Κύτταρα NCI-H1299: Κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299: Έρευνα και κλινικές επιπτώσεις
Το NCI-H1299 είναι μια αθάνατη ανθρώπινη κυτταρική σειρά μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα που χρησιμοποιείται ευρέως στην ανοσολογική ογκολογία, τον καρκίνο και την έρευνα για την ανακάλυψη φαρμάκων. Επιπλέον, οι ερευνητές χρησιμοποίησαν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν την ευαισθησία στα φάρμακα, τις υποκείμενες οδούς σηματοδότησης και τους μοριακούς μηχανισμούς που σχετίζονται με τον καρκίνο του πνεύμονα. Εκτός αυτού, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται για τη μελέτη ιογενών λοιμώξεων όπως ο SARS-CoV-2.
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων NCI-H1299
Το πρώτο πράγμα που πρέπει να γνωρίζετε για μια κυτταρική σειρά είναι η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά της, καθώς σας βοηθούν να σχεδιάσετε τη χρήση της στην έρευνά σας. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα σας βοηθήσει να μάθετε ορισμένες σημαντικές πληροφορίες σχετικά με την προέλευση και τα χαρακτηριστικά του NCI-H1299. Όπως, τι είναι τα κύτταρα του καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299 Τι είδους κύτταρο είναι το NCI-H1299 Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων NCI-H1299 Ποια είναι η διαφορά μεταξύ των κυττάρων A549 και NCI-H1299
- Η κυτταρική σειρά NCI-H1299 προέρχεται από λεμφαδενική μετάσταση του πνεύμονα ενός 43χρονου καυκάσιου άνδρα ασθενούς με καρκίνο.
- Τα κύτταρα αυτά διαθέτουν ομόζυγη μερική διαγραφή του γονιδίου p53- συνεπώς, δεν εκφράζουν την πρωτεΐνη p53. Η έλλειψη έκφρασης της πρωτεΐνης p53 του NCI-H1299 συμβάλλει στην τάση πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα H1299.
- Εκτός από την p53, αυτά τα αθάνατα κύτταρα αναφέρεται ότι διαθέτουν μετάλλαξη NCI-H1299 KRAS, υπεύθυνη για την ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και τις ιδιότητες εισβολής τους.
- Ο καρυότυπος του NCI-H1299 είναι σχεδόν διπλοειδής.
- Τα κύτταρα NCI-H1299 έχουν μορφολογία που μοιάζει με επιθηλιακά κύτταρα.
- Τα κύτταρα αυτά είναι πεπλατυσμένα και έχουν πάχος μικρότερο από 5 μm.
NCI-H1299 και A549
Οι NCI-H1299 και A549 είναι κυτταρικές σειρές μη μικροσκοπικού καρκίνου του πνεύμονα. Τα κύτταρα NCI-H1299 είναι πιο επιθετικά και ευαίσθητα σε σύγκριση με τα κύτταρα A549. Και οι δύο έχουν σχετικά παρόμοιες μεταλλάξεις, όπως η KRAS. Ωστόσο, σε αντίθεση με τα κύτταρα NCI-H1299, τα κύτταρα A549 εκφράζουν το γονίδιο P53.
Πληροφορίες καλλιέργειας
Η διατήρηση μιας καλλιέργειας κυτταρικής γραμμής δεν είναι εύκολη αν δεν γνωρίζετε όλες τις βασικές πληροφορίες σχετικά με αυτήν, όπως: Τι είναι ο χρόνος διπλασιασμού του NCI-H1299 Ποια είναι η πυκνότητα σποράς του NCI-H1299 Τι είναι το κυτταρικό μέσο NCI-H1299 Πώς καλλιεργείτε τις κυτταρικές σειρές NCI-H1299 Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε τις απαντήσεις σε όλες αυτές τις ερωτήσεις σχετικά με την καλλιέργεια κυτταρικών σειρών NCI-H1299.
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων NCI-H1299
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων NCI-H1299 κυμαίνεται μεταξύ 22-30 ωρών. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Το NCI-H1299 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά. |
|
Αναλογία υποκαλλιέργειας: |
Η υποκαλλιέργεια των κυττάρων NCI-H1299 γίνεται σε συνιστώμενη αναλογία 1:3 έως 1:6. Για τη σπορά, τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με 1x PBS και επωάζονται με το διάλυμα παθητικοποίησης Accutase για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Τα αποκολλημένα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Στη συνέχεια, το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και τα κύτταρα χύνεται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Το RPM1 1640 είναι το ιδανικό μέσο ανάπτυξης κυττάρων NCI-H1299. Συμπληρώνεται με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών, 4500 mg/L γλυκόζη, 2,0 mM L-γλουταμίνη, 1 mM πυρουβικό νάτριο, 1500 mg/L NaHCO3 και 10 mM HEPES. Τα μέσα θα πρέπει να ανανεώνονται κάθε 2 έως 3 φορές την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Οι καλλιέργειες κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299 διατηρούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα στους 37°C με παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Η κυτταρική σειρά NCI-H1299 μπορεί να αποθηκευτεί σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε καταψύκτες εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών σε θερμοκρασία κάτω των -150°C για μεγάλο χρονικό διάστημα. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
CM-1 ή CM-ACF είναι τα μέσα κατάψυξης των κυττάρων NCI-H1299. Τα κύτταρα καταψύχονται χρησιμοποιώντας μια αργή διαδικασία κατάψυξης που επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 βαθμό ανά λεπτό για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα NCI-H1299 αναδεύονται ταχέως σε προθερμασμένο υδατόλουτρο στους 37 βαθμούς Κελσίου για 40 έως 60 δευτερόλεπτα έως ότου απομείνει ένα μικρό κομμάτι πάγου. Τα αποψυγμένα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο και μπορούν να καλλιεργηθούν απευθείας σε νέες φιάλες ή να φυγοκεντρηθούν. Στην πρώτη περίπτωση, το θρεπτικό υλικό πρέπει να αντικαθίσταται μετά από 24 ώρες επώασης. Η φυγοκέντρηση βοηθά στην απομάκρυνση των στοιχείων του μέσου κατάψυξης. Στη συνέχεια, τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωματώνονται σε φρέσκο μέσο και διανέμονται στη νέα φιάλη για καλλιέργεια. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Για τον χειρισμό της καλλιέργειας κυττάρων NCI-H1299 απαιτείται εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
Αγοράστε την κυτταρική γραμμή NCI-H1299: Ερευνητικά εργαλεία υψηλής ποιότητας για τη διερεύνηση της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα
Πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα των κυττάρων NCI-H1299
Όπως και άλλες ανθρώπινες καρκινικές κυτταρικές σειρές, έτσι και η NCI-H1299 διαθέτει ορισμένα διακριτά χαρακτηριστικά που συνδέονται με συγκεκριμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Στο παρόν, έχουμε συνοψίσει μερικά σημαντικά από αυτά.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299 είναι τα εξής:
-
Μοντέλο καρκίνου του πνεύμονα in vitro
Οι κυτταρικές σειρές NCI-H1299 έχουν αναπτυχθεί από λεμφαδενικές μεταστάσεις του καρκινώματος του πνεύμονα και συνεπώς διαθέτουν σχετικά παρόμοιες ιδιότητες. Ως εκ τούτου, τα κύτταρα αυτά μπορούν να χρησιμεύσουν ως in vitro μοντέλο για τη διερεύνηση της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα, των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών και τη διαλογή και δοκιμή πιθανών θεραπευτικών ουσιών.
-
Εύκολη καλλιέργεια
Τα κύτταρα NCI-H1299 είναι εύκολο να καλλιεργηθούν και να διατηρηθούν σε ένα ερευνητικό εργαστήριο. Δεν υπάρχουν περίπλοκες απαιτήσεις και διαδικασίες καλλιέργειας κυττάρων.
-
NCI-H1299 P53 και NCI-H1299 KRAS μετάλλαξη
Τα κύτταρα NCI-H1299 στερούνται έκφρασης του γονιδίου p53, το οποίο επιτρέπει στα κύτταρα να πολλαπλασιάζονται έντονα. Επιπλέον, διαθέτουν μετάλλαξη KRAS που συμβάλλει στην ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό, την εισβολή και τη μετανάστευση των κυττάρων. Λαμβάνοντας υπόψη αυτά, οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα H1299 για να διερευνήσουν μοριακούς μηχανισμούς που σχετίζονται με τις μεταλλάξεις KRAS και P53.
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα των κυττάρων NCI-H1299 είναι τα εξής:
-
Ειδικότητα για τους ιστούς
Τα κύτταρα NCI-H1299 προέρχονται από πνευμονικό ιστό. Ως εκ τούτου, η εφαρμογή του περιορίζεται κυρίως στην έρευνα του καρκινώματος του πνεύμονα. Ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως την ετερογένεια και τα γενικά χαρακτηριστικά άλλων τύπων καρκίνου.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NCI-H1299
Η κυτταρική σειρά NCI-H1299 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα. Εδώ αναφέρονται μερικές υποσχόμενες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς.
- Βιολογία του καρκίνου: Τα κύτταρα NCI-H1299 χρησιμεύουν ως ένα εξαιρετικό ερευνητικό εργαλείο για τη διερεύνηση της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου και των σχετικών κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών. Τα κύτταρα αυτά εξοπλίζουν ορισμένες μεταλλάξεις, επιτρέποντας στους ερευνητές να διερευνήσουν σχετικές συμπεριφορές καρκινικών κυττάρων, μονοπάτια σηματοδότησης και προφίλ γονιδιακής έκφρασης. Αρκετές μελέτες έχουν χρησιμοποιήσει την κυτταρική σειρά μη μικροκυτταρικού καρκινώματος του πνεύμονα NCI-H1299 για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 διερεύνησε το μονοπάτι σηματοδότησης που εμπλέκεται στην απόπτωση των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα χρησιμοποιώντας κύτταρα NCI-H1299. Οι ερευνητές διαπίστωσαν ότι το μονοπάτι PI3K/AKT συμβάλλει στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και η αναστολή του μπορεί να προκαλέσει το θάνατο των καρκινικών κυττάρων [1]. Ομοίως, μια άλλη έρευνα διερεύνησε τους μηχανισμούς που εμπλέκονται στην επιθηλιακή-μεσεγχυματική μετάβαση (EMT) του NCI-H1299. Αυτή η μελέτη πρότεινε ότι μια εξωκυτταρική πρωτεΐνη SPARC (εκκρινόμενη πρωτεΐνη όξινη και πλούσια σε κυστεΐνη) συμβάλλει στην EMT και τη μετανάστευση του NCI-H1299, προωθώντας έτσι την καρκινογένεση στα κύτταρα - η πρωτεΐνη SPARC δρα ως μεσολαβητής της σηματοδότησης TGF-β1 [2].
- Ανακάλυψη και έλεγχος φαρμάκων: Η NCI-H1299, μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του πνεύμονα, χρησιμοποιείται εκτενώς για την αξιολόγηση της τοξικότητας και της αποτελεσματικότητας πιθανών φαρμάκων. Επιπλέον, χρησιμοποιείται από τους ερευνητές για τη διερεύνηση του μηχανισμού δράσης των αντικαρκινικών φαρμάκων. Μελέτες έχουν επίσης χρησιμοποιήσει αυτά τα κύτταρα για τον εντοπισμό πιθανών στόχων φαρμάκων και μηχανισμών αντίστασης. Για παράδειγμα, η έρευνα που διεξήχθη από τον Xiao-Yun Shen και τους συνεργάτες του διερεύνησε το αντικαρκινικό δυναμικό της φυσικής ένωσης βρουσεΐνη D (BD). Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι η BD παρεμποδίζει σημαντικά τον πολλαπλασιασμό, την εισβολή και τη μετανάστευση των κυττάρων NCI-H1299. Ως εκ τούτου, μπορεί να θεωρηθεί μια πιθανή επικουρική θεραπεία για τη θεραπεία του μη μικροκυτταρικού καρκινώματος του πνεύμονα [3]. Παρομοίως, μια μελέτη αξιολόγησε τις κυτταροτοξικές επιδράσεις της ξανθοχουμόλης μόνη της και σε συνδυασμό με το χημειοθεραπευτικό φάρμακο σισπλατίνη σε κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299 [4].
Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα NCI-H1299
Ορισμένες σημαντικές και περισσότερο αναφερόμενες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με την κυτταρική σειρά καρκινώματος του πνεύμονα NCI-H1299 βρίσκονται εδώ.
Αυτό το άρθρο δημοσιεύεται στο περιοδικό Human and Experimental Toxicology (2021). Η μελέτη πρότεινε ότι η ινδόλη-3-καρβινόλη επάγει την απόπτωση στα κύτταρα H1299 μέσω της αύξησης των επιπέδων των δραστικών ειδών οξυγόνου (ROS).
Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε το 2018 στο περιοδικό Cellular Physiology and Biochemistry. Τα ευρήματα της έρευνας αποκάλυψαν ότι ο συνδυασμός καφεϊκού οξέος και πακλιταξέλης ασκεί συνεργιστική αντικαρκινική δράση στην κυτταρική σειρά μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα, NCI-H1299.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο Molecular Medicine Reports (2018). Η μελέτη αξιολόγησε την αντικαρκινική δράση της tubeimoside-1, μιας τριτερπενοειδούς σαπωνίνης, και τους υποκείμενους μηχανισμούς στην κυτταρική σειρά NCI-H1299.
Αυτό το άρθρο που δημοσιεύθηκε στο Journal of Cancer (2020) πρότεινε ότι η πριστιμερίνη, μια φυσική ένωση, καταστέλλει τον πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση των κυττάρων NCI-H1299.
Μηχανισμός του γονιδίου VIPR1 που ρυθμίζει το ανθρώπινο αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα H1299 κύτταρα
Αυτή η μελέτη στο Medical Oncology (2019) διερεύνησε τις πιθανές επιδράσεις της υπερέκφρασης του γονιδίου VIPR1 στην κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος NCI-H1299.
Πόροι για την κυτταρική σειρά NCI-H1299: H121212: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που χαρακτηρίζουν τα κύτταρα NCI-H1299.
- Διαμόλυνση NCI-H1299: Αυτό το βίντεο θα εξηγήσει το πρωτόκολλο για το πρωτόκολλο παροδικής διαμόλυνσης για τις κυτταρικές σειρές NCI-H1299.
- Υποκαλλιέργεια μιας προσκολλημένης κυτταρικής σειράς: Αυτό το βίντεο θα σας βοηθήσει να μάθετε μια γενική διαδικασία υποκαλλιέργειας για μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά.
Ο ακόλουθος σύνδεσμος περιέχει πληροφορίες κυτταροκαλλιέργειας για κύτταρα NCI-H1299.
- Κυτταρική σειρά NCI-H1299: Αυτός ο σύνδεσμος μπορεί να σας βοηθήσει να μάθετε για το πρωτόκολλο διέλευσης και διαμόλυνσης κυττάρων NCI-H1299.
Συχνές ερωτήσεις σχετικά με την κυτταρική γραμμή NCI-H1299
Αναφορές
- Gu, J., et al., Study of EGCG induced apoptosis in lung cancer cells by inhibiting PI3K/Akt signaling pathway. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., Το SPARC δρα ως μεσολαβητής του TGF-β1 στην προώθηση της επιθηλιακής-μεσεγχυματικής μετάβασης στα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα A549 και H1299. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., κ.ά., Μελέτη του μηχανισμού της βρουσεΐνης D στη θεραπεία του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα H1299 κυττάρων. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Cytotoxic Effects of Xanthohumol and Its Combination with Cisplatin on Human Metastatic Lung Cancer H1299 Cells. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.