NCI-H460 rakud – kopsuvähiuuringute suunamine NCI-H460 andmete abil
NCI-H460 on inimestelt pärinevad mitteväikerakk-kopsuvähirakud, mida kasutatakse laialdaselt kopsuvähi ja toksikoloogia uuringutes. See rakuliin on väärtuslik vahend mitmesuguste vähibioloogia aspektide uurimiseks, sealhulgas kasvaja arengu, kasvu ja ravimresistentsuse uurimiseks. Lisaks on NCI-H460 rakud sobiv mudel vähivastaste ravimite väljatöötamiseks.
- Kasvukeskkond
- NCI-H460 kultiveerimiskeskkonnana kasutatakse RPMI 1640-t. Seda täiendatakse 10% veise loote seerumiga, 2,1 mM stabiilse glutamiiniga ja 2,0 g/l NaHCO3-ga. Kasvukeskkonda tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
- Kahekordistumisaeg
- NCI-H460 rakuliini kahekordistumisaeg on umbes 33 tundi.
- Kasvutüüp
- NCI-H460 kopsuvähirakud on adhesiivsed.
- Bioloogilise ohutuse tase
- BSL-4
- Saadaval
- Cytion — Telli NCI-H460
NCI-H460 rakud: päritolu ja üldised omadused
Rakuliini päritolu ja üldised omadused mõjutavad oluliselt selle kasutamist teadusuuringutes. Artikli käesolev osa aitab teil tutvuda NCI-H460 kopsuvähi rakkude päritolu ja olulisemate omadustega. Saate teada: Mis on NCI-H460 rakud? Milline on NCI-H460 rakuliini tüüp? Milline on NCI-H460 morfoloogia?
- NCI-H460 rakuliin pärineb suurerakulise kopsuvähiga Euroopa mehe pleuraefusioonist. Selle asutasid 1982. aastal A.F. Gazdar ja tema kolleegid.
- NCI-H460 kopsuvähirakkudel on epiteelne morfoloogia.
- NCI-H460 on kasvajate tekitav rakuliin, millel on hüpotriploidset kromosoomikoosseisu. Nende rakkude modaalne kromosoomide arv on 57. NCI-H460 rakkudel esineb võrreldava sagedusega ka 58 modaalse kromosoomide arvu.
- Nendel kopsuvähirakkudel esineb palju NCI-H460 mutatsioone, mis on sarnased mitteväikerakk-kopsuvähiga, näiteks NCI-H460 KRAS-mutatsioon, mis on seotud rakkude proliferatsiooni, kasvu, invasiivsuse ja metastaasidega.
NCI-H460 rakkude kasvatamise juhised
NCI-H460 rakuliini nõuetekohaseks käitlemiseks ja hooldamiseks peaksite teadma järgmisi põhipunkte. Siit leiate teavet NCI-H460 rakuliini kahekordistumisaega, NCI-H460 kasvatuskeskkonda ja NCI-H460 kopsuvähirakkude kasvatamise põhilisi protseduure.
NCI-H460 rakkude kasvatamise põhipunktid
Kaksikustumisaeg:
NCI-H460 rakkude kahekordistumisaeg on umbes 33 tundi.
Adherentne või suspensioonis:
NCI-H460 kopsuvähirakud on adhesiivsed.
Subkultiveerimissuhe:
NCI-H460 rakuliini jaoks soovitatav subkultiveerimissuhe on 1:2 ja 1:4. Pärast vana kasvukeskkonna eemaldamist loputatakse adhesiivseid rakke 1x fosfaadipuhvri soolalahusega. Seejärel inkubeeritakse rakke Accutase passaažilahusega 8–10 minutit toatemperatuuril. Dissotsieerunud rakud suspendeeritakse uuesti kasvukeskkonnas ja tsentrifuugitakse. Korjatud rakud suspendeeritakse uuesti ja valatakse uude kolbi kasvatamiseks.
Kasvukeskkond:
NCI-H460 kultuurikeskkonnana kasutatakse RPMI 1640-t. Seda täiendatakse 10% loote veise seerumiga, 2,1 mM stabiilse glutamiiniga ja 2,0 g/l NaHCO3-ga. Keskkonda tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
Kasvatustingimused:
NCI-H460 kultuure hoitakse 37 °C juures niisutatud inkubaatoris, kuhu juhitakse pidevalt 5% CO₂.
Säilitamine:
NCI-H460 kopsuvähirakke võib pikaajaliselt säilitada vedela lämmastiku aurufaasis või temperatuuril alla –150 °C elektrilises ülisügavkülmikus.
Külmutamisprotsess ja kasvukeskkond:
NCI-H460 rakkude külmutamiseks ja säilitamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF kasvatuskeskkonda. Rakkude eluvõimelisuse maksimaalseks säilitamiseks soovitatakse kasutada aeglast külmutamismeetodit.
Sulatusprotsess:
Külmutatud NCI-H460 rakke sulatatakse eelsoojendatud veevannis (temperatuuril 37 °C) 40–60 sekundit, kuni jääb alles väike jääklomp. Sulatatud rakkudele lisatakse värsket kasvatuskeskkonda ja neid tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonda kuuluvad komponendid. Kogutud rakupellet suspendeeritakse uuesti ja rakud jaotatakse uutesse kolbidesse, mis sisaldavad kasvuks vajalikku kasvatuskeskkonda. NCI-H460 rakkudel võib kolbi pinnale kinnitumine võtta aega ligi 24 tundi.
Bioloogilise ohutuse tase:
NCI-H460 kopsuvähirakke käideldakse ja hoitakse 1. bioloogilise ohutuse taseme laborites.
Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026
NCI-H460 rakkude eelised ja puudused
NCI-H460 on kopsuvähi uurimisel laialdaselt kasutatav rakuliin. Käesolevas jaotises käsitletakse NCI-H460 kopsuvähirakkudega seotud üldisi eeliseid ja puudusi.
Eelised
NCI-H460 mitteväikerakk-kopsuvähi rakuliini eelised on järgmised:
-
Tuumori päritolu
NCI-H460 rakuliin on saadud suurerakulise kopsuvähi patsiendilt, esindades seda konkreetset kopsuvähi tüüpi. Neid kasutatakse mudelina kopsuvähi bioloogia uurimiseks ning uute ja tõhusate ravimeetodite väljatöötamiseks. NCI-H460 rakkudel on kasvajate tekitamise potentsiaal ja neid saab süstida immuunpuudulikkusega hiirtesse, et luua in vivo kasvajamudeleid kasvaja kasvu, arengu ja potentsiaalsete ravimite tõhususe uurimiseks.
-
Kõrge proliferatsioonikiirus
NCI-H460 kasvukiirus on suurem kui teistel mitteväikerakk-kopsuvähi rakuliinidel, näiteks A549. See eelis suurendab nende kättesaadavust ja aitab teadlastel läbi viia korratavaid ja ajakriitilisi katseid.
Puudused
NCI-H460 kopsuvähirakkudega seotud puudused on järgmised:
-
Homogeensus
NCI-H460 rakud on homogeensed, kuna need on saadud ühe patsiendi kasvajast. Seetõttu puudub neil üldiselt patsientide kasvajates täheldatav keerukus ja heterogeensus.
NCI-H460 rakkude kasutamine teadusuuringutes
NCI-H460 kopsuvähirakke kasutatakse laialdaselt kopsuvähiga seotud uuringutes. Siin on mõned NCI-H460 rakkude olulisemad teaduslikud rakendused:
- Kopsuvähi uurimine: NCI-H460 rakud on hindamatu väärtusega mudel kasvajate tekke, kasvu ja metastaasidega seotud raku- ja molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. Lisaks kasutatakse neid oluliste signaaliteede, molekulaarsete sihtmärkide ja kopsuvähi progresseerumisega seotud erinevate geneetiliste mutatsioonide uurimiseks. Nende tegurite tõhusaks uurimiseks on NCI-H460 rakkudega läbi viidud mitmeid uuringuid. 2019. aastal läbi viidud uuringus väideti, et üleväljendunud tuumaubikvitaarne kaseiini ja tsükliinist sõltuvate kinaaside substraat (NUCKS) on seotud kasvajarakkude kasvuga PI3K/AKT signaalitee reguleerimise kaudu [1]. Samamoodi kasutati NCI-H460 rakke in vitro ja in vivo uuringus eIF4E-geeni rolli uurimiseks. Tulemused näitasid, et eIF4E-geen on seotud kopsuvähi kasvu ja angiogeneesiga ning seda saab sihtmärgiks võtta paljulubavate kopsuvähivastaste ravimite väljatöötamisel [2].
- Ravimite avastamine ja arendamine: inimese kopsuvähi rakuliini NCI-H460 kasutatakse laialdaselt ravimite avastamise ja arendamise uuringutes. Teadlased kasutavad neid rakke uute ravimikandidaatide, sihtterapiate ja peamiselt NCI-H460 KRAS-mutatsioonidele suunatud ravimeetodite toksilisuse ja efektiivsuse uurimiseks. Haoyue Hu ja tema kolleegide poolt 2023. aastal läbi viidud uuringus kasutati NCI-H460 rakke, et uurida ravimi anlotiniibi vähivastast toimet. Tulemused näitasid, et anlotinib mõjutas osaliselt KRAS-mutatsiooniga kopsuvähirakkude kasvu, pärssides MEK/ERK signaalikaskadi [3]. Samuti uuriti fenoolühendi, karnooshappe, antiproliferatiivset ja proapoptootilist toimet NCI-H460 rakkude abil [4].
- Ravimresistentsus: NCI-H460 rakuliin on ideaalne kopsuvähi ravimresistentsuse mehhanismi uurimiseks. Teadlased kasutavad neid rakke ravimresistentsuse mudelite väljatöötamiseks, et tuvastada selle taga olevaid geene, molekulaarseid tegureid ja signaaliteid. Näiteks töötati ühes uuringus välja pemetrexedile resistentsed NCI-H460 rakud, et uurida mitme sihtmärgiga antifolaadi pemetrexedi resistentsuse aluseks olevaid molekulaarseid mehhanisme mitteväikerakk-kopsuvähirakkudes [5].
Ostke NCI-H460 rakuliin: teie sissepääs kopsuvähi uurimisse
NCI-H460 rakke käsitlevad teadusartiklid
Siin on mõned huvitavad teadusartiklid NCI-H460 kopsuvähirakkude liini kohta.
Ajakirjas „Molecules“ (2023) avaldatud uuringus väidetakse, et mustadest oadest saadud looduslik α-1,6-glükaan BBWPW pärsib NCI-H460 rakkude paljunemist, reguleerides PI3K/AKT/MAPK signaaliteed.
Ajakirjas „Phytomedicine“ (2019) avaldatud artiklis uuriti, et dioscin-6′-O-atsetaat, uus looduslik ühend, avaldab antiproliferatiivset mõju NCI-H460 kopsuvähirakkudele.
miRNA-425-5p soodustab kopsuvähi kasvu PTEN/PI3K/AKT signaalitee kaudu
Ajakirjas „BMC Pulmonary Medicine“ (2020) avaldatud uuringu kohaselt soodustab mikroRNA-425-5p kopsuvähi teket PTEN/PI3K/AKT signaalitee kaudu.
Ajakirjas „Molecular Medicine Reports“ (2017) avaldatud artiklis käsitleti kinalizariini ühendi kasvajavastast potentsiaali ja selle aluseks olevaid mehhanisme NCI-H460 ja teistes kopsuvähi rakkudes.
Ajakirjas „Food and Function“ (2019) avaldatud uuringus rõhutatakse Eucalyptus globulus Labill. ekstrakti potentsiaalset vähivastast toimet NCI-H460 rakkude puhul. Tulemused näitasid, et taimeekstrakt avaldas neid toimeid, suurendades NCI-H460 p53 ekspressiooni ja moduleerides rakutsükli profiili.
NCI-H460 rakuliini alased materjalid: protokollid, videod ja muud
Siin on mõned veebivahendid, mis käsitlevad NCI-H460 kopsuvähirakke.
- NCI-H460 rakkude transfektsioon: see videojuhend on samm-sammuline juhis NCI-H460 rakkude transfektsiooniks plasmiid-DNA-ga.
Järgmised lingid sisaldavad olulist teavet H460-rakkude kultiveerimise kohta.
- NCI-H460 rakud: see veebisait pakub olulist teavet NCI-H460 rakkude kasvukeskkonna, subkultiveerimise, külmutamise ja sulatamise protseduuride kohta.
- NCI-H460 rakkude subkultiveerimine: See dokument annab juhiseid NCI-H460 rakuliini subkultiveerimise kohta. Lisaks aitab see teil tutvuda NCI-H460 rakkude transfektsiooniprotokolliga.
NCI-H460 rakuliini uurimine: KKK ja tähelepanekud
NCI-H460 rakuliin pärineb patsiendilt, kellel on suurrakuline kopsukartsinoom, mistõttu on see väärtuslik mudel seda tüüpi kopsuvähi uurimiseks.
NCI-H460 rakke kasutatakse kopsuvähi bioloogia uurimiseks, uute ravimeetodite väljatöötamiseks ja võimalike ravimite tõhususe hindamiseks. Neid saab süstida ka immuunpuudulikele hiirtele, et luua in vivo kasvajamudeleid kasvaja kasvu ja arengu uurimiseks.
Nii NCI-H460 kui ka A549 rakuliinid on saadud kopsukartsinoomidest, kuid NCI-H460 esindab suurrakulist kartsinoomi, A549 aga adenokartsinoomi. See erinevus histoloogilises alatüübis mõjutab nende omadusi ja käitumist.
Jah, NCI-H460 rakkudel on tuumorigeenne potentsiaal ja neid saab implanteerida immuunpuudulikesse hiirtesse, et luua ksenotransplantaadimudeleid, mis hõlbustab suurrakulise kopsukartsinoomi in vivo uurimist.
Paklitakseeli kombineerimine teiste ühenditega võib suurendada selle tsütotoksilist toimet NCI-H460 rakkudele, mis võib parandada kopsuvähi ravitulemusi.
Jah, NCI-H460 rakud ekspresseerivad hüpoksantiini-guaniini fosforibosüültransferaasi, mis on oluline nukleotiidide ainevahetuse ja rakkude proliferatsiooni jaoks.
NCI-H460 rakke kasutatakse tavaliselt vähi- ja toksikoloogiauuringutes, et uurida kasvaja kasvu, hinnata ühendite tsütotoksilist mõju ja uurida ravimresistentsuse mehhanisme.
NCI-H460 rakud ekspresseerivad tavaliselt neurofilament-tripletvalke, mis osalevad tsütoskeleti struktuuri säilitamises ja võivad mängida rolli vähirakkude migratsioonis ja invasiivsuses.
Teiste hulgas on κB-rada seotud NCI-H460 rakkude proliferatsiooni ja ellujäämise reguleerimisega, mis pakub potentsiaalseid sihtmärke terapeutiliseks sekkumiseks kopsuvähi puhul.
Jah, NCI-H460 rakke kasutatakse tavaliselt in vitro mudelina kemoterapeutiliste ainete, sealhulgas paklitakseeli ja karboplatiini tsütotoksilise toime hindamiseks, mis aitab kaasa tõhusa vähiravi väljatöötamisele.
Viited
- Hu, C. jt., NUCKS soodustab kopsuvähirakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsust Pi3k/Akt signaalitee kaudu. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): lk E55–61.
- Qi, X. jt., EGPI-1, uus eIF4E/eIF4G interaktsiooni inhibiitor, pärsib kopsuvähirakkude kasvu ja angiogeneesi Ras/MNK/ERK/eIF4E signaalitee kaudu. „Chemico-Biological Interactions”, 2022. 352: lk 109773.
- Hu, H. jt., Anlotinib avaldab KRAS-mutatsiooniga kopsuvähirakkudele vähivastast mõju, pärssides MEK/ERK signaaliteed. Cancer Management and Research, 2020: lk 3579–3587.
- Corveloni, A.C. jt., Karnoshape avaldab antiproliferatiivset ja proapoptootilist toimet kasvajarakkudes NCI-H460 ja mittekasvajarakkudes IMR-90. Journal of Toxicology and Environmental Health, osa A, 2020. 83(10): lk 412–421.
- Xu, Y.-L. jt., Pemetrexedile resistentsete NCI-H460/PMT-rakkude loomine ja iseloomustamine. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (endine Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): lk 731–739.