EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Το Μέσο Ελάχιστων Απαραίτητων Συστατικών του Eagle (EMEM) είναι ένα από τα πιο ευρέως χρησιμοποιούμενα βασικά μέσα για την καλλιέργεια ενός ευρέος φάσματος κυττάρων θηλαστικών, ιδίως προσκολλητικών κυτταρικών σειρών. Αυτή η κλασική σύνθεση, που αναπτύχθηκε αρχικά από τον Harry Eagle, περιέχει τα απαραίτητα αμινοξέα, βιταμίνες και ανόργανα άλατα που απαιτούνται για την υποστήριξη της ανάπτυξης τόσο πρωτογενών κυττάρων όσο και καθιερωμένων κυτταρικών σειρών υπό τυπικές συνθήκες καλλιέργειας.
Αυτή η έτοιμη προς χρήση, αποστειρωμένη και φιλτραρισμένη υγρή σύνθεση συμπληρώνεται με το ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα του Earle (EBSS), 2 mM L-γλουταμίνη, D-γλυκόζη (1,0 g/L) και 2,2 g/L διττανθρακικό νάτριο (NaHCO3), καθιστώντας την κατάλληλη για χρήση σε ατμόσφαιρα επωαστήρα ελεγχόμενη ως προς το CO2 (συνήθως 5 % CO2). Η φαινόλη κόκκινη που περιλαμβάνεται λειτουργεί ως δείκτης pH, επιτρέποντας την εύκολη οπτική παρακολούθηση της κατάστασης του μέσου κατά τη διάρκεια της κυτταρικής καλλιέργειας.
Βασικά χαρακτηριστικά
- Κλασική σύνθεση MEM του Eagle με ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα Earle (EBSS)
- Περιλαμβάνεται 2 mM L-γλουταμίνη – έτοιμο για άμεση χρήση
- 2,2 g/L διττανθρακικό νάτριο – ρυθμισμένο για επώαση σε 5 % CO2
- Με D-γλυκόζη (1,0 g/L) ως κύρια πηγή άνθρακα
- Με φαινόλη κόκκινη ως δείκτη pH
- Χωρίς HEPES και χωρίς πυρουβικό νάτριο
- Στεγνό-φιλτραρισμένο υγρό μέσο, έτοιμο προς χρήση
- pH 7,0 – 7,6
Τυπικές εφαρμογές
Το EMEM υποστηρίζει την καλλιέργεια μιας ευρείας ποικιλίας κυτταρικών σειρών θηλαστικών, συμπεριλαμβανομένων των HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 και πολλών πρωτογενών κυττάρων. Οι συνήθεις εφαρμογές περιλαμβάνουν:
- Τακτική συντήρηση και επέκταση προσκολλητικών κυτταρικών σειρών
- Ροές εργασίας για τον πολλαπλασιασμό ιών και την παραγωγή εμβολίων
- Εφαρμογές κυτταροτοξικότητας και βιοδοκιμών
- Μελέτες μεταφοράς γονιδίων και έκφρασης πρωτεϊνών
- Βασική έρευνα στην κυτταρική βιολογία και τη μοριακή βιολογία
Για βέλτιστη κυτταρική ανάπτυξη, το EMEM συμπληρώνεται συνήθως με 5–10 % εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS) και, ανάλογα με τη κυτταρική σειρά, με μη απαραίτητα αμινοξέα (NEAA) και αντιβιοτικά όπως πενικιλλίνη/στρεπτομυκίνη.
Χειρισμός και αποθήκευση
Αποθηκεύστε το κλειστό φιαλίδιο σε θερμοκρασία +2 °C έως +8 °C, προστατευμένο από το φως. Μετά το άνοιγμα, χρησιμοποιήστε το υπό ασηπτικές συνθήκες. Η L-γλουταμίνη σε διάλυμα υπόκειται σε σταδιακή αποικοδόμηση – συνιστούμε να χρησιμοποιήσετε το μέσο εντός 4 εβδομάδων από το άνοιγμα για βέλτιστη απόδοση ή να το συμπληρώσετε με φρέσκια L-γλουταμίνη πριν από τη χρήση, εάν αποθηκευτεί για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα. Αφήστε το μέσο να ζεσταθεί στους 37 °C πριν το προσθέσετε στα κύτταρα.
Ποιότητα
Παρασκευάζεται σύμφωνα με αυστηρά πρότυπα ποιότητας. Κάθε παρτίδα ελέγχεται ως προς τη στειρότητα, το pH, την οσμωτικότητα και τα επίπεδα ενδοτοξινών, προκειμένου να διασφαλίζεται σταθερή απόδοση σε εφαρμογές κυτταροκαλλιέργειας.
Προδιαγραφές προϊόντος
| Προδιαγραφές | Λεπτομέρεια |
|---|---|
| Τύπος προϊόντος | MEM |
| Κατηγορία προϊόντος | Μέσα κυτταρικής καλλιέργειας |
| Μορφή | Υγρό |
| Αποστειρωμένο | Ναι |
| Μέγεθος | 500 ml |
| L-γλουταμίνη | Με L-γλουταμίνη (2 mM) |
| Γλυκόζη | Με γλυκόζη (1,0 g/L) |
| Διττανθρακικό νάτριο | Με NaHCO3 (2,2 g/L) |
| HEPES | Χωρίς HEPES |
| Πυρουβικό νάτριο | Χωρίς πυρουβικό νάτριο |
| Φαινόλη κόκκινη | Με φαινόλη κόκκινη |
| Διάλυμα αλατιού | Ισορροπημένο διάλυμα αλατιού Earle (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Περιεκτικότητα σε ενδοτοξίνες | Δεν προσδιορίζεται |
| Αποθήκευση | +2 °C έως +8 °C |
Σύνθεση (Σύνθεση ανά λίτρο)
| Συστατικό | Συγκέντρωση (mg/L) |
|---|---|
| Ανόργανα άλατα | |
| Χλωριούχο ασβέστιο · 2H2O | 265,00 |
| Θειικό μαγνήσιο | 97,72 |
| Χλωριούχο κάλιο | 400,00 |
| Χλωριούχο νάτριο | 6.800,00 |
| Διυδροφωσφορικό νάτριο, άνυδρο | 122,00 |
| Διτριχομαγνησικό νάτριο (NaHCO3) | 2.200,00 |
| Αμινοξέα | |
| L-αργινίνη · HCl | 126,00 |
| L-Κυστίνη · 2HCl | 31,30 |
| L-γλουταμίνη | 292,00 |
| L-ιστιδίνη · HCl · H2O | 42,00 |
| L-ισολευκίνη | 52,00 |
| L-Λευκίνη | 52,00 |
| L-λυσίνη · HCl | 72,50 |
| L-μεθειονίνη | 15,00 |
| L-φαινυλαλανίνη | 32,00 |
| L-θρεονίνη | 48,00 |
| L-Τρυπτοφάνη | 10,00 |
| L-τυροσίνη · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-βαλίνη | 46,00 |
| Βιταμίνες | |
| D-Παντοθενικό ασβέστιο | 1,00 |
| Χλωριούχο χολίνη | 1,00 |
| Φολικό οξύ | 1,00 |
| Μυο-ινοσιτόλη | 2,00 |
| Νικοτιναμίδη | 1,00 |
| Πυριδοξάλη · HCl | 1,00 |
| Ριβοφλαβίνη | 0,10 |
| Θειαμίνη · HCl | 1,00 |
| Άλλα συστατικά | |
| D(+)-Γλυκόζη | 1.000,00 |
| Φαινολικό κόκκινο | 10,00 |