Siirry etusivulle

Hep2-solut ja niiden merkitys kurkunpään syövän tutkimuksessa

Hep 2 -solut ovat keskeinen in vitro -malli, jota käytetään laajasti biolääketieteen tutkimusalueilla, kuten reumatologiassa, syöpätutkimuksessa ja immunologiassa. Nämä kurkunpään karsinoomasta peräisin olevat ihmisen solut ovat olleet keskeisessä asemassa kurkunpään kasvainten alkuperäkudoksen ja erityispiirteiden selvittämisessä. Niiden merkitys on tunnustettu translaatiivisessa syöpätutkimuksessa, jossa ne ovat edistäneet merkittävästi ymmärrystä kurkunpään syöpien luonteesta ja alkuperästä, ja ne ovatkin näkyvästi esillä kurkunpään syövän tutkimusta käsittelevissä julkaisuissa [1].

📋 Hep2-solulinja — lyhyesti
Kasvatusväliaine
Hep 2 -solujen viljelyyn käytetään EMEM- tai Eagle's minimal essential -kasvatusainetta. Tätä elatusainetta täydennetään 10 % FBS:llä, 1,0 g/l glukoosilla, 2,2 g/l NaHCO3:lla, 2,0 mM L-glutamiinilla, 1 % NEAA:lla ja 1 mM natriumpyruvaatilla ihanteellisen solujen kasvun varmistamiseksi. Elatusaine tulisi vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
Kaksinkertaistumisaika
Hep 2 -solujen raportoitu kaksinkertaistumisaika on noin 40 tuntia.
Kasvutyyppi
Hep 2 -solut ovat adheesiivisia ja kasvavat monokerroksiksi.
Bioturvallisuustaso
BSL-1

Hep 2 -solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet

Solulinjan alkuperä ja yleiset ominaisuudet määrittävät sen soveltuvuuden tutkimuskäyttöön. Tämä osio auttaa sinua tutustumaan Hep 2 -solujen alkuperään ja joihinkin niiden keskeisiin ominaisuuksiin. Täältä löydät vastaukset esimerkiksi seuraaviin kysymyksiin: Mikä on HEp-2-solulinja? Mikä on Hep 2 -solujen lähde? Ja millainen on Hep 2:n morfologia?

  • Hep 2, kuolematon ihmisen epiteelisolulinja, kuvattiin ensimmäisen kerran H.W. Toolanin toimesta kurkunpään karsinoomasoluina vuonna 1954. Viime aikoina on kuitenkin raportoitu, että Hep 2 -solulinja koostuu kohdunkaulan adenokarsinoomasoluista ja on peräisin Hela-solulinjan kontaminaatiosta [2].
  • Hep 2 -solut sisältävät Hela-markkerikromosomeja, ja ne ovat positiivisia keratiinille ja ihmisen papilloomaviruksen DNA-sekvensseille, mikä on vahvistettu vastaavasti immunoperoksidaasivärjäyksellä ja PCR:llä.
  • Hela-solulinjasta johdettu Hep 2:lla on epiteelin kaltainen morfologia.
  • Hep 2 -solulinjalla on sekä rakenteellisia että numeerisia kromosomipoikkeamia, ja sen karyotyyppi on lähes triploidi [3].

HeLa-kohdunkaulasyöpäsolujen jakautuminen mikroskoopissa.

HEp-2-solulinja: Viljelyohjeet

Ennen solulinjan käsittelyä on tunnettava seuraavat viljelyyn liittyvät avainkohdat. Nämä tiedot voivat olla hyödyllisiä solulinjan tehokkaassa viljelyssä ja ylläpidossa. Sinun tulisi tietää: Mikä on HEp-2-solujen kaksinkertaistumisaika? Ovatko Hep 2 -solut adheesiivisia? Mikä on Hep2-solujen kylvötiheys?

 

Populaation kaksinkertaistumisaika:

Hep 2 -solujen kaksinkertaistumisaika on noin 40 tuntia.

Adheesiiviset vai suspensiossa:

Hep 2 -solut ovat adheesiivisia ja kasvavat monokerroksiksi.

Kylvötiheys:

Ihanteellinen siemennestiheys Hep 2 -soluviljelylle on 1 x 104 solua/cm2. Siemennystä varten kiinnittyvät Hep 2 -solut huuhdellaan 1 x PBS-liuoksella, minkä jälkeen niitä inkuboidaan Accutase-dissosiaatioliuoksessa. 8–10 minuutin inkuboinnin jälkeen huoneenlämmössä solut suspendoidaan uudelleen elatusaineeseen ja sentrifugoidaan. Kerätyt solut annostellaan sitten tuoreeseen elatusaineeseen ja kaadetaan uusiin pulloihin viljelyä varten.

Kasvatusväliaine:

Hep 2 -solujen viljelyyn käytetään EMEM- tai Eagle's minimal essential -kasvatusainetta. Tähän elatusaineeseen lisätään 10 % FBS:ää, 1,0 g/l glukoosia, 2,2 g/l NaHCO3:a, 2,0 mM L-glutamiinia, 1 % NEAA:ta ja 1 mM natriumpyruvaattia ihanteellisen solujen kasvun varmistamiseksi. Elatusaineet tulee uusia 2–3 kertaa viikossa.

Kasvuolosuhteet:

Muiden nisäkässolulinjojen tavoin myös Hep 2 -soluja viljellään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on 37 °C ja jossa on jatkuva 5 %:n CO2-syöttö.

Säilytys:

Hep 2 -soluja voidaan säilyttää pitkäaikaista säilytystä varten erittäin matalan lämpötilan sähköpakastimissa (alle -150 °C) tai nestemäisen typen höyryvaiheessa.

Jäädytysprosessi ja väliaine:

Hep 2 -soluille suositeltavat pakastusväliaineet ovat CM-1 tai CM-ACF. Solut tulee pakastaa hitaalla pakastusprosessilla, joka mahdollistaa lämpötilan asteittaisen laskun 1 °C:lla ja suojaa solujen elinkelpoisuutta.

Sulatusprosessi:

Jäädytettyjen solujen pullo sulatetaan nopeasti ravistelemalla vesihauteessa 37 °C:ssa, kunnes jäljellä on pieni jääpalanen. Solut lisätään sitten tuoreeseen väliaineeseen ja sentrifugoidaan pakastusväliaineen komponenttien poistamiseksi. Myöhemmin solupelletti suspendoidaan uudelleen väliaineeseen, ja solut annostellaan viljelypulloihin. Solujen on annettava levätä lähes 24 tuntia kiinnittymiseksi.

Bioturvallisuustaso

Hep 2 -soluviljelmien käsittelyyn ja ylläpitoon suositellaan bioturvallisuustason 1 laboratoriota.

Hep2 cells

Hep 2 -solut ennen ja jälkeen solukon täyttymisen.

Hep 2 -solujen edut ja rajoitukset

Lähes kaikilla solulinjoilla on ainutlaatuinen yhdistelmä etuja ja rajoituksia, jotka vaikuttavat niiden käyttöön tutkimusalalla. Tässä osiossa kuvataan muutamia Hep 2 -solulinjaan liittyviä tärkeimpiä etuja ja haittoja.

Edut

Hep 2 -solulinjan tärkeimmät edut ovat:

  • Ihmisperäisyys: Hep 2 on peräisin ihmisen epiteelisoluista, mikä tekee siitä arvokkaan in vitro -mallin ihmisten sairauksien ja virusinfektioiden tutkimiseen.
  • ANA-tunnistus: Hep 2 -solulinjalla on luonnollinen proteiinijärjestelmä, joka esittää lukuisia antigeenejä, mikä tekee siitä erinomaisen substraatin antinukleaaristen vasta-aineiden (ANA) tunnistamiseen. Tämä ominaisuus mahdollistaa ANA:n spesifisen ja erittäin herkän seulonnan seerumista, mikä tekee siitä tärkeän diagnostisen työkalun sidekudossairauksien tunnistamisessa.

Rajoitukset

  • Kromosomipoikkeavuudet: Hep 2 -soluissa esiintyy useita numeerisia ja rakenteellisia kromosomipoikkeavuuksia. Nämä poikkeavuudet voivat vaikuttaa solujen käyttäytymiseen ja rajoittaa niiden soveltuvuutta tietyissä laboratoriokokeissa.
  • Tumorigeenisyys: Hep 2, kasvaimesta peräisin oleva ihmisen epiteelisolulinja, voi sisältää geneettisiä poikkeavuuksia, joita ei tyypillisesti esiinny epiteelisoluissa. Tämän seurauksena Hep 2 -solujen käyttöä saatetaan rajoittaa tietyissä tutkimuksissa, joissa keskitytään normaaliin solufysiologiaan.

Hep 2 -solulinjan sovellusten laajentaminen biolääketieteellisessä tutkimuksessa

Hep 2 -solulinja erottuu esimerkillisenä mallina monille sovelluksille biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Monipuolisuudestaan tunnetut solut toimivat keskeisessä roolissa in vitro -kokeissa, jotka ulottuvat reseptorianalyysistä monimutkaisten sairauksien tutkimukseen.

Kasvainten muodostumismekanismien ja terapeuttisten kohteiden tutkiminen Hep 2 -soluilla

Hep 2 -solut ovat tuumorigeenisiä, joten ne ovat keskeisiä syövän biologian monimutkaisten mekanismien tutkimisessa. Ne tarjoavat tietoa syövän signalointireiteistä ja mekanistisista tutkimuksista ja ovat keskeisessä asemassa syöpälääkkeiden seulonnassa ja arvioinnissa. Esimerkiksi eräässä oivaltavassa tutkimuksessa käytettiin Hep 2 -soluja miRNA-33a:n vaikutuksen kuvaamiseen syöpäsolujen proliferaatioon. Tulokset valaisivat miRNA-33a:n antiproliferatiivisia vaikutuksia sen vuorovaikutuksen kautta tunnetun onkogeenin PIM1:n kanssa, mikä viittaa uuteen terapeuttiseen kohteeseen [4]. Toisessa tapauksessa Hep 2:ta käytettiin Marsdenia tenacissima -sinkkioksidin nanopartikkelien terapeuttisen potentiaalin arvioinnissa, mikä korosti niiden solujen lisääntymistä estävää ja apoptoottista tehoa [5].

Virologian tutkimuksen edistäminen Hep 2 -solujen avulla

Hep 2 -solujen alttius erilaisille ihmisviruksille tekee niistä korvaamattoman resurssin virologisessa tutkimuksessa. Niitä on käytetty tehokkaasti SARS-CoV-2-viruksen geenien ilmentämisessä viruksen ja isäntäsolun mekanismien välisen monimutkaisen vuorovaikutuksen selvittämiseksi [6]. Tämä sovellus on erityisen tärkeä nykyisessä tilanteessa, jossa COVID-19:n kaltaisten virusinfektioiden ymmärtäminen ja torjuminen on maailmanlaajuinen prioriteetti.

Solutoimintojen selvittäminen: geenimanipulointi Hep 2 -soluissa

Hep 2 -solulinjan sopeutumiskyky geenimanipulointiin korostaa sen hyödyllisyyttä mekanistisissa tutkimuksissa. Tutkijat hyödyntävät tätä ominaisuutta geenien ilmentymisen säätelemiseksi ja tiettyjen geenien roolin selvittämiseksi solutoiminnoissa. Eräässä merkittävässä tutkimuksessa tutkittiin RNA:ta sitovan proteiinin RBM6:n yli-ilmentymistä Hep 2 -soluissa, mikä helpotti sen tuumorisuppressoripotentiaalin tutkimista ja antoi arvokasta tietoa syövän molekyylitason mekanismeista [7].

Sairauksien diagnoosin parantaminen Hep 2 -solulinjan sovellusten avulla

Näiden tutkimusalueiden lisäksi Hep 2 -solut ovat tunnettuja diagnostisista ominaisuuksistaan, erityisesti ANA-vasta-aineiden havaitsemisessa, mikä on kriittistä autoimmuunisairauksien, kuten systeemisen lupus erythematosuksen, diagnoosissa. Hep 2 -solujen tarkkuus ANA-vasta-aineiden havaitsemisessa tukee diagnoosia ja kohdennettujen hoitojen kehittämistä, mikä parantaa ymmärrystämme autoimmuunisairauksista ja potilaiden hoitoa.

Näiden monipuolisten sovellusten kautta Hep 2 -solut ovat merkittävästi edistäneet syövän translaationaalisen tutkimuksen, virusinfektioiden tutkimuksen ja solumekanismien selvittämisen kehitystä. Niiden panos kliinisesti merkityksellisten tietojen tuottamiseen on korvaamaton, mikä vahvistaa niiden välttämättömän roolin sekä laboratoriossa että kliinisessä työssä. Tutkimuksen kehittyessä Hep 2 -solulinja pysyy varmasti eturintamassa auttaen uusien hoitojen löytämisessä ja laajentaen tietämystämme ihmisen terveydestä ja sairauksista.

Varmista HEp-2-solulinjasi jo tänään

Hep 2 -solut: Tutkimusjulkaisut

Seuraavassa on joitakin mielenkiintoisia ja eniten siteerattuja tutkimusjulkaisuja Hep 2 -soluista.

Hep2-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta

Hep 2 on tunnettu solulinja. Saatavilla on useita Hep 2 -solulinjaa käsitteleviä resursseja.

  • Hep 2 -solulinjan subkultivointi: Tämä video on vaiheittainen opas Hep 2 -solujen subkultivointiin.
  • Hep 2 -solujen ANA-seulonta: Tämä video selittää antinukleaaristen vasta-aineiden (ANA) seulonnan Hep 2 -solulinjalla.
  • Hep 2 -solujen viljely: Tämä linkki sisältää perustietoa Hep 2 -solujen viljelystä. Se kattaa solujen jakamisen, pakastamisen ja sulattamisen.

Usein kysytyt kysymykset HEp-2-soluista biolääketieteellisessä tutkimuksessa

HEp-2-solut ovat kuolematon solulinja, jonka alun perin uskottiin olevan peräisin kurkunpään karsinoomasta, mutta joka on myöhemmin tunnistettu kohdunkaulan adenokarsinoomasoluiksi, jotka on saastutettu HeLa-soluilla. Koska ne ovat peräisin ihmisen epiteelistä, ne ovat keskeinen väline erilaisten sairauksien tutkimisessa, erityisesti syöpätutkimuksessa, immunologiassa ja virologiassa, ja ne tarjoavat tietoa tautimekanismeista ja mahdollisista hoidoista
HEp-2-solujen värjäytymismallit ANA-testien (antinukleaaristen vasta-aineiden) aikana ovat ratkaisevia autoimmuunisairauksien diagnosoinnissa. Nämä mallit auttavat tunnistamaan spesifiset autovasta-aineet, mikä auttaa diagnosoimaan systeemisen lupus erythematosuksen kaltaisia sairauksia, ja ne ovat kliinisen immunologian kulmakivi, koska ne auttavat ymmärtämään autoimmuunisairauksia
HEp-2-soluja käytetään laajalti ANA:n osoittamiseen, koska ne pystyvät esittämään laajan valikoiman antigeenejä, mikä mahdollistaa ANA:n herkän ja spesifisen seulonnan seeruminäytteistä. Tämä tekee niistä korvaamattomia autoimmuunisairauksien diagnosoinnissa, mikä korostaa niiden keskeistä roolia immunologian diagnostisten menetelmien kehittämisessä
ANA-titterit HEp-2-soluissa osoittavat suurimman seerumin laimennoksen, jossa autovasta-aineet ovat havaittavissa, ja ne ovat tärkeä mittari autoimmuunitaudin vakavuuden ja etenemisen arvioinnissa. Korkeat titterit viittaavat usein aktiivisempaan tautiin, mikä ohjaa lääkäreitä hoitopäätöksissä ja taudin seurannassa
HEp-2-solut ovat peräisin kurkunpään karsinoomasta, ja ne ovat elintärkeitä kurkunpään syövän alkuperän ja ominaisuuksien tutkimisessa. Niiden käyttö translationaalisessa syöpätutkimuksessa on johtanut merkittäviin edistysaskeliin kurkunpään syövän ymmärtämisessä, auttanut kohdennettujen hoitojen kehittämisessä ja rikastuttanut kurkunpään syöpäkirjallisuutta
Alun perin HEp-2-solujen luultiin olevan peräisin kurkunpään karsinoomasta, mutta myöhemmin ne tunnistettiin kohdunkaulan adenokarsinoomasoluiksi. Tämä paljastus korosti solulinjojen alkuperän monimutkaisuutta, mutta ei kuitenkaan vähentänyt niiden arvoa tutkimuksessa niiden ainutlaatuisten ominaisuuksien ja sovellusten vuoksi epiteelisolujen käyttäytymisen ja patologioiden tutkimisessa
Vaikka HeLa- ja HEp-2-solut ovat peräisin ihmisen kohdunkaulan syöpäsoluista, niillä on erilaiset ominaisuudet. HeLa-solujen nopean lisääntymisen ansiosta ne soveltuvat monenlaisiin tutkimuksiin, kun taas HEp-2:n ainutlaatuiset ominaisuudet, erityisesti epiteelisolujen tutkimuksessa, tarjoavat erityisiä etuja epiteelisolujen patologioiden ja mekanismien tutkimisessa
HEp-2-solujen menestyksekäs viljely edellyttää erityisolosuhteita, kuten FBS:llä täydennetyn EMEM:n käyttöä ja valvotun ympäristön ylläpitämistä 37 °C:ssa ja 5 %:n hiilidioksidipitoisuudessa. Kasvatusvaatimusten, kuten kylvötiheyden ja elatusaineen koostumuksen, tunteminen on olennaista, jotta niitä voidaan käyttää tehokkaasti tutkimuksessa
HEp-2-soluilla on monia etuja, kuten niiden merkitys ihmisten sairauksien tutkimisessa ja niiden hyödyllisyys ANA:n osoittamisessa. Niiden kromosomipoikkeavuudet ja tumorigeeninen luonne voivat kuitenkin rajoittaa niiden soveltuvuutta tietyillä tutkimusalueilla, minkä vuoksi niiden käyttöä on harkittava huolellisesti
HEp-2-solut ovat laajentaneet tutkimushorisonttia eri biolääketieteen aloilla lääkkeiden seulonnasta tautimekanismien tutkimiseen. Niiden monipuolisuus ja panos sairauksien ymmärtämisessä ja hoidossa korostavat niiden korvaamatonta roolia sekä perus- että translaatiotutkimuksessa ja lupaavat jatkuvaa merkitystä tulevissa tieteellisissä ponnisteluissa

Lähteet

  1. Fusi, M. ja S. Dotti, HEp-2-solulinjan mukauttaminen täysin eläinperäisistä aineista vapaisiin viljelyjärjestelmiin ja solujen kasvun reaaliaikainen analysointi. Biotechniques, 2021. 70(6): s. 319–326.
  2. Gorphe, P., Kattava katsaus Hep-2-solulinjaan kurkunpään syövän translaatiotutkimuksessa. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): s. 644–649.
  3. Wang, M., et al., Ihmisen HEp-2-solulinjasta perustetussa kurkunpään ksenotransplantaattikasvaimessa esiintyvät syöpään liittyvät fibroblastit eivät ole peräisin syöpäsoluista epiteeli-mesenkymaalisessa siirtymässä, vaan ne ovat fenotyyppisesti aktivoituneita mutta karyotyyppisesti normaaleja. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
  4. Karatas, O.F., miR-33a:n antiproliferatiivinen potentiaali kurkunpään syövän Hep-2-soluissa kohdistamalla PIM1:een. Head Neck, 2018. 40(11): s. 2455–2461.
  5. Wang, Y., et al., Marsdenia tenacissimasta syntetisoitujen sinkkioksidin nanopartikkelien synteesi estää solujen proliferaatiota ja indusoi apoptoosia kurkunpään syöpäsoluissa (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: s. 111624.
  6. Zhang, J. ym., SARS-CoV-2-proteiinien subcellulaarisen lokalisoinnin systeeminen ja molekyylitason tutkimus. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): s. 269.
  7. Wang, Q., et al., RNA:ta sitova proteiini RBM6 tuumorisuppressorigeeninä estää kurkunpään syövän kasvua ja etenemistä. Gene, 2019. 697: s. 26–34.

Olemme havainneet, että olet eri maassa tai käytät eri selaimen kieltä kuin tällä hetkellä valittu. Haluatko hyväksyä ehdotetut asetukset?

Sulje