KG-1 rakuliin
KG-1 rakuliini üldised omadused ja päritolu
Rakuliini päritolu ja üldised omadused aitavad teadlasel otsustada, kas seda oma töös kasutada. Enne töö alustamist võite selle teabega tutvuda. Käesolev artikliosa käsitleb KG-1 makrofaagide päritolu ja omadusi. Siit saate teada: Mis on KG-1 rakud? Mis on KG-1a rakuliin? Milline on KG-1 rakuliini päritolu? Milline on KG-1 morfoloogia?
- KG-1 on lümfoblastilaadne rakuliin, mis on saadud ägeda müelogeense leukeemiaga kaukaasia päritolu mehe (59-aastane) luuüdi aspiratsiooniproovist. Selle asutasid Koeffler ja Golde 1978. aastal. Need rakud on peamiselt promüelotsüütide või müeloblastide küpsemisstaadiumis [1].
- KG-1 rakkudel on lümfoblastilaadne morfoloogia.
- KG-1 rakuliini kariotüüp näitab pseudodiploidset kromosoomide modaalarvu.
KG-1 ja KG-1a
KG-1a on emaliini KG-1 rakkude alaliin. See arendati välja pärast KG-1 rakuliini 35 passaaži. See on KG-1 rakuliiniga võrreldes vähem diferentseerunud. Lisaks on see alamliin tsütokeemiliselt, morfoloogiliselt ja funktsionaalselt vähem küps võrreldes emaliiniga (KG-1).
Teave KG-1 rakuliini kasvatamise kohta
Artikli selles osas käsitletakse kogu olulist teavet KG-1 rakuliini kasvatamise kohta, mis võib teie tööd hõlbustada. Siit saate teada: Milline on KG-1 rakuliini kahekordistumisaeg? Millised on KG-1 makrofaagide kasvatamistingimused? Kuidas kasvatada KG-1 rakke?
KG-1 rakkude kasvatamise põhipunktid
Kaksikordistumisaeg:
KG-1 rakuliini kahekordistumisaeg on umbes 45 tundi. See võib aga kultiveerimistingimustest sõltuvalt varieeruda.
Adherentsed või suspensioonis:
KG-1 rakud kasvavad suspensioonis.
Rakutihedus:
KG-1 rakuliini optimaalne rakutihedus on 1–3 × 10⁵ rakku/ml. Subkultiveerimiseks viiakse rakususpensioon üle steriilsesse torusse ja tsentrifuugitakse. Saadud rakudele lisatakse seejärel värsket kasvukeskkonda ja need suspendeeritakse hoolikalt uuesti. Seejärel jaotatakse rakud uutesse kolvidesse ja kasvatatakse optimaalsel rakutihedusel. Rakke võib jagada, kui need saavutavad maksimaalse rakutiheduse 1–2 × 10⁶ rakku/ml.
Kasvukeskkond:
IMDM (Iscove'i modifitseeritud Dulbecco'i keskkond), mis sisaldab 10% FBS-i, 4,5 g/l glükoosi, 4 mM L-glutamiini, 1,0 mM naatriumpüruvaati ja 3,0 g/l NaHCO₃, kasutatakse KG-1 rakkude kasvatamiseks. Kasvatuskeskkond tuleks vahetada iga kolme päeva järel.
Kasvatustingimused:
KG1 AML-rakuliini kasvatatakse niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja 5% CO₂ sisaldusega.
Säilitamine:
Külmutatud rakke hoitakse vedela lämmastiku aurufaasis või temperatuuril alla -150 °C elektrilises üli-madala temperatuuri külmkapis, et säilitada rakkude eluvõime.
Külmutamisprotsess ja kasvukeskkond:
KG-1 rakkude külmutamiseks sobib CM-1 või CM-ACF. Rakud külmutatakse aeglase külmutamisprotsessi abil, et kaitsta rakke šoki eest. See meetod võimaldab temperatuuri järkjärgulist langust 1 °C minutis.
Sulatusprotsess:
Rakke sulatatakse eelsoojendatud 37 °C veevannis, kuni jääb alles väike jääklomp. Sulatatud rakkudele lisatakse värsket kasvatuskeskkonda ja tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonda kuuluvad komponendid. Rakupellet suspendeeritakse hoolikalt uuesti ja valatakse uutesse kolbidesse, mis sisaldavad kasvatuskeskkonda.
Bioloogilise ohutuse tase:
KG-1 rakukultuuride säilitamiseks on hädavajalik 1. bioloogilise ohutuse taseme labor.
Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026
KG-1 rakuliin: eelised ja piirangud
Nagu teistelgi rakuliinidel, on ka KG-1 müeloidse leukeemia rakuliinil palju eeliseid ja piiranguid. Selles jaotises tutvume mõningate olulisematega, mis võivad olla otsustava tähtsusega selle kasutamise valimisel teie uurimistöös.
Eelised
KG-1 rakkude peamised eelised on järgmised:
-
Lihtne kasvatamine
KG-1 rakke on teaduslaborites lihtne kasvatada, kuna nende kasvatamisnõuded on lihtsad. Nende lihtne hooldamine ja kasvatamistingimused muudavad need kättesaadavaks laiale ringile teadlastele, kellel on olemas põhilised rakukultuuri kasvatamise vahendid.
-
Äge müeloidne leukeemia (AML) mudel
Ägeda müeloidse leukeemia (AML) diagnoosiga meespatsiendilt saadud KG-1 AML-rakuliin on väärtuslik vahend AML-i bioloogia uurimiseks ja potentsiaalsete ravimeetodite uurimiseks, pakkudes ülevaadet selle haiguse aluseks olevatest mehhanismidest ja ravistrateegiatest.
Piirangud
KG-1 rakuliiniga seotud piirangud on järgmised:
-
In vitro mudel
KG-1 rakud on väärtuslik in vitro mudel AML-i uurimiseks; siiski on oluline märkida, et need ei pruugi täielikult kajastada haiguse keerukust in vivo, olles lihtsustatud rakumudel, mis ei pruugi hõlmata kõiki AML-i bioloogia aspekte.
KG-1 rakkude rakendused teadustöös
KG-1 pakub mitmeid paljulubavaid rakendusi biomeditsiinilises uurimistöös. Mõned olulisemad KG1-makrofaagide kasutusalad teadustöös on järgmised:
- Vähktõve uurimine: KG-1 rakud on saadud ägeda müeloidse leukeemia patsiendilt ja seetõttu peetakse neid väärtuslikuks uurimisvahendiks AML-i bioloogia uurimisel. Teadlased kasutavad neid rakke AML-i arengut, kasvu ja ravimresistentsust mõjutavate raku- ja molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. See hõlmab ka AML-iga seotud uute biomarkerite, geneetiliste mutatsioonide ja signaaliteede tuvastamist ja avastamist. Näiteks 2019. aastal läbi viidud uuringus selgus, et pikk mittetranslatsiooniline RNA linc00239 soodustab doksorubitsiini resistentsust ja pahaloomulist käitumist ägeda müeloidse leukeemia rakkudes (KG-1). Edasised uuringud näitasid, et lncRNA aktiveerib PI3K/Akt/mTOR signaaliteed, et avaldada neid mõjusid AML-rakkudes [2].
- Toksikoloogia: KG1-rakuliini kasutatakse laialdaselt toksikoloogilistes uuringutes. Teadlased testivad potentsiaalsete ravimite, sealhulgas kemoteraapiavahendite ja sihtotstarbeliste ravimite toksilisust ja efektiivsust KG1-müeloidse leukeemia rakkudel, et leida paljulubavaid ravimikandidaate tulevasteks prekliinilisteks ja kliinilisteks hindamisteks. 2018. aastal läbi viidud uuringus analüüsiti doksorubitsiini sisaldavate nano-niosoomide toksilisust KG1 AML-rakuliinil. Uuringus järeldati, et nano-niosoom on sobiv ravimi manustamise kandja, kuna see suurendab ravi tõhusust [3]. Teises uuringus uurisid teadlased Urtica dioica taime lehtedest valmistatud nõgesetee terapeutilist mõju. Uuring näitas, et sellel taime lehtedest valmistatud vesiekstraktil on kasvajavastane toime ägeda müeloidse leukeemia rakkudel KG-1 ja U937 [4].
Publikatsioonid KG-1 rakkude kohta
Artikli selles osas on loetletud mõned huvitavad teaduspublikatsioonid KG-1 rakkude kohta.
See artikkel avaldati ajakirjas „Journal of Cellular Physiology“ (2019). Uuringus väideti, et kvertsetiin muudab KG-1 AML-rakuliini tundlikumaks TNF-ga seotud apoptoosi indutseeriva ligandi (TRAIL) suhtes ning võib tugevdada TRAIL-i poolt indutseeritud tsütotoksilisuse mõju rakkudes.
KLF8 soodustab ägeda müeloidse leukeemia rakkude kasvu ja glükolüüsi AKT/mTOR-signaalitee kaudu
Ajakirjas „Tropical Journal of Pharmaceutical Research“ (2022) avaldatud artiklis väidetakse, et krüppel-sarnase transkriptsioonifaktori 8 ekspressiooni allaregulatsioon pärsib AML-rakkude proliferatsiooni ja glükolüüsi, soodustades apoptoosi AKT/mTOR signaalitee reguleerimise kaudu.
Sorafeniibi ja arseentrioksiidi mõju U937- ja KG-1-rakuliinidele: apoptoos või autofaagia?
Ajakirjas „Cell Journal“ (Yakhteh) (2020) avaldatud uuringus uuriti arseentrioksiidi ja sorafenibi võimalikku mõju U937- ja KG-1-rakkudele.
Ajakirjas „Medical Oncology“ (2020) avaldatud uuringus hinnati OXPHOS-i ja glükolüüsi kui terapeutilisi sihtmärke AML-rakuliinis KG-1.
Ajakirjas „Drug Design, Development, and Therapy“ 2020. aastal avaldatud artiklis väideti, et kurkumiini ja talidomiidi ühendid avaldavad KG-1 rakkudes sünergistlikult apoptootilist mõju, vähendades STAT3 ja Bcl-xL ekspressiooni.
6. KG-1 rakuliini alased materjalid: protokollid, videod ja muud
Allpool on toodud mõned KG-1 rakkude kohta kättesaadavad veebivahendid.
- Suspensioonrakkude subkultiveerimine: Selles videos kirjeldatakse KG-1-taoliste suspensioonrakkude subkultiveerimise protokolli.
Järgmine link sisaldab KG-1 rakuliini kasvatamise protokolli:
- KG-1 rakuliin: See veebisait sisaldab põhiteavet KG-1 rakuliini rakukultuuri kohta. See hõlmab teavet rakuliini kasvukeskkonna kohta ning protokolle subkultiveerimiseks ja krüokonserveeritud ning proliferatiivsete kultuuride käitlemiseks.
Viited
- Pelliccia, F., V. Ubertini ja N. Bosco, „Molekulaarse tsütogeneetilise analüüsi tähtsus enne rakuliinide kasutamist teadustöös: KG-1a leukeemiarakuliini näide”. Oncol Lett, 2012. 4(2): lk 237–240.
- Yang, Y. jt, Pikk mittetranslatsiooniline RNA linc00239 soodustab pahaloomulist käitumist ja kemoresistentsust doksorubitsiini suhtes osaliselt PI3K/Akt/mTOR signaalitee aktiveerimise kaudu ägedas müeloidleukeemia rakkudes. Oncology Reports, 2019. 41(4): lk 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F. jt., Doksorubitsiini sisaldavate nano-niosomide valmistamine ja uurimine ning nende toksilisuse hindamine ägeda müeloblastilise leukeemia rakuliini KG-1 suhtes. Payavard Salamat, 2018. 12(4): lk 309–323.
- Hodroj, M.H. jt., Nõgesetee pärsib in vitro ägeda müeloidse leukeemia rakkude kasvu, soodustades apoptoosi. Nutrients, 2020. 12(9): lk 2629.