BxPC-3-solulinja
BxPC-3 on ihmisestä peräisin oleva haimasyöpäsolulinja. Sitä käytetään laajasti syöpätutkimuksissa. Tutkijat käyttävät näitä soluja pääasiassa haimasyövän biologian tutkimiseen, terapeuttisten kohteiden tunnistamiseen ja syöpälääkkeiden kehittämiseen.
Tämä artikkeli sisältää ratkaisevaa tietoa BxPC-3-solulinjasta, joka voi auttaa merkittävästi työskentelyssä sen kanssa. Siinä käsitellään pääasiassa seuraavia asioita:
- BxPC-3-solulinjan yleiset tiedot ja alkuperä
- BxPC-3-solujen viljely
- BxPC-3-solulinja: Bxxpx-3xb-3: edut ja rajoitukset: edut ja rajoitukset
- BxPC-3-solujen sovellukset tutkimuksessa
- BxPC-3-soluja koskevat tutkimusjulkaisut
- BxPC-3-solulinjaa koskevat resurssit: Bxxx-3xxx: Protokollia, videoita ja muuta
1. bxPC-3-solulinjan yleistiedot ja alkuperä
Tieto solulinjan alkuperästä on ratkaisevan tärkeää sen tutkimuskäytön kannalta. Sen ominaisuuksien, kuten morfologian, solujen koon ja ploidian, tunteminen tekee sen käytöstä suoraviivaisempaa ja helpompaa. Tässä kerrotaan BxPC-3-solujen alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista: Mitä BxPC-3-solut ovat? Mikä on BxPC-3-solulinja? Mikä on BxPC-3-solulinjan alkuperä? Mikä on BxPC-3-solujen morfologia?
- BxPC-3, ihmisen haimakarsinooman solut on saatu 61-vuotiaasta eurooppalaisesta naisesta, jolla oli haiman adenokarsinooma vuonna 1986. Nämä solut osoittautuivat tumorigeenisiksi myös sen jälkeen, kun potilaalle oli tehty useita radio- ja kemoterapiahoitoja. Näin ollen vakiintunut solulinja on korvaamaton malli syövän kehittymisen ja etenemisen tutkimiseen.
- BxPC-3-soluilla on epiteelisolujen kaltainen morfologia.
- BxPC-3:n modaalinen kromosomiluku on 59. Näissä soluissa on homotsygoottinen deleetio kromosomissa 18q, joka koodaa SMAD4/DPC4-proteiinia. Lisäksi solulinjasta puuttuu haimakasvaimissa yleinen BxPC-3 kras-mutaatio. Näissä haimasyöpäsoluissa havaitaan myös BxPC-3 braf-deleetio.
Mitä eroa on BxPC3:n ja PANC-1:n välillä?
BxPC-3 PADC- (haimakanavan duktaalinen adenokarsinooma) ja PANC-1-solut ovat primaarisia haimasyövän solulinjoja, joilla on epiteelimorfologia. Edellisillä soluilla on enemmän epiteelin kaltaisia ominaisuuksia, kun taas myöhemmillä soluilla on enemmän mesenkymaalisia ominaisuuksia [1].
2. bxPC-3-solujen viljely
BxPC-3-solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuslaboratorioissa. Tämän haimasyövän solulinjan tehokkaan viljelyn kannalta on tärkeää tietää seuraavat keskeiset seikat. Opit: Mikä on bxpc3:n kaksinkertaistumisaika? Miten BxPC-3-solulinjaa viljellään?
BxPC-3-solujen viljelyyn liittyvät avainkohdat
|
Populaation kaksinkertaistumisaika: |
BxPC-3-solujen kaksinkertaistumisaika on 48-60 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
BxPC-3 on tarttuva solulinja. |
|
Jakosuhde: |
BxPC-3-soluja viljellään suhteessa 1:2-1:4. Solut pestään 1 x PBS:llä ja inkuboidaan passage-liuoksella, jota kutsutaan akkutaasiksi. Soluihin lisätään 8-10 minuutin kuluttua tuoretta mediaa ja solut sentrifugoidaan. Pelletti suspendoidaan uudelleen väliaineeseen, ja solut kaadetaan uuteen kasvatusastiaan kasvatusta varten. |
|
Kasvualusta: |
BxPC-3-solulinjan viljelyyn käytetään RPMI 1640 -mediaa. Sitä täydennetään 10 %:lla naudan sikiöseerumia, 2,1 mM stabiililla glutamiinilla ja 2,0 g/l NaHCO3:lla solujen ihanteellisen kasvun saavuttamiseksi. Soluväliaine on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
BxPC-3-soluviljelmiä pidetään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, joka on kytketty 5 %:n hiilidioksidin syöttöön. |
|
Varastointi: |
Jäädytetyt solut säilytetään yleensä alle -150 °C:n lämpötilassa tai nestemäisen typen höyryfaasissa solujen elinkelpoisuuden suojaamiseksi. |
|
Pakastusprosessi ja väliaine: |
BxPC-3-soluviljelmien jäädyttämiseen voidaan käyttää CM-1:tä tai CM-ACF:ää. Jäädytysprosessi on hidas, jolloin lämpötila laskee vain 1 °C:n verran, jotta solut eivät joudu sokkiin. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastettuja BxPC-3-soluja sulatetaan 40-60 sekunnin ajan 37 °C:n valmiiksi säädetyssä vesihauteessa. Kun pieni jääkerrostuma on jäänyt, soluihin lisätään tuoretta kasvatusmediaa ja ne sentrifugoidaan pakastusmedian osien poistamiseksi. Sitten solupelletti suspendoidaan uudelleen ja solut annostellaan pulloon kasvattamista varten. |
|
Bioturvallisuustaso: |
BxPC-3-soluviljelmiä ylläpidetään bioturvallisuustason 1 laboratorioissa. |
3. bxPC-3-solulinja: Bxxxx: Edut ja rajoitukset
BxPC-3 on tunnettu haiman adenokarsinooman solulinja, johon liittyy useita etuja ja rajoituksia. Solulinjan tärkeimmät edut ja haitat luetellaan tässä.
Edut
BxPC-3-solulinjan tärkeimmät edut ovat:
-
Haimasyövän in vitro -malli
Haiman adenokarsinoomapotilaista saaduilla BxPC-3-soluilla on olennaisia ominaisuuksia, minkä vuoksi ne ovat sopiva malli haimasyövän käyttäytymisen tutkimiseen in vitro.
-
Tumorigeeninen solulinja
BxPC-3-soluilla on tuumorigeenisiä ominaisuuksia, ja ne voivat muodostaa kasvaimia, kun ne ruiskutetaan nude- tai immuunipuutteisiin hiiriin. Nämä kasvaimet muistuttavat läheisesti primaarisia haiman adenokarsinooman kasvaimia, joten BxPC-3-ksenotransplantaattimalli on ihanteellinen syövän kasvun ja etenemisen tutkimiseen.
Rajoitukset
BxPC-3-solulinjaan liittyvät rajoitukset ovat seuraavat:
-
Ristikontaminaatio
BxPC-3-solulinjaan, kuten mihin tahansa muuhunkin, liittyy ristikontaminaation riski. Tutkijoiden on oltava varovaisia ja noudatettava tiukkoja kontaminaation ehkäisyprotokollia näitä soluja käsitellessään.
-
Hidas kasvunopeus
BxPC-3-soluilla on suhteellisen hidas lisääntymisnopeus, ja niiden kaksinkertaistumisaika on 48-60 tuntia. Tämä ominaisuus saattaa vaatia pidempiä inkubaatioaikoja tietyissä kokeissa, mikä saattaa viivästyttää tutkimuksen edistymistä.
4. bxPC-3-solujen sovellukset tutkimuksessa
BxPC-3-solut tarjoavat monia sovelluksia syöpätutkimuksessa. Yleisimpiä sovelluksia ovat:
- Haimasyövän tutkimus: BxPC-3-solut jäljittelevät haiman adenokarsinoomaa, joten niitä käytetään kasvaimen kehittymisen ja kasvun taustalla olevien geneettisten ja molekulaaristen mekanismien tutkimiseen. Lisäksi tutkijat löytävät näiden solujen avulla uusia biomarkkereita ja hoitokohteita. Lisäksi BxPC-3-solut ilmentävät merkittävästi angiogeneettisiä tekijöitä eli interleukiini-8:a (IL-8), prostaglandiini E2:ta (PGE2) ja verisuonten endoteelin kasvutekijää (VEGF), minkä vuoksi ne soveltuvat angiogeneesin tutkimiseen. Angiogeneesi on keskeinen prosessi, joka liittyy syövän kasvuun ja etäpesäkkeisiin. Vuonna 2022 julkaistussa tutkimuksessa tutkittiin, että laminiini-5 gamma-2 (LAMC2) yliekspressio BxPC3 PDAC:ssä (haiman duktaalinen adenokarsinooma) parantaa sen kasvainten syntyä säätelemällä BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR-signalointireittiä [2].
- Lääkkeiden löytäminen ja kehittäminen: BxPC-3-solulinja toimii korvaamattomana syöpälääkkeiden testausmallina. Tutkijat tutkivat mahdollisten lääkkeiden sytotoksisia, metastaattisia ja apoptoottisia vaikutuksia BxPC3 PDAC:ssa. Alexandria Turnerin ja kollegoiden vuonna 2020 tekemässä tutkimuksessa tutkittiin Elaeocarpus reticulatus -hedelmäuutteiden apoptoottisia ominaisuuksia BxPC-3-haimasyövän soluissa [3]. Vastaavasti vuonna 2020 tehtiin tutkimus, jossa määritettiin Oxialis obtriangulata -nimisen kasvin metanoliuutteen syöpää ehkäisevä potentiaali BxPC-3-soluissa. Lisäksi tutkijat tutkivat myös solumekanistista reittiä, jonka kautta kasviuute harjoitti terapeuttisia vaikutuksia [4].
5.bxPC-3-soluja koskevat tutkimusjulkaisut
Tässä osiossa luetellaan joitakin eniten siteerattuja ja mielenkiintoisia julkaisuja, joissa käytetään BxPC-3-solulinjaa.
Licocoumarone indusoi BxPC-3-haiman adenokarsinooman solukuolemaa estämällä DYRK1A:ta
Tässä Chemico-Biological Interactions -lehdessä (2020) julkaistussa julkaisussa tutkittiin luonnontuotteen, licocoumaronin, apoptoottisia vaikutuksia BxPC-3-haimasyövän soluihin.
Hydroksiklorokiini edistää Bcl-xL:n eston aiheuttamaa apoptoosia ihmisen haimasyövän BxPC-3-soluissa
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Anticancer Research -lehdessä (2022). Tutkimuksessa ehdotettiin, että hydroksiklorokiini aiheuttaa BxPC3-solukuolemaa estämällä BCL-XL-geeniä.
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2020 Journal of Cellular Biochemistry -lehdessä. Tutkimuksessa todetaan, että luonnollisella yhdisteellä, salidrosidilla, on syövänvastaisia vaikutuksia BxPC-3-soluissa säätelemällä HIF-1α:ta (hypoksia-indusoituva tekijä) ja LOXL2-signalointikaskadia.
Tämä Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä julkaistu artikkeli viittaa siihen, että ibrutinibia voidaan käyttää loistavana sädeherkkyyttä lisäävänä aineena haimasyöpäpotilailla. In vitro -tutkimus BxPC-3-soluilla osoittaa, että se vähentää BxPC3:n EGFR-fosforylaatiota ja pAKT:n ja sädehoidon ylössäätämien downstream-geenien ilmentymistä.
Kelidoniini indusoi apoptoosia GADD45a-p53-säätelyn kautta ihmisen haimasyöpäsoluissa
Tässä Integrative Cancer Therapies -lehdessä julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että luontaistuote kelidoniini vaikuttaa apoptoottisesti ihmisen haimasyövän soluissa BxPC-3 säätelemällä BxPC3:n p53- ja GADD45a-signaalia.
6. bxPC-3-solulinjan resurssit: Bxxxx-3: Protokollien, videoiden ja muun muassa
BxPC-3-solulinjalla on monia kiehtovia etuja, jotka tekevät siitä sopivan tutkimuskäyttöön. Monissa BxPC-3-solulinjaa koskevissa verkkolähteissä mainitaan sen käsittely, ylläpito ja transfektioprotokollas.
- BxPC3:n transfektio: BxPC-3-solujen transfektioprotokollan opettaminen: Tämä video on vaiheittainen opas BxPC-3-solujen transfektioprotokollan oppimiseen.
Tässä artikkelin osassa on joitakin linkkejä, joissa selitetään BxPC3-soluviljelyprotokollia.
- BxPC3-soluviljely: Tämä verkkosivusto auttaa sinua oppimaan kryosäilytettyjen ja proliferatiivisten BxPC-3-soluviljelmien subkultivointia ja käsittelyä koskevat protokollat.
Viitteet
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Laminiini-5 gamma-2:n yliekspressio edistää haiman ductuksen adenokarsinooman tuumorigeneesiä EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskadin kautta. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus -hedelmäuutteet vähentävät elinkelpoisuutta ja indusoivat apoptoosia haimasyöpäsoluissa in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Oxialis obtriangulatan syöpää ehkäisevä potentiaali haimasyöpäsoluissa ERK/Src/STAT3-välitteisen reitin säätelyn kautta. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.