Όγκος: 100 ml
Αποθήκευση: ≤ –15°C
Στειρότητα: Στειρότητα με φιλτράρισμα
Το σταθερό διάλυμα γλουταμίνης (L-αλανυλ-L-γλουταμίνη, 200 mM) είναι μια εξαιρετικά σταθερή διπεπτιδική μορφή L-γλουταμίνης που έχει σχεδιαστεί ως άμεσο υποκατάστατο της συμβατικής L-γλουταμίνης σε μέσα κυτταρικής καλλιέργειας. Η L-γλουταμίνη είναι ένα απαραίτητο αμινοξύ και μια σημαντική πηγή ενέργειας για τα καλλιεργημένα κύτταρα, παίζοντας κρίσιμο ρόλο στην κυτταρική ανάπτυξη, το μεταβολισμό και τη σύνθεση πρωτεϊνών.
Εφαρμογή και οφέλη
Σε τυπικά υγρά μέσα, η L-γλουταμίνη αποικοδομείται σχετικά γρήγορα στους 37 °C, οδηγώντας στο σχηματισμό τοξικών παραπροϊόντων, όπως ιόντα αμμωνίου, τα οποία μπορούν να επηρεάσουν αρνητικά τη βιωσιμότητα των κυττάρων και τα αποτελέσματα των πειραμάτων. Η σταθερή γλουταμίνη ξεπερνά αυτόν τον περιορισμό παρέχοντας μια μη αποικοδομήσιμη μορφή διπεπτιδίου που παραμένει ανέπαφη σε συνθήκες καλλιέργειας.
Τα κύτταρα διασπούν ενζυματικά τον διπεπτιδικό δεσμό για να απελευθερώσουν L-γλουταμίνη ανάλογα με τις ανάγκες, εξασφαλίζοντας συνεχή φρέσκια παροχή και αποτρέποντας ταυτόχρονα τη συσσώρευση επιβλαβών αποβλήτων. Αυτό καθιστά το διάλυμα ιδιαίτερα πλεονεκτικό για μακροχρόνιες κυτταρικές καλλιέργειες και συστήματα ανάπτυξης υψηλής πυκνότητας.
Σύνθεση και χρήση
Το διάλυμα L-αλανυλ-L-γλουταμίνης παρασκευάζεται σε νερό κατάλληλο για κυτταρική καλλιέργεια σε συγκέντρωση 200 mM και φιλτράρεται με αποστειρωμένο τρόπο για εφαρμογές ευαίσθητες σε μόλυνση. Μπορεί να αραιωθεί απευθείας σε πλήρη μέσα σύμφωνα με τις πειραματικές απαιτήσεις. Αποθηκεύστε σε θερμοκρασία ≤ –15 °C και αποφύγετε επαναλαμβανόμενους κύκλους ψύξης-απόψυξης για να διατηρήσετε τη σταθερότητα του προϊόντος.
Μόνο για ερευνητική χρήση. Δεν προορίζεται για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Δεν προορίζεται για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
Όγκος: 100 ml
Αποθήκευση: +2°C έως +8°C
Αποστείρωση: Αποστειρωμένο με διήθηση
Το διάλυμα ρυθμιστικού HEPES (1 M), επίσης γνωστό ως N-2-υδροξυαιθυλοπιπεραζίνη-N-2-αιθανοσουλφονικό οξύ, είναι ένας οργανικός ρυθμιστικός παράγοντας με διπλή ηλεκτρική φορτία που χρησιμοποιείται ευρέως σε μέσα κυτταρικής καλλιέργειας. Έχει σχεδιαστεί για να διατηρεί σταθερές συνθήκες pH στο φυσιολογικό εύρος από 6,7 έως 8,6, υποστηρίζοντας τη βέλτιστη κυτταρική λειτουργία κατά τη διάρκεια εφαρμογών in vitro.
Εφαρμογή και οφέλη
Το HEPES παρέχει αξιόπιστη ρυθμιστική ικανότητα σε συστήματα κυτταρικής καλλιέργειας, ιδιαίτερα όταν τα κύτταρα χειρίζονται εκτός CO₂ επωαστήρα. Η προσθήκη 10–25 mM HEPES στα μέσα καλλιέργειας προσφέρει βελτιωμένη σταθερότητα pH κατά τη διάρκεια παρατεταμένων περιόδων χειρισμού, συμβάλλοντας στη διατήρηση σταθερών πειραματικών συνθηκών.
Αυτό το ρυθμιστικό διάλυμα είναι αδιαπέραστο από μεμβράνες, έχει ελάχιστη επίδραση στις βιοχημικές αντιδράσεις και παρουσιάζει ισχυρή χημική και ενζυμική σταθερότητα. Αυτές οι ιδιότητες το καθιστούν κατάλληλο για ένα ευρύ φάσμα εφαρμογών κυτταρικής καλλιέργειας και βιοχημείας.
Σύνθεση και χρήση
Το διάλυμα διατίθεται ως συμπύκνωμα 1 M παρασκευασμένο σε νερό κατάλληλο για κυτταρική καλλιέργεια και είναι αποστειρωμένο για χρήση σε περιβάλλοντα ευαίσθητα σε μόλυνση. Μπορεί να αραιωθεί στην επιθυμητή συγκέντρωση εργασίας ανάλογα με τις απαιτήσεις της εφαρμογής. Φυλάσσεται σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C και χειρίζεται υπό ασηπτικές συνθήκες για τη διατήρηση της ακεραιότητας του προϊόντος.
Μόνο για ερευνητική χρήση. Δεν προορίζεται για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Δεν προορίζεται για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
Όγκος: 50 ml
Αποθήκευση: +2°C έως +8°C
Αποστείρωση: Αποστειρωμένο με φίλτρο
Το διάλυμα D-(+)-γλυκόζης (διάλυμα δεξτρόζης) είναι ένα αποστειρωμένο, έτοιμο προς χρήση συμπλήρωμα που περιέχει τη φυσική ζάχαρη D-(+)-γλυκόζη, ένα βασικό συστατικό του κυτταρικού μεταβολισμού. Η γλυκόζη συμμετέχει σε βασικές βιολογικές διεργασίες, όπως η παραγωγή ενέργειας, η γλυκοζυλίωση και ο σχηματισμός γλυκανών που συμβάλλουν στη δομή και τη λειτουργία των κυττάρων.
Εφαρμογή και οφέλη
Αυτό το διάλυμα γλυκόζης χρησιμοποιείται ευρέως ως συμπλήρωμα σε μέσα κυτταρικής καλλιέργειας και σε πολυάριθμες εφαρμογές κυτταρικής και μοριακής βιολογίας. Ως κύρια πηγή άνθρακα και ενέργειας, η γλυκόζη υποστηρίζει την κυτταρική ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό και τη μεταβολική δραστηριότητα. Η συμμετοχή της στις βιοσυνθετικές οδούς την καθιστά επίσης κρίσιμη για τη διατήρηση της φυσιολογικής κυτταρικής φυσιολογίας και της πειραματικής συνέπειας.
Σύνθεση και χρήση
Το διάλυμα διατίθεται σε υψηλή συγκέντρωση 250 g/L γλυκόζης, επιτρέποντας ευέλικτη αραίωση σε μέσα καλλιέργειας σύμφωνα με τις πειραματικές απαιτήσεις. Είναι αποστειρωμένο με φίλτρο για να εξασφαλίζεται η καταλληλότητά του για εφαρμογές ευαίσθητες σε μόλυνση. Αποθηκεύστε σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C και χειριστείτε το με άσηπτο τρόπο για να διατηρήσετε την ποιότητα και τη σταθερότητα του προϊόντος.
Μόνο για ερευνητική χρήση. Δεν προορίζεται για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Δεν προορίζεται για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
Όγκος: 10 ml
Αποθήκευση: +2°C έως +8°C
Αποστείρωση: Αποστειρωμένο με διήθηση
Το διάλυμα ινσουλίνης-τρανσφερίνης-σεληνίου (ITS) (100x) είναι ένα χημικά καθορισμένο συμπλήρωμα που έχει σχεδιαστεί για ένα ευρύ φάσμα εφαρμογών κυτταροκαλλιέργειας. Χρησιμοποιείται συνήθως ως πρόσθετο σε βασικά μέσα κυτταροκαλλιέργειας για την υποστήριξη της κυτταρικής ανάπτυξης υπό συνθήκες μειωμένου ορού ή χωρίς ορό.
Εφαρμογή και οφέλη
Το συμπλήρωμα ITS παρέχει τα απαραίτητα συστατικά που απαιτούνται για τη βέλτιστη απόδοση των μέσων χωρίς ορό. Με τη συμπλήρωση των συμβατικών θρεπτικών μέσων με ITS, η απαίτηση σε εμβρυϊκό βοοειδές ορό (FBS) για τη συνήθη συντήρηση πολλών κυτταρικών σειρών μπορεί να μειωθεί σημαντικά. Αυτό βοηθά στην ελαχιστοποίηση της μεταβλητότητας που σχετίζεται με τη χρήση ορού, διατηρώντας παράλληλα σταθερή την κυτταρική ανάπτυξη και βιωσιμότητα.
Η ινσουλίνη υποστηρίζει την κυτταρική πρόσληψη και το μεταβολισμό βασικών θρεπτικών συστατικών, η τρανσφερίνη διευκολύνει τη μεταφορά σιδήρου και το σελήνιο συμβάλλει στην αντιοξειδωτική άμυνα και την ενζυμική δραστηριότητα. Μαζί, αυτά τα συστατικά προάγουν τον ισορροπημένο κυτταρικό μεταβολισμό και τη βελτιωμένη αναπαραγωγιμότητα σε καθορισμένα συστήματα καλλιέργειας.
Σύνθεση και χρήση
Η ινσουλίνη-τρανσφερίνη-σελήνιο (ITS) διατίθεται ως διάλυμα συγκέντρωσης 100x σε ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα Earle (EBSS) χωρίς φαινόλη κόκκινη. Για τυπικές εφαρμογές, αραιώστε σε αναλογία 1:100 στο κατάλληλο βασικό μέσο για να επιτύχετε τη συνιστώμενη συγκέντρωση εργασίας. Φυλάξτε σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C και χειριστείτε υπό ασηπτικές συνθήκες για να διατηρήσετε τη σταθερότητα και τη στειρότητα του προϊόντος.
Μόνο για ερευνητική χρήση. Δεν προορίζεται για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Δεν προορίζεται για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
Όγκος: 5 ml
Αποθήκευση: +2°C έως +8°C
Αποστείρωση: Αποστειρωμένο με διήθηση
Το διάλυμα ανασυνδυασμένης ανθρώπινης ινσουλίνης είναι ένα χημικά καθορισμένο συμπλήρωμα που χρησιμοποιείται συνήθως για την καλλιέργεια κυτταρικών σειρών θηλαστικών, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων ωοθηκών κινέζικου χάμστερ (CHO). Αυτό το διάλυμα ποιότητας κυτταρικής καλλιέργειας περιέχει ανασυνδυασμένη ανθρώπινη ινσουλίνη που εκφράζεται σε Saccharomyces cerevisiae, εξασφαλίζοντας υψηλή καθαρότητα και σταθερή απόδοση σε ερευνητικές εφαρμογές.
Εφαρμογή και οφέλη
Η ινσουλίνη προστίθεται συνήθως σε μέσα χωρίς ορό και χημικά καθορισμένα για την προώθηση της κυτταρικής ανάπτυξης και παραγωγικότητας. Ως βασική ρυθμιστική ορμόνη, η ινσουλίνη υποστηρίζει την κυτταρική πρόσληψη, αξιοποίηση και αποθήκευση γλυκόζης, αμινοξέων και λιπαρών οξέων. Επίσης, αναστέλλει τη διάσπαση του γλυκογόνου, των πρωτεϊνών και των λιπιδίων, συμβάλλοντας έτσι στη βελτίωση της κυτταρικής βιωσιμότητας και της μεταβολικής σταθερότητας σε συστήματα καλλιέργειας. Η χημικά καθορισμένη σύνθεση υποστηρίζει την αναπαραγωγιμότητα και ελαχιστοποιεί τη μεταβλητότητα σε ευαίσθητες ροές εργασίας κυτταρικής καλλιέργειας.
Βιολογικές ιδιότητες και χρήση
Η ινσουλίνη είναι μια ορμόνη πολυπεπτιδίου δύο αλυσίδων που παράγεται φυσιολογικά από τα β-κύτταρα των παγκρεατικών νησίδων. Έχει μοριακό βάρος περίπου 5.800 Da. Οι α
- και β-αλυσίδες συνδέονται με δύο διααλυσιδικούς δισουλφιδικούς δεσμούς, ενώ η α-αλυσίδα περιέχει έναν ενδοαλυσιδικό δισουλφιδικό δεσμό. Για εφαρμογές κυτταροκαλλιέργειας, το διάλυμα πρέπει να χειρίζεται υπό ασηπτικές συνθήκες και να αποθηκεύεται σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C για τη διατήρηση της σταθερότητας και της απόδοσης.
Μόνο για ερευνητική χρήση. Δεν προορίζεται για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Δεν προορίζεται για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
Όγκος: 100 ml
Αποθήκευση: +2°C έως +8°C
Αποστείρωση: Αποστειρωμένο με φίλτρο
Το διάλυμα πυροσταφυλικού νατρίου (100 mM) είναι ένα αποστειρωμένο, έτοιμο προς χρήση συμπλήρωμα που έχει σχεδιαστεί για να παρέχει μια πρόσθετη, εύκολα προσβάσιμη πηγή ενέργειας για τα μέσα κυτταρικής καλλιέργειας. Το πυροσταφυλικό νάτριο διαδραματίζει βασικό ρόλο στον κυτταρικό μεταβολισμό της ενέργειας και υποστηρίζει την ανάπτυξη μεταβολικά ενεργών και ταχέως πολλαπλασιαζόμενων κυττάρων, όπως τα καρκινικά κύτταρα. Η συμπλήρωση μπορεί να ενισχύσει τη βιωσιμότητα των κυττάρων και να βοηθήσει στη διατήρηση της μεταβολικής σταθερότητας στα συστήματα καλλιέργειας.
Εφαρμογή και οφέλη
Αυτό το διάλυμα χρησιμοποιείται ευρέως στην καθημερινή κυτταρική καλλιέργεια για τον εμπλουτισμό των μέσων με πυροσταφυλικό οξύ και την προώθηση βέλτιστων συνθηκών ανάπτυξης. Υποστηρίζει την παραγωγή ATP, μπορεί να βοηθήσει στη μείωση του οξειδωτικού στρες και συμβάλλει στη βελτίωση της μεταβολικής απόδοσης των καλλιεργημένων κυττάρων. Κατασκευασμένο με νερό κατάλληλο για κυτταρική καλλιέργεια και αποστειρωμένο με φίλτρο, το προϊόν εξασφαλίζει σταθερή ποιότητα και αναπαραγωγιμότητα στις ερευνητικές ροές εργασίας.
Χρήση και συμβατότητα
Η συνιστώμενη τελική συγκέντρωση για τις περισσότερες εφαρμογές κυτταρικής καλλιέργειας είναι 1 mM πυροσταφυλικό νάτριο, η οποία επιτυγχάνεται με αραίωση του διαλύματος αποθέματος 100 mM 1:100 σε πλήρες μέσο καλλιέργειας. Το διάλυμα είναι συμβατό με ένα ευρύ φάσμα βασικών μέσων και κυτταρικών σειρών θηλαστικών. Φυλάσσεται σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C και προστατεύεται από μόλυνση για τη διατήρηση της σταθερότητας του προϊόντος.
Μόνο για ερευνητική χρήση. Δεν προορίζεται για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Δεν προορίζεται για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
Όγκος: 100 ml Αποθήκευση: ≤-15°C Αποστειρότητα:
Το Αντιβιοτικό/Αντιμυκητιασικό διάλυμα (100x) είναι ένα αποστειρωμένο, έτοιμο προς χρήση συμπύκνωμα που έχει σχεδιαστεί για τη μείωση των κινδύνων μικροβιακής μόλυνσης σε κυτταροκαλλιέργειες και συναφείς εργαστηριακές εφαρμογές. Αυτό το διάλυμα 100x περιέχει έναν καθιερωμένο συνδυασμό πενικιλλίνης, στρεπτομυκίνης και αμφοτερικίνης Β
- παρέχοντας αντιμικροβιακή δράση ευρέος φάσματος έναντι θετικών κατά Gram και αρνητικών κατά Gram βακτηρίων, ζυμομυκήτων και νηματοειδών μυκήτων. Το σκεύασμα είναι κατάλληλο για χρήση σε καλλιέργειες ευκαρυωτικών κυττάρων, βακτηριακά μέσα και άλλα ευαίσθητα στη μόλυνση συστήματα, υποστηρίζοντας καθαρές και συνεπείς εργαστηριακές λειτουργίες.
Εφαρμογή και οφέλη Βελτιστοποιημένο για ερευνητικά πρωτόκολλα ρουτίνας, αυτό το διάλυμα χρησιμοποιείται ευρέως για τη διατήρηση ασηπτικών συνθηκών σε ροές εργασίας κυτταροκαλλιέργειας. Προσφέρει αξιόπιστη απόδοση σε περιβάλλοντα ευαίσθητα στη μόλυνση, βοηθώντας τους ερευνητές να μειώσουν τον κίνδυνο υπερανάπτυξης μικροβίων χωρίς να διακυβεύεται η υγεία των κυττάρων ή η πειραματική αναπαραγωγιμότητα. Η αποστειρωμένη φιλτραρισμένη σύνθεση εξαλείφει την ανάγκη για πρόσθετα στάδια διαλυτοποίησης, υποστηρίζοντας την απλοποιημένη προετοιμασία των μέσων και μειώνοντας τη μεταβλητότητα στις καθημερινές εργαστηριακές διαδικασίες.
Χρήση και συμβατότητα Για να επιτύχετε πρότυπες συγκεντρώσεις εργασίας, αραιώστε το διάλυμα 1:100 στο πλήρες μέσο καλλιέργειάς σας. Το προϊόν είναι συμβατό με ένα ευρύ φάσμα κυτταρικών σειρών θηλαστικών και βασικών μέσων. Με σταθερή διαθεσιμότητα αποθεμάτων, οι ερευνητές επωφελούνται από την αξιόπιστη συνέχεια του εφοδιασμού και τον απλουστευμένο προγραμματισμό της εφοδιαστικής. Το διάλυμα πρέπει να αποθηκεύεται στους ≤ -15 °C και να προστατεύεται από επαναλαμβανόμενους κύκλους ψύξης-απόψυξης για να διατηρείται η σταθερότητα. Μόνο για ερευνητική χρήση. Όχι για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Όχι για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
Όγκος: 100 ml Αποθήκευση: +2°C έως +8°C Αποστειρότητα: Αποστειρωμένο φιλτραρισμένο
Το MEM Non-Essential Amino Acids (100x) είναι ένα αποστειρωμένο συμπλήρωμα που έχει σχεδιαστεί για την ενίσχυση της ανάπτυξης και της βιωσιμότητας των κυττάρων σε συστήματα καλλιέργειας κυττάρων θηλαστικών. Το σκεύασμα αντιστοιχεί σε ένα 100x συμπύκνωμα των μη απαραίτητων αμινοξέων που βρίσκονται στο τυποποιημένο ελάχιστο απαραίτητο μέσο (MEM), επιτρέποντας την άμεση συμπλήρωση των βασικών μέσων με ελάχιστη προετοιμασία.
Εφαρμογή και οφέλη Αυτό το συμπλήρωμα παρέχει μια πρόσθετη δεξαμενή αμινοξέων για ταχέως πολλαπλασιαζόμενα κύτταρα ή για κυτταρικές σειρές που έχουν χάσει την ικανότητα να συνθέτουν μη απαραίτητα αμινοξέα de novo. Με την ελάφρυνση του μεταβολικού φόρτου της βιοσύνθεσης, υποστηρίζει βελτιωμένη κινητική ανάπτυξης, παρατεταμένη βιωσιμότητα και μεγαλύτερη πειραματική συνέπεια
- ειδικά σε καλλιέργειες ευαίσθητες σε θρεπτικά συστατικά ή υψηλής πυκνότητας.
Σύνθεση και χρήση Το διάλυμα περιλαμβάνει γλυκίνη, L-αλανίνη, L-ασπαραγίνη, L-ασπαρτικό οξύ, L-γλουταμινικό οξύ, L-προλίνη και L-σερίνη. Είναι συμβατό με το MEM και τα περισσότερα άλλα τυποποιημένα μέσα. Για χρήση, αραιώστε 1:100 στο τελικό μέσο καλλιέργειας. Αυτό το προϊόν είναι αποστειρωμένο-φίλτραρε και έτοιμο προς χρήση χωρίς πρόσθετα βήματα χειρισμού. Μόνο για ερευνητική χρήση. Όχι για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Δεν προορίζεται για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.
- Μια ήπια εναλλακτική λύση στην τρυψίνη
Η Accutase είναι ένα διάλυμα αποκόλλησης κυττάρων που φέρνει επανάσταση στη βιομηχανία κυτταροκαλλιέργειας. Πρόκειται για ένα μείγμα πρωτεολυτικών και κολλαγονολυτικών ενζύμων που μιμείται τη δράση της τρυψίνης και της κολλαγενάσης. Σε αντίθεση με τη θρυψίνη, η Accutase δεν περιέχει συστατικά θηλαστικών ή βακτηρίων και είναι πολύ πιο ήπια για τα κύτταρα, καθιστώντας την ιδανική λύση για την τακτική αποκόλληση κυττάρων από τα τυποποιημένα πλαστικά σκεύη καλλιέργειας ιστών και τα πλαστικά σκεύη με επικάλυψη προσκόλλησης. Σε αυτή την ανάρτηση ιστολογίου, θα διερευνήσουμε τα οφέλη και τις χρήσεις της Accutase και πώς αλλάζει το παιχνίδι στην κυτταροκαλλιέργεια.
Πλεονεκτήματα της Accutase
Η Accutase έχει αρκετά πλεονεκτήματα σε σχέση με τα παραδοσιακά διαλύματα θρυψίνης. Πρώτον, μπορεί να χρησιμοποιηθεί όποτε απαιτείται ήπια και αποτελεσματική αποκόλληση οποιασδήποτε προσκολλημένης κυτταρικής σειράς, καθιστώντας την άμεση αντικατάσταση της θρυψίνης. Δεύτερον, η Accutase λειτουργεί εξαιρετικά καλά σε εμβρυϊκά και νευρωνικά βλαστικά κύτταρα, και έχει αποδειχθεί ότι διατηρεί τη βιωσιμότητα αυτών των κυττάρων μετά από παθητικοποίηση. Τρίτον, η Accutase διατηρεί τους περισσότερους επιτόπους για την επακόλουθη ανάλυση με κυτταρομετρία ροής, καθιστώντας την ιδανική για την ανάλυση δεικτών κυτταρικής επιφάνειας.
Επιπλέον, η Accutase δεν χρειάζεται να εξουδετερωθεί κατά τη διέλευση προσκολλημένων κυττάρων. Η προσθήκη περισσότερου μέσου μετά τη διάσπαση των κυττάρων αραιώνει την Accutase ώστε να μην είναι πλέον σε θέση να αποκολλήσει τα κύτταρα. Αυτό εξαλείφει την ανάγκη για ένα βήμα αδρανοποίησης και εξοικονομεί χρόνο για τους τεχνικούς κυτταροκαλλιέργειας. Τέλος, η Accutase δεν χρειάζεται να διανέμεται σε άλλες ποσότητες και ένα μπουκάλι παραμένει σταθερό στο ψυγείο για 2 μήνες.
Εφαρμογές της Accutase
Η Accutase αποτελεί άμεση αντικατάσταση του διαλύματος θρυψίνης και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη διέλευση κυτταρικών σειρών. Επιπλέον, η Accutase αποδίδει καλά κατά την αποκόλληση κυττάρων για την ανάλυση πολλών δεικτών κυτταρικής επιφάνειας με τη χρήση κυτταρομετρίας ροής και για τη διαλογή κυττάρων. Άλλες μεταγενέστερες εφαρμογές της επεξεργασίας με Accutase περιλαμβάνουν ανάλυση δεικτών κυτταρικής επιφάνειας, δοκιμασία ανάπτυξης ιών, κυτταρικό πολλαπλασιασμό, δοκιμασίες μετανάστευσης καρκινικών κυττάρων, συνήθη διέλευση κυττάρων, κλιμάκωση παραγωγής (βιοαντιδραστήρας) και κυτταρομετρία ροής.
Σύνθεση της Accutase
Η Accutase δεν περιέχει συστατικά θηλαστικών ή βακτηρίων και είναι ένα φυσικό ενζυμικό μείγμα με πρωτεολυτική και κολλαγονολυτική ενζυμική δραστηριότητα. Είναι σχεδιασμένο σε πολύ χαμηλότερη συγκέντρωση από τη θρυψίνη και την κολλαγενάση, καθιστώντας το λιγότερο τοξικό και πιο ήπιο, αλλά εξίσου αποτελεσματικό.
Αποτελεσματικότητα της Accutase
Η Accutase έχει αποδειχθεί ότι είναι αποτελεσματική στην αποκόλληση πρωτογενών και βλαστικών κυττάρων και στη διατήρηση υψηλής βιωσιμότητας των κυττάρων σε σύγκριση με ένζυμα ζωικής προέλευσης, όπως η θρυψίνη. το 100% των κυττάρων ανακτάται μετά από 10 λεπτά και δεν υπάρχει καμία βλάβη στην παραμονή των κυττάρων στην Accutase για έως και 45 λεπτά, χάρη στην αυτόματη πέψη της Accutase.
Συνοπτικά
Συμπερασματικά, το Accutase είναι μια ισχυρή λύση που αλλάζει τα δεδομένα στην κυτταροκαλλιέργεια. Με τον ήπιο χαρακτήρα της, την αποτελεσματικότητα και την ευελιξία της, η Accutase είναι η ιδανική εναλλακτική λύση στη θρυψίνη. Εάν αναζητάτε μια αξιόπιστη και αποτελεσματική λύση για την αποκόλληση κυττάρων, η Accutase είναι η λύση για εσάς.
Τι περιέχει το EMEM
Το EMEM είναι μια τροποποιημένη έκδοση του ελάχιστου απαραίτητου μέσου Eagle, που περιέχει Earle's Balanced Salt Solution, μη απαραίτητα αμινοξέα, L-γλουταμίνη, πυρουβικό νάτριο και διττανθρακικό νάτριο. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι αυτό το επίπεδο διττανθρακικού νατρίου προορίζεται για χρήση σε αέρα με 5% CO2. Για να διατηρηθεί η αποτελεσματικότητά του, συνιστάται η αποθήκευση του μέσου στους 2°C έως 8°C στο σκοτάδι όταν δεν χρησιμοποιείται.
Για ποιο λόγο χρησιμοποιείται το EMEM
Το Eagle's minimal essential medium (EMEM) είναι ένα μέσο κυτταροκαλλιέργειας που μπορεί να διατηρήσει κύτταρα σε καλλιέργεια ιστών. Το μέσο περιέχει υψηλότερες συγκεντρώσεις αμινοξέων, επιτρέποντας την ακριβέστερη προσέγγιση της πρωτεϊνικής σύνθεσης των καλλιεργούμενων κυττάρων θηλαστικών. Το EMEM μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την καλλιέργεια διαφόρων κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων ινοβλαστών, κυττάρων ανθρώπινης καρκινικής κυτταρικής γραμμής του ήπατος (HepG2) και ανθρώπινων κυττάρων αστροκυττάρων που προέρχονται από εμβρυϊκούς προγονικούς εγκεφάλους (PDA). Συνήθως χρησιμοποιείται παρουσία εμβρυϊκού ορού βοοειδών (FBS), ορών μοσχαριού ή αλόγου.
Πώς διαφέρει το EMEM από άλλα μέσα καλλιέργειας κυττάρων
Ενώ το EMEM και το μέσο Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) μοιράζονται κάποιες ομοιότητες, διαφέρουν επίσης. Και τα δύο μέσα στερούνται πρωτεΐνης και περιέχουν τα αμινοξέα, τα άλατα, τη γλυκόζη και τις βιταμίνες που απαιτούνται για την παροχή ενέργειας σε ένα κύτταρο και τη διατήρησή του σε καλλιέργεια ιστών. Ωστόσο, το σκεύασμα DMEM έχει τροποποιηθεί ώστε να περιέχει έως και τέσσερις φορές περισσότερες βιταμίνες και αμινοξέα και δύο έως τέσσερις φορές περισσότερη γλυκόζη από το EMEM. Αξίζει να σημειωθεί ότι η EMEM είναι επίσης διαφορετική από το αρχικό σκεύασμα MEM.
Ποιοτικός έλεγχος
Αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Φυλάσσεται στους +2°C έως +8°C, προστατευμένη από το φως.
Μόλις ανοιχτεί, αποθηκεύστε στους 4°C και χρησιμοποιήστε το εντός 6-8 εβδομάδων.
Συνθήκες αποστολής
Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
Κατηγορία
Συστατικά
Συγκέντρωση (mg/L)
Αμινοξέα
L-αργινίνη HCl
126.00
L-Κυστίνη 2 HCl
31.30
L-Γλουταμίνη
292.00
L-ιστιδίνη HClH2O
42.00
L-Ισολευκίνη
52.00
L-λευκίνη
52.00
L-Λυσίνη HCl
72.50
L-μεθειονίνη
15.00
L-Φενυλαλανίνη
32.00
L-θρεονίνη
48.00
L-Τρυπτοφάνη
10.00
L-Τυροσίνη 2 Na 2H2O
51.90
L-Βαλίνη
46.00
Βιταμίνες
Χλωριούχο χολίνη
1.00
Βιταμίνες
Παντοθενικό D-ασβέστιο
1.00
Φολικό οξύ
1.00
myo-Ινοσιτόλη
2.00
Νικοτιναμίδιο
1.00
Πυριδοξαλικό HCl
1.00
Ριβοφλαβίνη
0.10
Θειαμίνη HCl
1.00
Ανόργανα άλατα
CaCl2 2H2O
265.00
Ανόργανα άλατα
KCl
400.00
MgSO4
97.67
NaCl
6800.00
NaHCO3
2200.00
NaH2PO4
122.00
Άλλα συστατικά
D-γλυκόζη
1000.00
Άλλα συστατικά
Αλάτι νατρίου κόκκινης φαινόλης
11.00
Τα βασικά χαρακτηριστικά του Freeze Medium CM-1 περιλαμβάνουν:
Ευρεία συμβατότητα: Αποτελεσματικό για ένα ευρύ φάσμα κυτταρικών τύπων, συμπεριλαμβανομένων πρωτογενών κυττάρων, βλαστικών κυττάρων και καθιερωμένων κυτταρικών σειρών.
Υψηλή βιωσιμότητα: Βελτιστοποιημένο για τη μεγιστοποίηση της ανάκτησης και της βιωσιμότητας των κυττάρων μετά την απόψυξη, εξασφαλίζοντας αξιόπιστα πειραματικά αποτελέσματα.
Έτοιμο προς χρήση: Παρασκευάζεται και αποστειρώνεται βολικά για άμεση εφαρμογή, μειώνοντας τον χρόνο προετοιμασίας και τον κίνδυνο μόλυνσης.
Ενισχυμένη σταθερότητα: Διατηρεί σταθερή απόδοση υπό τυπικές συνθήκες κρυοσυντήρησης, εξασφαλίζοντας αναπαραγώγιμα αποτελέσματα.
Μεγάλη διάρκεια ζωής: Το CM-1 είναι ένα μέσο κρυοσυντήρησης που περιέχει ορό, έτοιμο προς χρήση, το οποίο μπορεί να αποθηκευτεί στο ψυγείο για έως και ένα έτος.
Χρήση του CM-1 για την κατάψυξη κυττάρων
Για να χρησιμοποιήσετε το CM-1 για την κατάψυξη τόσο προσκολλημένων όσο και εναιωρημάτων κυττάρων, ακολουθήστε τα παρακάτω βήματα
Για προσκολλημένα κύτταρα, πλύνετε και διαχωρίστε τα από το υπόστρωμα καλλιέργειας. Για κύτταρα εναιωρήματος, προχωρήστε απευθείας στο επόμενο βήμα.
Μετρήστε τα κύτταρα για να βεβαιωθείτε ότι βρίσκονται στην κατάλληλη συγκέντρωση.
Φυγοκεντρήστε τα κύτταρα για να τα σφαιροποιήσετε και, στη συνέχεια, ανασυσσωματώστε τα σε μέσο κατάψυξης CM-1.
Μεταφέρετε τα επαναιωρούμενα κύτταρα σε κρυοφιαλίδια.
Χρησιμοποιήστε μια μέθοδο αργής κατάψυξης πριν από τη μεταφορά των κυττάρων σε μακροχρόνια αποθήκευση
Μέθοδος
Περιγραφή
Βήματα
❄️
Χειροκίνητη κατάψυξη
Μέθοδος βήμα προς βήμα που περιλαμβάνει σταδιακή μείωση της θερμοκρασίας για τη διασφάλιση της βιωσιμότητας των κυττάρων
1️⃣ Τοποθετήστε τα κύτταρα σε μέσο κατάψυξης σε καταψύκτη 4°C για 40 λεπτά.
2️⃣ Μεταφέρετε τα κύτταρα σε καταψύκτη -80°C για 24 ώρες.
3️⃣ Αποθηκεύστε τα κύτταρα σε υγρό άζωτο για μακροχρόνια διατήρηση
❄️
Χρήση του Mr. Frosty
Μια βολική συσκευή που επιτρέπει ελεγχόμενους ρυθμούς κατάψυξης χωρίς ηλεκτρικό ρεύμα
1️⃣ Προετοιμάστε τα κύτταρα σε κρυοφιαλίδια με μέσο κατάψυξης.
2️⃣ Τοποθετήστε τα κρυοφιαλίδια στο δοχείο Mr. Frosty.
3️⃣ Αποθηκεύστε στους -80°C για 24 ώρες πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο
❄️
Καταψύκτης ελεγχόμενης ταχύτητας
Καταψύκτης υψηλής ακρίβειας της Thermo Fisher ή άλλων κατασκευαστών σχεδιασμένος για ελεγχόμενη μείωση της θερμοκρασίας
1️⃣ Προγραμματίστε τη συσκευή για σταδιακή μείωση της θερμοκρασίας.
2️⃣ Τοποθετήστε τα προετοιμασμένα κύτταρα στον καταψύκτη.
3️⃣ Μετά τον κύκλο κατάψυξης, μεταφέρετε τα κύτταρα σε υγρό άζωτο
Αποθηκεύστε τα κρυοφιαλίδια σε θερμοκρασίες κάτω των -130°C ή σε υγρό άζωτο για μακροχρόνια συντήρηση.
Συστατικά
Περιέχει FBS, DMSO, γλυκόζη, άλατα
Ρυθμιστική ικανότητα: pH = 7,2 έως 7,6
Το Freeze Medium CM-1 της Cytion προσφέρει μια αξιόπιστη λύση για την κρυοσυντήρηση, εξασφαλίζοντας υψηλή βιωσιμότητα και λειτουργικότητα των κυττάρων μετά την απόψυξη για ένα ευρύ φάσμα ερευνητικών εφαρμογών.
Το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) Medium είναι προσεκτικά διαμορφωμένο για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών καλλιέργειας κυττάρων. Διαθέτει εμπλουτισμένη σύνθεση, παρέχοντας αυξημένα επίπεδα βασικών συστατικών, όπως αμινοξέα και πυρουβικό νάτριο, καθώς και πρόσθετα στοιχεία, όπως πουτρεσκίνη, θυμιδίνη, υποξανθίνη και ψευδάργυρο. Αυτές οι προσθήκες επιτρέπουν στους ερευνητές να συμπληρώνουν το μέσο με ελάχιστο ορό ή καθορισμένα συστατικά για συγκεκριμένους κυτταρικούς τύπους, διευκολύνοντας ακριβείς πειραματικές συνθήκες.
Ειδικότερα, το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) δεν περιέχει πρωτεΐνες ή αυξητικούς παράγοντες. Κατά συνέπεια, η συμπλήρωση με αυξητικούς παράγοντες και ορό εμβρύου βοοειδών (FBS) είναι συχνά απαραίτητη, επιτρέποντας στους ερευνητές να προσαρμόσουν το μέσο στις απαιτήσεις των συγκεκριμένων κυτταρικών σειρών τους. Για βέλτιστη απόδοση, η συγκέντρωση του FBS πρέπει να βελτιστοποιείται προσεκτικά για κάθε κυτταρική σειρά, εξασφαλίζοντας τη βέλτιστη ανάπτυξη και λειτουργικότητα.
Για τη διατήρηση του φυσιολογικού pH, το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) χρησιμοποιεί ρυθμιστικό σύστημα διττανθρακικού νατρίου (2,5 g/L), καθιστώντας απαραίτητο ένα ελεγχόμενο περιβάλλον 5-10% CO2 κατά τη διάρκεια της καλλιέργειας. Αυτό διασφαλίζει ότι το pH του μέσου παραμένει εντός του ιδανικού εύρους για την ανάπτυξη και τη βιωσιμότητα των κυττάρων
Ποιοτικός έλεγχος
pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη καθώς και η θέρμανση έως τους +37°C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής οποιουδήποτε μέσου εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.
Σύνθεση
Συστατικά
mg/L
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2H2O
135,24
Θειικός χαλκός(ΙΙ) x 5H2O
0,00
Θειικός σίδηρος (ΙΙ) x 7H2O
0,83
Χλωριούχο μαγνήσιο x 6H2O
105,72
Θειικό μαγνήσιο x 7H2O
394,49
Χλωριούχο κάλιο
283,29
Φωσφορικό διυδρογόνο κάλιο
58,52
Χλωριούχο νάτριο
7597,20
φωσφορικό δινατριούχο νάτριοάνυδρο
115,02
Θειικός ψευδάργυρος x 7H2O
0,14
Άλλα συστατικά
D(+)-γλυκόζη άνυδρη
1260,00
Υποξανθίνη
4,08
DL-α-λιποϊκό οξύ
0,21
Κόκκινη φαινόλη
3,00
Πουτρεσκίνη x 2HCl
0,32
Πυρουβικό νάτριο
220,00
NaHCO3
2500,00
Θυµιδίνη
0,73
Αμινοξέα
L-αλανίνη
17,82
L-αργινίνη x HCl
421,40
L-ασπαραγίνη x H2O
30,02
L-ασπαρτικό οξύ
26,62
L-κυστεΐνη x HCl x H2O
70,24
L-Γλουταμίνη
292,20
L-γλουταμινικό οξύ
29,42
Γλυκίνη
15,01
L-ιστιδίνη x HCl x H2O
41,92
L-ισολευκίνη
7,87
L-λευκίνη
26,24
L-Λυσίνη x HCl
73,04
L-μεθειονίνη
8,95
L-φαινυλαλανίνη
9,91
L-προλίνη
69,06
L-Σερίνη
21,02
L-θρεονίνη
23,82
L-Τρυπτοφάνη
4,08
L-τυροσίνη
10,87
L-Βαλίνη
23,42
Βιταμίνες
D(+)-Βιοτίνη
0,07
D-παντοθενικό ασβέστιο
0,48
Χλωριούχο χολίνη
13,96
Φολικό οξύ
1,32
μυο-ινοσιτόλη
18,02
Νικοτιναμίδιο
0,04
Πυριδοξίνη x HCl
0,06
Ριβοφλαβίνη
0,04
Θειαμίνη x HCl
0,34
Βιταμίνη Β12
1,36
Το ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών αλάτων (PBS) είναι ένα ευρέως χρησιμοποιούμενο ρυθμιστικό διάλυμα στη βιολογική και χημική έρευνα. Διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο στη διατήρηση της ισορροπίας του pH και της ωσμωτικότητας κατά τη διάρκεια διαφόρων πειραματικών διαδικασιών, συμπεριλαμβανομένης της επεξεργασίας ιστών και της καλλιέργειας κυττάρων. Το διάλυμά μας PBS είναι σχολαστικά παρασκευασμένο με συστατικά υψηλής καθαρότητας για να διασφαλίζεται η σταθερότητα και η αξιοπιστία σε κάθε πείραμα. Η οσμωτικότητα και οι συγκεντρώσεις ιόντων του PBS μας μιμούνται στενά εκείνες του ανθρώπινου σώματος, καθιστώντας το ισότονο και μη τοξικό για τα περισσότερα κύτταρα.
Σύνθεση του διαλύματος PBS
Το διάλυμά μας PBS είναι ένα ρυθμισμένο ως προς το pH μείγμα φωσφορικών ρυθμιστικών διαλυμάτων και αλατούχων διαλυμάτων υπερκαθαρού βαθμού. At a 1X working concentration, it contains:
8000 mg/l χλωριούχο νάτριο (NaCl)
200 mg/L Χλωριούχο κάλιο (KCl)
1150 mg/L Φωσφορικό νάτριο διβασικό άνυδρο (Na2HPO4)
200 mg/L Φωσφορικό κάλιο μονοβασικό άνυδρο (KH2PO4)
Αυτή η σύνθεση εξασφαλίζει βέλτιστη ισορροπία pH και ιόντων, κατάλληλη για ένα ευρύ φάσμα βιολογικών εφαρμογών.
Εφαρμογές του διαλύματος PBS
Το διάλυμά μας PBS είναι ιδανικό για διάφορες εφαρμογές στη βιολογική έρευνα. Οι ισοτονικές και μη τοξικές ιδιότητές του το καθιστούν κατάλληλο για αραίωση ουσιών και ξέπλυμα κυτταρικών δοχείων. Τα διαλύματα PBS που περιέχουν EDTA είναι αποτελεσματικά για την αποδέσμευση προσκολλημένων και συσσωματωμένων κυττάρων. Ωστόσο, τα δισθενή μέταλλα, όπως ο ψευδάργυρος, δεν πρέπει να προστίθενται στο PBS, καθώς αυτό μπορεί να προκαλέσει καθίζηση. Σε τέτοιες περιπτώσεις συνιστώνται τα ρυθμιστικά διαλύματα Good. Επιπλέον, το διάλυμά μας PBS είναι μια αποδεκτή εναλλακτική λύση σε μέσο μεταφοράς ιών για τη μεταφορά και αποθήκευση ιών RNA, συμπεριλαμβανομένου του SARS-CoV-2.
Ποιοτικός έλεγχος
Αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Φυλάσσεται στους +2°C έως +25°C, προστατευμένο από το φως.
Αφού ανοιχτεί, να φυλάσσεται στους 2°C έως 25°C και να χρησιμοποιείται εντός 24 μηνών.
Συνθήκες αποστολής
Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
Κατηγορία
Συστατικά
Συγκέντρωση (mg/L)
Άλατα
Χλωριούχο κάλιο
200
Φωσφορικό κάλιο μονοβασικό άνυδρο
200
Χλωριούχο νάτριο
8000
Φωσφορικό νάτριο διβασικό άνυδρο
1150
Αρχικά σχεδιασμένο για την υποστήριξη της ανάπτυξης ανθρώπινων λευχαιμικών κυττάρων τόσο σε καλλιέργειες εναιωρήματος όσο και σε μονοστρωματικές καλλιέργειες, το μέσο RPMI 1640 έχει εξελιχθεί μέσω τροποποιήσεων από ερευνητές και εμπορικούς προμηθευτές ώστε να καταστεί κατάλληλο για ένα ευρύ φάσμα κυττάρων θηλαστικών. Είναι εξαιρετικά συμβατό με κυτταρικές σειρές όπως HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, αστροκύτταρα και καρκινώματα.
Το μέσο RPMI 1640 Medium ξεχωρίζει από άλλα μέσα κυτταροκαλλιέργειας λόγω της μοναδικής του σύνθεσης. Περιέχει σημαντική ποσότητα φωσφορικών αλάτων, αμινοξέων και βιταμινών. Ειδικότερα, περιλαμβάνει βιοτίνη, βιταμίνη Β12 και PABA, που απουσιάζουν από το Minimal Essential Medium του Eagle ή το Dulbecco's Modified Eagle Medium. Επιπλέον, το μέσο RPMI 1640 παρουσιάζει σημαντικά αυξημένες συγκεντρώσεις βιταμινών ινοσιτόλης και χολίνης. Ωστόσο, δεν περιέχει πρωτεΐνες, λιπίδια ή αυξητικούς παράγοντες. Κατά συνέπεια, απαιτείται συνήθως η συμπλήρωση με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS) για την παροχή βέλτιστων συνθηκών για την ανάπτυξη των κυττάρων.
Το ρυθμιστικό σύστημα του RPMI 1640 Medium βασίζεται στο διττανθρακικό νάτριο και απαιτεί ένα περιβάλλον 5-10% CO2 για τη διατήρηση ενός φυσιολογικά κατάλληλου pH. Η συμπερίληψη του αναγωγικού παράγοντα γλουταθειόνη διακρίνει περαιτέρω αυτό το μέσο από άλλα.
Ποιοτικός έλεγχος
Αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Φυλάσσεται στους +2°C έως +8°C, προστατευμένο από το φως.
Μόλις ανοιχτεί, αποθηκεύστε στους 4°C και χρησιμοποιήστε το εντός 6-8 εβδομάδων.
Συνθήκες αποστολής
Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
Κατηγορία
Συστατικά
Συγκέντρωση (mg/L)
Αμινοξέα
Γλυκίνη
10.00
L-αλανυλο-L-γλουταμίνη
434.40
L-αργινίνη
200.00
L-ασπαραγίνηH2O
56.82
L-ασπαρτικό οξύ
20.00
L-Κυστίνη 2HCl
65.20
L-γλουταμινικό οξύ
20.00
L-ιστιδίνη HClH2O
20.27
L-Υδροξυ-L-προλίνη
20.00
L-Ισολευκίνη
50.00
L-λευκίνη
50.00
L-Λυσίνη HCl
40.00
L-μεθειονίνη
15.00
L-Φενυλαλανίνη
15.00
L-προλίνη
20.00
L-σερίνη
30.00
L-θρεονίνη
20.00
L-Τρυπτοφάνη
5.00
L-Τυροσίνη 2Na 2H2O
28.83
L-Βαλίνη
20.00
Βιταμίνες
p-αμινοβενζοϊκό οξύ
1.00
D-Biotin
0.20
Χλωριούχο χολίνη
3.00
Παντοθενικό D-ασβέστιο
0.25
Φολικό οξύ
1.00
myo-Ινοσιτόλη
35.00
Νικοτιναμίδιο
1.00
Πυριδοξίνη HCl
1.00
Ριβοφλαβίνη
0.20
Θειαμίνη HCl
1.00
Βιταμίνη Β12
0.005
Ανόργανα άλατα
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Άλλα συστατικά
D-γλυκόζη
2000.00
L-γλουταθειόνη μειωμένη
1.00
Κόκκινο νατριούχο άλας φαινόλης
5.30
Αυτό το μοναδικό σκεύασμα συνδυάζει Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) και Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) σε ακριβή αναλογία 1:1. Η προσθήκη L-γλουταμίνης ενισχύει περαιτέρω τη σύνθεσή του.
Το DMEM, που προέρχεται από το Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), προσφέρει αυξημένη συγκέντρωση αμινοξέων και βιταμινών σε σύγκριση με τον προκάτοχό του. Αντίθετα, το Ham's F-12 βασίζεται στο μέσο Ham's F-10, παρέχοντας ένα συμπληρωματικό σύνολο βασικών συστατικών.
Για την υποστήριξη της βέλτιστης ανάπτυξης των κυττάρων, είναι κοινή πρακτική να συμπληρώνεται το DMEM:Ham's F12 με FBS σε τυπική συγκέντρωση 5-10%. Η προσθήκη αυτή είναι απαραίτητη, καθώς το μέσο στερείται αυξητικών ορμονών, λιπιδίων και πρωτεϊνών ζωτικής σημασίας για την κυτταρική ανάπτυξη.
Η DMEM:Ham's F12 ενσωματώνει ένα ρυθμιστικό σύστημα pH και συχνά συμπληρώνεται με κόκκινο της φαινόλης, έναν δείκτη pH. Τα καλλιεργούμενα κύτταρα σε DMEM:Ham's F12 ή σε οποιοδήποτε μέσο που χρησιμοποιεί το ρυθμιστικό σύστημα διττανθρακικών, απαιτούν ελεγχόμενο περιβάλλον CO2 5-10% για τη διατήρηση των κατάλληλων επιπέδων pH.
Ποιοτικός έλεγχος
Αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Φυλάσσεται στους +2°C έως +8°C, προστατευμένο από το φως.
Μόλις ανοιχτεί, αποθηκεύστε στους 4°C και χρησιμοποιήστε το εντός 6-8 εβδομάδων.
Συνθήκες αποστολής
Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
Κατηγορία
Συστατικά
Συγκέντρωση (mg/L)
Αμινοξέα
Γλυκίνη
18.75
L-αλανίνη
4.45
L-αργινίνη HCl
147.50
L-ασπαραγίνη H₂O
7.50
L-ασπαρτικό οξύ
6.65
L-κυστεΐνη HCl H₂O
17.56
L-Κυστίνη 2 HCl
31.29
L-γλουταμινικό οξύ
7.35
L-Γλουταμίνη
365.00
L-ιστιδίνη HCl H₂O
31.48
L-Ισολευκίνη
54.47
L-λευκίνη
59.05
L-Λυσίνη HCl
91.25
L-μεθειονίνη
17.24
L-φαινυλαλανίνη
35.48
L-προλίνη
17.25
L-Σερίνη
26.25
L-θρεονίνη
53.45
L-Τρυπτοφάνη
9.02
L-Τυροσίνη Δισόξινο άλας
48.10
L-βαλίνη
52.85
Βιταμίνες
D-Biotin
0.0035
Χλωριούχος χολίνη
8.98
Παντοθενικό D-ασβέστιο
2.24
Φολικό οξύ
2.66
myo-Ινοσιτόλη
12.60
Νικοτιναμίδιο
2.02
Πυριδοξίνη HCl
0.031
Πυριδοξαλικό HCl
2.00
Ριβοφλαβίνη
0.219
Θειαμίνη HCl
2.17
Βιταμίνη Β12
0.68
Ανόργανα άλατα
CaCl₂ 2 H₂O
154.50
CuSO₄ 5 H₂O
0.0013
Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05
FeSO₄ 7 H₂O
0.417
KCl
311.80
MgCl₂ 6 H₂O
61.20
MgSO₄
48.84
NaCl
6996.00
NaHCO₃
1200.00
Na₂HPO₄
71.02
NaH₂PO₄
54.30
ZnSO₄ 7 H₂O
0.432
Άλλα συστατικά
D-γλυκόζη
3151.00
Υποξανθίνη
2.40
HEPES
3574.50
Λινολεϊκό οξύ
0.042
Λιποϊκό οξύ
0.105
Κόκκινο νατριούχο άλας φαινόλης
8.63
Πουτρεσκίνη 2 HCl
0.081
Πυρουβικό νάτριο
55.00
Θυµιδίνη
0.365
- 0,02 στους 20-25 °C. Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκόπλασμα και βακτηρίων. Συντήρηση Φυλάσσεται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C, σε σκοτεινό μέρος. Η κατάψυξη και η θέρμανση σε θερμοκρασία +37°C μειώνουν την ποιότητα του προϊόντος. Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία μεγαλύτερη από 37°C και μην χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. φούρνους μικροκυμάτων). Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την ποσότητα αυτή από το μπουκάλι και θερμάνετε την σε θερμοκρασία δωματίου. Η διάρκεια ζωής για όλα τα μέσα εκτός από το βασικό μέσο είναι 6 έως 8 εβδομάδες από την ημερομηνία ανοίγματος. Σύνθεση Συστατικά mg/L Ανόργανα άλαταΧλωριούχο ασβέστιο x 2H2O132,0 Θειικό μαγνήσιο97,67 Χλωριούχο κάλιο400 Χλωριούχο νάτριο6.460 Υδρογενικό φωσφορικό νάτριο (άνυδρο)504,00 Άλλα συστατικάD(+)-Γλυκόζη (άνυδρη)3.000 Γλουταθειόνη (αναγμένη)0 Πεπτόνη κρέατος600 Φαινόλη κόκκινη νάτριο άλας11 ΑμινοξέαL-αλανίνη13,36 L-αργινίνη x HCl42,14 L-ασπαραγίνη x H2O45,03 L-ασπαρτικό οξύ19,97 L-Κυστεΐνη x HCl x H2O31,75 L-γλουταμίνη (σταθερή)219,15 L-γλουταμινικό οξύ22,07 Γλυκίνη7,5 L-ιστιδίνη x HCl x H2O20,96 L-υδροξυπρολίνη19,67 L-ισολευκίνη39,36 L-Λευκίνη39,36 L-Λυσίνη x HCl36,54 L-Μεθειονίνη14,92 L-φαινυλαλανίνη16,52 L-προλίνη17,27 L-σερίνη26,28 L-Θρεονίνη17,87 L-Τρυπτοφάνη3,06 Δισόξινο άλας L-τυροσίνης26,10 L-βαλίνη17,57 Βιταμίνεςp-αμινοβενζοϊκό οξύ1 Ασκορβικό οξύ0,56 D(+)-Βιοτίνη0 D-παντοθενικό ασβέστιο0 Χλωριούχο χολίνη5 Φολικό οξύ10 Μυο-ινοσιτόλη36 Νικοτιναμίδιο0 Νικοτινικό οξύ0 Πυριδοξάλη HCl0,5 Πυριδοξίνη HCl0,5 Ριβοφλαβίνη0 Θειαμίνη HCl0 Βιταμίνη Β122,0
Το Medium 199 προσφέρει μια σειρά εφαρμογών στον τομέα. Μπορεί να διατηρήσει αποτελεσματικά το σύμπλεγμα σπερματοζωαρίου-ωοκυττάρων (COC) και να υποστηρίξει την in vitro ωρίμανση των ωαρίων. Επιπλέον, χρησιμοποιείται στην έκπλυση των γραμμών αναρρόφησης κατά τη συλλογή ωαρίων από γερμανικές αγελάδες Holstein. Επιπλέον, το Medium 199 χρησιμεύει ως εξαιρετικό μέσο για την καλλιέργεια καρδιακών ενδοθηλιακών κυττάρων που προέρχονται από αρουραίους. Οι εφαρμογές αυτές καταδεικνύουν την ευελιξία και την προσαρμοστικότητα του Medium 199 σε διάφορες πειραματικές ανάγκες.
Ιστορικό
Η ανάπτυξη του Medium 199 στη δεκαετία του 1950 σηματοδότησε σημαντική πρόοδο στα μέσα καλλιέργειας ιστών. Πριν από την εισαγωγή του, πολλά μέσα καλλιέργειας βασίζονταν σε προϊόντα ζωικής προέλευσης και εκχυλίσματα ιστών. Ωστόσο, ο Morgan και οι συνεργάτες του έφεραν επανάσταση στον τομέα διατυπώνοντας μια πλήρως καθορισμένη θρεπτική πηγή για κυτταροκαλλιέργειες. Μέσω των πειραμάτων τους που αφορούσαν διαφορετικούς συνδυασμούς βιταμινών, αμινοξέων και άλλων παραγόντων, ανακάλυψαν τις εξαιρετικές ιδιότητες του Medium 199 που προάγουν την ανάπτυξη.
Ποιοτικός έλεγχος
pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη και η θέρμανση έως τους +37° C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37° C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής για οποιοδήποτε μέσο εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.
Σύνθεση
Συστατικά
mg/L
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2H2O
264,92
Νιτρικός σίδηρος (III) x 9H2O
0,72
Θειικό μαγνήσιο
97,67
Χλωριούχο κάλιο
400,00
Οξικό νάτριο x 3H2O
82,95
Χλωριούχο νάτριο
6,800.00
Φωσφορικό διυδρογόνο νάτριο x H2O
140,00
Άλλα συστατικά
Θειική αδενίνη
10,00
AMP
0,20
ATP
1,00
Χοληστερόλη
0,20
2'-Δεοξυριβόζη
0,50
D(+)-Γλυκόζη άνυδρη
1,000.00
Γλουταθειόνη (ερυθρή)
0,05
Γουανίνη x HCl
0,30
Υποξανθίνη
0,30
Κόκκινη φαινόλη
10,00
D-Ribose
0,50
Θυμίνη
0,30
Tween 80
4,90
Ουρακίλ
0,30
Ξανθίνη
0,30
NaHCO3
2,200.00
Αμινοξέα
L-αλανίνη
25,00
L-αργινίνη x HCl
70,00
L-ασπαρτικό οξύ
30,00
L-κυστεΐνη x HCl x H2O
0,10
L-κυστίνη
20,00
Σταθερή L-Γλουταμίνη
149,00
L-γλουταμινικό οξύ
67,00
Γλυκίνη
50,00
L-ιστιδίνη x HCl x H2O
21,88
L-υδροξυπρολίνη
10,00
L-ισολευκίνη
20,00
L-λευκίνη
60,00
L-Λυσίνη x HCl
70,00
L-μεθειονίνη
15,00
L-Φενυλαλανίνη
25,00
L-προλίνη
40,00
L-Σερίνη
25,00
L-Θρεονίνη
30,00
L-Τρυπτοφάνη
10,00
L-Τυροσίνη
40,00
L-Βαλίνη
25,00
Βιταμίνες
4-Αμινοβενζοϊκό οξύ
0,05
Ασκορβικό οξύ
0,05
D(+)-Βιοτίνη
0,01
Καλσιφερόλη
0,10
D-παντοθενικό ασβέστιο
0,01
Χλωριούχος χολίνη
0,50
Φολικό οξύ
0,01
myo-Ινοσιτόλη
0,05
Μεναδιόνη
0,01
Νικοτινικό οξύ
0.025
Νικοτιναμίδιο
0.025
Πυριδοξάλη x HCl
0.025
Πυριδοξόλη x HCl
0.025
Ριβοφλαβίνη
0,01
DL-α-τοκοφερόλη φωσφορικό δινάτριο άλας
0,01
Θειαμίνη x HCl
0,01
Οξική βιταµίνη Α
0,14
Το IMDM είναι κατάλληλο για ταχέως πολλαπλασιαζόμενες καλλιέργειες κυττάρων υψηλής πυκνότητας, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων Jurkat, COS-7 και μακροφάγων. Οι διάφορες τροποποιήσεις του IMDM που διατίθενται για μια σειρά εφαρμογών κυτταροκαλλιέργειας μπορούν να βρεθούν χρησιμοποιώντας το εργαλείο επιλογής μέσων. Τα υγρά μέσα παρέχουν βασικά θρεπτικά συστατικά για όλες τις εφαρμογές κυτταροκαλλιέργειας. Κάθε ένα από τα υψηλής ποιότητας μέσα κυτταροκαλλιέργειας που διαθέτουμε παρασκευάζεται σύμφωνα με τον αρχικά δημοσιευμένο τύπο ή τις τροποποιήσεις που είναι απαραίτητες για τη συνεπή απόδοση και σταθερότητα του μέσου καλλιέργειας.
IMDM έναντι DMEM
Το IMDM περιέχει νιτρικό κάλιο αντί για νιτρικό σίδηρο και HEPES και πυρουβικό νάτριο. Τα πρόσθετα συστατικά στο IMDM το καθιστούν καταλληλότερο για εξειδικευμένους τύπους κυττάρων και ειδικές εφαρμογές από ό,τι το DMEM.
IMDM έναντι RPMI
Το IMDM και το RPMI έχουν διαφορετικές συνθέσεις που μπορεί να έχουν σημασία για τη διέγερση με PMA/ιονομυκίνη. Μια σημαντική διαφορά είναι η συγκέντρωση του Ca2+. Ενώ το RPMI περιέχει 0,42 mM Ca2+, το IMDM περιέχει 1,49 mM.
Ποιοτικός έλεγχος
pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη και η θέρμανση έως τους +37° C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37° C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής για οποιοδήποτε μέσο εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.
Σύνθεση
Συστατικά
mg/L
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2 H2O
219,00
Χλωριούχο κάλιο
330,00
Νιτρικό κάλιο
0.076
Θειικό μαγνήσιο άνυδρο
97,73
Χλωριούχο νάτριο
4,505.00
Φωσφορικό διυδρογόνο νάτριο άνυδρο
109,00
Σεληνιούχο νάτριο
0,02
Άλλα συστατικά
D(+)-γλυκόζη άνυδρη
4,500.00
HEPES
5,958.00
Πυρουβικό νάτριο
110,00
Κόκκινη φαινόλη
15,00
Αμινοξέα
L-αλανίνη
25,00
L-αργινίνη x HCl
84,00
L-ασπαραγίνη x H2O
25,00
L-ασπαρτικό οξύ
30,00
L-Κυστίνη x 2HCl
91,24
L-Γλουταμίνη
584,00
L-γλουταμινικό οξύ
75,00
Γλυκίνη
30,00
L-ιστιδίνη x HCl x H2O
42,00
L-ισολευκίνη
104,80
L-λευκίνη
104,80
L-Λυσίνη x HCl
146,20
L-μεθειονίνη
30,00
L-Φενυλαλανίνη
66,00
L-προλίνη
40,00
L-Σερίνη
42,00
L-Θρεονίνη
95,20
L-Τρυπτοφάνη
16,00
L-Τυροσίνη x 2Na
104,20
L-Βαλίνη
93,60
Βιταμίνες
D(+)-Βιοτίνη
0.013
D-παντοθενικό ασβέστιο
4,00
Χλωριούχος χολίνη
4,00
Φολικό οξύ
4,00
myo-Ινοσιτόλη
7,20
Μέσα καλλιέργειας κυττάρων: Μια επισκόπηση
Στον τομέα των βιοεπιστημών, μία από τις σημαντικότερες μεθοδολογίες είναι η κυτταροκαλλιέργεια. Η αφαίρεση κυττάρων, ιστών ή οργάνων από ένα ζώο ή φυτό και η επακόλουθη εμφύτευση αυτών των κυττάρων, ιστών ή οργάνων σε ένα τεχνητό περιβάλλον που ευνοεί την επιβίωση ή/και την ανάπτυξή τους είναι αυτό που εννοείται με τη φράση "κυτταροκαλλιέργεια" Οι θεμελιώδεις περιβαλλοντικές ανάγκες για τη βέλτιστη ανάπτυξη των κυττάρων είναι η ελεγχόμενη θερμοκρασία, ένα υπόστρωμα για την προσκόλληση των κυττάρων, ένα επαρκές μέσο ανάπτυξης και ένας επωαστήρας που διατηρεί το βέλτιστο pH και την ωσμωτικότητα. Τα κύτταρα πρέπει να έχουν αυτές τις συνθήκες προκειμένου να αναπτυχθούν στο πλήρες δυναμικό τους.
Η επιλογή ενός κατάλληλου μέσου ανάπτυξης για in vitro καλλιέργεια είναι το στάδιο της κυτταροκαλλιέργειας που είναι και το πιο κρίσιμο και το πιο ζωτικό. Ένα μέσο ανάπτυξης, επίσης γνωστό ως μέσο καλλιέργειας, είναι ένα υγρό ή πήκτωμα που έχει διαμορφωθεί για να ενθαρρύνει την ανάπτυξη οργανισμών σε μικροσκοπική, κυτταρική ή φυτική κλίμακα. Το μέσο που χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια κυττάρων συχνά περιέχει επαρκή παροχή ενέργειας και ουσιών που ελέγχουν τον κυτταρικό κύκλο. Τα κύρια συστατικά ενός μέσου καλλιέργειας περιλαμβάνουν αμινοξέα, βιταμίνες, ανόργανα άλατα, γλυκόζη και ορό. Ο ορός προστίθεται στο μέσο επειδή λειτουργεί ως πηγή αυξητικών παραγόντων, ορμονών και παραγόντων προσκόλλησης. Εκτός από την παροχή θρεπτικών συστατικών, το μέσο συμβάλλει επίσης στη διατήρηση των επιπέδων pH και ωσμωτικότητας.
Τύποι μέσων που χρησιμοποιούνται στην κυτταροκαλλιέργεια
Τόσο τα ανθρώπινα όσο και τα ζωικά κύτταρα έχουν τη δυνατότητα να καλλιεργηθούν είτε σε ένα τεχνητό ή συνθετικό μέσο είτε σε ένα εξ ολοκλήρου φυσικό μέσο που συμπληρώνεται με φυσικά στοιχεία. Στη συνέχεια, θα σας δώσουμε μια επισκόπηση των διαφόρων διαθέσιμων σήμερα τύπων μέσων.
Φυσικά μέσα
Σε φυσικά μέσα μπορούν να βρεθούν μόνο βιολογικά υγρά που υπάρχουν στη φυσική τους κατάσταση. Τα φυσικά μέσα είναι πολύ χρήσιμα και εύκολα για την καλλιέργεια μιας μεγάλης ποικιλίας τύπων ζωικών κυττάρων. Η έλλειψη κατανόησης των ακριβών συστατικών που συνθέτουν τα φυσικά μέσα είναι ο κύριος παράγοντας που συμβάλλει στη χαμηλή επαναληψιμότητα των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται με τη χρήση φυσικών μέσων.
Τεχνητά μέσα
Η παρασκευή τεχνητών ή συνθετικών μέσων περιλαμβάνει την προσθήκη θρεπτικών ουσιών (οργανικών και ανόργανων), πρωτεϊνών ορού, υδατανθράκων, συμπαράγοντων, βιταμινών και αλάτων, καθώς και φάσεων αερίων Ο2 και CO2 [1].
Έχουν αναπτυχθεί διάφοροι τύποι τεχνητών μέσων προκειμένου να εκπληρώσουν μία ή περισσότερες από τις ακόλουθες λειτουργίες: 1) Άμεση επιβίωση (ισορροπημένο διάλυμα αλάτων με ακριβές pH και οσμωτική πίεση). 2) Παρατεταμένη επιβίωση (ισορροπημένο διάλυμα άλατος συμπληρωμένο με διάφορα σκευάσματα οργανικών χημικών ουσιών ή/και ορού). 3) Απεριόριστη ανάπτυξη. 4) Εξειδικευμένες λειτουργίες.
Υπάρχουν τέσσερις διακριτές ταξινομήσεις για τα τεχνητά μέσα:
Μέσα που περιέχουν ορό
Το συχνότερο είδος συμπληρώματος που συναντάται σε μέσα που χρησιμοποιούνται για την ανάπτυξη ζωικών κυττάρων είναι ο εμβρυϊκός ορός βοοειδών. Προστίθεται στο μέσο καλλιέργειας ως συμπλήρωμα χαμηλού κόστους προκειμένου να επιτευχθούν οι καλύτερες δυνατές συνθήκες ανάπτυξης. Εκτός του ότι δρα ως μεταφορέας ή χηλικός παράγοντας για θρεπτικά συστατικά που είναι ασταθή ή αδιάλυτα στο νερό, ορμόνες και αυξητικούς παράγοντες, αναστολείς πρωτεασών και άλλες ουσίες, ο ορός δεσμεύει και εξουδετερώνει επίσης επιβλαβή μόρια.
Μέσο χωρίς ορό
Η παρουσία ορού στα μέσα έχει πολλά μειονεκτήματα και είναι δυνατόν να προκαλέσει σημαντικά σφάλματα στην ερμηνεία στην ανοσολογική έρευνα [2, 3]. Έχει δημιουργηθεί μια ποικιλία διαφορετικών μέσων χωρίς ορό [4, 5]. Τα μέσα αυτά είναι γενικά ειδικά σχεδιασμένα για την υποστήριξη της καλλιέργειας ενός μόνο κυτταρικού τύπου, όπως το Knockout Serum Replacement και το Knockout DMEM της Thermo Fisher Scientific και το μέσο mTESR της Stem Cell Technologies [6], για βλαστικά κύτταρα [7].
Επιπλέον, τα μέσα αυτά ενσωματώνουν καθορισμένες ποσότητες καθαρισμένων αυξητικών παραγόντων, λιποπρωτεϊνών και άλλων πρωτεϊνών, οι οποίες κατά τα άλλα παρέχονται συνήθως από τον ορό [8]. Τα μέσα αυτά αναφέρονται συχνά ως "καθορισμένα καλλιεργητικά μέσα", δεδομένου ότι τα συστατικά από τα οποία αποτελούνται τα μέσα αυτά είναι καλά κατανοητά.
Χημικά καθορισμένα μέσα
Τα μέσα αυτά περιλαμβάνουν εξαιρετικά καθαρά ανόργανα και οργανικά συστατικά που δεν έχουν μολυνθεί από κανενός είδους μόλυνση. Μπορεί επίσης να περιλαμβάνουν προσθήκες καθαρών πρωτεϊνών, όπως οι αυξητικοί παράγοντες.
η γενετική τροποποίηση βακτηρίων ή ζυμομυκήτων, σε συνδυασμό με την προσθήκη συγκεκριμένων λιπαρών οξέων, βιταμινών, χοληστερόλης και αμινοξέων, έχει ως αποτέλεσμα την παραγωγή των συστατικών τους [9].
Μέσα χωρίς πρωτεΐνες
Τα μέσα χωρίς πρωτεΐνες είναι εκείνα που δεν περιλαμβάνουν καθόλου πρωτεΐνες και αντ' αυτού περιλαμβάνουν μόνο μη πρωτεϊνικά στοιχεία. Σε σύγκριση με τα μέσα με προσθήκη ορού, η χρήση μέσων χωρίς προσθήκη πρωτεΐνης προάγει μεγαλύτερο κυτταρικό πολλαπλασιασμό και έκφραση πρωτεϊνών και καθιστά ευκολότερο τον καθαρισμό οποιουδήποτε προϊόντος που παράγεται σε μια μεταγενέστερη διαδικασία [10-12]. Η πρωτεΐνη δεν περιλαμβάνεται σε σκευάσματα όπως το MEM και το RPMI-1640. Ωστόσο, θα μπορούσε να χορηγηθεί συμπλήρωμα πρωτεΐνης εάν είναι απαραίτητο.
Μέσα καλλιέργειας και τα βασικά συστατικά τους
Τα εμπορικά μέσα καλλιέργειας μπορούν να αγοραστούν ως σκόνη ή υγρό και συχνά περιλαμβάνουν μια ποικιλία θρεπτικών συστατικών όπως αμινοξέα, γλυκόζη, άλατα, βιταμίνες και άλλα συμπληρώματα διατροφής.
Οι ανάγκες για αυτά τα συστατικά είναι διαφορετικές για κάθε κυτταρική σειρά και αυτές οι παραλλαγές ευθύνονται για τον μεγάλο αριθμό διαφορετικών σκευασμάτων μέσων καλλιέργειας. Κάθε συστατικό είναι υπεύθυνο για μια συγκεκριμένη λειτουργία, η οποία θα περιγραφεί στις επόμενες παραγράφους:
Συστήματα απομόνωσης
Για να διατηρηθούν οι βέλτιστες συνθήκες καλλιέργειας, πρέπει να ελέγχεται το pH, πράγμα που συχνά γίνεται με ένα από τα δύο ρυθμιστικά συστήματα:
Φυσικό ρυθμιστικό σύστημα
Η αναλογία CO2/H2CO3 στην ατμόσφαιρα είναι ίση με εκείνη του μέσου, δημιουργώντας έναν φυσικό ρυθμιστικό μηχανισμό. Προκειμένου να διατηρηθεί ο φυσικός ρυθμιστικός μηχανισμός, οι καλλιέργειες πρέπει να διατηρούνται σε περιβάλλον αέρα με 5-10% CO2, το οποίο συχνά επιτυγχάνεται με τη χρήση επωαστικού κλίβανου CO2. Ένα από τα καλύτερα πράγματα σχετικά με τη χρήση ενός φυσικού ρυθμιστικού παράγοντα είναι το πόσο φθηνό και ασφαλές είναι.
HEPES
Η χημική απομόνωση με χρήση του ζιτεριδίου HEPES έχει μεγαλύτερη ρυθμιστική ικανότητα στην περιοχή pH 7,2-7,4 και δεν χρειάζεται ρυθμιζόμενο αέριο περιβάλλον. Για συγκεκριμένους τύπους κυττάρων, μια μεγαλύτερη δόση HEPES μπορεί να είναι επιβλαβής. Τα μέσα που περιέχουν HEPES είναι επίσης πολύ πιο ευαίσθητα στις φωτοτοξικές επιδράσεις του φθορίζοντος φωτός [13].
Κόκκινη φαινόλη
Ο δείκτης pH phenol red περιλαμβάνεται συχνά σε εμπορικά διαθέσιμα μέσα καλλιέργειας, επιτρέποντας τη συνεχή παρακολούθηση του pH. Με την επέκταση των κυττάρων, οι μεταβολίτες που παράγονται από αυτά τα κύτταρα προκαλούν μετατόπιση του pH και, επομένως, αλλαγή του χρώματος του μέσου. Το κόκκινο της φαινόλης έχει διπλή επίδραση στο χρώμα ενός μέσου, μετατρέποντάς το σε κίτρινο σε όξινο pH και μοβ σε αλκαλικό pH. Το pH 7,4, η βέλτιστη τιμή για την καλλιέργεια κυττάρων, προκαλεί την εμφάνιση του μέσου σε φθορίζον κόκκινο χρώμα.
Όμως, το κόκκινο της φαινόλης έχει μερικά μειονεκτήματα: Πρώτον, το κόκκινο της φαινόλης είναι σε θέση να προσομοιάζει την απόδοση ορισμένων στεροειδών ορμονών, κυρίως οιστρογόνων [14]. Επομένως, κατά τη μελέτη ευαίσθητων στα οιστρογόνα κυττάρων, όπως ο ιστός του μαστού, συνιστάται ένα μέσο χωρίς κόκκινο της φαινόλης. Η ισορροπία νατρίου-καλίου διαταράσσεται από την παρουσία κόκκινης φαινόλης σε διάφορα σκευάσματα χωρίς ορό. Η προσθήκη ορού ή υποφυσιακής ορμόνης βοοειδών στο μέσο μπορεί να εξουδετερώσει αυτή την επίδραση [15]. Τρίτον, η ανίχνευση σε κυτταρομετρικά πειράματα ροής παρεμποδίζεται από την παρουσία του κόκκινου της φαινόλης.
Ανόργανα άλατα
Τα μέσα που περιέχουν ανόργανα άλατα, όπως ιόντα νατρίου, καλίου και ασβεστίου, βοηθούν στη διατήρηση της οσμωτικής ισορροπίας και ρυθμίζουν το δυναμικό της μεμβράνης.
Αμινοξέα
Δεδομένου ότι τα αμινοξέα είναι τα θεμελιώδη συστατικά των πρωτεϊνών, αποτελούν βασικό συστατικό κάθε μέσου κυτταρικής ανάπτυξης που έχει ποτέ δημιουργηθεί. Επειδή τα κύτταρα δεν είναι σε θέση να παράγουν μόνα τους ορισμένα αμινοξέα, είναι σημαντικό το μέσο καλλιέργειας να περιλαμβάνει απαραίτητα αμινοξέα. Είναι απαραίτητα για τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και η συγκέντρωση στην οποία υπάρχουν καθορίζει τη μέγιστη κυτταρική πυκνότητα που μπορεί να επιτευχθεί. Ειδικότερα, η L-γλουταμίνη, ένα απαραίτητο αμινοξύ είναι ιδιαίτερα κρίσιμο.
Η L-γλουταμίνη λειτουργεί ως δευτερεύουσα πηγή ενέργειας για το μεταβολισμό και συμβάλλει με άζωτο στην παραγωγή NAD, NADPH και νουκλεοτιδίων. Λόγω του γεγονότος ότι η L-γλουταμίνη είναι ένα ασταθές αμινοξύ που, με την πάροδο του χρόνου, μεταβάλλεται σε μια μορφή που τα κύτταρα δεν μπορούν να χρησιμοποιήσουν, πρέπει να χορηγείται στο μέσο.
Επιπλέον, μπορούν να παρέχονται στο μέσο μη απαραίτητα αμινοξέα προκειμένου να αναπληρώνονται εκείνα που έχουν καταναλωθεί κατά τη διάρκεια της διαδικασίας ανάπτυξης. Η ανάπτυξη των κυττάρων ενισχύεται και η βιωσιμότητά τους αυξάνεται όταν το μέσο ανάπτυξης συμπληρώνεται με μη απαραίτητα αμινοξέα.
Υδατάνθρακες
Οι υδατάνθρακες με τη μορφή σακχάρων αποτελούν την κύρια πηγή ενέργειας. Πολλά από τα μέσα περιλαμβάνουν επίσης μαλτόζη και φρουκτόζη εκτός από τα πιο κοινά σάκχαρα της γλυκόζης και της γαλακτόζης.
Πρωτεΐνες και πεπτίδια
Η αλβουμίνη, η τρανσφερρίνη και η φιμπρονεκτίνη είναι οι πιο συχνά χρησιμοποιούμενες πρωτεΐνες και πεπτίδια. Είναι ιδιαίτερα σημαντικές στα μέσα που δεν περιλαμβάνουν ορό. Η αλβουμίνη, η τρανσφερρίνη, η απροτινίνη, η φετουΐνη και η φιμπρονεκτίνη είναι μερικές από τις πρωτεΐνες που μπορεί να βρεθούν στον ορό, ο οποίος αποτελεί πλούσια παροχή πρωτεϊνών.
Η αλβουμίνη είναι η κύρια πρωτεΐνη που βρίσκεται στο αίμα και η λειτουργία της είναι να δεσμεύει και να μεταφέρει διάφορες ουσίες, συμπεριλαμβανομένου του νερού, των αλάτων, των ελεύθερων λιπαρών οξέων, των ορμονών και των βιταμινών, μεταξύ διαφόρων οργάνων και κυττάρων. Η ικανότητα της αλβουμίνης να προσκολλάται σε χημικές ουσίες την καθιστά αποτελεσματικό υποψήφιο για την απομάκρυνση επιβλαβών ενώσεων από το μέσο στο οποίο καλλιεργούνται κύτταρα.
Η απαρτινίνη αποτελεί προστατευτικό παράγοντα σε συστήματα κυτταροκαλλιέργειας, καθώς είναι σταθερή σε ουδέτερο και όξινο pH, καθώς και ανθεκτική σε υψηλές θερμοκρασίες και στην καταστροφή που μπορεί να προκληθεί από πρωτεολυτικά ένζυμα. Είναι ικανή να αναστέλλει έναν αριθμό πρωτεασών σερίνης, συμπεριλαμβανομένης της θρυψίνης, μεταξύ άλλων.
Η φετουΐνη είναι μια γλυκοπρωτεΐνη που μπορεί να ανιχνευθεί σε υψηλότερες ποσότητες στον ορό των εμβρυϊκών και νεογέννητων ζώων σε σύγκριση με τον ορό των ενηλίκων. Επιπλέον, δρα ως αναστολέας των πρωτεασών σερίνης. Η πρωτεΐνη φιμπρονεκτίνη αποτελεί βασικό συστατικό στη διαδικασία της κυτταρικής προσκόλλησης. Η τρανσφερρίνη είναι μια πρωτεΐνη που μεταφέρει σίδηρο και είναι υπεύθυνη για την παροχή σιδήρου στις μεμβράνες των κυττάρων.
Λιπαρά οξέα και λιπίδια
Παίζουν καθοριστικό ρόλο στο μέσο χωρίς ορό όταν απουσιάζει ο ορός.
Βιταμίνες
Πολλές βιταμίνες είναι απαραίτητες για την ανάπτυξη και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων. Οι βιταμίνες δεν μπορούν να παραχθούν σε επαρκείς ποσότητες από τα κύτταρα και συνεπώς είναι απαραίτητες στην καλλιέργεια ιστών ως συμπληρώματα διατροφής.
Στην κυτταροκαλλιέργεια, ο ορός είναι η πρωταρχική πηγή βιταμινών- ωστόσο, τα μέσα επεξεργάζονται επίσης με διάφορες βιταμίνες ώστε να είναι κατάλληλα για έναν συγκεκριμένο τύπο κυττάρων. Συνήθως, οι βιταμίνες της ομάδας Β χρησιμοποιούνται για τη διέγερση της ανάπτυξης.
Ιχνοστοιχεία
Χημικά στοιχεία όπως ο χαλκός, ο ψευδάργυρος, το σελήνιο και τα ενδιάμεσα τρικαρβοξυλικά οξέα είναι γνωστά ως ιχνοστοιχεία. Τα ιχνοστοιχεία προστίθενται συχνά σε μέσα που δεν περιλαμβάνουν ορό, προκειμένου να αντικαταστήσουν εκείνα που συνήθως υπάρχουν στον ορό. Τα στοιχεία αυτά είναι σημαντικά χημικά συστατικά που απαιτούνται για την υγιή ανάπτυξη των κυττάρων. Πολλές βιοχημικές αντιδράσεις εξαρτώνται από ορισμένα μικροθρεπτικά συστατικά, όπως η ενζυμική δραστηριότητα.
Συμπληρώματα μέσου
Το πλήρες μέσο ανάπτυξης που προτείνεται για ορισμένες κυτταρικές σειρές χρειάζεται επιπλέον συστατικά που απουσιάζουν από το βασικό μέσο και τον ορό. Αυτά τα συμπληρώματα διατροφής υποστηρίζουν την ανάπτυξη των κυττάρων και την κατάλληλη μεταβολική λειτουργία.
Αν και οι ορμόνες, οι αυξητικοί παράγοντες και τα μόρια σηματοδότησης είναι απαραίτητα για τον κατάλληλο πολλαπλασιασμό συγκεκριμένων κυτταρικών σειρών, θα πρέπει πάντα να λαμβάνονται οι ακόλουθες προφυλάξεις: Δεδομένου ότι η προσθήκη συμπληρωμάτων μπορεί να μεταβάλει την οσμωτικότητα του πλήρους μέσου ανάπτυξης, η οποία μπορεί να αναστείλει την ανάπτυξη των κυττάρων, συνιστάται πάντα να ελέγχεται η οσμωτικότητα μετά την προσθήκη συμπληρωμάτων. Για την πλειονότητα των κυτταρικών σειρών, η βέλτιστη ωσμωτικότητα κυμαίνεται μεταξύ 260 και 320 mOSM/kg.
Αντιβιοτικά
Τα αντιβιοτικά χρησιμοποιούνται συχνά για την αναστολή της ανάπτυξης βακτηριακών και μυκητιασικών ρύπων [16], αν και δεν είναι απαραίτητα για την ανάπτυξη των κυττάρων. Δεδομένου ότι τα αντιβιοτικά ενδέχεται να υποκρύπτουν μόλυνση από μυκόπλασμα και ανθεκτικά βακτήρια, η συνήθης χρήση τους δεν προτείνεται για την καλλιέργεια κυττάρων [17, 18].
Επιπλέον, τα αντιβιοτικά ενδέχεται να διαταράξουν τον μεταβολισμό των υπερευαίσθητων κυττάρων. Συχνά χρησιμοποιούνται οι συνδυασμοί πενικιλλίνης-στρεπτομυκίνης που παρασκευάζονται από τις MilliporeSigma και Life Technologies. Η πλασμοκίνη έχει χρησιμοποιηθεί στην καλλιέργεια των κυτταρικών σειρών γλοιώματος TS603, TS516 και BT260 [19] και έχει αποδειχθεί αποτελεσματική στην απομάκρυνση της μόλυνσης από μυκόπλασμα (20).
Ορός
Στον ορό υπάρχουν αλβουμίνες, αυξητικοί παράγοντες και αναστολείς της ανάπτυξης. Ο ορός είναι ένα από τα σημαντικότερα συστατικά του μέσου κυτταροκαλλιέργειας επειδή παρέχει αμινοξέα, πρωτεΐνες, βιταμίνες (ιδίως λιποδιαλυτές βιταμίνες όπως οι A, D, E και K), υδατάνθρακες, λιπίδια, ορμόνες, αυξητικούς παράγοντες, μέταλλα και ιχνοστοιχεία.
Ο ορός από εμβρυϊκές πηγές και από μοσχάρια βοοειδών χρησιμοποιείται συχνά για την προώθηση της ανάπτυξης των καλλιεργούμενων κυττάρων. Ο εμβρυϊκός ορός αποτελεί άφθονη παροχή αυξητικών παραγόντων και είναι κατάλληλος για την κλωνοποίηση κυττάρων και την ανάπτυξη ευαίσθητων κυττάρων. Λόγω των μειωμένων δυνατοτήτων προώθησης της ανάπτυξης, ο ορός μοσχαριού χρησιμοποιείται σε πειράματα αναστολής επαφής. Τα κανονικά μέσα ανάπτυξης συχνά περιλαμβάνουν 2% έως 10% ορό. Η προσθήκη ορού στο μέσο καλλιέργειας εξυπηρετεί τους ακόλουθους σκοπούς [21]:
-
Ο ορός παρέχει τα απαραίτητα θρεπτικά συστατικά για τα κύτταρα (τόσο σε διάλυμα όσο και συνδεδεμένα με πρωτεΐνες).
-
Αρκετοί αυξητικοί παράγοντες και ορμόνες που εμπλέκονται στην προώθηση της ανάπτυξης και στην εξειδικευμένη κυτταρική δραστηριότητα περιλαμβάνονται στον ορό.
-
Προσφέρει πολλές δεσμευτικές πρωτεΐνες, όπως η αλβουμίνη και η τρανσφερρίνη, που μεταφέρουν άλλες χημικές ουσίες στο κύτταρο. Για παράδειγμα, η αλβουμίνη μεταφέρει λίπη, βιταμίνες, ορμόνες κ.λπ. στα κύτταρα.
-
Παρέχει επίσης πρωτεΐνες, όπως η φιμπρονεκτίνη, οι οποίες αυξάνουν την προσκόλληση των κυττάρων στο υπόστρωμα. Επιπλέον, παράγει στοιχεία διασποράς που βοηθούν στην επέκταση των κυττάρων πριν από τη διαίρεση.
-
Παρέχει αναστολείς πρωτεάσης που εμποδίζουν την πρωτεόλυση στα κύτταρα.
-
Περιέχει επίσης ανόργανα άλατα, όπως Na+, K+, Zn2+ και Fe2+.
-
Ενισχύει το ιξώδες του μέσου, προστατεύοντας έτσι τα κύτταρα από μηχανικό τραυματισμό κατά την ανάδευση της καλλιέργειας εναιωρήματος.
-
Αποτελεί επίσης ρυθμιστικό παράγοντα.
Αναφορές
[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrition of animal cells in tissue culture- initial studies on a synthetic medium. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8
[2] Kerbel R, Blakeslee D. Ταχεία προσρόφηση ενός συστατικού ορού εμβρυϊκού μοσχαριού από κύτταρα θηλαστικών σε καλλιέργεια. Μια πιθανή πηγή τεχνουργημάτων σε μελέτες αντιορών σε κυτταροειδείς αντιγόνους. Immunology. 1976;31:881-91
[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Προσθήκη ορού στο μέσο που χρησιμοποιείται για την παρασκευή εναιωρημάτων κυττάρων ως πιθανή πηγή τεχνουργημάτων σε κυτταροδιαμεσολαβούμενες αντιδράσεις που μελετώνται με τη βοήθεια της δοκιμασίας του ποπλευρικού λεμφαδένα. J Immunogenet. 1980;7:483-9
[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Εμπορικά μέσα χωρίς ορό: ανάπτυξη υβριδομάτων και παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων. J Immunol Methods. 1991;145:175-83
[5] Barnes D, Sato G. Μέθοδοι ανάπτυξης καλλιεργούμενων κυττάρων σε μέσο χωρίς ορό. Anal Biochem. 1980;102:255-70
[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O,et al. HSP70 chaperones RNA-free TDP-43 into anisotropic intranuclear liquid spherical shells. Science. 2021;371:
[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J,et al. Down-syndrome-induced senescence disrupts the nuclear architecture of neural progenitors. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7
[8] Iscove N, Melchers F. Πλήρης αντικατάσταση του ορού με αλβουμίνη, τρανσφερρίνη και λιπίδια σόγιας σε καλλιέργειες αντιδρώντων σε λιποπολυσακχαρίτη Β λεμφοκυττάρων. J Exp Med. 1978;147:923-33
[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Συστηματική βελτίωση ενός χημικά καθορισμένου μέσου χωρίς πρωτεΐνες για την ανάπτυξη υβριδωμάτων και την παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων. J Biotechnol. 1996;45:111-23
[10] Darfler F. A protein-free medium for the growth of hybridomas and other cells of the immune system. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78
[11] Barnes D, Sato G. Καλλιέργεια κυττάρων χωρίς ορό: μια ενοποιητική προσέγγιση. Cell. 1980;22:649-55
[12] Hamilton W, Ham R. Κλωνική ανάπτυξη κυτταρικών σειρών κινέζικου χάμστερ σε μέσα χωρίς πρωτεΐνες. In Vitro. 1977;13:537-47
[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Ανάλυση των κυτταροτοξικών επιδράσεων του φωτοεκτεθειμένου μέσου καλλιέργειας που περιέχει HEPES. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7
[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Το κόκκινο της φαινόλης στα μέσα καλλιέργειας ιστών είναι ένα ασθενές οιστρογόνο: επιπτώσεις όσον αφορά τη μελέτη των κυττάρων που ανταποκρίνονται στα οιστρογόνα σε καλλιέργεια. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500
[15] Karmiol S. Ανάπτυξη μέσων χωρίς ορό. In: Master JRW, editor. Animal Cell culture, 3rd ed. Oxford: Oxford University Press, 2000.
[16] Perlman D. Use of antibiotics in cell culture media. Methods Enzymol. 1979;58:110-6
[17] McGarrity G. Διάδοση και έλεγχος της μυκοπλασματικής μόλυνσης των κυτταροκαλλιεργειών. In Vitro. 1976;12:643-8
[18] Masters J, Stacey G. Changing medium and passaging cell lines. Nat Protoc. 2007;2:2276-84
[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M,et al. Histone demethylase KDM6A directly senses oxygen to control chromatin and cell fate. Science. 2019;363:1217-1222
[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M,et al. Efficiency of Plasmocin™ on various mammalian cell lines infected by mollicutes in comparison with commonly used antibiotics in cell culture: a local experience. Κυτταροτεχνολογία. 2011;63:609-20
[21] Kragh Hansen U. Μοριακές πτυχές της δέσμευσης συνδέσμων σε αλβουμίνη ορού. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53