BEAS-2B-solut - BEAS-2B-solut hengityselinsairauksien tutkimuksessa: BEBASBAS: A Comprehensive Guide: A Comprehensive Guide: A Comprehensive Guide
BEAS-2B on kuolematon ja ei-tuumorigeeninen ihmisen keuhkoepiteelisolulinja. Se on laajalti käytetty in vitro -malli, jolla tutkitaan keuhkosolujen vastetta erilaisille karsinogeeneille ja toksisille aineille. Lisäksi se on arvokas tutkimusväline erilaisten hengitystieinfektioiden ja -sairauksien, kuten COVID-19:n ja keuhkokarsinoomien, tutkimiseen.
Tässä artikkelissa käsittelemme lähes kaikkia BEAS-2B-keuhkosolulinjan näkökohtia, mukaan lukien sen alkuperä, soluviljelytiedot, edut, haitat ja sovellukset tutkimuksessa. Erityisesti käymme läpi:
- BEAS-2B-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet
- BEAS-2B-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot
- BEAS-2B-solujen edut ja haitat
- BEAS-2B-solulinjan sovellukset tutkimuksessa
- BEAS-2B-solut: Tutkimusjulkaisut
- Soluviljelyprotokollat
1. BEAS-2B-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet
Ensimmäinen asia, jota solulinjassa tarkastellaan, on sen alkuperä ja yleiset ominaisuudet. Tässä opit ihmisen keuhkoputkien epiteelisolujen BEAS-2B:n keskeiset ominaisuudet ja alkuperän. Opiskelet: Mikä on BEAS-2B-keuhkosolulinja? Minkä tyyppisiä soluja Beas 2B on? Mikä on BEAS-2B-solujen alkuperä?
- Keuhkoputkien epiteelisolulinja BEAS-2B kehitettiin ihmisen ei-syöpäkudoksesta vuonna 1988 Curtis C. Harrisin ryhmässä [1].
- BEAS-2B-soluilla on epiteelin kaltainen morfologia.
HBEpC vs. BEAS-2B
HBEpC on ihmisen keuhkoputkien epiteelin primäärisoluja. BEAS-2B:n tavoin ne ovat normaaleja ihmisen keuhkoputkien epiteelisoluja. Niiden elinikä on kuitenkin rajallinen verrattuna immortalisoituun BEAS-2B:hen. Molempia solulinjoja voidaan käyttää keuhkojen biologian, toksikologian ja sairauksien mallintamisen tutkimiseen.
2.bEAS-2B-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot
Solulinjan viljelytiedot voivat helpottaa työtäsi sen kanssa. Tässä artikkelin osassa opit kaikki BEAS-2B-keuhkosolulinjan viljelyyn liittyvät perusasiat. Erityisesti tiedämme: Mikä on BEAS-2B:n kaksinkertaistumisaika? Mikä on BEAS-2B-media? Onko BEAS-2B-solulinja tarttuva? Miten BEAS-2B-soluja viljellään?
BEAS-2B-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
BEAS-2B-populaation kaksinkertaistumisaika on noin 26 tuntia. |
|
Tarttuva tai suspensiossa: |
BEAS-2B on epiteelin kaltainen tarttuva solulinja. |
|
Solutiheys: |
BEAS-2B-solulinjalle suositeltu solutiheys on 1-2 ×104 solua/cm2. Adherentit BEAS-2B-solut huuhdellaan fosfaattipuskurisuolaliuoksella ja inkuboidaan Accutaasin kanssa huoneenlämmössä muutaman minuutin ajan. Solujen dissosioitumisen jälkeen lisätään tuoretta elatusainetta ja solut kerätään sentrifugoimalla. Kerätyt solut resuspendoidaan varovasti ja kaadetaan uuteen pulloon kasvattamista varten. |
|
Kasvualusta: |
BEAS-2B-keuhkosolulinjan viljelyyn käytetään BEGM-mediaa (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium), joka sisältää 10 % naudan sikiöseerumia. Kasvualusta on vaihdettava 2-3 päivän välein. |
|
Kasvuolosuhteet: |
BEAS-2B-kasvatus pidetään 37 °C:ssa kostutetussa inkubaattorissa, jossa on jatkuva 5 %:n hiilidioksidipitoisuus. |
|
Varastointi: |
Jäädytetyt BEAS-2B-solupullot voidaan säilyttää nestemäisen typen höyryfaasissa tai sähköisessä pakastimessa alle -150 °C:n lämpötilassa. |
|
Pakastusprosessi ja -media: |
BEAS-2B-keuhkosolulinjan jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. Solut jäädytetään siten, että lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa solujen elinkelpoisuuden suojelemiseksi. Tällaista menetelmää kutsutaan hitaaksi jäädyttämiseksi. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastetut tai kryosäilötyt BEAS-2B-viljelmät sulatetaan 37 °C:n vesihauteessa, joka sisältää mikrobilääkettä, 40-60 sekunnin ajan. Tämän jälkeen soluihin lisätään väliaine, ja niitä voidaan viljellä suoraan uusissa pulloissa tai ne voidaan sentrifugoida pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Sitten kerätyt solut suspendoidaan uudelleen ja viljellään. Edellisessä tapauksessa pakastusmedia poistetaan 24 tunnin kuluttua. |
|
Bioturvallisuustaso: |
BEAS-2B-viljelmien käsittely edellyttää bioturvallisuustasoa 1. |
3.bEAS-2B-solujen edut ja haitat
Muiden solulinjojen tavoin myös BEAS-2B-soluihin liittyy joitakin etuja ja haittoja. Joitakin niistä käsitellään jäljempänä.
Edut
BEAS-2B-solulinjan etuja ovat muun muassa seuraavat:
|
Kuolematon solulinja |
BEAS-2B-ihmisen keuhkoputkien epiteelisolulinja on kuolematon. Siksi se jatkaa kasvuaan tulematta senesenssiin. Tämä BEAS-2B-solulinjan ominaisuus poistaa tarpeen toistuvaan uuttamiseen primaarisista ihmisen keuhkoepiteelisoluista, joiden elinikä on lyhyempi. |
|
Helppo viljellä |
BEAS-2B-viljelmät ovat helposti ylläpidettävissä. Solut kasvavat ja lisääntyvät vaivattomasti tavanomaisissa viljelyolosuhteissa. Soluviljelyyn ei liity hankalia tai monimutkaisia vaatimuksia. |
|
Ihmisperäinen |
BEAS-2B-solulinja on peräisin ihmisestä ja sillä on merkitystä. Näin ollen se on ihanteellinen in vitro -malli ihmisen hengitysteiden epiteelisolujen vasteiden, käyttäytymisen ja prosessien tutkimiseen. |
Haitat
BEAS-2B-keuhkosolulinjaan liittyvät haitat ovat seuraavat:
|
Muuntuneet ihmisen keuhkoepiteelisolut |
BEAS-2B-solut on muunnettu Ad12-SV40 2B -viruksella, mikä saattaa muuttaa niiden käyttäytymistä ja vasteita verrattuna alkuperäisiin ihmisen keuhkokudoksesta peräisin oleviin keuhkoepiteelisoluihin. |
4.bEAS-2B-solulinjan sovellukset tutkimuksessa
BEAS-2B-solulinjalla on useita sovelluksia biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Joitakin BEAS-2B-solujen yleisiä sovelluksia ovat:
- Toksikologia: BEAS-2B-soluja käytetään usein erilaisten myrkkyjen, ympäristösaasteiden ja kemikaalien genotoksisuuden ja sytotoksisuuden tutkimiseen. Tutkijat käyttävät tätä keuhkoputkien epiteelisolulinjaa arvioidakseen näiden aineiden haitallisia vaikutuksia keuhkojen terveyteen. Lisäksi he tutkivat myös taustalla olevia molekyylimekanismeja. Esimerkiksi vuonna 2021 tehdyssä tutkimuksessa arvioitiin kadmiummetallin toksisuutta BEAS-2B-solulinjassa. Tutkimustulokset paljastivat, että kadmium aiheutti BEAS-2B-keuhkosolulinjan solukuolemaa ja mitokondriovaurioita MAPK-signalointireitin moduloinnin kautta [2]. Toisessa tutkimuksessa käytettiin BEAS-2B-solulinjaa arvioitaessa sinkkioksidinanohiukkasten myrkyllisyyttä hapetusstressissä [3].
- Hengityselinsairauksien mallintaminen: BEAS-2B-solulinja on erinomainen tutkimusväline ja in vitro -malli hengityselinsairauksien, kuten kroonisen obstruktiivisen keuhkosairauden (COPD), astman, keuhkosyövän ja virusinfektioiden, kuten SARS-CoV-2:n, tutkimiseen. Tutkijat pyrkivät aiheuttamaan BEAS-2B-solulinjassa sairauteen liittyviä olosuhteita ja tutkimaan taustalla olevia solu- ja molekyylimekanismeja. Tämä auttaa tunnistamaan mahdollisia lääkekohteita ja kehittämään yksilöllisiä hoitomuotoja. Vuonna 2022 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin BEAS-2B-solulinjaa ja tutkittiin estrogeenin ja sen reseptorien roolia SARS-CoV-2-infektiossa. Tulokset osoittivat, että GPER1-estrogeenireseptorin korkeampi ilmentyminen vähentää BEAS-2B:n SARS-CoV-2 -viruskuormaa. Siksi se voi olla osallisena SARS-CoV-2 -virusinfektiossa tai replikaatiossa [4].
5.bEAS-2B-solut: BEBAS-2B: Tutkimusjulkaisut: Tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on joitakin mielenkiintoisia ja eniten siteerattuja tutkimuksia, joissa käytetään BEAS-2B-soluja.
Grafeenin myrkyllisyys ihmisen normaaleissa keuhkosoluissa (BEAS-2B)
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2011 Journal of Biomedical Nanotechnology -lehdessä. Tutkimuksessa ehdotettiin, että grafiittioksidi aiheuttaa apoptoosia ja sytotoksisuutta normaalissa keuhkoputkien epiteelisolulinjassa (BEAS-2B).
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Journal of Microbiology and Biotechnology -lehdessä (2014). Tässä tutkimuksessa tutkittiin flavonoidi naringeniinin terapeuttista potentiaalia BEAS-2B-solulinjassa. Tulokset viittasivat siihen, että naringeniini suojaa BEAS-2B-keuhkosoluja parakvatin aiheuttamalta toksisuudelta tai oksidatiivisilta vaurioilta.
Tämä tutkimus julkaistiin Inhalation Toxicology -lehdessä (2011). Siinä tutkijat arvioivat amorfisella piidioksidipinnoitteella varustettujen magneettisten nanohiukkasten toksisuusvaikutusta BEAS-2B-solulinjassa in vitro.
Tässä Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä (2022) julkaistussa artikkelissa ehdotettiin, että ursodeoksikolihappo voi estää hengitysteiden epiteelisolujen epänormaalin migraation ja ehkäistä SARS-CoV-2 piikkiproteiinin ja ACE-2:n vuorovaikutuksen aiheuttamia vaurioita. Näin ollen se voi auttaa palauttamaan epiteelin tyvikerroksen.
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2019 Journal of Toxicology and Environmental Health -lehdessä. Tutkimustulosten mukaan krooninen altistuminen radonille voi edistää karsinogeneesiä ihmisen keuhkoputkien epiteelisoluissa (BEAS-2B) aktivoimalla microRNA-34a:ta.
6.soluviljelyprotokollat
BEAS-2B-solujen soluviljelyprotokolla mainitaan tässä.
- BEAS-2B-solujen subkultivointi: Tämä asiakirja auttaa sinua tutustumaan BEAS-2B-solujen elatusaineisiin ja subkulturointimenetelmiin.
- BEAS-2B-solulinja: Tämä verkkosivusto sisältää kaikki perustiedot, joita tarvitset aloittaaksesi työskentelyn BEAS-2B-solulinjan kanssa, mukaan lukien sen väliaineet ja protokollat proliferoivien ja kryosäilytysviljelmien käsittelyä varten.
Viitteet
- Han, X., et al., Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmium indusoi BEAS-2B-solujen apoptoosia ja mitokondrioiden vaurioitumista MAPK-signalointireitin kautta. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Sinkkioksidi (ZnO) -nanohiukkasten toksisuus ihmisen keuhkoputkien epiteelisoluille (BEAS-2B) korostuu oksidatiivisen stressin vaikutuksesta. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Estrogeenireseptorin GPER1:n yliekspressio ja G1-hoito vähentävät SARS-CoV-2-infektiota BEAS-2B-keuhkosoluissa. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.