INS-1-solulinja

INS-1 on hyvin karakterisoitu rotan insulinoomasolulinja, jota käytetään laajalti diabetestutkimuksessa. INS-1-solut erittävät insuliinia glukoosistimulaation yhteydessä, joten niitä käytetään glukoosiaineenvaihdunnan, beetasolujen fysiologian ja insuliinin erityksen säätelyn tutkimiseen. Lisäksi näitä soluja hyödynnetään myös diabeteksen mahdollisten hoitomuotojen seulonnassa, testauksessa ja kehittämisessä.

Tämä artikkeli antaa sinulle kaikki tarvittavat tiedot INS-1-beetasoluista, jotka sinun on tiedettävä ennen niiden käyttöä tutkimuksessasi. Pääasiassa opit seuraavat asiat:

INS-1-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
INS-1-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot
INS-1-solulinjan edut ja haitat
INS-1-rottien insulinoomasolujen tutkimussovellukset
Tutkimusjulkaisut, joissa on INS-1-beetasoluja
INS-1-solulinjan resurssit: INS INS-1-1-1: protokollat, videot ja muut: protokollat, videot ja muut

1. INS-1-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä

Tieto solulinjan yleisistä ominaisuuksista ja alkuperästä voi suuresti auttaa sinua käyttämään sitä tehokkaasti ja tuloksellisesti tutkimuksessasi. Tämä artikkeliosio antaa sinulle tietoa INS-1-alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista. Saat tietää: Mikä on rotan INS-1 Insulinoma-solulinja? Mitkä ovat INS-1:n yleiset ominaisuudet? Mikä on INS-1 832/3 -solulinja? Mikä on INS-1E?

INS-1-solut eristettiin alun perin 666 päivän ikäisestä rotasta, jolla oli röntgensäteilyllä aiheutettu siirrettävä insulinooma.
INS-1-solut ovat bi-hormonaalisia. Ne ilmentävät samanaikaisesti insuliini- ja proglukagoniproteiineja. Näitä soluja pidetään epäkypsinä, koska niissä on alhainen Nkx6.1-transkriptiotekijän ilmentymistaso ja niistä puuttuvat alfasolumerkkiaineet [1].
INS-1-soluista on olemassa kaksi alakloonia, INS-1E ja INS-1 832/3.
INS-1E eroaa kantasolulinjasta INS-1 sihteerivasteiden osalta glukoosiin ja insuliinipitoisuuteen.
INS-1 832/3 tai INS-1 832/13 on myös INS-1-solulinjan alaklooni. Se on korvaamaton malli haiman saarekkeen beetasolujen toiminnan ja insuliinin erityksen säätelyn tutkimiseen. Se eroaa INS-1-alkuperäsoluista myös glukoosistimuloidun insuliinin erityksen (GSIS) osalta.

insuliinivälitteisen glukoosinoton 3D-mallinnus.

2. INS-1-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot

Jotta voit käsitellä ja ylläpitää solulinjaa tehokkaasti, sinun on tiedettävä seuraavat sitä koskevat viljelytiedot. Tässä artikkelin osassa käsitellään kaikki INS-1-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat. opit: Miten INS-1-beetasoluja viljellään? Mikä on INS-1-soluviljelyprotokolla? Mikä on INS-1-solujen kaksinkertaistumisaika? Mikä on INS-1-rotan insulinoomasolujen solualusta?

INS-1-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat

Kaksinkertaistumisaika:	INS-1-solujen populaation kaksinkertaistumisaika on noin 44 tuntia.
Adheesiossa tai suspensiossa:	INS-1-solut kasvavat sekä suspensiossa että adheesiomuodossa.
Osaviljelysuhde:	INS-1-soluja subkultivoidaan jakosuhteella 1:3. Lyhyesti sanottuna suspensiosolut kerätään. Tarttuvat solut huuhdellaan PBS:llä ja inkuboidaan Accutase-liuoksen kanssa. Irrotuksen jälkeen solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen. Tämän jälkeen sekä suspendoituneet että adheesiosolut sentrifugoidaan ja kerätään. Solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja annostellaan uusiin pulloihin kasvua varten.
Kasvualusta:	INS-1rat-insulinoomasolulinjan viljelyyn käytetään RPM1 1640 -nestettä. Väliaineeseen lisätään 10 % lämpöinaktivoitua naudan sikiöseerumia, 2,1 mM stabiilia glutamiinia, 10 mM HEPES:ää, 2,0 g/l NaHCO3:a ja 1 mM natriumpyruvaattia.
Kasvuolosuhteet:	INS-1-soluja pidetään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on 37 °C ja jossa on jatkuva 5 %:n hiilidioksidipitoisuus.
Säilytys:	INS-1-beetasoluja voidaan säilyttää nestemäisen typen höyryfaasissa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä pakastimessa pitkällä aikavälillä.
Pakastusprosessi ja väliaine:	INS-1-solujen jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-mediaa hitaan jäädytysprosessin avulla. Se sallii vain 1 °C:n lämpötilan laskun minuutissa solujen elinkelpoisuuden suojelemiseksi.
Sulatusprosessi:	Jäädytetyt INS-1-solut sulatetaan vesihauteessa, joka on esiasetettu 37 celsiusasteen lämpötilaan 40-60 sekunnin ajaksi. Sulattamisen jälkeen solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen ja kaadetaan suoraan uuteen pulloon kasvattamista varten. Vuorokauden kuluttua väliaine vaihdetaan, jotta jäädytysmedian komponentit saadaan poistettua.
Bioturvallisuustaso:	INS-1-rottien insulinoomasolujen viljelyyn tarvitaan bioturvallisuustason 1 laboratorio.

INS-1-solut kasvavat saarekkeissa 10-kertaisella ja 20-kertaisella suurennoksella.

3. iNS-1-solulinjan edut ja haitat

Kuten muillakin solulinjoilla, myös INS-1:llä on joitakin erityispiirteitä, joihin liittyy tiettyjä etuja ja haittoja. Olemme maininneet tässä muutamia merkittäviä niistä.

Edut

INS-1-solulinjan tärkeimmät edut ovat:

Hyvin karakterisoitu
INS-1 on vakiintunut ja hyvin karakterisoitu solulinja. Sitä on käytetty lukuisissa tutkimuksissa. Se säilyttää fenotyyppiset ominaisuutensa ja insuliinin erityskykynsä pidemmän ajanjakson ajan, mikä mahdollistaa luotettavat ja johdonmukaiset koetulokset.
Beetasolumalli
INS-1-soluja käytetään haiman saarekkeen beetasolujen toiminnan tutkimiseen, sillä ne erittävät insuliinia ja reagoivat glukoosipitoisuuden vaihteluihin.

haitat

INS-1-solujen haittoja ovat:

Ei ihmisperäinen alkuperä
INS-1-beetasolut ovat peräisin muusta kuin ihmisestä. Ne on saatu rotan insulinoomasta. Tämä voi aiheuttaa lajikohtaisia eroja ja rajoittaa kokeellisten tulosten suoraa siirtämistä ihmisen fysiologiaan.

4. INS-1-rotan insulinoomasolujen tutkimussovellukset

INS-1-beetasoluja käytetään laajasti diabetestutkimuksessa. Tässä mainitaan muutamia tämän solulinjan lupaavia sovelluksia.

Insuliinin eritystutkimukset: INS-1-soluilla on insuliininerityskyky, ja siksi niitä käytetään laajasti insuliinin erityksen taustalla olevien solumekanismien tutkimiseen. Tutkijat tutkivat insuliinin vapautumiseen vaikuttavia keskeisiä tekijöitä, kuten glukoosiaineenvaihduntaa, signaalireittejä, hormoneja ja farmakologisia aineita. Eräässä tutkimuksessa havaittiin, että K + ATP-ionikanavasta riippuvainen reitti säätelee insuliinin eritystä INS-1-beetasoluissa [2]. Lisäksi tutkimukset ovat paljastaneet, että GLP-1R- ja AKT/PDX1-reitit osallistuvat myös insuliinin eritykseen INS-1-rottien insulinoomasoluissa [3].
Beetasolujen toimintatutkimukset: INS-1-soluilla on haiman saarekkeen beetasolujen kaltaisia ominaisuuksia, kuten herkkyys glukoosiaineenvaihdunnalle ja insuliinin eritys. Siksi niitä käytetään beetasolujen fysiologisten prosessien ja toimintojen tutkimiseen. Vuonna 2022 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin INS-1-soluja ja kehitettiin _H2O2_:navulla beetasolujen toimintahäiriömalli. Niissä tutkittiin solujen elinkelpoisuutta, insuliinin eritystä ja oksidatiiviseen stressiin liittyviä merkkiaineita näissä soluissa vasteena luonnollisella yhdisteellä tehtävälle hoidolle [4].
Lääkkeiden löytäminen ja kehittäminen: INS-1-rottien insulinoomasoluja käytetään laajalti diabeteksen vastaisten yhdisteiden tai lääkkeiden seulontaan ja testaamiseen. Niitä voidaan käyttää terapeuttisten aineiden mahdollisten vaikutusten tutkimiseen insuliinin eritykseen ja muihin merkityksellisiin parametreihin. Eräässä tutkimuksessa havaittiin, että loganiini, joka on kiinalaisen kasviperäisen kaavan komponentti, suojasi INS-1-solujen insuliinin eritystoimintaa ja että sillä oli mahdollisia diabeteksen vastaisia vaikutuksia. Komponentti välitti nämä suotuisat vaikutukset estämällä FOXO1-geenin ydintranslokaatiota PI3K/AKT-reitin kautta [5].

550,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300471

5. Tutkimusjulkaisut, joissa INS-1-beetasolut

Tässä on joitakin merkittäviä tutkimusjulkaisuja, joissa käytetään INS-1-rotan insulinoomasolulinjaa.

Alfa-mangostiini parantaa insuliinin eritystä ja suojaa INS-1-soluja streptotsotokiinin aiheuttamilta vaurioilta

Tämä tutkimus julkaistiin Internation Journal of Molecular Sciences -lehdessä vuonna 2018. Tutkimuksessa ehdotettiin, että keltainen kiteinen luonnollinen yhdiste, alfa-mangostiini, edistää insuliinin eritystä INS-1-beetasoluissa ja suojaa niitä beetasolujen toksiinin streptotsotosiinin aiheuttamilta vaurioilta.

Epikatekiini ei ole riippuvainen INS-1-solujen glukoosistimuloidun insuliinin erityksen tehostumisesta sen antioksidanttisesta aktiivisuudesta

Tämä tutkimus julkaistiin acta pharmacologica sinica -lehdessä vuonna 2018. Tutkimustulos paljasti, että epikatekiiniyhdiste edistää glukoosistimuloitua insuliinin eritystä tyydyttyneiden rasvahappojen heikentämissä INS-1-beetasoluissa CaMKII-reitin aktivoinnin kautta.

Stevia rebaudiana Bertonin vastikään löydetty fenyylietanoidiglykosidi vaikuttaa insuliinin eritykseen rotan INS-1-saarekkeen β-soluissa

Tässä Molecules-lehdessä (2019) julkaistussa artikkelissa ehdotettiin, että uusi luonnollinen yhdiste fenyylietanoidiglykosidi vaikuttaa insuliinin eritykseen rotan INS-1-insuliinisoluissa, ja sillä on näin ollen diabeteksen vastainen potentiaali.

Loureirin B edistää insuliinin eritystä GLP-1R- ja AKT/PDX1-reittien kautta

Tämä tutkimus julkaistiin European Journal of Pharmacology -lehdessä (2022). Tutkimuksessa ehdotettiin, että luontaistuote Loureirin B tehostaa insuliinin eritystä INS-1-haiman saarekkeen beetasoluissa AKT/PDX1- ja GLP-1R-reittien moduloinnin kautta.

Withania coagulansin in vitro syöpälääkkeiden vaikutus HeLa-, MCF-7-, RD-, RG2- ja INS-1-syöpäsoluihin sekä fytokemiallinen analyysi

Tässä Integrative Medicine Research (2018) -artikkelissa arvioitiin Withania coagulans -uutteen syöpälääkkeiden potentiaalia INS-1-syöpäsolujen avulla.

6. INS-1-solulinjan resurssit: INS-1-1: protokollat, videot ja muut

Tässä on joitakin INS-1-soluja esitteleviä verkkoresursseja:

Suspensiosolujen subkultivointi: Tämä video on kattava opas suspensioviljelmissä kasvavien solujen subkulturoinnista.
Tarttuvien solujen subkultivointi: Tämän videon avulla opit yleisen protokollan adheenttien solujen passivoinnista.

Seuraavassa linkissä on INS-1-soluviljelyprotokolla:

INS-1-solulinja: Tämä verkkosivusto sisältää kaikki tiedot INS-1-soluviljelystä. Se sisältää tietoja INS-1-soluviljelystä ja pakastusmedioista, aliviljelyä koskevia protokollia sekä kryosäilytettyjen ja proliferatiivisten INS-1-viljelmien käsittelyä.

Viitteet

Acosta-Montalvo, A., et al., Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. ja J.S. Han, Portulaca oleracea L. -uute edistää insuliinin eritystä K+ ATP-kanavasta riippuvaisen reitin kautta INS-1-haiman β-soluissa. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al., Loureirin B edistää insuliinin eritystä GLP-1R- ja AKT/PDX1-reittien kautta. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swieteniini ja swietenolidi Swietenia macrophylla kingistä parantavat insuliinin eritystä ja heikentävät apoptoosia H2O2-indusoituneissa INS-1-soluissa. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al., Loganiinin diabeteksen vastainen vaikutus estämällä FOXO1-ytimen translokaatiota PI3K/Akt-signalointireitin kautta INS-1-soluissa. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.