Κυτταρική γραμμή Neuro-2a

Η Neuro-2a είναι μια νευρική κυτταρική γραμμή ποντικού που χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα των νευροεπιστημών. Κυρίως, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της νευρικής ανάπτυξης, της διαφοροποίησης, της νευροτοξικότητας, των μονοπατιών κυτταρικής σηματοδότησης και της αξονικής ανάπτυξης. Εκτός αυτού, χρησιμοποιούνται για την ανάπτυξη και τον έλεγχο φαρμάκων.

Αυτό το άρθρο επικεντρώνεται σε σημαντικές πτυχές των κυττάρων νευροβλαστώματος Neuro-2a που θα μπορούσαν να σας βοηθήσουν πριν ξεκινήσετε την εργασία με αυτά. Θα καλύψει κυρίως τα εξής:

  1. Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων Neuro-2a
  2. Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
  3. Πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
  4. Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
  5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα Neuro-2a
  6. Πηγές για τα κύτταρα Neuro-2a: -2a-2a: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

1. Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων Neuro-2a

Αυτό το μέρος του άρθρου θα καλύψει το ιστορικό και τα βασικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς Neuro-2a που είναι απαραίτητο να γνωρίζετε πριν εργαστείτε με αυτήν. Εδώ, θα μάθετε: Τι είναι η κυτταρική σειρά Neuro-2a Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς Neuro-2a Τι είναι η διαφοροποίηση των κυττάρων Neuro-2a Ποιο είναι το μέγεθος ενός κυττάρου Neuro-2a Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων Neuro-2a

  • Τα κύτταρα Neuro-2a προέρχονται από έναν αυθόρμητο όγκο (νευροβλάστωμα) ενός ποντικού αλμπίνο (στέλεχος Α). Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε από τους R.J. Klebe και F.H. Ruddle.
  • Τα κύτταρα νευροβλαστώματος Neuro-2a παρουσιάζουν μορφολογία νευρωνικών και αμοιβάδων βλαστικών κυττάρων.
  • Το μέγεθος των κυττάρων Neuro-2a είναι 12 μικρόμετρα σε ύψος [1].
  • Ο αριθμός χρωμοσωμάτων των κυττάρων Neuro-2a μπορεί να κυμαίνεται από 59 έως 193 με μέσο αριθμό 95. Ο καρυότυπος αυτών των κυττάρων του νευροβλαστώματος είναι ασταθής εντός ενός εύρους 94 έως 98 χρωμοσωμάτων.

Απεικονίζεται η νευρωνική σηματοδότηση: η τρισδιάστατη αναπαράσταση της απελευθέρωσης νευροδιαβιβαστή στο συναπτικό χάσμα από τον προσυναπτικό νευρώνα, που πυροδοτείται από την εισροή Ca2+, οδηγεί σε ενεργοποίηση ιοντικών διαύλων και εισροή Na+ στον μετασυναπτικό νευρώνα.

2. Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής γραμμής Neuro-2a

Τα κύτταρα Neuro-2a χρησιμοποιούνται ευρέως σε ερευνητικά εργαστήρια νευροεπιστημών. Πριν εργαστείτε με αυτά τα κύτταρα, θα πρέπει να μάθετε τις επιτακτικές πληροφορίες καλλιέργειας κυττάρων που αναφέρονται παρακάτω. Αυτό μπορεί να σας βοηθήσει να προχωρήσετε με ευκολία. Θα μάθετε: Οι πληροφορίες που θα σας δοθούν για την επεξεργασία των κυτταρικών κυττάρων της κυτταρικής κυτταρικής σειράς 2-2 θα είναι οι εξής: 1: Τι είναι ένα μέσο καλλιέργειας κυττάρων Neuro-2a Πώς καλλιεργείτε κύτταρα Neuro-2a Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων Neuro-2a Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των κυττάρων Neuro-2a Ποιο είναι το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων Neuro-2a Ποιο είναι το μέσο καλλιέργειας κυττάρων Neuro-2a

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων Neuro-2a

Χρόνος διπλασιασμού:

Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων Neuro-2a είναι περίπου 70 ώρες.

Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:

Η Neuro-2a είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά.

Πυκνότητα σποράς:

Η βελτιστοποιημένη πυκνότητα σποράς κυττάρων για την κυτταρική σειρά Neuro-2a είναι 1 x104 κύτταρα/cm2. Για τη σπορά, τα κύτταρα πλένονται με ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών αλάτων χωρίς μαγνήσιο και ασβέστιο (1x). Αργότερα, προστίθεται διάλυμα διέλευσης (Accutase) και τα κύτταρα επωάζονται για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Μετά τη διάσπαση των κυττάρων, προστίθεται φρέσκο μέσο και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Το συλλεγμένο κυτταρικό σφαιρίδιο ανασυσσωματώνεται προσεκτικά και τα κύτταρα χύνεται σε δοχείο καλλιέργειας για ανάπτυξη.

Μέσο ανάπτυξης:

EMEM χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια των κυττάρων Neuro-2a. Περιέχει 10% FBS, 2 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM πυρουβικό νάτριο και NEAA για ιδανική ανάπτυξη των κυττάρων. Το μέσο θα πρέπει να αντικαθίσταται 1 έως 2 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Οι καλλιέργειες Neuro-2a διατηρούνται σε επωαστήρα με υγρασία 37°C, συνδεδεμένο με παροχή 5% CO2.

Αποθήκευση:

Τα κύτταρα πρέπει να αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας ή στην αέρια φάση υγρού αζώτου για μακροπρόθεσμη αποθήκευση.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Τα μέσα CM-1 ή CM-ACF χρησιμοποιούνται για την κατάψυξη των κυττάρων Neuro-2a. Τα κύτταρα καταψύχονται μέσω μιας αργής διαδικασίας κατάψυξης που επιτρέπει μόνο μια πτώση 1 °C ανά λεπτό. Αυτό προστατεύει τα κύτταρα από το σοκ και διατηρεί τη βιωσιμότητά τους.

Διαδικασία απόψυξης:

Για την απόψυξη των κατεψυγμένων καλλιεργειών, το φιαλίδιο τοποθετείται σε υδατόλουτρο 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα έως ότου απομείνει μόνο ένα μικρό σβόλο πάγου. Στη συνέχεια, προστίθεται θρεπτικό υλικό και τα κύτταρα υποβάλλονται σε φυγοκέντρηση. Αυτό το βήμα βοηθά στην απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Στη συνέχεια, το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη γεμάτη με μέσο καλλιέργειας. Στη συνέχεια, τα κύτταρα τοποθετούνται σε επωαστήρα στους 37 °C για τουλάχιστον 24 ώρες.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Οι εργαστηριακές ρυθμίσεις επιπέδου βιοασφάλειας 1 είναι υποχρεωτικές για το χειρισμό και τη διατήρηση των καλλιεργειών Neuro-2a.

Μικροσκοπική εικόνα ενός πρώιμου περάσματος προσκολλημένων κυττάρων νευροβλαστώματος Neuro 2a που απεικονίζει τη μορφολογία τους σε μεγέθυνση 10x και 20x.

3. Πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς Neuro-2a

Τα κύτταρα Neuro-2a διαθέτουν ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που τα διαφοροποιούν από άλλες νευρωνικές κυτταρικές σειρές. Ορισμένα αξιοσημείωτα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα αυτών των κυττάρων παρατίθενται εδώ.

Πλεονεκτήματα

Τα πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς νευροβλαστώματος ποντικού Neuro-2a είναι τα εξής:

  • Εύκολη συντήρηση

    Η κυτταρική γραμμή Neuro-2a δεν συνδέεται με πολύπλοκες ή περίπλοκες διαδικασίες κυτταροκαλλιέργειας. Είναι εύκολο να καλλιεργηθούν και να διατηρηθούν στα ερευνητικά εργαστήρια.

  • Μοντέλο νευρωνικών κυττάρων in vitro

    Η Neuro-2a είναι ένα βολικό μοντέλο νευρωνικών κυττάρων που χρησιμοποιείται ευρέως από ερευνητές σε μελέτες ανάπτυξης και διαφοροποίησης νευρώνων.

Μειονεκτήματα

Τα μειονεκτήματα των κυττάρων Neuro-2a είναι τα εξής:

  • Προέλευση από ποντίκι

    Οι ερευνητές θα πρέπει να είναι προσεκτικοί όταν προεκτείνουν τα αποτελέσματα από μελέτες που βασίζονται σε ποντίκια στην ανθρώπινη υγεία και ασθένεια, καθώς η βιολογία των ποντικιών και η ανθρώπινη βιολογία μπορεί να διαφέρουν σημαντικά.

4. Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς Neuro-2a

Τα κύτταρα Neuro-2a προσφέρουν πολλές εφαρμογές στον ερευνητικό τομέα των νευροεπιστημών. Εδώ αναλύονται μερικές υποσχόμενες χρήσεις αυτής της κυτταρικής σειράς:

  • Νευρική ανάπτυξη: Η Neuro-2a είναι ένα in vitro μοντέλο νευρωνικών κυττάρων που χρησιμοποιείται ευρέως για τη μελέτη της νευρωνικής ανάπτυξης και συναφών διεργασιών, όπως η διαφοροποίηση, η αξονική ανάπτυξη και ο σχηματισμός συνάψεων. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 χρησιμοποίησε κύτταρα Neuro-2a για να διερευνήσει τον ρόλο του microRNA-124 στην επαγόμενη από ρετινοϊκό οξύ διαφοροποίηση νευρωνικών κυττάρων [2]. Μια άλλη μελέτη διερεύνησε την έκφραση του υποδοχέα γάμμα του ρετινοϊκού οξέος (RARG) Neuro 2a και του miRNA-124 στην κυτταρική σειρά νευροβλαστώματος (N2A). Η μελέτη αυτή πρότεινε ότι ο RARG στοχεύεται από το miR-124 και καταστέλλει την ανάπτυξη των νευριτών [3].
  • Νευροτοξικότητα: Το Neuro-2a χρησιμοποιείται επίσης για την αξιολόγηση των τοξικών επιδράσεων φαρμάκων, χημικών ουσιών ή περιβαλλοντικών παραγόντων στα νευρικά κύτταρα. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη από τον Zhihong Yin και τους συνεργάτες του διερεύνησε τη νευροτοξικότητα της δισφαινόλης Α (BPA), μιας περιβαλλοντικής χημικής ουσίας, χρησιμοποιώντας κύτταρα Neuro-2a. Παρατήρησαν ότι η BPA καταστέλλει τη διαφοροποίηση και τον πολλαπλασιασμό των νευρικών κυττάρων διαταράσσοντας την κυτταρική και συναπτική ακεραιότητά τους [4].
  • Διαλογή φαρμάκων: Τα κύτταρα Neuro-2a χρησιμοποιούνται επίσης για την αξιολόγηση των θεραπευτικών δραστηριοτήτων διαφόρων φαρμάκων, ενώσεων και φυσικών προϊόντων. Για παράδειγμα, μια μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα Neuro-2a και μελέτησε το αντιοξειδωτικό δυναμικό του φυτικού εκχυλίσματος Gingko biloba. Επιπλέον, η έρευνα πρότεινε ότι προκαλεί μείωση της συσσώρευσης του Aβ και μπορεί να αποτελέσει μια πιθανή θεραπεία για τη νόσο του Alzheimer [5].

5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα Neuro-2a

Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις που περιλαμβάνουν την κυτταρική σειρά Neuro-2a.

Αλκαμίδια που μοιάζουν με πιπερίνη από το Piper nigrum επάγουν τον προαγωγέα του BDNF και προάγουν την ανάπτυξη των νευριτών στα κύτταρα Neuro-2a

Αυτή η μελέτη στο Journal of Natural Medicines, 2018 διερεύνησε τις θεραπευτικές επιδράσεις των αλκαμιδίων που απομονώνονται από το λευκό πιπέρι (P. nigrum) στα νευρωνικά κύτταρα Neuro-2a.

Η υπορύθμιση του Nkx2. 1 εμπλέκεται στην εγκεφαλική ανωμαλία που προκαλείται από την περίσσεια ρετινοϊκού οξέος

Αυτή η έρευνα στο Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 πρότεινε ότι το γονίδιο Nkx2.1 παίζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη του εγκεφάλου των ποντικών ρυθμίζοντας τον καταρράκτη σηματοδότησης Shh.

Η έκθεση σε δισφαινόλη Α προκαλεί νευροτοξικότητα που συνδέεται με συναπτική και κυτταροσκελετική δυσλειτουργία σε κύτταρα neuro-2a

Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο Toxicology and Industrial Health (2023) και πρότεινε ότι μια περιβαλλοντική χημική ουσία, η δισφαινόλη Α, προκαλεί νευροτοξικότητα στα κύτταρα neuro-2a και διαταράσσει τη συναπτική και κυτταροσκελετική δυσλειτουργία τους.

Η διαμόρφωση των μονοπατιών MAPK και PI3K/Akt σε κύτταρα Neuro-2A με εξαρελίνη αναστέλλει την επαγόμενη από το υπεροξείδιο του υδρογόνου αποπτωτική τοξικότητα

Αυτή η δημοσίευση στο Pharmaceuticals (2021) πρότεινε ότι ένα φάρμακο, η εξαρελίνη, διαμορφώνει τον καταρράκτη PI3K/AKT και MAPK σε κύτταρα νευροβλαστώματος (Neuro-2a) και αναστέλλει την επαγόμενη από το υπεροξείδιο του υδρογόνου απόπτωση των κυττάρων Neuro-2a.

Το αιθανολικό εκχύλισμα φρούτων της Emblica officinalis καταστέλλει τη νευροφλεγμονή στη μικρογλοία και προάγει την εκβλάστηση των νευριτών στα κύτταρα Neuro2a

Αυτή η ερευνητική εργασία στο Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) πρότεινε ότι το εκχύλισμα φρούτων Emblica officinalis καταστέλλει τη νευροφλεγμονή στα κύτταρα Neuro-2a και επομένως μπορεί να είναι ευεργετικό για τις νευροφλεγμονώδεις ασθένειες.

6. Πηγές για τα κύτταρα Neuro-2a: -2-2a: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Ακολουθούν οι διαδικτυακοί πόροι που είναι διαθέσιμοι για τα κύτταρα Neuro-2a. Περιλαμβάνουν πρωτόκολλο καλλιέργειας και διαμόλυνσης κυττάρων Neuro-2a.

  • Πρωτόκολλο διαμόλυνσης των κυττάρων Neuro-2a: Το Neuro-2a είναι ένας κατάλληλος ξενιστής διαμόλυνσης. Αυτός ο σύνδεσμος θα σας καθοδηγήσει σχετικά με το πρωτόκολλο διαμόλυνσης της κυτταρικής σειράς. Η αποτελεσματικότητα της διαμόλυνσης Neuro 2a ποικίλλει από αντιδραστήριο σε αντιδραστήριο.

Ο ακόλουθος σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων Neuro-2a.

  • Πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων Neuro-2a: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο υποκαλλιέργειας των κυττάρων Neuro 2a.
  • Κύτταρα Neuro-2a: Ο δικτυακός τόπος περιέχει ολοκληρωμένες γνώσεις σχετικά με τα μέσα για τα κύτταρα Neuro-2a, την πυκνότητα σποράς και τα πρωτόκολλα υποκαλλιέργειας και χειρισμού κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαστικών καλλιεργειών.

Αναφορές

  1. Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
  2. You, Q., et al., Role of miR-124 in the regulation of retinoic acid-induced Neuro-2A cell differentiation. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
  3. Su, X., et al., Ο υποδοχέας γάμμα του ρετινοϊκού οξέος στοχοποιείται από το microRNA-124 και αναστέλλει την εκβλάστηση των νευριτών. Νευροφαρμακολογία, 2020. 163: p. 107657.
  4. Yin, Z., et al., Η έκθεση στη δισφαινόλη-A προκάλεσε νευροτοξικότητα και σχετίζεται με τις συνάψεις και τον κυτταροσκελετό στα κύτταρα Neuro-2a. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
  5. Chen, L., et al., Το εκχύλισμα Gingko biloba (EGb) αναστέλλει το οξειδωτικό στρες σε κύτταρα νευρο-2Α που υπερεκφράζουν το APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.

Εντοπίσαμε ότι βρίσκεστε σε διαφορετική χώρα ή χρησιμοποιείτε διαφορετική γλώσσα του προγράμματος περιήγησης από την τρέχουσα επιλεγμένη. Θα θέλατε να αποδεχτείτε τις προτεινόμενες ρυθμίσεις

Κλείστε το