Κύτταρα P19 - Έρευνα για το εμβρυονικό καρκίνωμα με τη χρήση κυττάρων P19
ΤοP19 είναι μια κυτταρική σειρά εμβρυονικού καρκινώματος ποντικού. Χρησιμοποιείται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα, κυρίως για τη μελέτη της αναπτυξιακής βιολογίας, της βιολογίας των βλαστικών κυττάρων, της κυτταρικής διαφοροποίησης και της διαλογής φαρμάκων. Καθώς τα κύτταρα P19 έχουν την ικανότητα διαφοροποίησης, μπορούν να είναι χρήσιμα στη διερεύνηση σύνθετων βιολογικών διεργασιών, όπως ο σχηματισμός ιστών και η πρώιμη εμβρυϊκή ανάπτυξη. Σε αυτό το άρθρο, θα συζητήσουμε τις βασικές αρχές των κυττάρων P19 που προέρχονται από ποντίκια.
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων P19
Η γνώση των γενικών χαρακτηριστικών και της προέλευσης μιας κυτταρικής σειράς είναι απαραίτητη προτού αρχίσετε να εργάζεστε μαζί της. Αυτή η ενότητα θα καλύψει τα εξής: Τι είναι η κυτταρική σειρά P19 Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων P19 Ποια είναι η προέλευση των κυττάρων P19
- Η P19 είναι ένας τύπος πολυδύναμων εμβρυϊκών καρκινικών κυττάρων που προέκυψαν αρχικά από τερατοκαρκίνωμα που αναπτύχθηκε σε ποντίκι C3H/He. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε για πρώτη φορά το 1982 από τους McBurney και Rogers.
- Τα κύτταρα P19 μπορούν να αναπτύσσονται συνεχώς σε θρεπτικό μέσο καλλιέργειας που συμπληρώνεται με ορό. Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε άλλους κυτταρικούς τύπους όταν εκτίθενται σε μη τοξικά φάρμακα όπως το ρετινοϊκό οξύ και το διμεθυλοσουλφοξείδιο (DMSO) [1].
- Αυτά τα καρκινωματικά κύτταρα ποντικού διαθέτουν μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο.
- Η κυτταρική σειρά P19 έχει ευπλοειδή αρσενικό καρυότυπο (n=40; XY).
Πληροφορίες καλλιέργειας για τα κύτταρα P19
Η κυτταρική σειρά P19 καλλιεργείται ευρέως στα ερευνητικά εργαστήρια λόγω των μοναδικών χαρακτηριστικών της. Η καλλιέργειά της είναι εύκολη και διαχειρίσιμη. Σε αυτή την ενότητα αναφέρονται όλες οι βασικές πληροφορίες που χρειάζεστε για τη διατήρηση και την καλλιέργεια των κυττάρων P19. Θα γνωρίζουμε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων P19 Πώς καλλιεργείτε την κυτταρική σειρά P19 Είναι η P19 μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων P19
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού που αναφέρεται για την κυτταρική σειρά P19 είναι περίπου 2 έως 3 ημέρες. |
|
Προσκολλημένη ή σε εναιώρημα: |
Η κυτταρική σειρά P19 εμβρυικού καρκινώματος είναι προσκολλημένη. |
|
Αναλογία υποκαλλιέργειας: |
Τα κύτταρα P19 πρέπει να υποκαλλιεργούνται κάθε 48 ώρες και πρέπει να διατηρείται αναλογία διαίρεσης 1:10 για τα κύτταρα αυτά. Τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με φυσιολογικό ορό φωσφορικού διαλύματος 1 X και επωάζονται με Accutase έως ότου τα κύτταρα διαχωριστούν. Τα κύτταρα προστίθενται με μέσο καλλιέργειας και συλλέγονται μέσω φυγοκέντρησης. Τα συλλεγέντα κύτταρα ανασυσσωματώνονται προσεκτικά και διανέμονται σε νέες φιάλες. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
DMEM/Ham's F12 που περιέχει 5% εμβρυϊκό ορό βοοειδών, 3,1 g/L γλυκόζη, 1,6 mM L-γλουταμίνη, 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, 15 mM HEPES και 1,2 g/L NaHCO3 χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια των κυττάρων P19. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Για την ανάπτυξη και καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς του εμβρυϊκού καρκινώματος P19 είναι απαραίτητη η ύπαρξη ενός υγροποιημένου επωαστήρα στους 37°C με παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κατεψυγμένα φιαλίδια κυττάρων P19 πρέπει να αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150°C σε καταψύκτη ή στη φάση ατμών υγρού αζώτου για να διατηρηθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Τα μέσα CM-1 ή CM-ACF μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την κατάψυξη των κυττάρων P19 χρησιμοποιώντας μια μέθοδο αργής κατάψυξης που προστατεύει τα κύτταρα από οποιοδήποτε σοκ και διατηρεί τη βιωσιμότητά τους. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα P19 μπορούν να αποψυχθούν σε υδατόλουτρο 37°C με ταχεία ανάδευση ενός φιαλιδίου για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Τα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για να απομακρυνθούν τα στοιχεία του μέσου κατάψυξης. Η παλέτα κυττάρων ανασυσσωματώνεται και πάλι και τα κύτταρα χύνεται στη νέα φιάλη για ανάπτυξη. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Για την κυτταρική σειρά P19 απαιτούνται εργαστηριακές ρυθμίσεις επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
Κυτταρική σειρά P19: Πλεονεκτήματα & Μειονεκτήματα
Σε αυτή την ενότητα θα συζητηθούν τα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς P19.
Πλεονεκτήματα
- Δυνατότητα διαφοροποίησης: Τα κύτταρα P19 μπορούν να διαφοροποιηθούν σε διάφορους κυτταρικούς τύπους, συμπεριλαμβανομένων καρδιομυοκυττάρων, νευρώνων και μικρογλοιακών κυττάρων. Απαιτούν μη τοξικά φάρμακα για τη διαφοροποίηση, όπως το ρετινοϊκό οξύ και το διμεθυλοσουλφοξείδιο (DMSO). Το ρετινοϊκό οξύ επάγει την ανάπτυξη νευρώνων, μικρογλοίας και αστρογλοίας, ενώ το DMSO ξεκινά την ανάπτυξη καρδιομυοκυττάρων που χτυπούν και λείων μυϊκών κυττάρων. Έτσι, τα κύτταρα P19 είναι χρήσιμα για τη μελέτη της κυτταρικής διαφοροποίησης και των αναπτυξιακών διεργασιών
- Σύστημα μοντέλου: Η πολυδύναμη σειρά κυττάρων P19 του εμβρυϊκού καρκινώματος είναι ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της πρώιμης εμβρυϊκής ανάπτυξης. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα P19 για τη διαλεύκανση των μονοπατιών κυτταρικής σηματοδότησης και των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που εμπλέκονται σε αυτές τις διαδικασίες
Μειονεκτήματα
- Προέλευση από ποντικούς: Το P19 είναι μια κυτταρική σειρά εμβρυονικού καρκινώματος ποντικού. Κατά συνέπεια, τα ευρήματα από μελέτες που χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα ενδέχεται να μην μπορούν να μεταφραστούν πλήρως στην ανθρώπινη βιολογία και διαδικασίες
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων P19
Τα κύτταρα P19 έχουν διάφορες ερευνητικές εφαρμογές λόγω της ικανότητας διαφοροποίησης και της σημασίας τους για την αναπτυξιακή βιολογία και την έρευνα των βλαστικών κυττάρων. Ορισμένες από τις σημαντικές ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων εμβρυϊκού καρκινώματος P19 περιλαμβάνουν:
- Μελέτες κυτταρικής διαφοροποίησης: Ως εκ τούτου χρησιμοποιούνται ευρέως για τη μελέτη των διαδικασιών κυτταρικής διαφοροποίησης. Επιπλέον, βοηθά την έρευνα να διερευνήσει τη νευρική και καρδιακή ανάπτυξη και τους υποκείμενους μηχανισμούς. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 διαπίστωσε ότι τα δραστικά είδη οξυγόνου (ROS) κατευθύνουν τη διαφοροποίηση των κυττάρων P19 σε συγκεκριμένους κυτταρικούς τύπους και αποτρέπουν την επαγωγή άλλων [3]. Μια άλλη μελέτη διερεύνησε τη διαδικασία νευρικής διαφοροποίησης που διαμεσολαβείται από το ρετινοϊκό οξύ και διαπίστωσε τη συμμετοχή του σηματοδοτικού μονοπατιού PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Βιολογία της ανάπτυξης: Τα κύτταρα P19 είναι ένα ανεκτίμητο μοντέλο για τη μελέτη της πρώιμης εμβρυϊκής ανάπτυξης. Βοηθούν τους ερευνητές να κατανοήσουν πολύπλοκες βιολογικές διαδικασίες, όπως ο σχηματισμός ιστών κατά την ανάπτυξη του εμβρύου. Η έρευνα χρησιμοποίησε κύτταρα P19 και μελέτησε τους μοριακούς παράγοντες που συμβάλλουν στο σχηματισμό κοιλιακού διαφραγματικού ελλείμματος (VSD). Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι ένα μακρύ μη κωδικοποιούμενο RNA SNHG6 συμβάλλει στο VSD ρυθμίζοντας αρνητικά το miRNA-101 και ενεργοποιώντας το μονοπάτι Wnt/β-κατενίνης [5].
- Δοκιμές φαρμάκων: Η κυτταρική σειρά εμβρυϊκού καρκινώματος ποντικού P19 χρησιμοποιείται επίσης για τον έλεγχο πιθανών υποψηφίων φαρμάκων. Μια μελέτη χρησιμοποίησε διαφοροποιημένους νευρώνες κυττάρων P19 και διερεύνησε τις νευροπροστατευτικές ανασταλτικές επιδράσεις της ακετυλοχολινεστεράσης από συνθετική L-Dopa και υδατικό εκχύλισμα σπόρων Mucuna pruriens. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το φυτικό εκχύλισμα παρουσίασε υποσχόμενα αποτελέσματα σε σύγκριση με την L-Dopa [6].
Αγοράστε τη δική σας κυτταρική γραμμή P19 σήμερα
Κύτταρα P19: P19: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
Αυτή η ενότητα άρθρων θα καλύψει μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα P19.
Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο Oncology Reports το 2017. Η μελέτη πρότεινε ότι οι σεξουαλικές ορμόνες της υπόφυσης καθοδηγούν την προσκόλληση, τον πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση των κυτταρικών σειρών τερατοκαρκινώματος, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων P19.
Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό Experimental & Molecular Medicine (2018) χρησιμοποίησε κύτταρα P19 και μελέτησε τη λειτουργία του μακρού μη κωδικοποιητικού RNA uc.4. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι το uc.4 επηρεάζει την κυτταρική διαφοροποίηση μέσω της διαμόρφωσης της σηματοδοτικής οδού TGF βήτα.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2018 στο Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. Η μελέτη διαπίστωσε ότι το φυσικό εκχύλισμα εγκεφαλικού ιστού και η τρισδιάστατη κυτταρική καλλιέργεια μπορούν να επιταχύνουν τη διαφοροποίηση των κυττάρων του εμβρυϊκού καρκινώματος P19 σε νευρικά κύτταρα.
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο Journal of Ethnopharmacology το 2020. Η μελέτη πρότεινε ότι το εκχύλισμα φύλλων του Cichorium intybus L. μπορεί να επάγει τη διαφοροποίηση σε κύτταρα εμβρυϊκού καρκινώματος P19 σε παγκρεατικά β κύτταρα που παράγουν ινσουλίνη.
Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε στο Molecules (2022). Αυτή η μελέτη διερεύνησε τις νευροπροστατευτικές και ανασταλτικές επιδράσεις της ακετυλοχολινεστεράσης του εκχυλίσματος σπόρων Mucuna pruriens σε νευρώνες κυττάρων P19.
Πηγές για την κυτταρική σειρά P19: P19: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν ορισμένοι πόροι σχετικά με τα κύτταρα P19.
- Πρωτόκολλο νευρωνικής διαφοροποίησης κυττάρων P19: Αυτό το άρθρο περιέχει πρωτόκολλο νευρωνικής διαφοροποίησης κυττάρων P19 και άλλες χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τη διαφοροποίηση των κυττάρων P19.
- Διαμόλυνση κυττάρων P19: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο διαμόλυνσης κυττάρων P19.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων p19.
- Κύτταρα P19: Αυτός ο δικτυακός τόπος περιέχει όλες τις χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά P19, συμπεριλαμβανομένων των συνθηκών καλλιέργειάς της, των μέσων καλλιέργειας των κυττάρων P19, του διαχωρισμού των κυττάρων και πολλά άλλα.
Εξερεύνηση της κυτταρικής γραμμής P19: P19: Συχνές Ερωτήσεις
Αναφορές
- McBurney, M.W., Κύτταρα εμβρυϊκού καρκινώματος P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., et al., P19 Embryonic Carcinoma Cell Line: A Model To Study Gene-Environment Interactions. Cell Culture Techniques, 2011: σ. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey, and G. Rödel, Mitochondrial ROS direct the differentiation of murine pluripotent P19 cells. Stem Cell Research, 2018. 30: p. 180-191.
- Fu, F., et al., Το all-trans-ρετινοειδές οξύ επάγει τη διαφοροποίηση των κυττάρων P19 σε νευρώνες που εμπλέκονται στο μονοπάτι σηματοδότησης PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., Το μακρύ μη κωδικοποιούμενο RNA SNHG6 συμβάλλει στον σχηματισμό κοιλιακού διαφραγματικού ελλείμματος μέσω αρνητικής ρύθμισης του miR-101 και ενεργοποίησης του μονοπατιού Wnt/β-κατενίνης. Die Pharmazie-An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2019. 74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., Mucuna pruriens seed aqueous extract improved neuroprotective and acetylcholinesterase inhibitory effects compared with synthetic L-dopa. Molecules, 2022. 27(10): p. 3131.