Κύτταρα A431 - Λεπτομερής ανάλυση των κυττάρων επιδερμοειδούς καρκινώματος στη δερματολογική έρευνα
ΤοA431 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά επιδερμοειδούς καρκίνου. Χρησιμοποιείται ευρέως στον τομέα της βιοϊατρικής έρευνας, κυρίως στη βιολογία του καρκίνου, την ανοσο-ογκολογία και τις τοξικολογικές μελέτες. Επιπλέον, τα κύτταρα A431 υπερεκφράζουν τον EGFR (υποδοχέας του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα), οπότε χρησιμοποιούνται ως πολύτιμο in vitro μοντέλο για τη μελέτη του κυτταρικού κύκλου και των μονοπατιών σηματοδότησης των κυττάρων που σχετίζονται με τον καρκίνο.
Το παρόν άρθρο θα εξηγήσει τα βασικά στοιχεία της καρκινικής κυτταρικής σειράς A431. Θα μάθετε τα εξής: Το άρθρο αυτό θα σας ενημερώσει για την ανάπτυξη της Α3131:
- Κύτταρα A431: 3131: Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση
- Κυτταρική σειρά A431: A431: Πληροφορίες για την καλλιέργεια
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς A431
- Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων A431
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα A431
- Πηγές για την κυτταρική σειρά A431: A431: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
1. Κύτταρα A431: Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση
Αυτή η ενότητα του άρθρου θα σας βοηθήσει να μάθετε τις γενικές πληροφορίες για την κυτταρική σειρά A431 που πρέπει να γνωρίζετε πριν εργαστείτε με αυτήν. Όπως, ποια είναι η προέλευση της Τι είναι η κυτταρική σειρά A431 Ποια είναι τα χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς A431 Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων A431 Από πού προέρχονται τα κύτταρα A431
- Η A431, μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος, ελήφθη από την επιδερμίδα μιας 85χρονης γυναίκας ασθενούς με επιδερμοειδές καρκίνωμα [1]. Δημιουργήθηκε από τον D.J. Giard, κ.ά., ο οποίος ανέπτυξε πολλές άλλες κυτταρικές σειρές από συμπαγείς όγκους.
- Τα κύτταρα A-431 διαθέτουν επιθηλιακή μορφολογία. Συσσωρεύονται και σχηματίζουν συστάδες κυττάρων.
- Η κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος a431 είναι υπερτριπλοειδής. Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων για αυτή την κυτταρική σειρά είναι 74, ο οποίος εμφανίζεται σε περίπου 36% των κυττάρων. Υψηλότερες πλουδίες υπάρχουν επίσης σε περίπου 1% του κυτταρικού πληθυσμού.
2.κυτταρική σειρά A431: Καλλιέργεια
Η γνώση των απαιτήσεων και των διαδικασιών κυτταροκαλλιέργειας μιας κυτταρικής γραμμής μπορεί να καταστήσει τον χειρισμό της χωρίς προβλήματα. Αυτό το μέρος του άρθρου θα σας βοηθήσει να μάθετε τα βασικά σημεία για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς A431. Όπως θα γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων A431 Είναι η καρκινική κυτταρική σειρά A431 προσκολλητική Ποιο μέσο ανάπτυξης χρησιμοποιείται για την A431
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια των κυττάρων A431
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού για τα κύτταρα A431 κυμαίνεται από 80 έως 100 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Το A431 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά. |
|
Πυκνότητα σποράς: |
η κυτταρική πυκνότητα 1 x104 κύτταρα/cm2 είναι ιδανική για την κυτταρική σειρά A431. Τα κύτταρα χρειάζονται σχεδόν 4 ημέρες για να γίνουν συνεκτικά σε αυτή την πυκνότητα. Τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με PBS (1x) και επωάζονται με διάλυμα παθητικοποίησης Accutase. Στη συνέχεια, τα κύτταρα ανασυστάθηκαν σε μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρήθηκαν. Τα συλλεχθέντα κύτταρα ανασυστάθηκαν και πάλι και διανεμήθηκαν σε νέες φιάλες για ανάπτυξη. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς A431 χρησιμοποιείται μέσο DMEM συμπληρωμένο με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών, 4,5 g/L γλυκόζη, 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, 1,5 g/L NaHCO3 και 4 mM L-γλουταμίνη. Το μέσο θα πρέπει να αντικαθίσταται κάθε 2 έως 3 ημέρες την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Τα καρκινικά κύτταρα A431 αναπτύσσονται σε υγροποιημένο επωαστήρα εξοπλισμένο με πηγή CO2 5% σε θερμοκρασία 37°C. |
|
Αποθήκευση: |
Η κυτταρική σειρά μπορεί να αποθηκευτεί σε ηλεκτρικό καταψύκτη ή σε φάση ατμών υγρού αζώτου σε θερμοκρασία κάτω των -150°C, καθώς συμβάλλει στην προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
CM-1 ή CM-ACF είναι τα δύο ιδιαίτερα συνιστώμενα μέσα κατάψυξης που χρησιμοποιούνται για τα κύτταρα A431. Τα κύτταρα καταψύχονται με τη χρήση μιας μεθόδου αργής κατάψυξης που επιτρέπει την πτώση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 βαθμό ανά λεπτό. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα A431 αποψύχονται σε υδατόλουτρο 37°C που περιέχει αντιμικροβιακό παράγοντα για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Όταν απομένει μόνο ένα μικρό σβόλο πάγου, τα κύτταρα προστίθενται με θρεπτικό υλικό και φυγοκεντρίζονται. Τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωρεύονται και χύνεται σε φιάλες καλλιέργειας για ανάπτυξη. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Συνιστάται επίπεδο βιοασφάλειας ένα για το χειρισμό και τη συντήρηση των καλλιεργειών A431. |
3.πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς A431
Η κυτταρική σειρά A431 διαθέτει διακριτά χαρακτηριστικά και προσφέρει αρκετά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Εν προκειμένω, έχουμε συνοψίσει μερικά από αυτά παρακάτω.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα της καρκινικής κυτταρικής σειράς A431 είναι τα εξής:
|
Υπερέκφραση του EGFR |
Τα κύτταρα A431 υπερεκφράζουν τον υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR). Χρησιμεύουν ως θετικός έλεγχος για τη μελέτη της σηματοδότησης EGFR και των επιπτώσεών της στον καρκίνο. Χρησιμοποιούνται επίσης για την αξιολόγηση νέων θεραπειών για τον καρκίνο. |
|
Ογκογονικότητα |
Τα κύτταρα A431 είναι καρκινικά και έχουν την ικανότητα να σχηματίζουν όγκους. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ανάπτυξη μοντέλων καρκίνου με ξενομοσχεύματα, τα οποία αποτελούν πολύτιμα εργαλεία για τη μελέτη της δυναμικής ανάπτυξης των όγκων και την αξιολόγηση νέων θεραπειών για τον καρκίνο. |
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα των κυττάρων A431 είναι τα εξής:
|
Γενετικές ανωμαλίες |
Το A431 είναι μια καρκινική κυτταρική σειρά που περιλαμβάνει γενετικές μεταλλάξεις και αλλοιώσεις που ενδέχεται να το διαφοροποιούν από τα αρχικά χαρακτηριστικά του όγκου. |
|
Μικροβιακή μόλυνση |
Το A431 είναι επιρρεπές σε μικροβιακή μόλυνση, κυρίως βακτηριακή μόλυνση. Ωστόσο, η διατήρηση τυπικών ασηπτικών συνθηκών καλλιέργειας μπορεί να συμβάλει στην πρόληψη της εν λόγω μόλυνσης στις καλλιέργειες κυττάρων A431. |