Κυτταρική γραμμή BEWO

Η BeWo είναι μια ανθρώπινη κυτταρική γραμμή που προέρχεται από χοριοκαρκίνωμα και χρησιμοποιείται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα. Χρησιμεύει ως ένα πολύτιμο in vitro μοντέλο για τη διερεύνηση της περίπλοκης διαδικασίας της ανάπτυξης του πλακούντα και της συγκυτιοποίησης των ανθρώπινων τροφοβλαστών. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν επίσης τα κύτταρα αυτά για να μελετήσουν τη συμπεριφορά των κυττάρων της τροφοβλάστης, την παραγωγή ορμονών και τη μεταφορά ουσιών διαμέσου του πλακούντα. Εκτός αυτού, τα κύτταρα BeWo προσφέρουν επίσης εφαρμογές σε μελέτες τοξικολογίας, λοιμώξεων και μετάδοσης ασθενειών.

Αυτό το άρθρο περιλαμβάνει θεμελιώδεις γνώσεις σχετικά με τα κύτταρα BeWo που μπορεί να σας βοηθήσουν να τα αντιμετωπίσετε στην έρευνά σας. Θα περιλαμβάνει:

  1. Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων BeWo
  2. Κυτταρική σειρά BeWo: Πληροφορίες καλλιέργειας
  3. Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς BeWo
  4. Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων BeWo
  5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα BeWo
  6. Πηγές για τη σειρά κυττάρων BeWo: BeoWo: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

1. Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων BeWo

Η προηγούμενη γνώση σχετικά με την προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά μιας κυτταρικής σειράς είναι ζωτικής σημασίας για τη χρήση της στην έρευνά σας. Αυτό το μέρος του άρθρου διερευνά την προέλευση της κυτταρικής σειράς BeWo, τα χαρακτηριστικά της και πολλά άλλα. Εδώ, θα μάθετε: Τι είναι η κυτταρική σειρά χοριοκαρκινώματος BeWo Τι είναι η συγκυτιοποίηση BeWo Από πού προέρχονται τα κύτταρα BeWo Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων BeWo Ποιος είναι ο πλουειδισμός του BeWo

  • Η κυτταρική σειρά πλακούντα, BeWo, προήλθε από το κακοήθες χοριοκαρκίνωμα κύησης ενός ανδρικού εμβρυϊκού πλακούντα το 1968 [1]. Έτσι, χρησιμεύει ως ένα ανεκτίμητο μοντέλο για την έρευνα του πλακούντα.
  • Τα κύτταρα BeWo παρουσιάζουν μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο.
  • Τα κύτταρα BeWo είναι σχετικά μικρά και κυμαίνονται μεταξύ 20 και 30 μΜ [2].
  • Τα κύτταρα BeWo παρουσιάζουν σταθερό καρυότυπο. Ο αριθμός των βλαστικών γραμμών τους είναι υποτετραπλοειδής. Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων των κυττάρων BeWo είναι 86. Μπορεί να κυμαίνεται από 71 έως 178.
  • Τα κύτταρα BeWo παράγουν διάφορες ορμόνες, δηλαδή ανθρώπινη χοριακή σωματομαστοτροπίνη, ανθρώπινη χοριακή γοναδοτροπίνη (hCG) και στεροειδείς ορμόνες.
  • Τα κύτταρα BeWo εκφράζουν μοριακούς δείκτες, συμπεριλαμβανομένων των CK 7, E-cadherin και VE-cadherin.

Υποσειρά B30

Η B30 είναι η υπογραμμή των κυττάρων BeWo. Χρησιμοποιείται για τη διερεύνηση της πρόσληψης και της μεταφοράς θρεπτικών ουσιών. Αυτό αποδίδεται στην έντονη ανάπτυξή τους σε πορώδεις μεμβράνες.

BeWo και JEG-3

Οι κυτταρικές σειρές BeWo JEG-3 προέρχονται από χοριοκαρκινώματα και χρησιμοποιούνται στην έρευνα του πλακούντα. Τα κύτταρα BeWo παράγουν ορμόνες σε χαμηλότερα επίπεδα από την JEG-3, όπως η ανθρώπινη χοριακή γοναδοτροπίνη (hCG) και η οιστραδιόλη.

Χρονική απεικόνιση της γονιμότητας του ανθρώπινου ωαρίου, που απεικονίζει τα στάδια σχηματισμού της βλαστοκύστης, όπως παρατηρούνται στο μικροσκόπιο.

2. Κυτταρική σειρά BeWo: Πληροφορίες καλλιέργειας

Η διατήρηση μιας κυτταρικής καλλιέργειας μπορεί να είναι δύσκολη αν δεν γνωρίζετε βασικές λεπτομέρειες. Όπως: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της BeWo Τι είναι το κυτταρικό μέσο BeWo Πώς καλλιεργείτε την κυτταρική σειρά BeWo και πώς καταψύχετε τα κύτταρα BeWo

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια των κυττάρων BeWo

Χρόνος διπλασιασμού:

Ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού των κυττάρων BeWo είναι περίπου 30 ώρες.

Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:

Η BeWo είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά.

Πυκνότητα σποράς κυττάρων:

Η συνιστώμενη πυκνότητα σποράς για τα κύτταρα BeWo είναι 1 x104 κύτταρα/cm2. Για τη σπορά, τα παλαιά μέσα απομακρύνονται από τα κύτταρα και τα κύτταρα ξεπλένονται με 1 x PBS. Στη συνέχεια, προστίθεται Accutase (διάλυμα διέλευσης) και τα κύτταρα επωάζονται για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Στη συνέχεια, τα αποκολλημένα κύτταρα προστίθενται με καλλιεργητικό μέσο και φυγοκεντρίζονται. Στη συνέχεια, τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωματώνονται και χύνεται σε νέα φιάλη.

Μέσο ανάπτυξης:

Για την ανάπτυξη των κυττάρων BeWo χρησιμοποιείται το μέσο καλλιέργειας F12K της Ham που περιέχει 10% FBS, 2,0 mM L-γλουταμίνη, 2,0 mM πυρουβικό νάτριο και 2,5 g/L NaHCO3. Το μέσο για τα κύτταρα BeWo πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Τα κύτταρα BeWo διατηρούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα σε θερμοκρασία 37 βαθμών Κελσίου και με παροχή 5% CO2.

Αποθήκευση:

Τα κατεψυγμένα κύτταρα BeWo αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών ή σε φάση ατμών υγρού αζώτου.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Τα κύτταρα BeWo συνιστάται να καταψύχονται σε μέσο κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Τα κύτταρα καταψύχονται με τη μέθοδο της αργής κατάψυξης. Η μέθοδος αυτή επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 βαθμό ανά λεπτό, αποτρέποντας έτσι τα κύτταρα από οποιοδήποτε σοκ και προστατεύοντας τη βιωσιμότητα των κυττάρων.

Διαδικασία απόψυξης:

Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποψύχονται βυθίζοντάς τα σε προκαθορισμένο υδατόλουτρο 37°C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα μέχρι να απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Στη συνέχεια, προστίθεται φρέσκο μέσο ανάπτυξης και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το συλλεγέν κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και διανέμεται σε φιάλη καλλιέργειας για ανάπτυξη.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Για το χειρισμό και τη συντήρηση των κυτταρικών καλλιεργειών BeWo απαιτείται εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1.

Αποτύπωση της επιθηλιακής, πολυγωνικής μορφολογίας και της νησιδοειδούς ανάπτυξης της ανθρώπινης κυτταρικής σειράς χοριοκαρκινώματος, BEWO, με μεγέθυνση 10x και 20x στο μικροσκόπιο.

3. Πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς BeWo

Τα κύτταρα BeWo παρουσιάζουν μοναδικά χαρακτηριστικά και συνοδεύονται από συγκεκριμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Σε αυτή την ενότητα, θα διερευνήσουμε ορισμένα από τα αξιοσημείωτα από αυτά.

Πλεονεκτήματα

Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς χοριοκαρκινώματος BeWo είναι τα εξής:

  • Μοντέλο πλακουντιακών κυττάρων in vitro

    Τα κύτταρα BeWo παρέχουν ένα in vitro μοντέλο για τη μελέτη της συμπεριφοράς των τροφοβλαστικών κυττάρων και της πλακουντιακής συγκυτιοποίησης, αναπαράγοντας διαδικασίες που είναι δύσκολο να παρατηρηθούν in vivo.

  • Παραγωγή ορμονών

    Τα κύτταρα BeWo εκκρίνουν ορμόνες, όπως η hCG και το πλακουντιακό γαλακτογόνο, γεγονός που τα καθιστά πολύτιμα για μελέτες ορμονικής ρύθμισης και έρευνα στην αναπαραγωγική βιολογία.

Μειονεκτήματα

Τα μειονεκτήματα των κυττάρων τροφοβλάστης BeWo είναι τα εξής:

  • Καρκινική κυτταρική γραμμή

    Τα κύτταρα BeWo προέρχονται από χοριοκαρκίνωμα, το οποίο είναι ένας όγκος του πλακούντα. Αυτή η προέλευση ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως τη φυσιολογική λειτουργία των πλακουντιακών κυττάρων.

4. Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων BeWo

Η κυτταρική σειρά BeWo χρησιμοποιείται εκτενώς στην έρευνα του πλακούντα. Εδώ αναφέρονται μερικές συγκεκριμένες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς:

  • Πλακούντα και έρευνα σχετικά με την εγκυμοσύνη: Τα κύτταρα BeWo έχουν καθοριστική σημασία στην έρευνα για τον πλακούντα και την εγκυμοσύνη. Όπως οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να μελετήσουν τη μεταφορά ουσιών, συμπεριλαμβανομένων φαρμάκων, θρεπτικών ουσιών και τοξινών, διαμέσου του πλακουντιακού φραγμού. Εκτός αυτού, διερευνούν επίσης την παραγωγή και τη ρύθμιση των ορμονών, συμπεριλαμβανομένης της ανθρώπινης χοριακής γοναδοτροπίνης (hCG), του πλακουντιακού γαλακτογόνου και των στεροειδών ορμονών. Αυτό είναι σημαντικό για την κατανόηση των ορμονικών αλλαγών κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Η έρευνα που διεξήχθη το 2018 διερεύνησε την επίδραση των βρωμιούχων επιβραδυντών φλόγας (BFRs) στη δραστηριότητα της σουλφοτρανσφεράσης στην ανθρώπινη τροφοβλαστική κυτταρική σειρά (BeWo). Το ένζυμο αυτό εμπλέκεται στη ρύθμιση των ενδοκυτταρικών επιπέδων της θυρεοειδικής ορμόνης [3].
  • Έρευνα για τη μόλυνση και την ασθένεια: Τα κύτταρα BeWo χρησιμοποιούνται επίσης για την εξέταση της αλληλεπίδρασης μεταξύ παθογόνων μικροοργανισμών και πλακουντιακών κυττάρων. Η έρευνα αυτή είναι πολύτιμη για την κατανόηση των ασθενειών που μπορούν να μεταδοθούν από τη μητέρα στο έμβρυο και για την ανάπτυξη στρατηγικών για την προστασία της υγείας του εμβρύου. Επιπλέον, αυτή η κυτταρική σειρά βοηθά τους ερευνητές να διερευνήσουν επιπλοκές που προκύπτουν κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, όπως η προεκλαμψία. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη από την Michalina Bralewska το 2023 χρησιμοποίησε το κυτταρικό μοντέλο τροφοβλάστης BeWo και διαπίστωσε ότι τόσο η χρωμογρανίνη Α (CgA) όσο και το πεπτίδιο που προέρχεται από αυτήν, η κατεστατίνη (CST), μπορεί να έχουν ρόλο στην περίπλοκη διαδικασία της παθογένειας της προεκλαμψίας (PE) [4]. Προχωρώντας προς τα εμπρός, μια άλλη μελέτη διερεύνησε το αντικαρκινικό δυναμικό της τριχοσανθίνης χρησιμοποιώντας την κυτταρική σειρά χοριοκαρκινώματος BeWo. Η έρευνα κατέβαλε επίσης μια επιπλέον προσπάθεια για την ανακάλυψη βιοδεικτών με τη διενέργεια συγκριτικής πρωτεομικής ανάλυσης πριν και μετά το πείραμα [5].

5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με τα κύτταρα BeWo

Ακολουθούν ορισμένες σημαντικές ερευνητικές δημοσιεύσεις που περιλαμβάνουν τα κύτταρα τροφοβλάστης BeWo.

Η σηματοδότηση AMPK ρυθμίζει τη μιτοφαγία και τη μιτοχονδριακή παραγωγή ΑΤΡ στην ανθρώπινη κυτταρική γραμμή τροφοβλάστης BeWo

Αυτή η μελέτη στο Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) πρότεινε ότι η σηματοδότηση AMPK ενεργοποιεί τη μιτοφαγία στα κύτταρα της τροφοβλάστης BeWo μέσω των μονοπατιών FUNDC1 και PRKN που διευκολύνουν τη μιτοφαγία. Ως αποτέλεσμα, η μιτοφαγία συμβάλλει στη διατήρηση της παραγωγής ΑΤΡ και του δυναμικού της μιτοχονδριακής μεμβράνης.

Το αιθυλοπαραμπέν επάγει τον αποπτωτικό κυτταρικό θάνατο στα κύτταρα BeWo του ανθρώπινου πλακούντα μέσω της οδού της κασπάσης-3

Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο Animal Cells and Systems (2020). Η μελέτη πρότεινε ότι το ethylparaben μεσολαβεί στην απόπτωση των κυττάρων BeWo μέσω της ρύθμισης της οδού της κασπάσης-3.

Χαρακτηρισμός του δυναμικού διάθεσης ξενοβιοτικών και στεροειδών του ανθρώπινου πλακουντιακού ιστού και των κυτταρικών σειρών (BeWo, JEG-3, JAR και HTR-8/SVneo) με ποσοτική πρωτεομική

Αυτή η μελέτη στο Drug Metabolism and Disposition (2023) χρησιμοποίησε κυτταρικές σειρές πλακούντα, συμπεριλαμβανομένων των BeWo, JAR, JEG-3 και HTR-8/SVneo, για τη διερεύνηση της εναπόθεσης ξενοβιοτικών και στεροειδών στα κύτταρα.

Η απελίνη και ο υποδοχέας απελίνης στον ανθρώπινο πλακούντα: JEG-3 και BeWo: έκφραση, οδός σηματοδότησης και ρύθμιση του πολλαπλασιασμού και του κυτταρικού κύκλου των κυττάρων της τροφοβλάστης

Αυτό το ερευνητικό άρθρο στο International Journal of Molecular Medicine (2020) πρότεινε ότι η απελίνη, ο προσδέτης του υποδοχέα APJ, προάγει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων BeWo μέσω της σηματοδότησης APJ και ERK1/2, stat3 και AMPK. Έτσι, θα μπορούσε να είναι μια ουσιαστική αδιποκίνη που ρυθμίζει την ανάπτυξη του πλακούντα.

Αντιεπιληπτικά φάρμακα και εμβρυϊκές θρεπτικές ουσίες: επιδράσεις στους μεταφορείς χολίνης σε μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά πλακούντα

Αυτή η μελέτη στο Epilepsia (2021) διερεύνησε τις επιδράσεις των εμβρυϊκών θρεπτικών ουσιών και των αντιεπιληπτικών φαρμάκων στους μεταφορείς χολίνης στην ανθρώπινη τροφοβλαστική κυτταρική σειρά BeWo.

6. Πόροι για την κυτταρική γραμμή BeWo: BeWoo: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Ακολουθούν ορισμένοι διαθέσιμοι διαδικτυακοί πόροι σχετικά με τα κύτταρα BeWo:

  • In vitro διαμόλυνση: Αυτό το βίντεο θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο in vitro διαμόλυνσης πλασμιδιακού DNA για προσκολλημένα κύτταρα.

Ο ακόλουθος σύνδεσμος περιέχει πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων για τα κύτταρα BeWo:

  • Κύτταρα BeWo: Αυτός ο δικτυακός τόπος περιέχει βασικές πληροφορίες κυτταρικής καλλιέργειας για την κυτταρική σειρά BeWo. Αυτό περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με τα κυτταρικά μέσα και τις συνθήκες καλλιέργειας. Διαθέτει επίσης πρωτόκολλα για την υποκαλλιέργεια και τον χειρισμό κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαστικών καλλιεργειών.

Αναφορές

  1. Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al., Χαρακτηριστικά των τροφοβλαστών σε μακροχρόνια καλλιέργεια. Δελτίο Πειραματικής Βιολογίας και Ιατρικής, 2017. 164: p. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
  5. Hu, Y., et al., Συγκριτική πρωτεομική ανάλυση της προσθήκης φαρμάκου τριχοσανθίνης στην κυτταρική σειρά BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.

Εντοπίσαμε ότι βρίσκεστε σε διαφορετική χώρα ή χρησιμοποιείτε διαφορετική γλώσσα του προγράμματος περιήγησης από την τρέχουσα επιλεγμένη. Θα θέλατε να αποδεχτείτε τις προτεινόμενες ρυθμίσεις

Κλείστε το