Αυτή η έτοιμη προς χρήση, αποστειρωμένη και φιλτραρισμένη υγρή σύνθεση συμπληρώνεται με το ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα του Earle (EBSS), 2 mM L-γλουταμίνη, D-γλυκόζη (1,0 g/L) και 2,2 g/L διττανθρακικό νάτριο (NaHCO3), καθιστώντας την κατάλληλη για χρήση σε ατμόσφαιρα επωαστήρα ελεγχόμενη ως προς το CO2 (συνήθως 5 % CO2). Η φαινόλη κόκκινη που περιλαμβάνεται λειτουργεί ως δείκτης pH, επιτρέποντας την εύκολη οπτική παρακολούθηση της κατάστασης του μέσου κατά τη διάρκεια της κυτταρικής καλλιέργειας.
Βασικά χαρακτηριστικά
Κλασική σύνθεση MEM του Eagle με ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα Earle (EBSS)
Περιλαμβάνεται 2 mM L-γλουταμίνη – έτοιμο για άμεση χρήση
2,2 g/L διττανθρακικό νάτριο – ρυθμισμένο για επώαση σε 5 % CO2
Με D-γλυκόζη (1,0 g/L) ως κύρια πηγή άνθρακα
Με φαινόλη κόκκινη ως δείκτη pH
Χωρίς HEPES και χωρίς πυρουβικό νάτριο
Στεγνό-φιλτραρισμένο υγρό μέσο, έτοιμο προς χρήση
pH 7,0 – 7,6
Τυπικές εφαρμογές
Το EMEM υποστηρίζει την καλλιέργεια μιας ευρείας ποικιλίας κυτταρικών σειρών θηλαστικών, συμπεριλαμβανομένων των HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 και πολλών πρωτογενών κυττάρων. Οι συνήθεις εφαρμογές περιλαμβάνουν:
Τακτική συντήρηση και επέκταση προσκολλητικών κυτταρικών σειρών
Ροές εργασίας για τον πολλαπλασιασμό ιών και την παραγωγή εμβολίων
Εφαρμογές κυτταροτοξικότητας και βιοδοκιμών
Μελέτες μεταφοράς γονιδίων και έκφρασης πρωτεϊνών
Βασική έρευνα στην κυτταρική βιολογία και τη μοριακή βιολογία
Για βέλτιστη κυτταρική ανάπτυξη, το EMEM συμπληρώνεται συνήθως με 5–10 % εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS) και, ανάλογα με τη κυτταρική σειρά, με μη απαραίτητα αμινοξέα (NEAA) και αντιβιοτικά όπως πενικιλλίνη/στρεπτομυκίνη.
Χειρισμός και αποθήκευση
Αποθηκεύστε το κλειστό φιαλίδιο σε θερμοκρασία +2 °C έως +8 °C, προστατευμένο από το φως. Μετά το άνοιγμα, χρησιμοποιήστε το υπό ασηπτικές συνθήκες. Η L-γλουταμίνη σε διάλυμα υπόκειται σε σταδιακή αποικοδόμηση – συνιστούμε να χρησιμοποιήσετε το μέσο εντός 4 εβδομάδων από το άνοιγμα για βέλτιστη απόδοση ή να το συμπληρώσετε με φρέσκια L-γλουταμίνη πριν από τη χρήση, εάν αποθηκευτεί για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα. Αφήστε το μέσο να ζεσταθεί στους 37 °C πριν το προσθέσετε στα κύτταρα.
Ποιότητα
Παρασκευάζεται σύμφωνα με αυστηρά πρότυπα ποιότητας. Κάθε παρτίδα ελέγχεται ως προς τη στειρότητα, το pH, την οσμωτικότητα και τα επίπεδα ενδοτοξινών, προκειμένου να διασφαλίζεται σταθερή απόδοση σε εφαρμογές κυτταροκαλλιέργειας.
Προδιαγραφές προϊόντος
Προδιαγραφές
Λεπτομέρεια
Τύπος προϊόντοςMEM
Κατηγορία προϊόντοςΜέσα κυτταρικής καλλιέργειας
ΜορφήΥγρό
ΑποστειρωμένοΝαι
Μέγεθος500 ml
L-γλουταμίνηΜε L-γλουταμίνη (2 mM)
ΓλυκόζηΜε γλυκόζη (1,0 g/L)
Διττανθρακικό νάτριοΜε NaHCO3 (2,2 g/L)
HEPESΧωρίς HEPES
Πυρουβικό νάτριοΧωρίς πυρουβικό νάτριο
Φαινόλη κόκκινηΜε φαινόλη κόκκινη
Διάλυμα αλατιούΙσορροπημένο διάλυμα αλατιού Earle (EBSS)
pH7,0 – 7,6
Περιεκτικότητα σε ενδοτοξίνεςΔεν προσδιορίζεται
Αποθήκευση+2 °C έως +8 °C
Σύνθεση (Σύνθεση ανά λίτρο)
Συστατικό
Συγκέντρωση (mg/L)
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο · 2H2O265,00
Θειικό μαγνήσιο97,72
Χλωριούχο κάλιο400,00
Χλωριούχο νάτριο6.800,00
Διυδροφωσφορικό νάτριο, άνυδρο122,00
Διτριχομαγνησικό νάτριο (NaHCO3)2.200,00
Αμινοξέα
L-αργινίνη · HCl126,00
L-Κυστίνη · 2HCl31,30
L-γλουταμίνη292,00
L-ιστιδίνη · HCl · H2O42,00
L-ισολευκίνη52,00
L-Λευκίνη52,00
L-λυσίνη · HCl72,50
L-μεθειονίνη15,00
L-φαινυλαλανίνη32,00
L-θρεονίνη48,00
L-Τρυπτοφάνη10,00
L-τυροσίνη · 2Na · 2H2O51,90
L-βαλίνη46,00
Βιταμίνες
D-Παντοθενικό ασβέστιο1,00
Χλωριούχο χολίνη1,00
Φολικό οξύ1,00
Μυο-ινοσιτόλη2,00
Νικοτιναμίδη1,00
Πυριδοξάλη · HCl1,00
Ριβοφλαβίνη0,10
Θειαμίνη · HCl1,00
Άλλα συστατικά
D(+)-Γλυκόζη1.000,00
Φαινολικό κόκκινο10,00
Το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) Medium είναι προσεκτικά διαμορφωμένο για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών καλλιέργειας κυττάρων. Διαθέτει εμπλουτισμένη σύνθεση, παρέχοντας αυξημένα επίπεδα βασικών συστατικών, όπως αμινοξέα και πυρουβικό νάτριο, καθώς και πρόσθετα στοιχεία, όπως πουτρεσκίνη, θυμιδίνη, υποξανθίνη και ψευδάργυρο. Αυτές οι προσθήκες επιτρέπουν στους ερευνητές να συμπληρώνουν το μέσο με ελάχιστο ορό ή καθορισμένα συστατικά για συγκεκριμένους κυτταρικούς τύπους, διευκολύνοντας ακριβείς πειραματικές συνθήκες.
Ειδικότερα, το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) δεν περιέχει πρωτεΐνες ή αυξητικούς παράγοντες. Κατά συνέπεια, η συμπλήρωση με αυξητικούς παράγοντες και ορό εμβρύου βοοειδών (FBS) είναι συχνά απαραίτητη, επιτρέποντας στους ερευνητές να προσαρμόσουν το μέσο στις απαιτήσεις των συγκεκριμένων κυτταρικών σειρών τους. Για βέλτιστη απόδοση, η συγκέντρωση του FBS πρέπει να βελτιστοποιείται προσεκτικά για κάθε κυτταρική σειρά, εξασφαλίζοντας τη βέλτιστη ανάπτυξη και λειτουργικότητα.
Για τη διατήρηση του φυσιολογικού pH, το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) χρησιμοποιεί ρυθμιστικό σύστημα διττανθρακικού νατρίου (2,5 g/L), καθιστώντας απαραίτητο ένα ελεγχόμενο περιβάλλον 5-10% CO2 κατά τη διάρκεια της καλλιέργειας. Αυτό διασφαλίζει ότι το pH του μέσου παραμένει εντός του ιδανικού εύρους για την ανάπτυξη και τη βιωσιμότητα των κυττάρων
Ποιοτικός έλεγχος
pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη καθώς και η θέρμανση έως τους +37°C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής οποιουδήποτε μέσου εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.
Σύνθεση
Συστατικά
mg/L
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2H2O
135,24
Θειικός χαλκός(ΙΙ) x 5H2O
0,00
Θειικός σίδηρος (ΙΙ) x 7H2O
0,83
Χλωριούχο μαγνήσιο x 6H2O
105,72
Θειικό μαγνήσιο x 7H2O
394,49
Χλωριούχο κάλιο
283,29
Φωσφορικό διυδρογόνο κάλιο
58,52
Χλωριούχο νάτριο
7597,20
φωσφορικό δινατριούχο νάτριοάνυδρο
115,02
Θειικός ψευδάργυρος x 7H2O
0,14
Άλλα συστατικά
D(+)-γλυκόζη άνυδρη
1260,00
Υποξανθίνη
4,08
DL-α-λιποϊκό οξύ
0,21
Κόκκινη φαινόλη
3,00
Πουτρεσκίνη x 2HCl
0,32
Πυρουβικό νάτριο
220,00
NaHCO3
2500,00
Θυµιδίνη
0,73
Αμινοξέα
L-αλανίνη
17,82
L-αργινίνη x HCl
421,40
L-ασπαραγίνη x H2O
30,02
L-ασπαρτικό οξύ
26,62
L-κυστεΐνη x HCl x H2O
70,24
L-Γλουταμίνη
292,20
L-γλουταμινικό οξύ
29,42
Γλυκίνη
15,01
L-ιστιδίνη x HCl x H2O
41,92
L-ισολευκίνη
7,87
L-λευκίνη
26,24
L-Λυσίνη x HCl
73,04
L-μεθειονίνη
8,95
L-φαινυλαλανίνη
9,91
L-προλίνη
69,06
L-Σερίνη
21,02
L-θρεονίνη
23,82
L-Τρυπτοφάνη
4,08
L-τυροσίνη
10,87
L-Βαλίνη
23,42
Βιταμίνες
D(+)-Βιοτίνη
0,07
D-παντοθενικό ασβέστιο
0,48
Χλωριούχο χολίνη
13,96
Φολικό οξύ
1,32
μυο-ινοσιτόλη
18,02
Νικοτιναμίδιο
0,04
Πυριδοξίνη x HCl
0,06
Ριβοφλαβίνη
0,04
Θειαμίνη x HCl
0,34
Βιταμίνη Β12
1,36
Αρχικά σχεδιασμένο για την υποστήριξη της ανάπτυξης ανθρώπινων λευχαιμικών κυττάρων τόσο σε καλλιέργειες εναιωρήματος όσο και σε μονοστρωματικές καλλιέργειες, το μέσο RPMI 1640 έχει εξελιχθεί μέσω τροποποιήσεων από ερευνητές και εμπορικούς προμηθευτές ώστε να καταστεί κατάλληλο για ένα ευρύ φάσμα κυττάρων θηλαστικών. Είναι εξαιρετικά συμβατό με κυτταρικές σειρές όπως HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, αστροκύτταρα και καρκινώματα.
Το μέσο RPMI 1640 Medium ξεχωρίζει από άλλα μέσα κυτταροκαλλιέργειας λόγω της μοναδικής του σύνθεσης. Περιέχει σημαντική ποσότητα φωσφορικών αλάτων, αμινοξέων και βιταμινών. Ειδικότερα, περιλαμβάνει βιοτίνη, βιταμίνη Β12 και PABA, που απουσιάζουν από το Minimal Essential Medium του Eagle ή το Dulbecco's Modified Eagle Medium. Επιπλέον, το μέσο RPMI 1640 παρουσιάζει σημαντικά αυξημένες συγκεντρώσεις βιταμινών ινοσιτόλης και χολίνης. Ωστόσο, δεν περιέχει πρωτεΐνες, λιπίδια ή αυξητικούς παράγοντες. Κατά συνέπεια, απαιτείται συνήθως η συμπλήρωση με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS) για την παροχή βέλτιστων συνθηκών για την ανάπτυξη των κυττάρων.
Το ρυθμιστικό σύστημα του RPMI 1640 Medium βασίζεται στο διττανθρακικό νάτριο και απαιτεί ένα περιβάλλον 5-10% CO2 για τη διατήρηση ενός φυσιολογικά κατάλληλου pH. Η συμπερίληψη του αναγωγικού παράγοντα γλουταθειόνη διακρίνει περαιτέρω αυτό το μέσο από άλλα.
Ποιοτικός έλεγχος
Αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Φυλάσσεται στους +2°C έως +8°C, προστατευμένο από το φως.
Μόλις ανοιχτεί, αποθηκεύστε στους 4°C και χρησιμοποιήστε το εντός 6-8 εβδομάδων.
Συνθήκες αποστολής
Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
Κατηγορία
Συστατικά
Συγκέντρωση (mg/L)
Αμινοξέα
Γλυκίνη
10.00
L-αλανυλο-L-γλουταμίνη
434.40
L-αργινίνη
200.00
L-ασπαραγίνηH2O
56.82
L-ασπαρτικό οξύ
20.00
L-Κυστίνη 2HCl
65.20
L-γλουταμινικό οξύ
20.00
L-ιστιδίνη HClH2O
20.27
L-Υδροξυ-L-προλίνη
20.00
L-Ισολευκίνη
50.00
L-λευκίνη
50.00
L-Λυσίνη HCl
40.00
L-μεθειονίνη
15.00
L-Φενυλαλανίνη
15.00
L-προλίνη
20.00
L-σερίνη
30.00
L-θρεονίνη
20.00
L-Τρυπτοφάνη
5.00
L-Τυροσίνη 2Na 2H2O
28.83
L-Βαλίνη
20.00
Βιταμίνες
p-αμινοβενζοϊκό οξύ
1.00
D-Biotin
0.20
Χλωριούχο χολίνη
3.00
Παντοθενικό D-ασβέστιο
0.25
Φολικό οξύ
1.00
myo-Ινοσιτόλη
35.00
Νικοτιναμίδιο
1.00
Πυριδοξίνη HCl
1.00
Ριβοφλαβίνη
0.20
Θειαμίνη HCl
1.00
Βιταμίνη Β12
0.005
Ανόργανα άλατα
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Άλλα συστατικά
D-γλυκόζη
2000.00
L-γλουταθειόνη μειωμένη
1.00
Κόκκινο νατριούχο άλας φαινόλης
5.30
Αυτό το μοναδικό σκεύασμα συνδυάζει Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) και Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) σε ακριβή αναλογία 1:1. Η προσθήκη L-γλουταμίνης ενισχύει περαιτέρω τη σύνθεσή του.
Το DMEM, που προέρχεται από το Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), προσφέρει αυξημένη συγκέντρωση αμινοξέων και βιταμινών σε σύγκριση με τον προκάτοχό του. Αντίθετα, το Ham's F-12 βασίζεται στο μέσο Ham's F-10, παρέχοντας ένα συμπληρωματικό σύνολο βασικών συστατικών.
Για την υποστήριξη της βέλτιστης ανάπτυξης των κυττάρων, είναι κοινή πρακτική να συμπληρώνεται το DMEM:Ham's F12 με FBS σε τυπική συγκέντρωση 5-10%. Η προσθήκη αυτή είναι απαραίτητη, καθώς το μέσο στερείται αυξητικών ορμονών, λιπιδίων και πρωτεϊνών ζωτικής σημασίας για την κυτταρική ανάπτυξη.
Η DMEM:Ham's F12 ενσωματώνει ένα ρυθμιστικό σύστημα pH και συχνά συμπληρώνεται με κόκκινο της φαινόλης, έναν δείκτη pH. Τα καλλιεργούμενα κύτταρα σε DMEM:Ham's F12 ή σε οποιοδήποτε μέσο που χρησιμοποιεί το ρυθμιστικό σύστημα διττανθρακικών, απαιτούν ελεγχόμενο περιβάλλον CO2 5-10% για τη διατήρηση των κατάλληλων επιπέδων pH.
Ποιοτικός έλεγχος
Αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Φυλάσσεται στους +2°C έως +8°C, προστατευμένο από το φως.
Μόλις ανοιχτεί, αποθηκεύστε στους 4°C και χρησιμοποιήστε το εντός 6-8 εβδομάδων.
Συνθήκες αποστολής
Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
Κατηγορία
Συστατικά
Συγκέντρωση (mg/L)
Αμινοξέα
Γλυκίνη
18.75
L-αλανίνη
4.45
L-αργινίνη HCl
147.50
L-ασπαραγίνη H₂O
7.50
L-ασπαρτικό οξύ
6.65
L-κυστεΐνη HCl H₂O
17.56
L-Κυστίνη 2 HCl
31.29
L-γλουταμινικό οξύ
7.35
L-Γλουταμίνη
365.00
L-ιστιδίνη HCl H₂O
31.48
L-Ισολευκίνη
54.47
L-λευκίνη
59.05
L-Λυσίνη HCl
91.25
L-μεθειονίνη
17.24
L-φαινυλαλανίνη
35.48
L-προλίνη
17.25
L-Σερίνη
26.25
L-θρεονίνη
53.45
L-Τρυπτοφάνη
9.02
L-Τυροσίνη Δισόξινο άλας
48.10
L-βαλίνη
52.85
Βιταμίνες
D-Biotin
0.0035
Χλωριούχος χολίνη
8.98
Παντοθενικό D-ασβέστιο
2.24
Φολικό οξύ
2.66
myo-Ινοσιτόλη
12.60
Νικοτιναμίδιο
2.02
Πυριδοξίνη HCl
0.031
Πυριδοξαλικό HCl
2.00
Ριβοφλαβίνη
0.219
Θειαμίνη HCl
2.17
Βιταμίνη Β12
0.68
Ανόργανα άλατα
CaCl₂ 2 H₂O
154.50
CuSO₄ 5 H₂O
0.0013
Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05
FeSO₄ 7 H₂O
0.417
KCl
311.80
MgCl₂ 6 H₂O
61.20
MgSO₄
48.84
NaCl
6996.00
NaHCO₃
1200.00
Na₂HPO₄
71.02
NaH₂PO₄
54.30
ZnSO₄ 7 H₂O
0.432
Άλλα συστατικά
D-γλυκόζη
3151.00
Υποξανθίνη
2.40
HEPES
3574.50
Λινολεϊκό οξύ
0.042
Λιποϊκό οξύ
0.105
Κόκκινο νατριούχο άλας φαινόλης
8.63
Πουτρεσκίνη 2 HCl
0.081
Πυρουβικό νάτριο
55.00
Θυµιδίνη
0.365
- 0,02 στους 20-25 °C. Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκόπλασμα και βακτηρίων. Συντήρηση Φυλάσσεται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C, σε σκοτεινό μέρος. Η κατάψυξη και η θέρμανση σε θερμοκρασία +37°C μειώνουν την ποιότητα του προϊόντος. Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία μεγαλύτερη από 37°C και μην χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. φούρνους μικροκυμάτων). Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την ποσότητα αυτή από το μπουκάλι και θερμάνετε την σε θερμοκρασία δωματίου. Η διάρκεια ζωής για όλα τα μέσα εκτός από το βασικό μέσο είναι 6 έως 8 εβδομάδες από την ημερομηνία ανοίγματος. Σύνθεση Συστατικά mg/L Ανόργανα άλαταΧλωριούχο ασβέστιο x 2H2O132,0 Θειικό μαγνήσιο97,67 Χλωριούχο κάλιο400 Χλωριούχο νάτριο6.460 Υδρογενικό φωσφορικό νάτριο (άνυδρο)504,00 Άλλα συστατικάD(+)-Γλυκόζη (άνυδρη)3.000 Γλουταθειόνη (αναγμένη)0 Πεπτόνη κρέατος600 Φαινόλη κόκκινη νάτριο άλας11 ΑμινοξέαL-αλανίνη13,36 L-αργινίνη x HCl42,14 L-ασπαραγίνη x H2O45,03 L-ασπαρτικό οξύ19,97 L-Κυστεΐνη x HCl x H2O31,75 L-γλουταμίνη (σταθερή)219,15 L-γλουταμινικό οξύ22,07 Γλυκίνη7,5 L-ιστιδίνη x HCl x H2O20,96 L-υδροξυπρολίνη19,67 L-ισολευκίνη39,36 L-Λευκίνη39,36 L-Λυσίνη x HCl36,54 L-Μεθειονίνη14,92 L-φαινυλαλανίνη16,52 L-προλίνη17,27 L-σερίνη26,28 L-Θρεονίνη17,87 L-Τρυπτοφάνη3,06 Δισόξινο άλας L-τυροσίνης26,10 L-βαλίνη17,57 Βιταμίνεςp-αμινοβενζοϊκό οξύ1 Ασκορβικό οξύ0,56 D(+)-Βιοτίνη0 D-παντοθενικό ασβέστιο0 Χλωριούχο χολίνη5 Φολικό οξύ10 Μυο-ινοσιτόλη36 Νικοτιναμίδιο0 Νικοτινικό οξύ0 Πυριδοξάλη HCl0,5 Πυριδοξίνη HCl0,5 Ριβοφλαβίνη0 Θειαμίνη HCl0 Βιταμίνη Β122,0
Το Medium 199 προσφέρει μια σειρά εφαρμογών στον τομέα. Μπορεί να διατηρήσει αποτελεσματικά το σύμπλεγμα σπερματοζωαρίου-ωοκυττάρων (COC) και να υποστηρίξει την in vitro ωρίμανση των ωαρίων. Επιπλέον, χρησιμοποιείται στην έκπλυση των γραμμών αναρρόφησης κατά τη συλλογή ωαρίων από γερμανικές αγελάδες Holstein. Επιπλέον, το Medium 199 χρησιμεύει ως εξαιρετικό μέσο για την καλλιέργεια καρδιακών ενδοθηλιακών κυττάρων που προέρχονται από αρουραίους. Οι εφαρμογές αυτές καταδεικνύουν την ευελιξία και την προσαρμοστικότητα του Medium 199 σε διάφορες πειραματικές ανάγκες.
Ιστορικό
Η ανάπτυξη του Medium 199 στη δεκαετία του 1950 σηματοδότησε σημαντική πρόοδο στα μέσα καλλιέργειας ιστών. Πριν από την εισαγωγή του, πολλά μέσα καλλιέργειας βασίζονταν σε προϊόντα ζωικής προέλευσης και εκχυλίσματα ιστών. Ωστόσο, ο Morgan και οι συνεργάτες του έφεραν επανάσταση στον τομέα διατυπώνοντας μια πλήρως καθορισμένη θρεπτική πηγή για κυτταροκαλλιέργειες. Μέσω των πειραμάτων τους που αφορούσαν διαφορετικούς συνδυασμούς βιταμινών, αμινοξέων και άλλων παραγόντων, ανακάλυψαν τις εξαιρετικές ιδιότητες του Medium 199 που προάγουν την ανάπτυξη.
Ποιοτικός έλεγχος
pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη και η θέρμανση έως τους +37° C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37° C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής για οποιοδήποτε μέσο εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.
Σύνθεση
Συστατικά
mg/L
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2H2O
264,92
Νιτρικός σίδηρος (III) x 9H2O
0,72
Θειικό μαγνήσιο
97,67
Χλωριούχο κάλιο
400,00
Οξικό νάτριο x 3H2O
82,95
Χλωριούχο νάτριο
6,800.00
Φωσφορικό διυδρογόνο νάτριο x H2O
140,00
Άλλα συστατικά
Θειική αδενίνη
10,00
AMP
0,20
ATP
1,00
Χοληστερόλη
0,20
2'-Δεοξυριβόζη
0,50
D(+)-Γλυκόζη άνυδρη
1,000.00
Γλουταθειόνη (ερυθρή)
0,05
Γουανίνη x HCl
0,30
Υποξανθίνη
0,30
Κόκκινη φαινόλη
10,00
D-Ribose
0,50
Θυμίνη
0,30
Tween 80
4,90
Ουρακίλ
0,30
Ξανθίνη
0,30
NaHCO3
2,200.00
Αμινοξέα
L-αλανίνη
25,00
L-αργινίνη x HCl
70,00
L-ασπαρτικό οξύ
30,00
L-κυστεΐνη x HCl x H2O
0,10
L-κυστίνη
20,00
Σταθερή L-Γλουταμίνη
149,00
L-γλουταμινικό οξύ
67,00
Γλυκίνη
50,00
L-ιστιδίνη x HCl x H2O
21,88
L-υδροξυπρολίνη
10,00
L-ισολευκίνη
20,00
L-λευκίνη
60,00
L-Λυσίνη x HCl
70,00
L-μεθειονίνη
15,00
L-Φενυλαλανίνη
25,00
L-προλίνη
40,00
L-Σερίνη
25,00
L-Θρεονίνη
30,00
L-Τρυπτοφάνη
10,00
L-Τυροσίνη
40,00
L-Βαλίνη
25,00
Βιταμίνες
4-Αμινοβενζοϊκό οξύ
0,05
Ασκορβικό οξύ
0,05
D(+)-Βιοτίνη
0,01
Καλσιφερόλη
0,10
D-παντοθενικό ασβέστιο
0,01
Χλωριούχος χολίνη
0,50
Φολικό οξύ
0,01
myo-Ινοσιτόλη
0,05
Μεναδιόνη
0,01
Νικοτινικό οξύ
0.025
Νικοτιναμίδιο
0.025
Πυριδοξάλη x HCl
0.025
Πυριδοξόλη x HCl
0.025
Ριβοφλαβίνη
0,01
DL-α-τοκοφερόλη φωσφορικό δινάτριο άλας
0,01
Θειαμίνη x HCl
0,01
Οξική βιταµίνη Α
0,14
Το IMDM είναι κατάλληλο για ταχέως πολλαπλασιαζόμενες καλλιέργειες κυττάρων υψηλής πυκνότητας, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων Jurkat, COS-7 και μακροφάγων. Οι διάφορες τροποποιήσεις του IMDM που διατίθενται για μια σειρά εφαρμογών κυτταροκαλλιέργειας μπορούν να βρεθούν χρησιμοποιώντας το εργαλείο επιλογής μέσων. Τα υγρά μέσα παρέχουν βασικά θρεπτικά συστατικά για όλες τις εφαρμογές κυτταροκαλλιέργειας. Κάθε ένα από τα υψηλής ποιότητας μέσα κυτταροκαλλιέργειας που διαθέτουμε παρασκευάζεται σύμφωνα με τον αρχικά δημοσιευμένο τύπο ή τις τροποποιήσεις που είναι απαραίτητες για τη συνεπή απόδοση και σταθερότητα του μέσου καλλιέργειας.
IMDM έναντι DMEM
Το IMDM περιέχει νιτρικό κάλιο αντί για νιτρικό σίδηρο και HEPES και πυρουβικό νάτριο. Τα πρόσθετα συστατικά στο IMDM το καθιστούν καταλληλότερο για εξειδικευμένους τύπους κυττάρων και ειδικές εφαρμογές από ό,τι το DMEM.
IMDM έναντι RPMI
Το IMDM και το RPMI έχουν διαφορετικές συνθέσεις που μπορεί να έχουν σημασία για τη διέγερση με PMA/ιονομυκίνη. Μια σημαντική διαφορά είναι η συγκέντρωση του Ca2+. Ενώ το RPMI περιέχει 0,42 mM Ca2+, το IMDM περιέχει 1,49 mM.
Ποιοτικός έλεγχος
pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη και η θέρμανση έως τους +37° C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37° C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής για οποιοδήποτε μέσο εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.
Σύνθεση
Συστατικά
mg/L
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2 H2O
219,00
Χλωριούχο κάλιο
330,00
Νιτρικό κάλιο
0.076
Θειικό μαγνήσιο άνυδρο
97,73
Χλωριούχο νάτριο
4,505.00
Φωσφορικό διυδρογόνο νάτριο άνυδρο
109,00
Σεληνιούχο νάτριο
0,02
Άλλα συστατικά
D(+)-γλυκόζη άνυδρη
4,500.00
HEPES
5,958.00
Πυρουβικό νάτριο
110,00
Κόκκινη φαινόλη
15,00
Αμινοξέα
L-αλανίνη
25,00
L-αργινίνη x HCl
84,00
L-ασπαραγίνη x H2O
25,00
L-ασπαρτικό οξύ
30,00
L-Κυστίνη x 2HCl
91,24
L-Γλουταμίνη
584,00
L-γλουταμινικό οξύ
75,00
Γλυκίνη
30,00
L-ιστιδίνη x HCl x H2O
42,00
L-ισολευκίνη
104,80
L-λευκίνη
104,80
L-Λυσίνη x HCl
146,20
L-μεθειονίνη
30,00
L-Φενυλαλανίνη
66,00
L-προλίνη
40,00
L-Σερίνη
42,00
L-Θρεονίνη
95,20
L-Τρυπτοφάνη
16,00
L-Τυροσίνη x 2Na
104,20
L-Βαλίνη
93,60
Βιταμίνες
D(+)-Βιοτίνη
0.013
D-παντοθενικό ασβέστιο
4,00
Χλωριούχος χολίνη
4,00
Φολικό οξύ
4,00
myo-Ινοσιτόλη
7,20
Ένα από τα αξιοσημείωτα πλεονεκτήματά του είναι η ικανότητα υποστήριξης της ανάπτυξης των κυττάρων χωρίς την ανάγκη συμπλήρωσης ορού. Αυτό εξαλείφει τις πιθανές παρεμβολές που προκαλούνται από τα συστατικά του ορού, εξασφαλίζοντας συνεπή και αξιόπιστα πειραματικά αποτελέσματα. Παρέχοντας ένα περιβάλλον καλλιέργειας χωρίς ορό, το Ham's F-12 Medium προσφέρει στους ερευνητές μεγαλύτερο έλεγχο των ερευνών τους.
Ένα άλλο βασικό χαρακτηριστικό του Ham's F-12 Medium είναι η καταλληλότητά του για επιμερισμό μεμονωμένων κυττάρων. Αυτό το καθιστά εξαιρετική επιλογή για μια ποικιλία κυτταρικών σειρών, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων CHO, των κυττάρων του πνεύμονα και των κυττάρων L του ποντικού. Η βελτιστοποιημένη σύνθεση θρεπτικών συστατικών του μέσου διευκολύνει την αποτελεσματική προσκόλληση και ανάπτυξη μεμονωμένων κυττάρων, επιτρέποντας τη δημιουργία ομοιογενών κυτταρικών καλλιεργειών με βελτιωμένη αναπαραγωγιμότητα.
Επιπλέον, το Ham's F-12 Medium έχει κερδίσει την αναγνώριση ως το προτιμώμενο μέσο για τη δοκιμασία κλωνικής τοξικότητας (CTA). Η δοκιμασία αυτή διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο στην αξιολόγηση των κυτταροτοξικών επιδράσεων ουσιών στα κύτταρα. Χρησιμοποιώντας το Ham's F-12 Medium στην CTA, οι ερευνητές μπορούν να αξιολογήσουν με ακρίβεια την επίδραση διαφόρων ενώσεων ή θεραπειών σε μεμονωμένα κύτταρα, παρέχοντας πολύτιμες πληροφορίες για το τοξικολογικό προφίλ.
Ποιοτικός έλεγχος
pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη και η θέρμανση έως τους +37° C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37° C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής για οποιοδήποτε μέσο εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.
Σύνθεση
Συστατικά
mg/L
Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2H2O
44,00
Θειικός χαλκός(ΙΙ) x 5H2O
0,00
Θειικός σίδηρος (ΙΙ) x 7H2O
0,83
Χλωριούχο μαγνήσιο x 6H2O
122,00
Χλωριούχο κάλιο
223,65
Χλωριούχο νάτριο
7599,00
φωσφορικό δινάτριοάνυδρο
142,04
Θειικός ψευδάργυρος x 7H2O
0,86
Άλλα συστατικά
D(+)-γλυκόζη άνυδρη
1801,60
Υποξανθίνη
4,08
Λινολεϊκό οξύ
0,08
DL-α-λιποϊκό οξύ
0,21
Κόκκινη φαινόλη
1,20
Πουτρεσκίνη x 2HCl
0,16
Πυρουβικό νάτριο
110,00
Θυµιδίνη
0,73
NaHCO3
1176,00
Αμινοξέα
L-αλανίνη
8,91
L-αργινίνη x HCl
210,70
L-ασπαραγίνη x H2O
15,01
L-ασπαρτικό οξύ
13,31
L-κυστεΐνη x HCl x H2O
35,12
L-αλανυλο-L-γλουταμίνη
217,30
L-γλουταμινικό οξύ
14,71
Γλυκίνη
7,51
L-ιστιδίνη x HCl x H2O
20,96
L-ισολευκίνη
3,94
L-λευκίνη
13,12
L-Λυσίνη x HCl
36,54
L-μεθειονίνη
4,48
L-φαινυλαλανίνη
4,96
L-προλίνη
34,53
L-σερίνη
10,51
L-θρεονίνη
11,91
L-Τρυπτοφάνη
2,04
L-τυροσίνη
5,44
L-Βαλίνη
11,71
Βιταμίνες
D(+)-Βιοτίνη
0,01
D-παντοθενικό ασβέστιο
0,24
Χλωριούχο χολίνη
13,96
Φολικό οξύ
1,32
μυο-ινοσιτόλη
18,02
Νικοτιναμίδιο
0,04
Πυριδοξίνη x HCl
0,06
Ριβοφλαβίνη
0,04
Θειαμίνη x HCl
0,34
Βιταμίνη Β12
1,36
Αυτό που κάνει το DMEM να ξεχωρίζει από άλλα μέσα είναι η μοναδική του σύνθεση. Περιέχει εντυπωσιακή τετραπλάσια συγκέντρωση αμινοξέων και βιταμινών σε σύγκριση με το αρχικό Eagle's Minimal Essential Medium. Αρχικά αναπτύχθηκε με χαμηλή γλυκόζη (1 g/L) και πυρουβικό νάτριο, το DMEM χρησιμοποιείται συχνά με υψηλότερα επίπεδα γλυκόζης, είτε με είτε χωρίς πυρουβικό νάτριο. Ειδικότερα, το DMEM δεν περιέχει πρωτεΐνες, λιπίδια ή αυξητικούς παράγοντες, γεγονός που καθιστά αναγκαία τη συμπλήρωση. Για την επίτευξη βέλτιστης ανάπτυξης, μια συνήθης προσέγγιση είναι η συμπλήρωση της DMEM με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS). Επιπλέον, η DMEM χρησιμοποιεί ένα ρυθμιστικό σύστημα διττανθρακικού νατρίου, απαιτώντας ένα περιβάλλον 5-10% CO2 για τη διατήρηση ενός φυσιολογικού pH.
Το Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) είναι ιδιαίτερα αναγνωρισμένο μεταξύ των καθορισμένων μέσων για την καλλιέργεια κυττάρων και ιστών, καλύπτοντας τις ανάγκες ανάπτυξης διαφόρων φαινοτύπων προσκολλημένων κυττάρων. Υπερτερεί του αρχικού Eagle's Medium, που αναπτύχθηκε τη δεκαετία του 1950 για την καλλιέργεια κυττάρων κοτόπουλου, μέσω της ενισχυμένης συμπληρωματικής σύνθεσης που είναι γνωστή ως τροποποίηση Dulbecco. Αυτή η τροποποίηση αυξάνει σημαντικά την περιεκτικότητα σε επιλεγμένα αμινοξέα και βιταμίνες έως και τετραπλάσια σε σύγκριση με το αρχικό μέσο.
Στον τομέα της κυτταροκαλλιέργειας, το DMEM διαδραματίζει ζωτικό ρόλο ως μέσο ανάπτυξης για διάφορους τύπους κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των πρωτογενών κυττάρων, των βλαστικών κυττάρων και των μετασχηματισμένων κυττάρων. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν επίσης την τροποποιημένη έκδοση της DMEM για ένα ευρύ φάσμα ερευνητικών εφαρμογών, όπως η ανακάλυψη φαρμάκων, η μηχανική ιστών και η μελέτη των μονοπατιών κυτταρικής σηματοδότησης.
Ποιοτικός έλεγχος
Αποστειρωμένο φιλτραρισμένο
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Φυλάσσεται στους +2°C έως +8°C, προστατευμένη από το φως.
Μόλις ανοιχτεί, αποθηκεύστε στους 4°C και χρησιμοποιήστε το εντός 6-8 εβδομάδων.
Συνθήκες αποστολής
Θερμοκρασία περιβάλλοντος
Συντήρηση
Διατηρείται στο ψυγείο σε θερμοκρασία +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Αποφύγετε την κατάψυξη και τη συχνή θέρμανση στους +37°C, καθώς μειώνεται η ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο πάνω από τους 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας, όπως συσκευές μικροκυμάτων.
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε την απαιτούμενη ποσότητα και θερμάνετέ το σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
Σύνθεση
Κατηγορία
Συστατικά
Συγκέντρωση (mg/L)
Αμινοξέα
Γλυκίνη
30.00
L-αργινίνη HCl
84.00
L-Κυστίνη 2 HCl
62.57
L-Γλουταμίνη
584.00
L-ιστιδίνη HClH2O
42.00
L-Ισολευκίνη
105.00
L-λευκίνη
105.00
L-Λυσίνη HCl
146.00
L-μεθειονίνη
30.00
L-Φενυλαλανίνη
66.00
L-Σερίνη
42.00
L-Θρεονίνη
95.00
L-Τρυπτοφάνη
16.00
L-Τυροσίνη 2 Na 2H2O
103.79
L-Βαλίνη
94.00
Βιταμίνες
Χλωριούχος χολίνη
4.00
Παντοθενικό D-ασβέστιο
4.00
Φολικό οξύ
4.00
myo-Ινοσιτόλη
7.20
Νικοτιναμίδιο
4.00
Πυριδοξαλικό HCl
4.00
Ριβοφλαβίνη
0.40
Θειαμίνη HCl
4.00
Ανόργανα άλατα
CaCl2 2H2O
265.00
Fe(NO3)3 9H2O
0.10
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
NaCl
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
Άλλα συστατικά
D-γλυκόζη
4500.00
Κόκκινη φαινόλη Αλάτι νατρίου
15.90
Πυρουβικό νάτριο
110.00