DLD-1-Zellen: Anwendungen und Einblicke in DLD-1-Zellen in der Darmkrebsforschung

DLD-1 ist eine menschliche Kolorektalkarzinom-Zelllinie, die häufig in der Krebsforschung eingesetzt wird. Sie ist ein wertvolles Instrument zur Untersuchung verschiedener Aspekte des Kolonkarzinoms, einschließlich der Tumorentwicklung, des Fortschreitens, der zugrunde liegenden molekularen Mechanismen und des Ansprechens auf therapeutische Mittel. Daher ist DLD-1 für das Verständnis der Krankheit und die Entwicklung potenzieller Behandlungsstrategien von herausragender Bedeutung.

Dieser Artikel enthält wichtige Informationen über die Zelllinie DLD-1, die Sie kennen sollten, bevor Sie mit ihr arbeiten. Er behandelt:

Allgemeine Merkmale und Herkunft der DLD-1-Zellen
Informationen zur Kultivierung der DLD-1-Zelllinie
DLD-1-Zelllinie: Vorteile und Beschränkungen
Forschungsanwendungen der DLD-1-Zelllinie
Forschungspublikationen über DLD-1-Zellen
Ressourcen für die DLD-1-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr

1. Allgemeine Merkmale und Herkunft von DLD-1-Zellen

Bevor ein Forscher mit einer Zelllinie arbeitet, sollte er sich zunächst über deren Herkunft und allgemeine Eigenschaften informieren. Dieser Artikelabschnitt ist eine detaillierte Einführung in die DLD-1-Zelllinie. Dabei werden die folgenden häufig gestellten Fragen behandelt: Was sind DLD-1-Zellen? Was ist eine DLD-1-Krebszelllinie? Was sind die Mutationen der DLD-1-Zelllinie? Wie groß ist eine DLD-1-Zelle? Wie sieht die Morphologie von DLD-1-Zellen aus?

DLD-1, eine Darmkrebs-Zelllinie, stammt aus dem Dickdarm eines 67-jährigen männlichen Patienten mit kolorektalem Adenokarzinom. Sie wurde von D.L. Dexter und Kollegen in den Jahren 1977-1979 isoliert. Diese Zelllinie hat denselben Ursprung wie die Zelllinien HCT-8, HCT-15 und HRT-18.
Wie kolorektale Karzinome weisen auch DLD-1-Zellen einen Phänotyp der Mikrosatelliteninstabilität auf [1].
Zu den DLD-1-Mutationen gehören KRAS, P53, BRAF, BRCA1 und BRCA2. Aufgrund des DLD-1-P53-Status, der DLD-1-BRCA-, DLD-1-BRCA2- und der DLD-1-KRAS-Mutation gelten diese Zellen als ideal für Krebsstudien.
Diese Zellen weisen eine epithelähnliche Morphologie auf.
Die Größe der DLD-1-Zelllinie beträgt etwa 15 µm.
Die menschliche Darmkrebs-Zelllinie DLD-1 besitzt einen pseudodiploiden Karyotyp. Etwa 86 % der Zellen besitzen eine modale Chromosomenzahl von 46. Bei 17,1 % der Zellpopulation kann jedoch auch Polyploidie vorliegen.

3D-Darstellung einer CT-Kolonographie oder CT-Aufnahme des Dickdarms auf dem Bildschirm zur Diagnose von Dickdarmkrebs, Kolon-Krebs und kolorektalem Krebs.

2.informationen zur Kultivierung der DLD-1-Zelllinie

Bevor Sie eine Zelllinie kultivieren, müssen Sie deren grundlegende Anforderungen an die Zellkultur kennen. In diesem Abschnitt werden die wichtigsten Punkte hervorgehoben, die Sie kennen müssen, bevor Sie mit der DLD-1-Zelllinie arbeiten. Dazu gehören: Was ist die Verdopplungszeit von DLD-1? Welches ist das DLD-1-Kulturmedium? Wie hoch ist die Aussaatdichte von DLD-1-Zellen? Wie kultiviert man DLD-1-Zellen?

Wichtige Punkte für die Kultivierung von DLD-1-Zellen

Verdopplungszeit:	Die Verdopplungszeit von DLD-1-Zellen beträgt etwa 15 Stunden.
Adhärent oder in Suspension:	DLD-1 ist eine adhärente menschliche Dickdarmkrebs-Zelllinie. Die Zellen wachsen in Monolayern.
Aussaat-Dichte:	DLD-1-Zellen werden mit einer Dichte von 1 bis 2 x¹⁰⁴ ^Zellen/cm2 ausgesät. Adhärente Zellen werden mit 1x Phosphatpuffersalzlösung (PBS) gewaschen und bei Raumtemperatur mit einer Passagierlösung (Accutase) inkubiert. Nach einer Inkubationszeit von 8 bis 10 Minuten werden die abgelösten Zellen in das Kulturmedium gegeben und zentrifugiert. Das Zellpellet wird dann vorsichtig resuspendiert, und die Zellen werden in neue Kulturgefäße mit Wachstumsmedium gegossen.
Wachstumsmedium:	Zur Kultivierung von DLD-1-Zellen wird RPMI 1640 mit Mediumzusätzen wie 10 % fötales Rinderserum FBS, 2,1 mM stabiles Glutamin und 2,0 g/L NaHCO3 verwendet. Das Medium sollte 2-3 Mal pro Woche ausgetauscht werden.
Wachstumsbedingungen:	DLD-1-Kulturen werden in einem befeuchteten 37°C-Inkubator mit einer 5%igen CO2-Zufuhr gehalten.
Lagerung:	DLD-1-Zellen werden in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder in einem elektrischen Ultratiefkühlschrank (bei einer Temperatur unter -150°C) gelagert.
Einfrierverfahren und Medium:	Zum Einfrieren der DLD-1-Zellen können CM-1- oder CM-ACF-Gefriermedien verwendet werden. Es wird immer ein langsamer Einfrierprozess empfohlen, der eine allmähliche Temperatursenkung um 1 °C ermöglicht, um einen Schock der Zellen zu vermeiden und ihre Lebensfähigkeit zu schützen.
Auftauprozess:	Die eingefrorenen Zellen werden in einem auf 37 °C voreingestellten Wasserbad 40 bis 60 Sekunden lang aufgetaut, bis ein kleiner Eisklumpen übrig bleibt. Anschließend werden die Zellen in ein frisches Medium gegeben und zentrifugiert. Dieser Schritt ist notwendig, um die Bestandteile des Gefriermediums von den Zellen zu entfernen. Die gesammelten Zellen werden in einem Wachstumsmedium resuspendiert und zum Wachsen in den Kolben gegeben.
Biosicherheitsstufe:	Die DLD-1-Zelllinie wird in den Labors der Biosicherheitsstufe 1 gehalten.

DLD-1-Zellen bei 10- und 20-facher Vergrößerung, die ihre charakteristische epitheliale Morphologie erkennen lassen.

3.dLD-1-Zelllinie: Vorteile und Beschränkungen

In diesem Abschnitt des Artikels werden die Vorteile und Grenzen der DLD-1-Kolonkarzinom-Zelllinie erläutert.

Vorteile

Die wichtigsten Vorteile der DLD-1-Zelllinie sind:

Dickdarmkrebs-Modell	DLD-1-Zellen weisen Mutationen auf, die bei Darmkrebspatienten häufig vorkommen, z. B. die DLD-1-KRAS-Mutation, DLD-1-BRCA und DLD-1-BRCA2. Diese Relevanz macht sie zu einem klinisch geeigneten Zellmodell für die Untersuchung dieser Krankheit.
Tumorigene Zelllinie	DLD-1-Zellen sind tumorerzeugend. Sie können Tumore verursachen, wenn sie in Nacktmäuse injiziert werden. Daher verwenden Forscher diese Zellen zur Entwicklung von Xenotransplantat-Tumormodellen, mit denen die Entstehung, Entwicklung und das Fortschreiten von Tumoren in vivo untersucht werden können.

Beschränkungen

Die mit DLD-1-Zellen verbundenen Einschränkungen sind:

Heterogenität

DLD-1-Kolonkarzinom-Zellpopulationen weisen eine genetische und phänotypische Heterogenität auf. Dies kann die Verallgemeinerbarkeit von Forschungsergebnissen beeinflussen.

4.forschungsanwendungen der DLD-1-Zelllinie

Die DLD-1-Zelllinie bietet eine Reihe von Anwendungsmöglichkeiten in der Krebsforschung. Einige wichtige Anwendungen werden in diesem Abschnitt erörtert.

Krebsforschung: DLD-1-Zellen dienen als wertvolles In-vitro-Modell für das Verständnis der molekularen Mechanismen, die dem Wachstum, der Entwicklung und der Progression von Darmkrebs zugrunde liegen. Außerdem werden sie zur Untersuchung der Genexpression, der Signalwege und des Einflusses spezifischer genetischer Mutationen auf das Verhalten von Krebszellen verwendet. In Untersuchungen aus dem Jahr 2022 wurde festgestellt, dass die PI3K/Akt/YAP-Signalkaskade die Migration und Invasion der Darmkrebszelllinie DLD-1 reguliert [2].
Entwicklung von Arzneimitteln: Forscher nutzen die DLD-1-Zelllinie, um die Wirksamkeit von Krebsmedikamenten zu testen und ihr Potenzial für die Behandlung von Darmkrebs zu bewerten. Dies hilft bei der Entwicklung von Medikamenten und der effizienten Bekämpfung der Krankheit. In einer im Jahr 2022 durchgeführten Studie wurde die Krebszelllinie DLD-1 verwendet und die krebshemmende Wirkung von Siliziumphthalocyaninen, chemisch synthetisierten Verbindungen, untersucht. Die Ergebnisse der Studie deuten darauf hin, dass diese Verbindungen starke Anti-Krebs-Wirkstoffe sind [3]. Interessanterweise wurde in einer anderen Studie das krebshemmende Potenzial eines aus einem Probiotikum gewonnenen P8-Proteins an DLD-1-Zellen untersucht [4].

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Produktnummer: 300220

5.forschungspublikationen über DLD-1-Zellen

In diesem Abschnitt werden einige interessante und häufig zitierte Veröffentlichungen über die Kolonkarzinom-Zelllinie DLD-1 vorgestellt.

Das Flavonoidglykosid Diosmin induziert Apoptose und Zellzyklusstillstand in der menschlichen Dickdarmkrebs-Zelllinie DLD-1

Diese Veröffentlichung ist im Journal of Biologically Active Products von Nature (2022) erschienen. Die Studie ergab, dass Diosmin, ein Flavonoid, den Zelltod in DLD-1-Zellen auslöst und auch den Zellzyklus zum Stillstand bringt.

Bromelain unterdrückt Kras-mutiertes kolorektales Karzinom wirksam durch Stimulierung der Ferroptose

Diese Studie in Animal Cells and Systems (2018) schlug vor, dass Bromelain, ein Enzym, die DLD-1 KRAS-Mutation unterdrückt und starke zytotoxische Wirkungen ausübt.

Bergapten induziert G1-Arrest und pro-apoptotische Kaskade in kolorektalen Krebszellen in Verbindung mit der p53/p21/PTEN-Achse

Dieser Forschungsartikel wurde 2019 in der Zeitschrift "Environmental Toxicology" veröffentlicht. Die Studie untersuchte die Anti-Tumor-Wirkung einer natürlichen Verbindung, Bergapten, anhand einer DLD-1 Darmkrebs-Zelllinie.

Umweltfreundliche Herstellung von Nanocurcumin/Nanoeisenoxid-Kompositen: Verbesserte In-vitro-Krebsbekämpfungsaktivität gegen DLD-1-Zelllinien

Diese im Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) veröffentlichte Studie ergab, dass Curcumin/Eisenoxid-Nanokomposite hochwirksam gegen DLD-1-Darmkrebszellen sind.

Epibrassinolid aktiviert AKT zur Auslösung von Autophagie mit Polyamin-Stoffwechsel in SW480- und DLD-1-Darmkrebs-Zelllinien

Dieser Forschungsartikel wurde im Jahr 2020 im Turkish Journal of Biology veröffentlicht. Die Studie schlug vor, dass ein natürliches Produkt, Epibrassinolid-vermittelte Aktivierung von AKT in DLD-1-Zellen, Autophagie in Verbindung mit Polyaminen stimuliert.

6.ressourcen für die Zelllinie DLD-1: Protokolle, Videos und mehr

Im Folgenden finden Sie einige Ressourcen zu DLD-1-Zellen:

DLD-1-Transfektion: Dieses Video-Tutorial ist ein umfassender Leitfaden für das DLD-1-In-vitro-Transfektionsprotokoll.
DLD-1-Zellen: Dieses Forschungspapier beschreibt kurz die Anforderungen an DLD-1-Zellkulturen, einschließlich Medien und Kulturbedingungen. Außerdem können Sie hier das Transfektionsprotokoll für DLD-1-Zellen lernen.

Die folgenden Links enthalten das Protokoll für die Kultivierung von DLD-1, von Menschen stammenden Dickdarmkrebszellen.

DLD-1-Zelllinie: Diese Website bietet grundlegende Informationen über die DLD-1-Zelllinie. Sie hilft Ihnen, verschiedene Protokolle für die Kultivierung von DLD-1-Zellen kennen zu lernen, einschließlich der Subkultur und der Handhabung von kryokonservierten und proliferierenden Kulturen.

Referenzen

Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotische Gene als neue Ziele für Einzel- und Kombinationsbehandlungen mit Resveratrol und Curcumin bei kolorektalem Krebs. Food & Function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP signaling promotes migration and invasion ofDLD-1colorectal cancer cells. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al., Anti-Krebs-Aktivität von neuartigen Silizium-Phthalocyaninen gegen die kolorektale Adenokarzinom-Zelllinie (DLD-1). Neue Zeitschrift für Chemie, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1. Internationale Zeitschrift für Molekularwissenschaften, 2023. 24(12): p. 9857.