Hep2-solut ja niiden rooli kurkunpään syövän tutkimuksessa

Hep 2 -solut ovat keskeinen in vitro -malli, jota käytetään laajalti biolääketieteellisen tutkimuksen eri aloilla, kuten reumatologiassa, syöpätutkimuksessa ja immunologiassa. Nämä ihmisen solut ovat peräisin kurkunpään karsinoomasta, ja ne ovat olleet olennainen osa kurkunpään kasvainten alkuperäkudoksen ja erityispiirteiden selvittämistä. Niiden merkitys tunnustetaan hyvin translaatiotutkimuksessa, jossa ne ovat suuresti edistäneet ymmärrystämme syöpien kurkunpään luonteesta ja alkuperästä, mikä merkitsee merkittävää läsnäoloa kurkunpään syöpätutkimusjulkaisuissa [1].

Hep 2 -solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet

Solulinjan alkuperä ja yleiset ominaisuudet määrittelevät sen soveltuvuuden tutkimuksessa. Tässä jaksossa kerrotaan Hep 2 -solujen alkuperästä ja eräistä merkittävistä ominaisuuksista. Saat esimerkiksi tietää: Mikä on HEp-2-solulinja? Mikä on Hep 2 -solujen lähde? Ja mikä on Hep 2 -solujen morfologia?

Hep 2 on kuolematon ihmisen epiteelisolulinja, jonka H.W. Toolan kuvasi ensimmäisen kerran kurkunpään karsinooman soluina vuonna 1954. Viime aikoina on kuitenkin raportoitu, että Hep 2 -solulinja koostuu kohdunkaulan adenokarsinoomasoluista ja on peräisin Hela-solulinjan kontaminaatiosta [2].
Hep 2 -solut sisältävät Hela-merkkikromosomeja, ja niiden on todettu olevan positiivisia keratiinin ja ihmisen papilloomaviruksen DNA-sekvenssien suhteen, mikä on vahvistettu immunoperoksidaasivärjäyksellä ja PCR:llä.
Hela-solulinjan johdannaisella Hep 2:lla on epiteelin kaltainen morfologia.
Hep 2 -solulinjalla on sekä rakenteellisia että numeerisia kromosomihiertymiä, ja sen karyotyyppi on lähes triploidinen [3].

HeLa-kohdunkaulan syöpäsolujen jakautuminen mikroskoopilla.

Hep 2-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot

Ennen kuin työskentelemme solulinjan kanssa, meidän on tiedettävä seuraavat keskeiset seikat sen viljelyä varten. Näistä tiedoista voi olla hyötyä solulinjan tehokkaassa viljelyssä ja ylläpidossa. Sinun tulisi tietää: Mikä on HEp-2-solujen kaksinkertaistumisaika? Ovatko Hep-2-solut tarttuvia? Mikä on Hep2-solujen kylvötiheys?

Populaation kaksinkertaistumisaika:	Hep 2 -solujen ilmoitettu kaksinkertaistumisaika on noin 40 tuntia.
Adheesiossa tai suspensiossa:	Hep 2 -solut ovat tarttuvia ja kasvavat monokerroksiksi.
Kylvötiheys:	Kylvötiheys 1 x¹⁰⁴ ^solua/cm2 on ihanteellinen Hep 2 -soluviljelyssä. Kylvöä varten adherentit Hep 2 -solut huuhdellaan 1 x PBS-liuoksella, minkä jälkeen ne inkuboidaan Accutase-dissosiaatioliuoksella. Kun soluja on inkuboitu 8-10 minuuttia huoneenlämmössä, ne suspendoidaan uudelleen väliaineeseen ja sentrifugoidaan. Kerätyt solut annostellaan tuoreeseen väliaineeseen ja kaadetaan uusiin pulloihin viljelyä varten.
Kasvualusta:	Hep 2 -solujen viljelyyn käytetään EMEM:ää tai Eaglen minimaalista välttämättömyysmediaa. Tämä väliaine on täydennetty 10 % FBS:llä, 1,0 g/l glukoosilla, 2,2 g/l NaHCO3:lla, 2,0 mM L-glutamiinilla, 1 % NEAA:lla ja 1 mM natriumpyruvaatilla solujen ihanteellisen kasvun varmistamiseksi. Väliaine on uusittava 2-3 kertaa viikossa.
Kasvuolosuhteet:	Muiden nisäkässolulinjojen tavoin myös Hep 2:ta viljellään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on 37 °C ja jossa on jatkuva 5 %:n hiilidioksidipitoisuus.
Varastointi:	Hep 2 -soluja voidaan säilyttää erittäin alhaisessa lämpötilassa sähköisissä pakastimissa (alle -150 °C) tai nestemäisen typen höyryfaasissa pitkäaikaissäilytystä varten.
Pakastusprosessi ja -media:	Hep 2 -soluille suositellut pakastusmediat ovat CM-1 tai CM-ACF. Solut olisi pakastettava käyttäen hidasta pakastusprosessia, joka mahdollistaa asteittaisen 1 °C:n lämpötilan laskun ja suojaa solujen elinkelpoisuutta.
Sulatusprosessi:	Pakastetut solut sulatetaan nopeasti sekoittamalla vesihauteessa37 °C:n lämpötilassa, kunnes jäljellä on pieni jääpalanen. Tämän jälkeen solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen ja sentrifugoidaan pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Myöhemmin solupelletti suspendoidaan uudelleen väliaineeseen ja solut annostellaan viljelypulloihin. Solujen on levättävä lähes 24 tuntia, jotta ne tarttuvat.
Bioturvallisuustaso	Hep 2 -soluviljelmien käsittelyyn ja ylläpitoon suositellaan bioturvallisuustason 1 laboratoriota.

Hep 2 -solut ennen ja jälkeen konfluenssin saavuttamisen.

Hep 2 -solujen edut ja rajoitukset

Lähes kaikilla solulinjoilla on ainutlaatuinen yhdistelmä etuja ja rajoituksia, jotka edistävät niiden käyttöä tutkimusalalla. Tässä jaksossa kuvataan muutamia tärkeimpiä Hep 2 -solulinjaan liittyviä etuja ja haittoja.

Edut

Hep 2 -solulinjan tärkeimmät edut ovat seuraavat:

Hep 2 on peräisin ihmisen epiteelisoluista, mikä tekee siitä arvokkaan in vitro -mallin ihmisen sairauksien ja virusinfektioiden tutkimiseen
ANA-tunnistus: Hep 2 -solulinjalla on natiivi proteiinirakenne, jossa on lukuisia antigeenejä, mikä tekee siitä erinomaisen substraatin antinukleaaristen vasta-aineiden (ANA) havaitsemiseen. Tämä ominaisuus mahdollistaa ANA:n spesifisen ja erittäin herkän seulonnan seerumista, mikä tekee siitä tärkeän diagnostisen välineen sidekudossairauksien tunnistamisessa

Rajoitukset

Kromosomipoikkeavuudet: Hep 2 -soluissa on useita numeerisia ja rakenteellisia kromosomipoikkeavuuksia. Nämä poikkeavuudet voivat vaikuttaa solujen käyttäytymiseen ja rajoittaa niiden soveltuvuutta tiettyihin laboratoriokokeisiin
Kasvainvaarallisuus: Hep 2, joka on ihmisen epiteelisolulinjasta peräisin oleva kasvain, voi sisältää geneettisiä poikkeavuuksia, joita ei yleensä esiinny epiteelisoluissa. Näin ollen Hep 2 -solujen käyttöä voidaan rajoittaa tietyissä tutkimuksissa, joissa keskitytään solujen normaaliin fysiologiaan.

Hep 2 -solulinjan sovellusten laajentaminen biolääketieteellisessä tutkimuksessa

Hep 2 -solulinja on esimerkillinen malli moniin eri sovelluksiin biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Nämä monipuolisuudestaan tunnetut solut ovat tärkeässä asemassa in vitro -kokeissa reseptorien analysoinnista monimutkaisten sairauksien tutkimiseen.

Kasvainten syntymekanismien ja terapeuttisten kohteiden tutkiminen Hep 2 -soluilla

Koska Hep 2 -solut ovat tumorigeenisiä, ne ovat keskeisessä asemassa syövän biologian monimutkaisuuden tutkimisessa. Ne tarjoavat tietoa syövän signalointireiteistä, mekanistisia tutkimuksia ja ovat syöpälääkkeiden seulonnan ja arvioinnin tukipilari. Esimerkiksi eräässä oivaltavassa tutkimuksessa käytettiin Hep 2:ta hahmottamaan miRNA-33a:n vaikutusta syöpäsolujen lisääntymiseen. Havainnot valaisivat miRNA-33a:n antiproliferatiivisia vaikutuksia sen vuorovaikutuksen kautta PIM1:n, tunnetun onkogeenin, kanssa, mikä viittaa uuteen terapeuttiseen kohteeseen [4]. Toisessa tapauksessa Hep 2:ta käytettiin Marsdenia tenacissima -sinkkioksidinanopartikkelien terapeuttisen potentiaalin arvioinnissa, jolloin korostui niiden antiproliferatiivinen ja apoptoottinen teho [5].

Virologian tutkimuksen edistäminen Hep 2 -solujen avulla

Hep 2 -solujen herkkyys erilaisille ihmisviruksille tekee niistä korvaamattoman arvokkaan resurssin virologisessa tutkimuksessa. Niitä on käytetty tehokkaasti SARS-CoV-2 -viruksen geenien ilmentämisessä viruksen ja isäntäsolujen monimutkaisen vuorovaikutuksen selvittämiseksi [6]. Tämä sovellus on erityisen tärkeä nykyaikana, jolloin COVID-19:n kaltaisten virusinfektioiden ymmärtäminen ja torjunta on maailmanlaajuinen prioriteetti.

Solutoimintojen tulkitseminen: Geenimanipulaatio Hep 2 -soluissa

Hep 2 -solulinjan sopeutumiskyky geneettiseen manipulointiin korostaa sen hyödyllisyyttä mekanistisissa tutkimuksissa. Tutkijat hyödyntävät tätä ominaisuutta geenien ilmentymisen muokkaamiseen ja tiettyjen geenien roolien selvittämiseen solun toiminnoissa. Eräässä merkittävässä tutkimuksessa RNA:ta sitovan proteiinin RBM6:n yliekspressio Hep 2 -soluissa helpotti sen kasvainsuppressoripotentiaalin tutkimista, mikä antoi arvokasta tietoa syövän molekulaarisista taustatekijöistä [7].

Sairauksien diagnosoinnin parantaminen Hep 2 -solulinjasovellusten avulla

Näiden tutkimusalojen lisäksi Hep 2 -soluja on arvostettu niiden diagnostisista ominaisuuksista, erityisesti ANA:iden havaitsemisessa, jotka ovat kriittisiä autoimmuunisairauksien, kuten systeemisen lupus erythematosuksen, diagnosoinnissa. Tarkkuus, jolla Hep 2 -solut voivat esittää ANA:t, tukee diagnoosia ja kohdennettujen hoitojen kehittämistä, mikä lisää ymmärrystä autoimmuunisairauksista ja parantaa potilaiden hoitoa.

Näiden monipuolisten sovellusten avulla Hep 2 -solut ovat edistäneet merkittävästi translaatiotutkimusta syöpätutkimuksessa, virusinfektioiden tutkimuksessa ja solumekanismien tutkimisessa. Niiden panos kliinisesti merkityksellisten tietojen tuottamisessa on korvaamaton, mikä vahvistaa niiden korvaamattoman roolin sekä laboratoriossa että klinikassa. Tutkimuksen kehittyessä edelleen Hep 2 -solulinja pysyy varmasti eturintamassa, auttaa uusien hoitojen löytämisessä ja laajentaa tietämystämme ihmisten terveydestä ja sairauksista.

Varmista HEp-2-solulinjasi tänään

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300397

Hep 2 -solut: Hepa Hepa: Tutkimusjulkaisut

Seuraavassa on joitakin mielenkiintoisia ja eniten siteerattuja tutkimusjulkaisuja Hep 2 -soluista.

Marsdenia tenacissimasta saatujen sinkkioksidinanohiukkasten synteesi estää solujen lisääntymistä ja indusoi apoptoosia kurkunpään syöpäsoluissa (Hep-2)
Tässä Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology -lehdessä (2019) julkaistussa artikkelissa tutkittiin biosyntetisoitujen Marsdenia tenacissima -sinkkioksidinanohiukkasten syöpää ehkäisevää potentiaalia Hep-2-solulinjassa.
Bioformuloidut hesperidiinillä ladatut PLGA-nanohiukkaset torjuvat mitokondriovälitteistä intrinsistä apoptoosireittiä syöpäsoluissa
Tämä artikkeli julkaistiin Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials -lehdessä vuonna 2021. Tässä tutkimuksessa tutkittiin biovalmistettujen hesperidiinillä ladattujen Poly (maito-co-glykolihappo) (PLGA) -nanohiukkasten syöpää ehkäiseviä ominaisuuksia Hep 2 -soluissa.
Lophatherum gracile -kasvin etanoliuutteen antiviraalinen aktiivisuus hengitystie-synktiovirusinfektiota vastaan
Tässä Journal of Ethnopharmacology -lehdessä vuonna 2019 julkaistussa julkaisussa käytettiin Hep 2 -soluja hengitysteiden synktiovirusinfektion tutkimiseen ja viruslääkkeiden seulontaan sitä vastaan. Tutkimuksessa raportoitiin lääkekasvin eli Lophatherum gracilen etanoliuutteen lupaavasta antiviraalisesta potentiaalista hengitysteiden synktiovirusinfektiota vastaan.
Neljästä aromaattisesta kasvista saatujen vesiuutteiden aktiivisuuden arviointi Candida albicansin tarttumista ihmisen HEp-2 epiteelisoluihin vastaan
Tämä tutkimus on julkaistu Gene Reports -lehdessä (2020). Tässä tutkimuksessa tutkittiin neljän aromaattisen kasvin vesipitoisten uutteiden estävää potentiaalia Candida albicansin tarttumista ihmisen Hep-2-epiteelisoluihin.
Wnt1-indusoituva signalointiproteiini 1 säätelee kurkunpään levyepiteelikarsinooman glykolyysiä ja kemoresistenssiä YAP1/TEAD1/GLUT1-reitin kautta
Tämä tutkimus julkaistiin Journal of Cellular Physiology -lehdessä vuonna 2019. Tutkimuksessa raportoidaan, että Wnt1-indusoituva signalointiproteiini 1 (WISP1) on vuorovaikutuksessa YAP1/TEAD1/GLUT1-reitin kanssa ja säätelee glukoosimetaboliaa ja kemoresistenssiä Hep 2 -solulinjassa.

Hep2-solulinjan resurssit: Hep2 Hep2: protokollat, videot ja muuta

Hep 2 on tunnettu solulinja. Saatavilla on useita Hep 2 -solulinjaa esitteleviä resursseja.

Hep2-solulinjan subkultivointi: Tämä video on vaiheittainen opas Hep 2 -solujen subkulturointiin.
Hep 2 -solujen ANA-seulonta: Tässä videossa selitetään ANA-vasta-aineiden (anti-nuclear antibodies, ANA) seulonta käyttäen Hep 2 -solulinjaa.
Hep 2 -solujen viljely: Tämä linkki sisältää perustietoa soluviljelystä Hep 2 -soluissa. Se sisältää solujen jakamisen, solujen jäädyttämisen ja sulattamisen.

Usein kysytyt kysymykset HEp-2-soluista biolääketieteellisessä tutkimuksessa

Viitteet

Fusi, M. ja S. Dotti, HEp-2-solulinjan mukauttaminen täysin eläimettömiin viljelyjärjestelmiin ja solujen kasvun reaaliaikainen analysointi. Biotekniikka, 2021. 70(6): p. 319-326.
Gorphe, P., Kattava katsaus Hep-2-solulinjasta kurkunpään syövän translaatiotutkimuksessa. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
Wang, M., et al., Cancer-associated fibroblasts in a human HEp-2 established laryngeal xenografted tumor are not derived from cancer cells through epithelial-mesenchymal transition, phenotypically activated but karyotypically normal. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
Karatas, O.F., miR-33a:n antiproliferatiivinen potentiaali kurkunpäänsyöpä Hep-2-soluissa PIM1:n kohdentamisen kautta. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
Wang, Y., et al., Marsdenia tenacissimasta peräisin olevien sinkkioksidinanohiukkasten synteesi estää solujen lisääntymistä ja indusoi apoptoosia kurkunpään syöpäsoluissa (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
Zhang, J., et al., SARS-CoV-2-proteiinien subcellulaarisen lokalisoinnin systeeminen ja molekulaarinen tutkimus. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
Wang, Q., et al., RNA:ta sitova proteiini RBM6 kasvainsuppressorigeeninä tukahduttaa kasvua ja etenemistä kurkunpään karsinoomassa. Gene, 2019. 697: p. 26-34.