PANC1-rakud: nende olulise rolli selgitamine pankreasevähi uurimisel
PANC1 on inimese epitelioidne kasvajarakuliin, mida kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes. Seda rakendatakse in vitro mudelina, et uurida pankreasevähi bioloogiat, kantserogeneesi ning selle aluseks olevaid raku- ja molekulaarmehhanisme ning hinnata potentsiaalseid vähivastaseid ravimeetodeid.
- Kasvukeskkond
- PANC1-rakkude kasvatamiseks kasutatakse DMEM-i, millele on lisatud 10% loote veise seerumit (FBS), 4,5 g/l glükoosi, 4 mM L-glutamiini, 1,5 g/l NaHCO3 ja 1,0 mM naatriumpüruvaati. PANC1 rakuliini kasvatuskeskkonda tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
- Kahekordistumisaeg
- Pankrease rakuliin PANC 1 näitab mõõdukat proliferatsioonikiirust, mille kahekordistumisaeg on 25,83 ± 2,03 tundi.
- Kasvutüüp
- PANC1 on epiteelrakkudele iseloomulik adhesiivne rakuliin.
- Bioloogilise ohutuse tase
- BSL-1
- Saadaval
- Cytion — Telli PANC1
PANC1 rakuliini üldised omadused ja päritolu
Käesolevas artikli osas antakse põhiteavet PANC1 rakuliini kohta. Näiteks: mida tähendab lühend PANC-1? Mis on PANC-1 rakud? Milline on PANC1 päritolu? Milline on PANC 1 morfoloogia? Milline on PANC 1 rakkude suurus?
- PANC1-pankreasevähirakkude liin saadi 56-aastaselt valgenahalise mehelt, kellel oli pankreasekanali kartsinoom. Selle pideva kasvuga kasvajarakuliini lõid Michael Lieber ja tema kolleegid 1975. aastal [1].
- PANC1-rakkudel on nõrk diferentseerumisvõime, kuid neil on potentsiaal metastaase tekitada.
- Need inimese pankreasevähirakud näitavad epiteelrakkudele omast morfoloogiat.
- PANC 1-l on hüpertriploidset kariootüüpi. PANC 1 rakuliini puhul on teatatud modaalseks kromosoomide arvuks 63. Genoomis on üks väike rõngakromosoom ja kolm eristatavat markerkromosoomi.
Teave PANC1 rakukultuuri kohta
Käesolev osa on pühendatud PANC1 rakukultuuri teabele. Rakuliini kasvatamistingimuste tundmine võib teie tööd oluliselt hõlbustada. Käsitleme järgmisi teemasid: Milline on PANC-1 rakkude kahekordistumisaeg? Kuidas kasvatada PANC1 rakke? Kas PANC-1 rakud on adhesiivsed? Mis on PANC-1 rakkude kasvukeskkond?
PANC1-rakkude kasvatamise põhipunktid
Kahekordistumisaeg:
Pankrease rakuliin PANC-1 näitab mõõdukat proliferatsioonikiirust, mille kahekordistumisaeg on 25,83 ± 2,03 tundi.
Adherentne või suspensioonis:
PANC-1 on epiteelrakkudele iseloomulik adhesiivne rakuliin.
Istutustihedus:
PANC1-rakke külvatakse tihedusega 1 × 10⁴ rakku/cm². Külvamiseks pestakse rakke PBS-ga (fosfaadipuhverlahus) ja inkubeeritakse dissotsiatsioonilahusega, st Accutase’iga, 8–10 minutit toatemperatuuril. Eraldunud rakud suspendeeritakse uues kasvukeskkonnas ja tsentrifuugitakse. Rakupellet suspendeeritakse hoolikalt kasvukeskkonnas ja rakud valatakse kasvu jaoks uutesse kolbidesse.
Kasvatuskeskkond:
PANC1-rakkude kasvatamiseks kasutatakse DMEM-i, millele on lisatud 10% loote veise seerumit (FBS), 4,5 g/l glükoosi, 4 mM L-glutamiini, 1,5 g/l NaHCO₃ ja 1,0 mM naatriumpüruvaati.
PANC1-rakkude kasvatuskeskkonda tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
Kasvatustingimused:
PANC1-rakke kasvatatakse niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja 5% CO₂ sisaldusega.
Säilitamine:
PANC-rakke säilitatakse vedela lämmastiku aurufaasis või elektrilises sügavkülmikus (temperatuuril alla -150 °C), et tagada rakkude eluvõime.
Külmutamisprotsess ja keskkond:
PANC1-rakke külmutatakse CM-1 või CM-ACF keskkonnas. PANC1-rakkude külmutamiseks kasutatakse aeglast külmutamismeetodit, mis võimaldab temperatuuri langust vaid 1 °C minutis.
Sulatusprotsess:
Rakke sulatatakse 37 °C veevannis, kuni jääb alles väike jääklomp. Sulatatud rakud suspendeeritakse uuesti keskkonnas ja tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkond. Rakupalett suspendeeritakse hoolikalt uuesti ja rakud jaotatakse tihedusega 5 × 10⁴ rakku/cm² uutesse kolvidesse kasvatamiseks. PANC1-rakkude kinnitumine võtab aega ligi 48 tundi.
Bioloogilise ohutuse tase:
PANC1-rakkude kultiveerimiseks soovitatakse 1. bioloogilise ohutuse taset.
PANC1-rakkude eelised
Iga rakuliiniga kaasnevad teatud eelised ja puudused, mis eristavad seda teistest. Käesolevas jaotises selgitatakse PANC1-rakuliiniga seotud eeliseid ja puudusi.
Eelised
PANC1-rakkude peamised eelised on järgmised:
-
In vitro pankreasevähi mudel
PANC1 esindab inimese pankrease kanalite adenokartsinoomi omadusi. Seetõttu kasutatakse seda in vitro mudelina pankrease kasvaja arengu, kasvu ja sellega seotud molekulaarsete mehhanismide uurimiseks.
-
Geneetilised mutatsioonid
PANC1-rakkudes esineb palju PANC1-mutatsioone, mida leitakse pankreasevähkides, mistõttu on need väärtuslikud haigustega seotud signaaliteede uurimiseks. Need mutatsioonid hõlmavad peamiselt PANC1 KRAS ja PANC1 P53.
PANC1-rakkude rakendused teadusuuringutes
Inimese vähirakuliini PANC1 kasutatakse sageli pankreasevähi uurimisel. Siin oleme nimetanud mõned levinumad uurimisvaldkonnad.
- Vähibioloogia: PANC1-rakke kasutatakse pankreasevähi tekke, kasvu ja paljude teiste rakuprotsesside, sealhulgas proliferatsiooni, invasiivsuse, migratsiooni ja rakusurma uurimiseks. Lisaks uuritakse ka erinevaid rakusignaaliteid, geneetilisi mutatsioone ja molekulaarseid mehhanisme, mis on seotud pankrease kartsinogeneesiga. 2018. aastal läbi viidud uuringus kasutati PANC1-rakke ja leiti, et omeprasool pärsib pankrease kasvajarakkude invasiivsust arüülsüsivesinikuretseptori vahendatud JNK induktsiooni kaudu. JNK aktiveerimine omakorda moduleerib teisi rakkude geene ja põhjustab onkogeensete faktorite pärssimist [3]. Samamoodi näitas teine uuring, et AKT- ja ERK-signaaliteed on seotud inimese pankreasevähi PANC1-rakkude proliferatsiooni, invasiivsuse ja rändega [4].
- Ravimite sõelumine: PANC1-rakuliin on väärtuslik vahend potentsiaalsete vähivastaste ravimite või ravimeetodite sõelumiseks. Teadlased uurivad tavaliselt ravimresistentsust ja potentsiaalsete ravimikandidaatide toimemehhanisme. Samira Alipouri ja kolleegide poolt 2022. aastal läbi viidud uuringus väideti, et Portulaca oleracea ekstrakt avaldab PANC1-rakkudele apoptootilist ja tsütotoksilist mõju ning võib seetõttu olla potentsiaalne pankreasevähi ravivahend. Taim avaldab neid kasvajavastaseid toimeid, reguleerides CDK1- ja P53-geene [5].
PANC-1-rakkude ostmine: teie sissepääs kõhunäärmevähi uurimisse
PANC1-rakke käsitlevad publikatsioonid
Käesolevas jaotises on nimetatud mõned huvitavad ja sageli tsiteeritud teaduspublikatsioonid, milles käsitletakse PANC1-rakke.
See uurimus avaldati 2019. aastal rahvusvahelises ajakirjas „Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology”. Uuringus väideti, et Scutellaria barbata taimest rohelise sünteesi teel saadud kulla nanokübemed avaldavad kasvajavastast toimet pankreasevähirakkude liini PANC1 suhtes.
Ajakirjas „Toxicology and Environmental Health Sciences“ (2020) ilmunud artiklis uuriti Delonix regia ekstrakti ja hõbedananoosakeste vähivastast potentsiaali kahe inimese vähirakkude liini, st PANC1 ja MCF7 suhtes.
Kuldnanopartiklite süntees Panax notoginsengi lehtedest ja nende vähivastane toime pankreasevähi PANC-1 rakuliinidel
See artikkel avaldati 2019. aastal rahvusvahelises ajakirjas „Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology”. Uuringus uuriti Panax notoginsengi taime leheekstraktist sünteesitud kuldnanopartiklite terapeutilist mõju PANC1 kõhunäärmevähi rakuliinile.
KS-58 kui esimese K-Ras (G12D)-inhibeeriva peptiidi, millel on in vivo vähivastane toime, süntees
Käesolev uuring avaldati ajakirjas „Nature Scientific Reports“ (2020). Selles loodi peptiid KS-58, mis inhibeerib selektiivselt PANC-1 KRAS G12D-mutatsiooni in vitro.
Isorhamnetiin pärsib PANC-1 pankreasevähirakkude proliferatsiooni S-faasi peatamise kaudu
See uurimus avaldati ajakirjas „Biomedicine & Pharmacotherapy“ 2018. aastal. Uurimuses väideti, et flavonoid isorhamnetiin pärsib PANC-1 rakkude proliferatsiooni rakutsükli S-faasi peatamise kaudu.
Uus LIMK2-inhibiitor blokeerib Panc-1-tuumori kasvu hiire ksenotransplantaadi mudelis
Ajakirjas „Oncoscience“ (2014) avaldatud uuringus väidetakse, et uus LIMK2-inhibiitor pärsib PANC-1 ksenotransplantaadi hiiremudelis kasvaja kasvu.
PANC1-rakuliini ressursid: protokollid, videod ja muud
Allpool on loetletud mõned PANC 1 rakkudega seotud kättesaadavad ressursid.
- PANC-1 transfektsioon: see video on juhend PANC-1 transfektsiooniprotokolli õppimiseks.
- Rakuliini subkultiveerimine: selles videos selgitatakse adhesiivsete rakuliinide subkultiveerimise üldist protokolli.
Järgmised lingid sisaldavad PANC1-rakkude rakukultuuri protokolli.
- PANC1-rakud: see link sisaldab PANC1-rakuliini sulatamise ja subkultiveerimise protokolli.
- PANC 1 rakukultuur: sellelt veebilehelt leiate kogu olulise teabe PANC 1 rakukultuuri kohta, sealhulgas PANC 1 rakukultuuri kasvukeskkonnad, rakkude sulatamine, külmutamine ja subkultiveerimise protokoll.
KKK: PANC-1-rakkude ja nende rakenduste tutvustus
Viited
- Lieber, M. jt., Pideva kasvajarakuliini (PANC-1) loomine inimese eksokriinse kõhunäärme kartsinoomist. International Journal of Cancer, 1975. 15(5): lk 741–747.
- Kim, Y. jt. Pankrease duktaalse adenokartsinoomi rakuliinide võrdlev proteoomiline profiil. Mol Cells, 2014. 37(12): lk 888–98.
- Jin, U.-H. jt., Pankreasevähi Panc1-rakkude rändamise pärssimine omeprasooliga sõltub JNK arüülsüsivesiniku retseptori aktiveerimisest. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 501(3): lk 751–757.
- Yuetong, L. jt., Salidrosiid pärsib inimese pankreasevähi PANC1- ja SW1990-rakkude proliferatsiooni, rändamist ja invasiivsust AKT- ja ERK-signaaliteede kaudu. Die Pharmazie – rahvusvaheline farmaatsiateaduste ajakiri, 2020. 75(8): lk 385–388.
- Alipour, S., L. Pishkar ja V. Chaleshi, Portulaca oleracea ekstrakti tsütotoksiline toime CDK1- ja P53-geenide ekspressiooni regulatsioonile pankreasevähirakkude liinis. Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): lk 1792–1801.