Κύτταρα Hep2 και ο ρόλος τους στην έρευνα για τον καρκίνο του λάρυγγα

Τα κύτταρα Hep 2 είναι ένα βασικό in vitro μοντέλο που χρησιμοποιείται ευρέως σε όλους τους τομείς της βιοϊατρικής έρευνας, όπως η ρευματολογία, η έρευνα του καρκίνου και η ανοσολογία. Προερχόμενα από καρκίνωμα του λάρυγγα, αυτά τα ανθρώπινα κύτταρα ήταν αναπόσπαστο στοιχείο για τη διαλεύκανση του ιστού προέλευσης και των ειδικών χαρακτηριστικών των νεοπλασιών του λάρυγγα. Η σημασία τους αναγνωρίζεται καλά στη μεταφραστική έρευνα για τον καρκίνο, όπου έχουν συμβάλει σημαντικά στην κατανόηση της λαρυγγικής φύσης και προέλευσης των καρκίνων, σημειώνοντας σημαντική παρουσία στις δημοσιεύσεις για την έρευνα του καρκίνου του λάρυγγα [1].

Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων Hep 2

Η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά μιας κυτταρικής σειράς καθορίζουν τη δυνατότητα εφαρμογής της στην έρευνα. Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να γνωρίσετε την προέλευση και ορισμένα σημαντικά χαρακτηριστικά των κυττάρων Hep 2. Για παράδειγμα, θα μάθετε: Τι είναι η κυτταρική σειρά HEp-2 Ποια είναι η πηγή των κυττάρων Hep 2 Και ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων Hep 2

  • Η Hep 2, μια αθάνατη ανθρώπινη επιθηλιακή κυτταρική σειρά περιγράφηκε για πρώτη φορά από τον H.W. Toolan ως κύτταρα καρκινώματος του λάρυγγα το 1954. Ωστόσο, πρόσφατα αναφέρθηκε ότι η κυτταρική σειρά Hep 2 αποτελείται από κύτταρα αδενοκαρκινώματος του τραχήλου της μήτρας και προέρχεται από μόλυνση της κυτταρικής σειράς Hela [2].
  • Τα κύτταρα Hep 2 περιέχουν χρωμοσώματα-δείκτες Hela και βρέθηκαν θετικά για αλληλουχίες DNA κερατίνης και ιού των ανθρώπινων θηλωμάτων, όπως επιβεβαιώθηκε μέσω χρώσης με ανοσοϋπεροξειδάση και PCR, αντίστοιχα.
  • Το παράγωγο της κυτταρικής σειράς Hela Hep 2 διαθέτει μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο.
  • Η κυτταρική σειρά Hep 2 παρουσιάζει τόσο δομικές όσο και αριθμητικές χρωμοσωμικές εκδορές με σχεδόν τριπλοειδή καρυότυπο [3].

Διαίρεση των καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας HeLa στο μικροσκόπιο.

Κυτταρική σειρά Hep 2: Hepa: Πληροφορίες καλλιέργειας

Πριν εργαστούμε με μια κυτταρική σειρά, πρέπει να γνωρίζουμε τα ακόλουθα βασικά σημεία για την καλλιέργειά της. Οι πληροφορίες αυτές μπορεί να είναι χρήσιμες για την αποτελεσματική καλλιέργεια και διατήρηση της κυτταρικής σειράς. Θα πρέπει να γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HEp-2 Είναι τα κύτταρα Hep 2 προσκολλημένα Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των κυττάρων Hep2

Χρόνος διπλασιασμού πληθυσμού:

Ο χρόνος διπλασιασμού που αναφέρεται για τα κύτταρα Hep 2 είναι περίπου 40 ώρες.

Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:

Τα κύτταρα Hep 2 είναι προσκολλημένα και αναπτύσσονται σε μονοστρώματα.

Πυκνότητα σποράς:

Η πυκνότητα σποράς 1 x104 κύτταρα/cm2 είναι ιδανική για την καλλιέργεια κυττάρων Hep 2. Για τη σπορά, τα προσκολλημένα κύτταρα Hep 2 ξεπλένονται με διάλυμα 1 x PBS, ακολουθούμενη από επώαση με διάλυμα διάσπασης Accutase. Μετά από επώαση 8-10 λεπτών σε θερμοκρασία περιβάλλοντος, τα κύτταρα επαναιωρούνται σε μέσο και φυγοκεντρίζονται. Στη συνέχεια, τα συλλεχθέντα κύτταρα διανέμονται σε φρέσκο μέσο και χύνεται σε νέες φιάλες για καλλιέργεια.

Μέσο ανάπτυξης:

Για την καλλιέργεια των κυττάρων Hep 2 χρησιμοποιείται το EMEM ή το ελάχιστο απαραίτητο μέσο του Eagle. Αυτό το μέσο συμπληρώνεται με 10% FBS, 1,0 g/L γλυκόζη, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-γλουταμίνη, 1% NEAA και 1 mM πυρουβικό νάτριο για ιδανική ανάπτυξη των κυττάρων. Το μέσο θα πρέπει να ανανεώνεται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές θηλαστικών, έτσι και η Hep 2 καλλιεργείται σε υγροποιημένο επωαστήρα ρυθμισμένο σε θερμοκρασία 37°C και με συνεχή παροχή 5% CO2.

Αποθήκευση:

Τα κύτταρα Hep 2 μπορούν να αποθηκευτούν σε ηλεκτρικούς καταψύκτες εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας (κάτω από -150 °C) ή σε φάση ατμών υγρού αζώτου για μακροχρόνια αποθήκευση.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Τα μέσα κατάψυξης που συνιστώνται για τα κύτταρα Hep 2 είναι τα CM-1 ή CM-ACF. Τα κύτταρα θα πρέπει να καταψύχονται χρησιμοποιώντας μια αργή διαδικασία κατάψυξης που επιτρέπει σταδιακή πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C και προστατεύει τη βιωσιμότητα των κυττάρων.

Διαδικασία απόψυξης:

Το φιαλίδιο με τα κατεψυγμένα κύτταρα αποψύχεται γρήγορα με ανάδευση σε υδατόλουτροστους 37 °Cέως ότου απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται σε φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Αργότερα, το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται σε μέσο και τα κύτταρα διανέμονται σε φιάλες καλλιέργειας. Τα κύτταρα πρέπει να ξεκουραστούν για σχεδόν 24 ώρες για να προσκολληθούν.

Επίπεδο βιοασφάλειας

Για το χειρισμό και τη συντήρηση των κυτταρικών καλλιεργειών Hep 2 συνιστάται εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1.

Κύτταρα Hep 2 πριν και μετά την επίτευξη συρροής.

Πλεονεκτήματα & περιορισμοί των κυττάρων Hep 2

Σχεδόν όλες οι κυτταρικές σειρές παρουσιάζουν έναν μοναδικό συνδυασμό πλεονεκτημάτων και περιορισμών που συμβάλλουν στη χρήση τους στον ερευνητικό τομέα. Στην παρούσα ενότητα θα περιγραφούν μερικά βασικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που σχετίζονται με την κυτταρική σειρά Hep 2.

Πλεονεκτήματα

Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς Hep 2 είναι τα εξής:

  • Ανθρώπινη προέλευση: Η Hep 2 προέρχεται από ανθρώπινα επιθηλιακά κύτταρα, γεγονός που την καθιστά πολύτιμο in vitro μοντέλο για τη μελέτη ανθρώπινων ασθενειών και ιογενών λοιμώξεων
  • Ανίχνευση ANA: Η κυτταρική σειρά Hep 2 διαθέτει εγγενή πρωτεϊνική συστοιχία που παρουσιάζει πολυάριθμα αντιγόνα, καθιστώντας την εξαιρετικό υπόστρωμα για την ανίχνευση αντιπυρηνικών αντισωμάτων (ANA). Αυτό το χαρακτηριστικό επιτρέπει την ειδική και ιδιαίτερα ευαίσθητη διαλογή των ANA στον ορό, καθιστώντας το ένα κρίσιμο διαγνωστικό εργαλείο για τον εντοπισμό ασθενειών του συνδετικού ιστού

Περιορισμοί

  • Χρωμοσωμικές ανωμαλίες: Τα κύτταρα Hep 2 παρουσιάζουν πολλαπλές αριθμητικές και δομικές χρωμοσωμικές ανωμαλίες. Αυτές οι ανωμαλίες μπορούν να επηρεάσουν τη συμπεριφορά των κυττάρων και ενδέχεται να περιορίσουν τη δυνατότητα εφαρμογής τους σε ορισμένα εργαστηριακά πειράματα
  • Ογκογονικότητα: Η Hep 2, μια σειρά ανθρώπινων επιθηλιακών κυττάρων που προέρχονται από όγκους, μπορεί να διαθέτει γενετικές ανωμαλίες που συνήθως απουσιάζουν από τα επιθηλιακά κύτταρα. Κατά συνέπεια, η χρήση των κυττάρων Hep 2 ενδέχεται να περιορίζεται σε συγκεκριμένες μελέτες που εστιάζουν στη φυσιολογική κυτταρική φυσιολογία.

Επέκταση των εφαρμογών της κυτταρικής γραμμής Hep 2 στη βιοϊατρική έρευνα

Η κυτταρική σειρά Hep 2 ξεχωρίζει ως ένα υποδειγματικό μοντέλο για πλήθος εφαρμογών στο πλαίσιο της βιοϊατρικής έρευνας. Φημισμένα για την ευελιξία τους, τα κύτταρα αυτά εξυπηρετούν κρίσιμους ρόλους σε in vitro πειράματα, που κυμαίνονται από την ανάλυση υποδοχέων έως τη μελέτη σύνθετων ασθενειών.

Διερεύνηση των καρκινικών μηχανισμών και των θεραπευτικών στόχων με κύτταρα Hep 2

Τα κύτταρα Hep 2, όντας καρκινικά, έχουν καθοριστική σημασία για την εμβάθυνση στις περιπλοκές της βιολογίας του καρκίνου. Παρέχουν γνώσεις σχετικά με τα μονοπάτια σηματοδότησης του καρκίνου, μηχανιστικές μελέτες και αποτελούν βασικό πυλώνα στον έλεγχο και την αξιολόγηση αντικαρκινικών φαρμάκων. Για παράδειγμα, μια διορατική μελέτη χρησιμοποίησε το Hep 2 για να σκιαγραφήσει την επίδραση του miRNA-33a στον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων. Τα ευρήματα φώτισαν τις αντιπολλαπλασιαστικές επιδράσεις του miRNA-33a μέσω της αλληλεπίδρασής του με το PIM1, ένα γνωστό ογκογονίδιο, υποδηλώνοντας έναν νέο θεραπευτικό στόχο [4]. Σε μια άλλη περίπτωση, το Hep 2 χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση των θεραπευτικών δυνατοτήτων των νανοσωματιδίων οξειδίου του ψευδαργύρου Marsdenia tenacissima, αναδεικνύοντας την αντιπολλαπλασιαστική και αποπτωτική αποτελεσματικότητά τους [5].

Προώθηση της ιολογικής έρευνας με τις γνώσεις των κυττάρων Hep 2

Η ευαισθησία των κυττάρων Hep 2 σε διάφορους ανθρώπινους ιούς τα καθιστά ανεκτίμητη πηγή στην ιολογική έρευνα. Έχουν χρησιμοποιηθεί αποτελεσματικά στην έκφραση των γονιδίων του ιού SARS-CoV-2 για την αποκάλυψη της πολύπλοκης αλληλεπίδρασης μεταξύ του ιού και των κυτταρικών μηχανισμών του ξενιστή [6]. Η εφαρμογή αυτή είναι ιδιαίτερα κρίσιμη στη σημερινή εποχή, όπου η κατανόηση και η καταπολέμηση ιικών λοιμώξεων όπως η COVID-19 αποτελεί παγκόσμια προτεραιότητα.

Αποκρυπτογράφηση κυτταρικών λειτουργιών: Σε κύτταρα Hep 2

Η προσαρμοστικότητα της κυτταρικής σειράς Hep 2 σε γενετικούς χειρισμούς υπογραμμίζει τη χρησιμότητά της σε μηχανιστικές μελέτες. Οι ερευνητές αξιοποιούν αυτό το χαρακτηριστικό για να τροποποιήσουν τη γονιδιακή έκφραση και να διευκρινίσουν τους ρόλους συγκεκριμένων γονιδίων στις κυτταρικές λειτουργίες. Μια αξιοσημείωτη μελέτη αφορούσε την υπερέκφραση της πρωτεΐνης RNA-δέσμευσης RBM6 σε κύτταρα Hep 2, η οποία διευκόλυνε τη διερεύνηση του δυναμικού καταστολής όγκων που διαθέτει, παρέχοντας πολύτιμες πληροφορίες για τα μοριακά θεμέλια του καρκίνου [7].

Βελτίωση της διάγνωσης ασθενειών μέσω εφαρμογών κυτταρικής γραμμής Hep 2

Πέρα από αυτούς τους ερευνητικούς τομείς, τα κύτταρα Hep 2 είναι αναγνωρισμένα για τις διαγνωστικές τους ικανότητες, ιδίως στην ανίχνευση των ANAs, οι οποίες είναι κρίσιμες για τη διάγνωση αυτοάνοσων νοσημάτων όπως ο συστηματικός ερυθηματώδης λύκος. Η ακρίβεια με την οποία τα κύτταρα Hep 2 μπορούν να παρουσιάσουν τα ANAs υποστηρίζει τη διάγνωση και την ανάπτυξη στοχευμένων θεραπειών, ενισχύοντας την κατανόηση των αυτοάνοσων παθολογιών και βελτιώνοντας τη φροντίδα των ασθενών.

Μέσω αυτών των ποικίλων εφαρμογών, τα κύτταρα Hep 2 έχουν συμβάλει σημαντικά στην πρόοδο της μεταφραστικής έρευνας για τον καρκίνο, τη μελέτη των ιογενών λοιμώξεων και τη διερεύνηση των κυτταρικών μηχανισμών. Η συμβολή τους στη δημιουργία κλινικά σχετικών δεδομένων είναι ανεκτίμητη, επιβεβαιώνοντας τον απαραίτητο ρόλο τους τόσο στο εργαστήριο όσο και στην κλινική. Καθώς η έρευνα συνεχίζει να εξελίσσεται, η κυτταρική σειρά Hep 2 είναι βέβαιο ότι θα παραμείνει στο προσκήνιο, βοηθώντας στην ανακάλυψη νέων θεραπειών και διευρύνοντας τις γνώσεις μας για την ανθρώπινη υγεία και ασθένεια.

Εξασφαλίστε τη γραμμή κυττάρων HEp-2 σήμερα

Κύτταρα Hep 2: Hepep: Ερευνητικές Δημοσιεύσεις

Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες και πιο αναφερόμενες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα Hep 2.

Πόροι για την κυτταρική γραμμή Hep2: Hep2: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Η Hep 2 είναι μια πολύ γνωστή κυτταρική γραμμή. Υπάρχουν αρκετοί διαθέσιμοι πόροι που χαρακτηρίζουν την κυτταρική γραμμή Hep 2.

Συχνές ερωτήσεις σχετικά με τα κύτταρα HEp-2 στη βιοϊατρική έρευνα

Αναφορές

  1. Fusi, M. και S. Dotti, Προσαρμογή της κυτταρικής σειράς HEp-2 σε συστήματα καλλιέργειας χωρίς ζώα και ανάλυση της κυτταρικής ανάπτυξης σε πραγματικό χρόνο. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
  2. Gorphe, P., Συνολική ανασκόπηση της κυτταρικής σειράς Hep-2 στη μεταφραστική έρευνα για τον καρκίνο του λάρυγγα. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
  3. Wang, M., et al., Cancer-associated fibroblasts in a human HEp-2 established laryngeal xenografted tumor are not derived from cancer cells through epithelial-mesenchymal transition, phenotypically activated but karyotypically normal. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
  4. Karatas, O.F., Αντιπολλαπλασιαστικό δυναμικό του miR-33a στα κύτταρα Hep-2 του καρκίνου του λάρυγγα μέσω της στόχευσης του PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
  5. Wang, Y., et al., Synthesis of Zinc oxide nanoparticles from Marsdenia tenacissima inhibits the cell proliferation and induces apoptosis in laryngeal cancer cells (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
  6. Zhang, J., et al., Συστημική και μοριακή μελέτη του υποκυτταρικού εντοπισμού των πρωτεϊνών SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
  7. Wang, Q., et al., Η RNA-δεσμευτική πρωτεΐνη RBM6 ως ογκοκατασταλτικό γονίδιο καταστέλλει την ανάπτυξη και την εξέλιξη στο λαρυγγοκαρκίνωμα. Gene, 2019. 697: p. 26-34.

Εντοπίσαμε ότι βρίσκεστε σε διαφορετική χώρα ή χρησιμοποιείτε διαφορετική γλώσσα του προγράμματος περιήγησης από την τρέχουσα επιλεγμένη. Θα θέλατε να αποδεχτείτε τις προτεινόμενες ρυθμίσεις

Κλείστε το