BEWO-solulinja
BeWo on ihmisen koriokarsinoomasta peräisin oleva solulinja, jota käytetään laajalti biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Se toimii arvokkaana in vitro -mallina istukan monimutkaisen kehitysprosessin ja ihmisen trofoblastien synkistymisen tutkimiseen. Tutkijat käyttävät näitä soluja myös trofoblastisolujen käyttäytymisen, hormonituotannon ja aineiden kuljetuksen tutkimiseen istukan läpi. Lisäksi BeWo-solut tarjoavat sovelluksia myös toksikologian, infektioiden ja tautien leviämisen tutkimiseen.
Tämä artikkeli sisältää perustiedot BeWo-soluista, jotka voivat auttaa sinua käsittelemään niitä tutkimuksessasi. Se sisältää mm:
- BeWo-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
- BeWo-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot
- BeWo-solulinjan edut ja haitat
- BeWo-solujen tutkimussovellukset
- Tutkimusjulkaisut, joissa on BeWo-soluja
- BeWo-solulinjan resurssit: BeoWo Cell: Protokollia, videoita ja muuta
1. BeWo-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Solulinjan alkuperän ja yleisten ominaisuuksien tuntemus on ratkaisevan tärkeää, jotta sitä voidaan käyttää tutkimuksessasi. Tässä artikkelin osassa tarkastellaan BeWo-solulinjan alkuperää, ominaispiirteitä ja paljon muuta. Täältä opit: Mikä on BeWo-korio-karsinoomasolulinja? Mikä on BeWo-synkyylisolu? Mistä BeWo-solut ovat peräisin? Mikä on BeWo-solujen morfologia? Mikä on BeWon ploidia?
- Istukkasolulinja, BeWo, on peräisin vuonna 1968 poikasikiön istukan pahanlaatuisesta gestationaalisesta koorio-karsinoomasta [1]. Näin ollen se toimii korvaamattomana mallina istukkatutkimuksessa.
- BeWo-soluilla on epiteelin kaltainen morfologia.
- BeWo-solut ovat suhteellisen pieniä, kooltaan 20-30 µM [2].
- BeWo-soluilla on vakaa karyotyyppi. Niiden kantaluku on hypo-tetraploidi. BeWo-solujen modaalinen kromosomiluku on 86. Se voi vaihdella 71:stä 178:aan.
- BeWo-solut tuottavat useita hormoneja, kuten ihmisen korionisomatomammotropiinia, ihmisen koriongonadotropiinia (hCG) ja steroidihormoneja.
- BeWo-solut ilmentävät molekyylimarkkereita, kuten CK 7:ää, E-kadheriinia ja VE-kadheriinia.
B30-alalinja
B30 on BeWo-solujen alalinja. Sitä käytetään ravinteiden ottamisen ja kuljettamisen tutkimiseen. Tämä johtuu niiden voimakkaasta kasvusta huokoisilla kalvoilla.
BeWo ja JEG-3
BeWo JEG-3-solulinjat on johdettu koriokarsinoomista, ja niitä käytetään istukkatutkimuksessa. BeWo-solut tuottavat hormoneja alhaisemmalla tasolla kuin JEG-3, kuten ihmisen koriongonadotropiinia (hCG) ja estradiolia.
2. BeWo-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot
Soluviljelmän ylläpito voi olla hankalaa, ellet tiedä keskeisiä yksityiskohtia. Tällaisia ovat mm: Mikä on BeWon kaksinkertaistumisaika? Mikä on BeWo-solualusta? Miten BeWo-solulinjaa viljellään ja Miten BeWo-solut pakastetaan?
BeWo-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
BeWo-solujen populaation kaksinkertaistumisaika on noin 30 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
BeWo on tarttuva solulinja. |
|
Solujen kylvötiheys: |
BeWo-solujen suositeltava kylvötiheys on 1 x104 solua/cm2. Kylvöä varten soluista poistetaan vanha väliaine ja solut huuhdellaan 1 x PBS:llä. Tämän jälkeen lisätään Accutase (passaging-liuos) ja soluja inkuboidaan 8-10 minuuttia huoneenlämmössä. Sitten irrotettuihin soluihin lisätään kasvatusmediaa ja ne sentrifugoidaan. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen ja kaadetaan uuteen pulloon. |
|
Kasvualusta: |
BeWo-solujen kasvattamiseen käytetään Ham's F12K -mediaa, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2,0 mM L-Glutamiinia, 2,0 mM natriumpyruvaattia ja 2,5 g/l NaHCO3:a. BeWo-solujen kasvatusmedia on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
BeWo-soluja ylläpidetään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on 37 celsiusastetta ja jossa on 5 % CO2. |
|
Varastointi: |
Jäädytetyt BeWo-solut säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä ultramatalan lämpötilan pakastimessa tai nestemäisen typen höyryfaasissa. |
|
Pakastusprosessi ja -media: |
BeWo-solut suositellaan pakastettavaksi CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediassa. Solut pakastetaan käyttäen hidasta pakastusmenetelmää. Menetelmä sallii vain yhden asteen lämpötilan laskun minuutissa, jolloin solut eivät joudu sokkiin ja solujen elinkelpoisuus säilyy. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastetut solut sulatetaan upottamalla ne esiasetettuun 37 °C:n vesihauteeseen 40-60 sekunnin ajaksi, kunnes jäljellä on pieni jääkerrostuma. Sitten lisätään tuoretta kasvualustaa ja solut sentrifugoidaan pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Kerätty solupelletti suspendoidaan uudelleen ja annostellaan kasvatuspulloon kasvattamista varten. |
|
Bioturvallisuustaso: |
BeWo-soluviljelmien käsittely ja ylläpito edellyttää bioturvallisuustason 1 laboratoriota. |
3. BeWo-solulinjan edut ja haitat
BeWo-soluilla on ainutlaatuisia ominaisuuksia, ja niillä on erityisiä etuja ja haittoja. Tässä jaksossa tarkastelemme joitakin niistä, jotka ovat huomionarvoisia.
Edut
BeWo-koriokarsinoomasolulinjan tärkeimmät edut ovat:
-
In vitro istukkasolumalli
BeWo-solut tarjoavat in vitro -mallin trofoblastisolujen käyttäytymisen ja istukan synkyristymisen tutkimiseen, mikä jäljittelee prosesseja, joita on haastavaa havaita in vivo.
-
Hormonituotanto
BeWo-solut erittävät hormoneja, kuten hCG:tä ja istukan laktogeeniä, mikä tekee niistä arvokkaita hormonaalisen säätelyn tutkimuksissa ja lisääntymisbiologian tutkimuksessa.
Haitat
BeWo-trofoblastisolujen haittoja ovat:
-
Syöpäsolulinja
BeWo-solut on johdettu koriokarsinoomasta, joka on istukan kasvain. Tämä alkuperä ei välttämättä edusta täysin normaalia istukkasolujen toimintaa.
4. BeWo-solujen tutkimussovellukset
BeWo-solulinjaa käytetään laajasti istukkatutkimuksessa. Tässä mainitaan muutamia tämän solulinjan erityisiä sovelluksia:
- Istukka ja raskauteen liittyvä tutkimus: BeWo-solut ovat keskeisessä asemassa istukan ja raskauteen liittyvässä tutkimuksessa. Tutkijat esimerkiksi käyttävät näitä soluja tutkiessaan aineiden, kuten lääkkeiden, ravintoaineiden ja toksiinien, kulkeutumista istukan esteen läpi. Lisäksi he tutkivat hormonien, kuten ihmisen koriongonadotropiinin (hCG), istukan laktogeenin ja steroidihormonien tuotantoa ja säätelyä. Tämä on tärkeää raskauden aikaisten hormonaalisten muutosten ymmärtämiseksi. Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa tutkittiin bromattujen palonestoaineiden (BFR) vaikutusta sulfotransferaasin aktiivisuuteen ihmisen trofoblastisolulinjassa (BeWo). Tämä entsyymi osallistuu kilpirauhashormonin solunsisäisten tasojen säätelyyn [3].
- Infektio- ja tautitutkimus: BeWo-soluja käytetään myös patogeenien ja istukkasolujen välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen. Tämä tutkimus on arvokasta, kun pyritään ymmärtämään äidistä sikiöön siirtyviä sairauksia ja kehittämään strategioita sikiön terveyden suojelemiseksi. Lisäksi tämä solulinja auttaa tutkijoita tutkimaan raskauden aikana ilmeneviä komplikaatioita, kuten pre-eklampsiaa. Esimerkiksi Michalina Bralewskan vuonna 2023 tekemässä tutkimuksessa käytettiin BeWo-trofoblastisolumallia ja todettiin, että sekä kromograniini A:lla (CgA) että siitä johdetulla peptidillä, katestatiinilla (CST), voi olla merkitystä preeklampsian (PE) patogeneesin monimutkaisessa prosessissa [4]. Toisessa tutkimuksessa tutkittiin trikosantiinin syöpää ehkäisevää potentiaalia BeWo-korio-karsinoomasolulinjan avulla. Tutkimuksessa tehtiin myös ylimääräisiä ponnisteluja biomarkkereiden löytämiseksi suorittamalla vertaileva proteomianalyysi ennen ja jälkeen kokeen [5].
5. Tutkimusjulkaisut, joissa BeWo Cells on mukana
Seuraavassa on joitakin merkittäviä tutkimusjulkaisuja, joissa BeWo-trofoblastisoluja käytetään.
Tässä Frontiers in Bioscience-Landmark -lehdessä (2022) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että AMPK-signalointi aktivoi mitofagiaa BeWo-trofoblastisoluissa FUNDC1- ja PRKN-facilitoitujen mitofagian reittien kautta. Tämän seurauksena mitofagia auttaa ylläpitämään ATP-tuotantoa ja mitokondrioiden kalvopotentiaalia.
Tämä artikkeli on julkaistu Animal Cells and Systems -lehdessä (2020). Tutkimuksessa ehdotettiin, että etyyliparabeeni välittää BeWo-solujen apoptoosia kaspaasi-3-reitin säätelyn kautta.
Tässä lääkeainemetabolian ja -disposition (2023) tutkimuksessa käytettiin istukan solulinjoja, mukaan lukien BeWo, JAR, JEG-3 ja HTR-8/SVneo, solujen ksenobioottien ja steroidien laskeutumisen tutkimiseen.
Tässä International Journal of Molecular Medicine -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimusartikkelissa ehdotettiin, että APJ-reseptorin ligandi apeliini edistää BeWo-solujen proliferaatiota APJ:n ja ERK1/2-, stat3- ja AMPK-signaloinnin kautta. Näin ollen se voisi olla olennainen adipokiini, joka säätelee istukan kehitystä.
Tässä Epilepsia-lehdessä (2021) julkaistussa tutkimuksessa selvitettiin sikiöaikaisen ravitsemuksen ja kohtauslääkkeiden vaikutuksia koliinin kuljettajiin ihmisestä peräisin olevassa trofoblastisolulinjassa BeWo.
6. BeWo-solulinjaa koskevat resurssit: BeoWo: protokollat, videot ja muuta
Seuraavassa on joitakin BeWo-soluista saatavilla olevia verkkolähteitä:
- In vitro transfektio: Tämä video auttaa sinua oppimaan in vitro plasmidi-DNA:n transfektioprotokollan adheesiosoluille.
Seuraava linkki sisältää soluviljelytietoja BeWo-soluille:
- BeWo-solut: BeWo-solulinjaa koskevat olennaiset soluviljelytiedot. Tämä sisältää tietoa solualustoista ja viljelyolosuhteista. Siellä on myös aliviljelyä ja kryosäilytettyjen ja proliferatiivisten viljelmien käsittelyä koskevia protokollia.
Viitteet
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Trofoblastien ominaisuudet pitkäaikaisviljelyssä. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt ja H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha ja A. Sakowicz, Preeclamptisen ympäristön aiheuttama CgA:sta peräisin olevan CST-proteiinin tason väheneminen HTR-8/SVneo- ja BeWo-trofoblastisolulinjoissa. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al., Vertaileva proteomianalyysi lääkkeen trikosantiini lisäyksestä BeWo-solulinjaan. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.