Κυτταρική γραμμή BxPC-3
Το BxPC-3 είναι μια κυτταρική σειρά καρκίνου του παγκρέατος ανθρώπινης προέλευσης. Εφαρμόζεται ευρέως σε μελέτες καρκίνου. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα κυρίως για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του παγκρέατος, τον εντοπισμό θεραπευτικών στόχων και την ανάπτυξη αντικαρκινικών φαρμάκων.
Αυτό το άρθρο περιλαμβάνει κρίσιμες πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά BxPC-3 που μπορούν να σας βοηθήσουν σημαντικά να εργαστείτε μαζί της. Κυρίως, θα συζητήσει:
- Γενικές πληροφορίες και προέλευση της κυτταρικής σειράς BxPC-3
- Καλλιέργεια των κυττάρων BxPC-3
- Κυτταρική σειρά BxPC-3: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων BxPC-3 στην έρευνα
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις για τα κύτταρα BxPC-3
- Πηγές για την κυτταρική σειρά BxPC-3: Bxxxxx: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
1. γενικές πληροφορίες και προέλευση της κυτταρικής σειράς BxPC-3
Η γνώση της προέλευσης μιας κυτταρικής σειράς είναι κρίσιμη για την ερευνητική της εφαρμογή. Η εξοικείωση με τα χαρακτηριστικά της, συμπεριλαμβανομένης της μορφολογίας, του μεγέθους των κυττάρων και του πλουβιδίου, καθιστά τη χρήση της πιο απλή και βολική. Στο παρόν θα μάθετε την προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων BxPC-3: Τι είναι τα κύτταρα BxPC-3 Τι είναι η κυτταρική σειρά BxPC-3 Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς BxPC-3 Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων BxPC-3
- Τα κύτταρα BxPC-3, ανθρώπινα κύτταρα καρκινώματος του παγκρέατος, προήλθαν από μια 61χρονη Ευρωπαία με αδενοκαρκίνωμα του παγκρέατος το 1986. Τα κύτταρα αυτά επιβεβαιώθηκε ότι είναι καρκινικά ακόμη και αφού η ασθενής υποβλήθηκε σε αρκετές συνεδρίες ραδιο- και χημειοθεραπείας. Έτσι, η καθιερωμένη κυτταρική σειρά αποτελεί ένα ανεκτίμητο μοντέλο για τη μελέτη της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου.
- Τα κύτταρα BxPC-3 διαθέτουν μορφολογία που μοιάζει με επιθηλιακά κύτταρα.
- Ο τυπικός αριθμός χρωμοσωμάτων για την BxPC-3 είναι 59. Τα κύτταρα αυτά έχουν ομόζυγη διαγραφή στο χρωμόσωμα 18q, το οποίο κωδικοποιεί την πρωτεΐνη SMAD4/DPC4. Εκτός αυτού, η κυτταρική σειρά στερείται της μετάλλαξης BxPC-3 kras που είναι κοινή μεταξύ των παγκρεατικών όγκων. Η διαγραφή BxPC-3 braf εντοπίζεται επίσης σε αυτά τα παγκρεατικά καρκινικά κύτταρα.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της BxPC3 και της PANC-1
Τα κύτταρα BxPC-3 PADC (αδενοκαρκίνωμα παγκρεατικού πόρου) και PANC-1 είναι πρωτογενείς κυτταρικές σειρές καρκίνου του παγκρέατος με επιθηλιακή μορφολογία. Εδώ, τα πρώτα κύτταρα διαθέτουν περισσότερο επιθηλιακές ιδιότητες, ενώ τα μεταγενέστερα εμφανίζουν περισσότερο μεσεγχυματικά χαρακτηριστικά [1].
2. καλλιέργεια των κυττάρων BxPC-3
Η κυτταρική σειρά BxPC-3 χρησιμοποιείται ευρέως στα ερευνητικά εργαστήρια για τον καρκίνο. Πρέπει να γνωρίζετε τα ακόλουθα βασικά σημεία για την αποτελεσματική καλλιέργεια αυτής της κυτταρικής σειράς καρκίνου του παγκρέατος. Θα μάθετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της bxpc3 Πώς καλλιεργείτε την κυτταρική σειρά BxPC-3
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια των κυττάρων BxPC-3
|
Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων BxPC-3 κυμαίνεται μεταξύ 48 και 60 ωρών. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Η BxPC-3 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά. |
|
Αναλογία διαχωρισμού: |
Τα κύτταρα BxPC-3 υποκαλλιεργούνται σε αναλογία 1:2 έως 1:4. Τα κύτταρα πλένονται με 1 x PBS και επωάζονται με ένα διάλυμα διέλευσης που ονομάζεται accutase. Μετά από 8-10 λεπτά, προστίθεται φρέσκο μέσο στα κύτταρα και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Το σφαιρίδιο επαναιωρείται και πάλι σε μέσο και τα κύτταρα χύνεται σε νέο δοχείο καλλιέργειας για ανάπτυξη. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Το μέσο RPMI 1640 χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς BxPC-3. Συμπληρώνεται με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών, 2,1 mM σταθερής γλουταμίνης και 2,0 g/L NaHCO3 για την επίτευξη ιδανικής ανάπτυξης των κυττάρων. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Οι καλλιέργειες κυττάρων BxPC-3 διατηρούνται σε επωαστήρα με υγρασία 37 °C, συνδεδεμένο με παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποθηκεύονται γενικά σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C ή σε φάση ατμών υγρού αζώτου για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Το CM-1 ή το CM-ACF μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την κατάψυξη των καλλιεργειών κυττάρων BxPC-3. Ακολουθείται μια αργή διαδικασία κατάψυξης που επιτρέπει μόνο μια πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C, ώστε να αποφευχθεί οποιοδήποτε σοκ των κυττάρων. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα BxPC-3 αποψύχονται σε προκαθορισμένο υδατόλουτρο 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Αφού απομείνει μια μικρή μάζα πάγου, τα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των στοιχείων του μέσου κατάψυξης. Στη συνέχεια, το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και τα κύτταρα διανέμονται στη φιάλη για ανάπτυξη. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Οι καλλιέργειες κυττάρων BxPC-3 διατηρούνται σε εργαστήρια επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
3. κυτταρική σειρά BxPC-3: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
Η BxPC-3 είναι μια γνωστή κυτταρική σειρά παγκρεατικού αδενοκαρκινώματος που συνδέεται με διάφορα πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Τα βασικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής γραμμής παρατίθενται εδώ.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα των κυττάρων BxPC-3 είναι τα εξής:
-
Μοντέλο in vitro του καρκίνου του παγκρέατος
Τα κύτταρα BxPC-3, που προέρχονται από ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα του παγκρέατος, παρουσιάζουν σχετικά χαρακτηριστικά, γεγονός που τα καθιστά κατάλληλο μοντέλο για τη μελέτη της συμπεριφοράς του καρκίνου του παγκρέατος in vitro.
-
Ογκογόνος κυτταρική γραμμή
Τα κύτταρα BxPC-3 διαθέτουν καρκινικές ιδιότητες και μπορούν να σχηματίσουν όγκους όταν εγχέονται σε γυμνά ή ανοσοκατεσταλμένα ποντίκια. Αυτοί οι όγκοι μοιάζουν πολύ με τους πρωτοπαθείς όγκους αδενοκαρκινώματος του παγκρέατος, καθιστώντας το μοντέλο ξενομοσχεύματος BxPC-3 ιδανικό για τη μελέτη της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου.
Περιορισμοί
Οι περιορισμοί που σχετίζονται με την κυτταρική σειρά BxPC-3 είναι οι εξής:
-
Διασταυρούμενη μόλυνση
Η κυτταρική σειρά BxPC-3, όπως κάθε άλλη, ενέχει τον κίνδυνο διασταυρούμενης μόλυνσης. Οι ερευνητές θα πρέπει να είναι προσεκτικοί και να τηρούν αυστηρά πρωτόκολλα πρόληψης της μόλυνσης κατά το χειρισμό αυτών των κυττάρων.
-
Αργός ρυθμός ανάπτυξης
Τα κύτταρα BxPC-3 παρουσιάζουν σχετικά αργό ρυθμό πολλαπλασιασμού, με χρόνο διπλασιασμού που κυμαίνεται μεταξύ 48 και 60 ωρών. Αυτό το χαρακτηριστικό μπορεί να απαιτεί μεγαλύτερες περιόδους επώασης για συγκεκριμένα πειράματα, προκαλώντας ενδεχομένως καθυστερήσεις στην πρόοδο της έρευνας.
4. εφαρμογές των κυττάρων BxPC-3 στην έρευνα
Τα κύτταρα BxPC-3 προσφέρουν πολλές εφαρμογές στην έρευνα για τον καρκίνο. Οι συνηθέστερες εφαρμογές είναι οι εξής:
- Έρευνα για τον καρκίνο του παγκρέατος: Τα κύτταρα BxPC-3 μιμούνται το παγκρεατικό αδενοκαρκίνωμα και, ως εκ τούτου, χρησιμοποιούνται για τη διερεύνηση των γενετικών και μοριακών μηχανισμών που διέπουν την ανάπτυξη και την ανάπτυξη του όγκου. Επιπλέον, οι ερευνητές αποκαλύπτουν νέους βιοδείκτες και θεραπευτικούς στόχους χρησιμοποιώντας αυτά τα κύτταρα. Επιπλέον, τα κύτταρα BxPC-3 εκφράζουν σημαντικά αγγειογενετικούς παράγοντες, δηλαδή την ιντερλευκίνη-8 (IL-8), την προσταγλανδίνη Ε2 (PGE2) και τον αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικό παράγοντα (VEGF), γεγονός που τα καθιστά κατάλληλα για τη μελέτη της αγγειογένεσης. Εδώ, η αγγειογένεση είναι μια κρίσιμη διαδικασία που σχετίζεται με την ανάπτυξη και τη μετάσταση του καρκίνου. Μια μελέτη που δημοσιεύθηκε το 2022 μελέτησε ότι η υπερέκφραση της λαμινίνης-5 γάμμα-2 (LAMC2) σε BxPC3 PDAC (αδενοκαρκίνωμα παγκρεατικού πόρου) ενισχύει την καρκινογένεση μέσω της ρύθμισης του σηματοδοτικού μονοπατιού BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR [2].
- Ανακάλυψη και ανάπτυξη φαρμάκων: Η κυτταρική σειρά BxPC-3 χρησιμεύει ως ανεκτίμητο μοντέλο δοκιμής αντικαρκινικών φαρμάκων. Οι ερευνητές εξετάζουν τις κυτταροτοξικές, αντιμεταστατικές και αποπτωτικές επιδράσεις των πιθανών φαρμάκων σε BxPC3 PDAC. Μια μελέτη που διεξήχθη από την Alexandria Turner και τους συνεργάτες της το 2020 διερεύνησε τις αποπτωτικές ιδιότητες των εκχυλισμάτων φρούτων Elaeocarpus reticulatus σε κύτταρα καρκίνου του παγκρέατος BxPC-3 [3]. Ομοίως, το 2020 διεξήχθη έρευνα που προσδιόρισε τις αντικαρκινικές δυνατότητες ενός μεθανολικού εκχυλίσματος ενός φυτού που ονομάζεται Oxialis obtriangulata σε κύτταρα BxPC-3. Εκτός αυτού, οι ερευνητές μελέτησαν επίσης την κυτταρική μηχανιστική οδό μέσω της οποίας το φυτικό εκχύλισμα ασκούσε θεραπευτικές επιδράσεις [4].
5.ερευνητικές δημοσιεύσεις για τα κύτταρα BxPC-3
Αυτή η ενότητα παραθέτει μερικές από τις πιο αναφερόμενες και ενδιαφέρουσες δημοσιεύσεις που αφορούν την κυτταρική σειρά BxPC-3.
Αυτή η δημοσίευση στο Chemico-Biological Interactions (2020) διερεύνησε τις αποπτωτικές επιδράσεις ενός φυσικού προϊόντος, της λικοκουμαρόνης, στα κύτταρα καρκίνου του παγκρέατος BxPC-3.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο Anticancer Research (2022). Η μελέτη πρότεινε ότι η υδροξυχλωροκίνη προκαλεί τον θάνατο των κυττάρων BxPC3 μέσω της αναστολής του γονιδίου BCL-XL.
Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε το 2020 στο Journal of Cellular Biochemistry. Η μελέτη αναφέρει ότι μια φυσική ένωση, η σαλιδροσίδη, εμφανίζει αντικαρκινικές δράσεις σε κύτταρα BxPC-3 ρυθμίζοντας τον καταρράκτη σηματοδότησης HIF-1α (υποξία-επαγώγιμος παράγοντας) και LOXL2.
Αυτό το άρθρο στην επιθεώρηση Biomedicine & Pharmacotherapy υποδηλώνει ότι η ιμπρουτινίμπη μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως ένας σπουδαίος ακτινοευαισθητοποιητής σε ασθενείς με καρκίνο του παγκρέατος. In vitro, μελέτη σε κύτταρα BxPC-3 δείχνει ότι μειώνει τη φωσφορυλίωση του EGFR BxPC3 και την έκφραση του pAKT και των μεταγενέστερων γονιδίων που ρυθμίζονται από την ακτινοθεραπεία.
Αυτή η μελέτη στην επιθεώρηση Integrative Cancer Therapies πρότεινε ότι ένα φυσικό προϊόν, η χηληδονίνη, ασκεί αποπτωτική δράση στα ανθρώπινα παγκρεατικά κύτταρα BxPC-3 μέσω της ρύθμισης της σηματοδότησης BxPC3 p53 και GADD45a.
6. πόροι για την κυτταρική σειρά BxPC-3: Bxxxx3: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Η κυτταρική σειρά BxPC-3 έχει πολλά γοητευτικά πλεονεκτήματα που την καθιστούν κατάλληλη για ερευνητική χρήση. Πολλοί διαδικτυακοί πόροι σχετικά με την κυτταρική σειρά BxPC-3 αναφέρουν το χειρισμό, τη συντήρηση και το πρωτόκολλο διαμόλυνσηςs.
- Διαμόλυνση της BxPC3: Αυτό το βίντεο είναι ένας οδηγός βήμα προς βήμα για την εκμάθηση του πρωτοκόλλου διαμόλυνσης για τα κύτταρα BxPC-3.
Αυτή η ενότητα του άρθρου περιλαμβάνει ορισμένους συνδέσμους που εξηγούν τα πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων BxPC3.
- Καλλιέργεια κυττάρων BxPC3: Αυτός ο δικτυακός τόπος θα σας βοηθήσει να μάθετε πρωτόκολλα για την υποκαλλιέργεια και τον χειρισμό κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαστικών καλλιεργειών BxPC-3.
Αναφορές
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruit extracts reduce viability and induce apoptosis in pancreatic cancer cells in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Αντικαρκινικό δυναμικό του Oxialis obtriangulata σε παγκρεατικά καρκινικά κύτταρα μέσω της ρύθμισης του μονοπατιού ERK/Src/STAT3 που μεσολαβεί. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.