T98G rakuliin
T98G rakud moodustavad inimese glioblastoomi rakuliini, mida kasutatakse üldiselt biomeditsiinilistes uuringutes. Eelkõige kasutatakse neid rakke ajuvähi uuringutes, et uurida selle tekkele kaasaaitavaid olulisi rakke ja molekulaarseid tegureid. Lisaks aitavad need teadlastel sõeluda ja testida uusi vähivastaseid ravimeid, mis võivad aidata kaasa ravimite arendamisele.
T98G rakuliini üldised omadused ja päritolu
Artikli käesolev osa aitab teil tutvuda T98G rakuliini põhiomadustega. See hõlmab teavet rakuliini päritolu, morfoloogia, suuruse ja ploidsuse kohta. Lisaks annab see põhjaliku ülevaate järgmistest küsimustest: Mis on T98G rakud? Millist tüüpi rakud on T98G? Kust pärineb T98G? Millised on T98G rakuliini omadused? Mis on glioblastoomi rakuliin T98G U87?
- T98G rakuliini asutas GH Stein. See koosneb fibroblastilaadsetest rakkudest, mis on saadud 61-aastase glioblastoma multiforme’iga kaukaasia päritolu mehe ajukoes [1].
- T98G-rakud ei ole tuumorigeensed; need ei põhjusta tuumoreid, kui neid süstitakse alasti hiirtele. Siiski on neil kalduvus paljuneda, kui neile tagatakse sobiv kinnitus rakukultuuris.
- Nendel rakkudel on fibroblastidele sarnane morfoloogia.
- Glioblastoomi rakuliin T98G on hüperpentaploidsusega. Kromosoomide modaalne arv varieerub vahemikus 128–132. 1,39% rakupopulatsioonist võib esineda suuremat ploidsust.
T98 vs T98G
Mõlemad on inimese glioblastoomi rakuliinid ja neil on sarnane päritolu. Ainus erinevus nende rakuliinide vahel on kromosoomide arv. T98G-l on peaaegu kaks korda rohkem kromosoome kui T98-l. Seetõttu tuntakse T98G-d T98 polüploidse variandina.
T98G vs U87
U87 ja T98G on mõlemad inimese glioblastoomi rakuliinid, mida kasutatakse ajuvähi uurimisel. U87-l on T98G GBM-iga võrreldes agressiivsem fenotüüp.
2. T98G rakuliini kasvatamise juhised
Enne töö alustamist on äärmiselt oluline teada rakuliini kasvatamisega seotud teavet. See aitab teil laboris rakuliiniga hõlpsalt ja mugavalt toime tulla. Te peaksite teadma järgmist: Milline on T98G rakuliini kahekordistumisaeg? Milline kasvukeskkond sobib T98G-rakkudele kõige paremini? Millised on T98G-rakkude kasvuomadused? Milline on T98G-rakkude külvitihedus? Kuidas T98G-rakke külmutada?
T98G-rakkude kasvatamise põhipunktid
Kahekordistumisaeg:
T98G-rakkude ligikaudne kahekordistumisaeg on 40 tundi. See võib varieeruda sõltuvalt kasvatamistingimustest.
Adherentne või suspensioonis:
T98G-rakud on adhesiivsed. Nad kinnituvad kultiveerimisnõude põhja ja moodustavad monokihid.
Jagamissuhe:
T98G-rakke subkultiveeritakse jagamissuhtega 1:2 kuni 1:5. Selleks pestakse rakud esmalt 1X PBS-puhvriga ja inkubeeritakse seejärel passaažilahusega (Accutase) 8–10 minutit toatemperatuuril. Pärast inkubeerimist lisatakse lahtikleepunud rakud värskesse kasvukeskkonda ja tsentrifuugitakse. Seejärel suspendeeritakse kogutud rakupellet hoolikalt uuesti ja rakud jaotatakse kasvukeskkonda sisaldavasse kultuurikolbi.
Kasvukeskkond:
T98G-rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEM-kasvukeskkonda, mis sisaldab 10% loote veise seerumit, 2 mM L-glutamiini, 2,2 g/l NaHCO₃ ja EBSS-i. Kasvukeskkond tuleks vahetada 3–4 korda nädalas.
Kasvatustingimused:
T98G-rakke hoitakse niisutatud inkubaatoris, mis on seadistatud temperatuurile 37 °C ja ühendatud CO₂-allikaga.
Säilitamine:
Külmutatud rakke võib säilitada temperatuuril alla -150 °C või vedela lämmastiku aurufaasis, et tagada rakkude eluvõime pikemaks ajaks.
Külmutamisprotsess ja keskkond:
T98G-rakke soovitatakse külmutada CM-1 või CM-ACF rakkude külmutuskeskkonnas. Selleks soovitatakse aeglast külmutamisprotsessi, mille käigus temperatuur langeb vaid 1 °C minutis. See hoiab ära rakkude šoki ja säilitab nende eluvõime.
Sulatusprotsess:
Külmutatud rakke sulatatakse õrnalt, asetades need 40–60 sekundiks eelsoojendatud 37-kraadisesse veevanni. Seejärel suspendeeritakse need uuesti värskes kasvukeskkonnas ja viiakse üle uude kolbi. 24-tunnise inkubeerimise järel vahetatakse kasvukeskkond, et eemaldada külmutuskeskkonda kuuluvad komponendid.
Bioloogilise ohutuse tase:
T98G kultuure hoitakse 1. bioloogilise ohutuse taseme laboris.
Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026
- T98G rakuliin: eelised ja puudused
- T98G rakkude rakendused
- 2. T98G rakuliini kasvatamise juhised
- T98G rakkude kasvatamise põhipunktid
- T98G rakuliini üldised omadused ja päritolu
- 5. T98G-rakke käsitlevad teadusartiklid
- T98G-rakkude ressursid: protokollid, videod ja muud materjalid
- Korduma kippuvad küsimused
T98G rakuliin: eelised ja puudused
T98G on laialdaselt kasutatav inimestelt pärinev glioblastoomi rakuliin. Sellel on mitmeid eeliseid ja puudusi, mis eristavad seda teistest. Artikli selles osas käsitletakse mõningaid märkimisväärseid neist.
Eelised
T98G-rakkude eelised on järgmised:
-
Hästi iseloomustatud
Hästi väljakujunenud ja hästi iseloomustatud rakuliin. Uuritud põhjalikult ja kirjanduses hästi dokumenteeritud.
-
In vitro mudel
Esindab glioblastoomi, kõige agressiivsema ajukasvaja, omadusi. Väärtuslik vahend haiguse uurimiseks, bioloogia mõistmiseks ja ravi arendamiseks.
Puudused
T98G-rakkudega seotud puudused on järgmised:
-
Heterogeensus
T98G-rakkude populatsiooni geneetiline heterogeensus võib põhjustada eksperimentaalsete tulemuste ebajärjekindlust ja raskendada andmete tõlgendamist.
T98G-rakkude rakendused
T98G rakuliin on väärtuslik vahend vähiuuringutes. Siin on loetletud mõned T98G rakkude peamised rakendused teadustöös:
- Vähktõve uurimine: T98G rakuliin on väärtuslik vahend glioblastoomi kasvajate bioloogia uurimiseks. Neid rakke kasutatakse peamiselt glioblastoomi haiguse tekke ja progresseerumise aluseks olevate keerukate molekulaarsete signaaliteede uurimiseks. Lisaks kasutatakse neid kasvajate kasvu soodustavate geneetiliste mutatsioonide ja muude vähirakkude toimemehhanismide kindlakstegemiseks. Yang Chen ja tema kolleegid uurisid neid rakke ning leidsid, et miRNA-21 üleväljendamine vähendab PDCD4 (programmeeritud rakusurma valk 4) taset T98G-rakkudes. See põhjustab PDCD4-vahendatud T98G-rakkude apoptoosi pärssimist. Seega viitab uuring miRNA-21-le kui potentsiaalsele sihtmärgile ravimeetodite väljatöötamisel [2]. Sarnaselt selle uuringuga uurisid Fanqiang Kong ja tema kolleegid mikroRNA-15a rolli T98G glioblastoomi rakkude proliferatsioonis ja invasiivsuses. Nad leidsid, et miRNA-15a-5p soodustab neid rakuprotsesse, mõjutades rakuadhesiivmolekuli 1 (CADM1) [3].
- Ravimite testimine ja ravimeetodite arendamine: T98G on suurepärane glioblastoomi in vitro mudel uute ravimite sõelumiseks ning pakub platvormi potentsiaalsete vähiravimeetodite tõhususe hindamiseks. Teadlased testivad ka mitmesuguseid ühendeid ja ravimeetodeid, et tuvastada ja avastada ravimikandidaate, millel on kõige paljulubavamad glioblastoomi vastased omadused. See viib uute ravimite ja ravistrateegiate väljatöötamiseni, pakkudes lootust glioblastoomi patsientidele. Ühes sellises uuringus uuriti loodusliku ühendi nimega korilagiini vähivastast potentsiaali temozolomiidile resistentses T98G GBM-rakuliinis. Uuringu tulemused näitasid, et korilagiin koos temozolomiidiga tekitab rakkudes tugevamat antiproliferatiivset ja antiapoptootilist toimet [4].
5. T98G-rakke käsitlevad teadusartiklid
Allpool on toodud mõned huvitavad ja sageli tsiteeritud teadusartiklid glioblastoomi rakuliini T98G kohta.
REV-ERB-agonisti SR9009 kemoteraapiline toime inimese glioblastoomi T98G-rakkudele
Selles ajakirjas ASN Neuro (2019) avaldatud artiklis uuriti REV-ERB-agonisti SR9009 vähivastast toimet T98G glioblastoomi rakkudel.
Selles ajakirjas „Neurochemical Research“ (2019) avaldatud uurimusartiklis esitati hüpotees, et naatriumbutüraat ja kvertsetiin pärsivad sünergistlikult kaitsvat autofaagiat T98G-rakkudes ja suurendavad rakkude apoptoosi.
Ajakirjas „Genes“ (2023) avaldatud uuringus viidi hüpoksiaga kohanenud T98G rakuliinil läbi RNA sekveneerimine ning pakuti välja IRE1 (inositooli vajav ensüüm 1) kui paljulubav terapeutiline sihtmärk.
See artikkel avaldati ajakirjas „Oncology Letters“ (2017). Uuringus selgitati välja, et miRNA-548c-3p suunab oma toime T98G onkogeenidele (c-Myb), et pärssida T98G-rakkude proliferatsiooni ja migratsiooni.
Ajakirjas „Journal of Medicinal Plants Research“ (2011) avaldatud artiklis väidetakse, et Dracocephalum tanguticum’i kloroformiekstrakt avaldab T98G-rakkudele proliferatsiooni pärssivat mõju, mõjutades kaspaasi-3, Bax’i ja p21 geene.
T98G-rakkude alased materjalid: protokollid, videod ja muud
Siin on loetletud kättesaadavad materjalid, mis sisaldavad T98G-rakkude kultiveerimise ja transfektsiooni protokolle.
- T98G transfektsioon: See teadusartikkel sisaldab T98G transfektsiooni protokolli. Selles selgitatakse lühidalt meetodit ja vajalikke reagente.
Järgmised lingid aitavad teil T98G-rakkude kultiveerimisprotokolli hästi omandada ja teevad sellega töötamise lihtsamaks.
- T98G-rakud: See veebisait sisaldab olulist teavet T98G-rakkude kultiveerimise protokollide kohta, sealhulgas subkultiveerimise ning proliferatiivsete ja krüokonserveeritud kultuuride käitlemise kohta. Lisaks aitab see teil tutvuda rakkude kasvukeskkondade, tingimuste ja kahekordistumisajaga.
Viited
- Haehl, E., Endoteelrakkude poolt indutseeritud kiirgustaluvus glioblastoomis. 2021, Tübingeni Ülikool.
- Chen, Y. jt., MikroRNA-21 vähendab kasvajavastase geeni PDCD4 ekspressiooni inimese glioblastoomi rakus T98G. Cancer Letters, 2008. 272(2): lk 197–205.
- Kong, F. jt., MikroRNA-15a-5p soodustab T98G glioblastoomi rakkude proliferatsiooni ja invasiivsust, mõjutades rakkude adhesiivmolekuli 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): lk 1–1.
- Milani, R. jt., Corilagin indutseerib kõrget apoptoosi taset temozolomidile resistentses T98G glioomi rakuliinis. Oncol Res, 2018. 26(9): lk 1307–1315.