RBL-2H3-Zellen - Bedeutung von RBL-2H3 bei allergischen Reaktionen und immunologischen Studien
Die RBL-2H3-Zelllinie ist eine von Ratten abgeleitete basophile Leukämiezelllinie, die in der immunologischen Forschung verwendet wird. Sie dient als Modellsystem für die Untersuchung der Physiologie, des Verhaltens und der Funktionen von Mastzellen. Diese Zellen werden auch zur Untersuchung allergischer Reaktionen, immunologischer Prozesse sowie zur Prüfung und Entwicklung von Arzneimitteln eingesetzt.
Der Artikel gibt einen Einblick in die Herkunft der RBL-2H3-Zellen, ihre allgemeinen Eigenschaften, Kulturanforderungen und Forschungsanwendungen.
RBL-2H3-Zellen: Herkunft und allgemeine Merkmale
Bevor Sie eine basophile Zelllinie in Ihrer Forschung verwenden, sollten Sie deren Herkunft und allgemeine Eigenschaften kennen. In diesem Abschnitt des Artikels werden Sie über die Grundlagen der RBL-2H3-Zellen informiert. Zum Beispiel: Was sind RBL-2H3-Mastzellen? Warum werden RBL-2H3-Zellen verwendet? Was sind RBL-2H3-Zellen bei der Rattenbasophilen Leukämie? Wie sieht die Morphologie der RBL-2H3-Zellen aus? Sind RBL-2H3-Zellen unsterblich?
- RBL-2H3 sind basophile Leukämiezellen, die 1978 am National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology aus basophilen Zellen der Wistar-Ratte gewonnen wurden.
- RBL-2H3-Zellen besitzen c-kit-Rezeptor-Tyrosinkinase- und Mastzellprotease-II (RMCP-II)-Rezeptoren, was sie zu einem potenziellen Mastmodell macht. Daher werden sie gemeinhin als Mastzellen bezeichnet, obwohl sie von Rattenbasophilen abstammen [1].
- Sie setzen bei Aktivierung Histamin und andere Mediatoren frei und exprimieren hochaffine IgE-Rezeptoren.
- RBL-2H3-Zellen weisen eine fibroblastenähnliche Morphologie auf.
RBL-2H3-Zellen: Informationen zur Kultivierung
In diesem Abschnitt erfahren Sie einige wichtige Aspekte zur Kultivierung der RBL-2H3-Zelllinie. Sie werden wissen: Was ist die RBL-2H3-Zellverdopplungszeit? Wie hoch ist die RBL-2H3-Zellaussaatdichte? Wie sieht das RBL-2H3-Zellkulturprotokoll aus? Was sind die Gefriermedien für RBL-2H3-Zelllinien?
Wichtige Punkte für die Kultivierung von RBL-2H3-Zellen
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Populationsverdopplungszeit: |
Die Verdopplungszeit der RBL-2H3-Mastzellen beträgt etwa 50 bis 60 Stunden. |
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Adhärent oder in Suspension: |
Die RBL-2H3 ist eine adhärente Zelllinie. |
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Subkultivierungsverhältnis: |
Bei RBL-2H3-Zellen wird das Teilungsverhältnis zwischen 1:2 und 1:4 beibehalten. Adhärente Zellen werden mit magnesium- und kalziumfreier 1 x PBS-Lösung gewaschen. Die Zellen werden 10 Minuten lang bei Raumtemperatur gehalten, damit sie sich vom Boden des Kulturgefäßes lösen. Frisches Medium wird zugegeben, und die Zellen werden zentrifugiert. Die geernteten Zellen werden vorsichtig in frischem Medium resuspendiert und in neue Flaschen mit Wachstumsmedium gefüllt. |
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Wachstumsmedium: |
Für die Kultur der RBL-2H3-Zellen wird EMEM-Medium mit 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 und EBSS-Salz verwendet. Das Medium sollte 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden. |
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Wachstumsbedingungen: |
RBL-2H3-Zellen werden in einem befeuchteten Inkubator bei einer Temperatur von 37 °C kultiviert, der an eine 5%igeCO2-Quelle angeschlossen ist. |
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Lagerung: |
Die Zellen werden in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder bei einer Temperatur unter -150 °C in einem elektrischen Gefrierschrank gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen langfristig zu erhalten. |
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Einfrierprozess und Medium: |
Zum Einfrieren von RBL-2H3-Zellen wird CM-1- oder CM-ACF-Gefriermedium in einem langsamen Gefrierprozess verwendet. Dieses Verfahren ermöglicht eine Temperaturabnahme von 1 °C pro Minute und schützt die Zellen vor einem Schock. |
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Auftauprozess: |
RBL-2H3-Zellen werden in einem voreingestellten Wasserbad (37 °C) für etwa 60 Sekunden aufgetaut. Anschließend werden die Zellen in frisches Kulturmedium gegeben und zentrifugiert. Dieser Schritt ist wichtig, um die Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen. Anschließend wird das Zellpellet in einem Wachstumsmedium resuspendiert, und die Zellen werden zur Kultivierung in eine Flasche gegeben. |
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Biosicherheitsstufe: |
Die RBL-2H3-Zellen sollten in Laboratorien der Biosicherheitsstufe 1 aufbewahrt werden. |
Vorteile und Beschränkungen der RBL-2H3 Basophilen-Zelllinie
RBL-2H3-Zellen werden in der immunologischen Forschung häufig verwendet. In diesem Abschnitt werden ihre wichtigsten Vorteile und Einschränkungen beschrieben.
Vorteile
- Einfach zu kultivieren: RBL-2H3-Zellen lassen sich in der Laborumgebung leicht kultivieren und pflegen. Dies erleichtert kostengünstige und reproduzierbare Experimente und macht sie zu einer beliebten Wahl für erste Studien in der Immunologie.
Beschränkungen
- Nicht-menschlicher Ursprung: Da RBL-2H3-Zellen von Rattenbasophilen abstammen, können sie menschliche biologische Prozesse nicht genau nachahmen, was ihre Anwendbarkeit in humanspezifischen Forschungsstudien einschränken kann. Dies erfordert eine vorsichtige Interpretation der Daten bei der Extrapolation der Ergebnisse auf menschliche Systeme.
- Vereinfachtes Mastzellenmodell: Diese Zellen stellen zwar ein grundlegendes Modell für die Untersuchung der Mastzellenfunktionen dar, sie repräsentieren jedoch nicht vollständig die komplexe Natur der Mastzelleninteraktionen innerhalb des menschlichen Immunsystems. Folglich können sie die vielfältigen Funktionen von Mastzellen bei Immunreaktionen oder Krankheitszuständen in vivo nicht adäquat modellieren.
RBL-2H3-Zelllinie: Ein Eckpfeiler in der immunologischen Forschung
Basophile und Mastzellenforschung unter Verwendung der RBL-2H3-Zelllinie
Die RBL-2H3-Zelllinie, die von Rattus norvegicus stammt, dient als Schlüsselmodell für die Untersuchung der Biologie von Basophilen und Mastzellen. Diese Rattenmastzellen liefern wesentliche Erkenntnisse über die Freisetzung von Mastzellmediatoren, die für das Verständnis allergischer Erkrankungen wie der allergischen Rhinitis entscheidend sind. Anhand dieser Zellen erforschen Forscher die Zellrezeptordynamik und die Bildung immunologischer Synapsen, die für die Reaktion des Immunsystems auf Allergene von zentraler Bedeutung sind. Eine interessante Studie, die 2019 veröffentlicht wurde, verwendete die RBL-2H3-Zelllinie und untersuchte die Mechanismen hinter pseudoallergischen Reaktionen, die durch eine Qingkailing-Injektion hervorgerufen werden. Die Studie ergab, dass die PI3K-RAC1-Signalkaskade diese allergische Reaktion in den Zellen teilweise auslöst [2]
Immunologische Synapsendynamik in der Allergieforschung
RBL-2H3-Zellen werden in der immunologischen Forschung häufig eingesetzt und eignen sich besonders gut für die Untersuchung der immunologischen Synapsendynamik. Dies trägt dazu bei, die Kommunikationsprozesse des Immunsystems zu erhellen, wobei sowohl periphere Blut- als auch peritoneale Mastzellen untersucht werden können. Diese Forschung ist für ein umfassendes Verständnis der Immunantwort sowohl im systemischen als auch im lokalen Kontext von entscheidender Bedeutung
Arzneimittelscreening und Toxizitätstests
Beim Screening und Testen von Medikamenten wird die Reaktionsfähigkeit von RBL-Zellen auf verschiedene Stimuli ausgenutzt, einschließlich der Untersuchung, wie H2O2 die IgE-vermittelten Reaktionen hemmt. Diese Zellen spielen eine wichtige Rolle bei der Entwicklung von Behandlungen für Krankheiten wie Streptokokkeninfektionen, bei denen die Streptokokken der Mitis-Gruppe die Aktivierung der Mastzellen hemmen. Außerdem bewerten Forscher die toxischen Auswirkungen verschiedener Substanzen, darunter Chemikalien, Medikamente und Nanopartikel, mit diesem RBL 2H3 mc-Modell. In einer aktuellen Studie (2022) wurde beispielsweise die Zytotoxizität von Polystyrol-Mikroplastik auf RBL-2H3-Zellen untersucht. Sie ergab, dass Mikroplastik die Organellen von RBL-2H3-Zellen schädigt und den Zelltod fördert [3]. In einer weiteren Studie aus dem Jahr 2021 wurde das antiallergische und entzündungshemmende Potenzial eines Naturprodukts, Neferin, anhand des RBL-2H3-Zellmodells untersucht. Die Studie ergab, dass die Verbindung gute antiallergische und entzündungshemmende Eigenschaften besitzt [4]
Fortgeschrittene Methoden für immunologische Messungen
Die konsistente und messbare Freisetzung von Mediatoren aus RBL-2H3-Zellen macht sie ideal für die praktische Fluorimetrie, die präzise und genaue Messungen ermöglicht, die für die Untersuchung von Krankheiten und die Bewertung von therapeutischen Wirkstoffen entscheidend sind.
Die aus Rattus norvegicus stammende RBL-2H3-Zelllinie ist von unschätzbarem Wert sowohl für die Grundlagenforschung als auch für die angewandte Forschung auf dem Gebiet der Immunologie. Sie bietet weitreichende Möglichkeiten, unser Wissen über immunologische Krankheiten und deren Behandlung zu erweitern
RBL-2H3-Zelllinie für fortgeschrittene immunologische Forschung
RBL-2H3-Zellen: Forschungspublikationen
Im Folgenden finden Sie einige spannende Forschungspublikationen über RBL-2H3-Mastzellen:
Die hemmende Wirkung von Narirutin auf die Degranulation von RBL-2H3-Zellen
Diese Forschungsarbeit wurde in der Zeitschrift Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021) veröffentlicht. In der Studie wird vorgeschlagen, dass Narirutin, ein natürlicher Wirkstoff, die Degranulation von RBL-2H3-Zellen über die Regulierung von NF-κB, MAPK und den Tyrosinkinase-Signalweg hemmt.
Diese im International Journal of Molecular Sciences (2020) veröffentlichte Studie zeigt, dass die Apigenin-Verbindung die allergischen und entzündlichen Reaktionen von RBL-2H3- und RAW264.7-Zellen deutlich unterdrückt. Daher kann es als potenzielles Mittel zur Bekämpfung immunologischer Krankheiten dienen.
In dieser Forschungsarbeit im International Journal of Molecular Sciences (2021) wurden die antiallergischen und entzündungshemmenden Wirkungen eines Naturprodukts, Saponarin, anhand verschiedener Zelllinien, darunter RBL-2H3, untersucht.
Diese Studie zur evidenzbasierten Komplementär- und Alternativmedizin (2014) ergab, dass Benchalokawichian-Extrakte und einige aktive Bestandteile potenziell hemmende Wirkungen auf die Freisetzung von RBL-2H3-ß-Hexosaminidase ausüben.
Diese Arbeit wurde 2018 im International Journal of Biological Macromolecules veröffentlicht. In der Studie wurde festgestellt, dass das Naturprodukt Spirulina maxima die RBL-2H3-Degranulation hemmt, indem es die MAPKs- und AKT-Phosphorylierung verhindert.
Ressourcen für die RBL-2H3-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
RBL-2H3 ist eine weit verbreitete Mastzelllinie. Die verfügbaren Ressourcen für RBL-2H3-Kultivierungs- und Transfektionsprotokolle sind hier aufgeführt:
- RBL-2H3 MC-Modell: Dieser Forschungsartikel enthält Protokolle für die Pflege von RBL-2H3-Kulturen und für die RBL-2H3-Transfektion.
Hier finden Sie einige Ressourcen, die das RBL-2H3-Zellkulturprotokoll erklären:
- RBL-2H3-Zellen: Auf dieser Website können Sie Zellkulturprotokolle für die RBL-2H3-Zelllinie lernen. Außerdem enthält sie Informationen über RBL-2H3-Zellmedien und Kultivierungsbedingungen.
RBL-2H3-Zelllinie: Wichtige FAQs für Forscher
Referenzen
- Passante, E. und N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoallergische Reaktion verursacht durch Qingkailing-Injektion teilweise über den PI3K-Rac1-Signalweg in RBL-2H3-Zellen. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Polystyrene micro (nano) plastics damage the organelles of RBL-2H3 cells and promote MOAP-1 to induce apoptosis. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Anti-allergische und entzündungshemmende Wirkungen von Neferin auf RBL-2H3-Zellen. Internationale Zeitschrift für Molekularwissenschaften, 2021. 22(20): p. 10994.