HT22-Zelllinie
HT22 ist eine murine neuronale Zelllinie, die häufig in der neurowissenschaftlichen Forschung eingesetzt wird. Sie ist wertvoll für die Erforschung neurodegenerativer Erkrankungen und die Prüfung potenzieller neuroprotektiver Therapien oder Behandlungen. Außerdem sind die HT22-Zellen glutamatempfindlich und werden daher zur Untersuchung von Glutamat-induzierter Toxizität oder neuronalen Schäden verwendet.
- Wachstumsmedium
- Zur Kultivierung von HT22-Zellen wird DMEM-Medium verwendet. Es wird mit 10 % FBS, 4,5 g/l Glukose, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/l NaHCO₃ und 1,0 mM Natriumpyruvat ergänzt, um ein optimales Zellwachstum zu gewährleisten.
- Verdopplungszeit
- Die Verdopplungszeit der HT22-Zellen beträgt etwa 15 Stunden.
- Wachstumsart
- HT22-Zellen sind adhärent.
- Sicherheitsstufe
- BSL-1
- Erhältlich bei
- Cytion – HT22 bestellen
Dieser Artikel beleuchtet die wesentlichen Aspekte von HT22-Zellen, die Sie bei Ihrer Forschungsarbeit unterstützen können. Er behandelt vor allem:
- Allgemeine Eigenschaften und Herkunft der HT22-Zellen
- Informationen zur Kultivierung der HT22-Zelllinie
- Vor- und Nachteile der HT22-Zelllinie
- Forschungsanwendungen der HT22-Zelllinie
- Forschungspublikationen zu HT22-Zellen
- Ressourcen für HT22-Zellen: Protokolle, Videos und mehr
Allgemeine Eigenschaften und Herkunft der HT22-Zellen
Dieser Abschnitt des Artikels beleuchtet die Herkunft und die allgemeinen Eigenschaften von HT22-Zellen. Diese Informationen über eine Zelllinie sind notwendig, bevor man mit der Arbeit daran beginnt. Hier erfahren Sie: Was sind HT22-Zellen? Wie sieht die Morphologie von HT22-Hippocampuszellen aus? Wie groß sind HT22-Zellen?
HT22 ist eine kontinuierliche Zelllinie, die aus der Hippocampusregion des Mausgehirns gewonnen wurde. Es handelt sich um einen Subklon der Elternzelllinie HT-4, der durch die Immortalisierung von neuronalen Geweben der Maus mittels eines temperaturempfindlichen Polyomavirus-Affenvirus-40 (SV40)-T-Antigens entwickelt wurde.
Diese Zellen unterscheiden sich von reifen Hippocampuszellen, da ihnen Glutamat- und cholinerge Rezeptoren fehlen, wie sie bei reifen Neuronen hippokampalen Ursprungs vorhanden sind. Daher sind sie für gedächtnisbezogene Forschungsstudien nicht geeignet [1].
HT22-Zellen weisen ein epithelioidartiges Erscheinungsbild auf.
Informationen zur Kultivierung der HT22-Zelllinie
HT22-Zellen werden in neurowissenschaftlichen Forschungslabors verwendet. Vor der Kultivierung dieser Zellen suchen Forscher nach wichtigen Informationen zur Zellkultur, die ihre Arbeit vereinfachen und effizienter machen. Dieser Abschnitt behandelt alle wichtigen Punkte zur Kultivierung von HT22-Zellen. Sie erfahren: Wie lang ist die Verdopplungszeit der HT22-Zellen? Wie kultiviert man HT22-Zellen? Wie lautet das HT22-Zellkulturprotokoll? Was ist das HT22-Zellkulturmedium?
Wichtige Punkte zur Kultivierung von HT22-Zellen
Verdopplungszeit:
Die Verdopplungszeit der HT22-Zellen beträgt etwa 15 Stunden.
Adhärent oder in Suspension:
HT22-Zellen sind adhärent.
Subkultivierungsverhältnis:
Das Subkultivierungsverhältnis für HT22-Hippocampuszellen beträgt 1:3 bis 1:6. Kurz gesagt wird das Medium entfernt und die adhärenten Zellen werden mit 1× PBS gespült. Accutase-Dissoziationslösung wird in den Kolben gegeben, und die Zellen werden 8 bis 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend wird frisches Kulturmedium hinzugefügt, und die Zellen werden zur Zentrifugation in ein Röhrchen gesammelt. Das erhaltene Zellpellet wird vorsichtig resuspendiert, und die Zellen werden zur Vermehrung in einen Kulturkolben gegeben.
Wachstumsmedium:
Für die Kultivierung von HT22-Zellen wird DMEM-Medium verwendet. Es wird mit 10 % FBS, 4,5 g/l Glukose, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/l NaHCO₃ und 1,0 mM Natriumpyruvat ergänzt, um ein optimales Zellwachstum zu gewährleisten.
Wachstumsbedingungen:
HT22-Zellkulturen werden in einem befeuchteten Inkubator (37 °C) mit einer 5%igen CO₂-Zufuhr gehalten.
Lagerung:
Gefrorene HT22-Zellen können bei Temperaturen unter -150 °C entweder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder in einem elektrischen Ultra-Tiefkühlschrank langfristig gelagert werden.
Einfrierverfahren und Medium:
HT22-Zellen können in CM-1- oder CM-ACF-Medien unter Verwendung einer Langsamgefriermethode eingefroren werden. Dieser Prozess ermöglicht nur eine Abkühlung der Probe um 1 °C pro Minute, schützt die Zellen vor Schock und trägt zur Erhaltung ihrer Lebensfähigkeit bei.
Auftauprozess:
Die Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang in einem 37 °C warmen Wasserbad aufgetaut, bis nur noch ein kleiner Eisklumpen übrig ist. Anschließend wird Kulturmedium zu den Zellen gegeben, und diese werden zentrifugiert, um Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen. Das Zellpellet wird resuspendiert, und die Zellen werden in einen neuen Kolben mit Kulturmedium überführt. Anschließend werden die Zellen bei 37 °C in einem Inkubator für mindestens 24 Stunden inkubiert.
Biosicherheitsstufe:
Für die Kultivierung von HT22-Zellen sind Laborbedingungen der Biosicherheitsstufe 1 vorgeschrieben.
Vor- und Nachteile der HT22-Zelllinie
HT22-Hippocampuszellen weisen einige Vor- und Nachteile auf, die sie von anderen neuronalen Zelllinien unterscheiden. Einige nennenswerte Vor- und Nachteile der Zelllinie werden hier aufgeführt.
Vorteile
Die Vorteile der murinen neuronalen Zelllinie HT22 sind:
-
Schnelle Wachstumsrate
HT22-Zellen haben eine Verdopplungszeit von 15 Stunden, was schnelle und effiziente Experimente ermöglicht und zu zeitnahen Forschungsergebnissen beiträgt.
-
Immortalisierung
HT22 ist eine immortalisierte Zelllinie, die ein kontinuierliches Wachstum über längere Zeiträume gewährleistet. Dies sorgt für eine konstante Verfügbarkeit der Zellen, reduziert Zeit und Kosten und ermöglicht Langzeitexperimente mit konsistenten Ergebnissen.
Nachteile
Die Nachteile von HT22-Zellen sind:
-
Mausursprung
Die HT22-Zelllinie wurde aus Gewebe des Hippocampus von Mäusen gewonnen, das die Komplexität der Physiologie und des Verhaltens menschlicher Nervenzellen möglicherweise nicht vollständig widerspiegelt, was ihre translationale Relevanz einschränkt.
4. Forschungsanwendungen der HT22-Zelllinie
HT22-Zellen finden in der neurobiologischen Forschung breite Anwendung. Einige vielversprechende Anwendungsbereiche dieser Zelllinie werden in diesem Abschnitt des Artikels behandelt:
- Neurowissenschaftliche Forschung: HT22-Zellen werden häufig in der Forschung zu neurodegenerativen Erkrankungen, d. h. Alzheimer und Parkinson, eingesetzt. Sie gelten als wertvolles Forschungsinstrument zur Untersuchung von Neurotoxizität und oxidativen Stressmechanismen im Zusammenhang mit diesen Erkrankungen. Eine im Jahr 2020 durchgeführte Studie ergab, dass der PI3K/AKT/CREB-Signalweg an der durch Hyperglykämie induzierten neuronalen Toxizität in HT22-Zellen beteiligt ist [2]. Ebenso wurde in einer aktuellen Studie vorgeschlagen, dass der Nrf2/HO-1-Signalweg und die NF-κB-Signalachse eine bedeutende Rolle bei der Amyloid-beta-Toxizität in HT22-Zellen spielen [3].
- Wirkstoffscreening: HT22-Zellen werden in großem Umfang für Wirkstofftests und Screening-Zwecke eingesetzt. Sie helfen Forschern dabei, potenzielle Therapeutika zu identifizieren, die neuroprotektive Wirkungen zur Bekämpfung neurodegenerativer Erkrankungen aufweisen. Eine 2019 durchgeführte Studie untersuchte das neuroprotektive Potenzial der Tetrahydrocurcumin-Verbindung in mit Glutamat behandelten HT22-Hippocampuszellen. Dabei induziert Glutamat oxidativen Stress in HT22-Zellen und verursacht Zelltod durch die Aktivierung von mitogenaktivierten Proteinkinasen [4].
5. Wissenschaftliche Veröffentlichungen zu HT22-Zellen
Hier sind einige interessante Forschungsarbeiten zur HT22-Zelllinie:
Diese Studie im International Journal of Molecular Medicine (2019) wies auf das neuroprotektive Potenzial von Crocin hin, einer aus Crocus sativus L. isolierten Verbindung, in den durch L-Glutamat geschädigten HT22-Zellen.
Diese Veröffentlichung in Neuropharmacology (2018) berichtete, dass Oxindol-Derivate vor dem durch oxidativen Stress induzierten Zelltod von HT22-Zellen schützen.
Diese Forschungsarbeit wurde 2019 im Journal of Ginseng Research veröffentlicht. Diese Studie untersuchte die neuroprotektiven Wirkungen eines Naturstoffs, Ginsenosid Rb2, unter Verwendung der HT22-Zelllinie. Die Studie ergab, dass Ginsenosid Rb2 den durch Glutamat induzierten oxidativen Stress und den Zelltod in HT22-Zellen des murinen Hippocampus wirksam reduzierte.
Diese Studie in „Ecotoxicology and Environmental Safety“ (2021) bewertete das zytotoxische Potenzial von Silbernanopartikeln in der HT22-Zelllinie.
Ferrostatin-1 schützt HT-22-Zellen vor oxidativer Toxizität
Dieser Forschungsartikel wurde 2020 in „Neural Regeneration Research“ veröffentlicht. Darin wurde vorgeschlagen, dass Ferrostatin-1, ein Inhibitor der Ferroptose, oxidative Toxizität in HT22-Hippocampuszellen verhindert.
Ressourcen zu HT22-Zellen: Protokolle, Videos und mehr
Einige Online-Ressourcen zu den HT22-Zellen erläutern deren Transfektions-, Differenzierungs- und Zellkulturprotokolle:
- HT22-Transfektion: Dieses Dokument enthält ein optimiertes Protokoll für die HT22-Transfektion in 24- und 96-Well-Zellkulturplatten.
- HT22-Zelldifferenzierung: Dieser Artikel bietet Ihnen eine umfassende Anleitung zum HT22-Differenzierungsprotokoll.
Der folgende Link enthält das HT22-Zellkulturprotokoll:
- Subkultivierung von HT22-Zellen: Über diesen Link erfahren Sie mehr über das Subkultivierungsprotokoll für die HT22-Zelllinie. Außerdem erhalten Sie hier Informationen zum Protokoll zur Induktion von Neurotoxizität in Zellen.
- HT22-Hippocampuszellen: Diese Website enthält viele nützliche Informationen über die Verdopplungszeit von HT22-Zellen, Medien und Zellkulturprotokolle.
Referenzen
- He, M., et al., Differenzierung führt zu einer Anfälligkeit für Exzitotoxizität in HT22-Neuronen. Neural Regen Res, 2013. 8(14): S. 1297–306.
- Zhang, S., et al., Fisetin verhindert die durch hohen Glukosespiegel induzierte Neurotoxizität in HT22-Zellen über den PI3K/Akt/CREB-Signalweg. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: S. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Schützende Wirkung von Berberin gegen β-Amyloid-induzierte Neurotoxizität in HT22-Zellen über den Nrf2/HO-1-Signalweg. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: S. 106–210.
- Park, C.-H., et al., Neuroprotektive Wirkungen von Tetrahydrocurcumin gegen Glutamat-induzierten oxidativen Stress in HT22-Zellen des Hippocampus. Molecules, 2019. 25(1): S. 144.