NCI-H460-celler - navigering i lungekræftforskning med NCI-H460-indsigt
NCI-H460 er ikke-småcellede lungekræftceller fra mennesker, der ofte bruges i forskning i lungekarcinom og toksikologi. Denne cellelinje er et værdifuldt værktøj til at studere forskellige kræftbiologiske aspekter, der involverer tumorudvikling, vækst og lægemiddelresistens. Desuden er NCI-H460-celler en passende model til udvikling af anti-cancerreagenser.
NCI-H460-celler: Oprindelse og generelle karakteristika
En cellelinjes oprindelse og generelle karakteristika bidrager i høj grad til dens forskningsanvendelse. Dette afsnit af artiklen vil hjælpe dig med at lære om oprindelsen og de vigtigste egenskaber ved NCI-H460 lungekræftceller. Du vil få det at vide: Hvad er NCI-H460-celler? Hvad er NCI-H460-cellelinjetypen? Hvad er NCI-H460's morfologi?
- NCI-H460-cellelinjen stammer fra pleuraeffusionen fra en europæisk mand med storcellet lungekræft. Den blev etableret i 1982 af A.F. Gazdar og kolleger.
- NCI-H460-lungekræftceller har en epitelial morfologi.
- NCI-H460 er en tumorigen cellelinje med en hypotriploid karyotype. Det modale kromosomtal for disse celler er 57. NCI-H460-celler har også 58 modale kromosomtal med sammenlignelige hastigheder.
- Disse lungekræftceller har mange NCI-NCI-H460-mutationer ligesom ikke-småcellede lungetumorer, f.eks. NCI-H460 KRAS-mutation, som er involveret i celleproliferation, vækst, invasion og metastase.
Information om dyrkning af NCI-H460-celler
Du bør kende følgende nøglepunkter for korrekt håndtering og vedligeholdelse af NCI-H460-cellelinjen. Det vil informere dig om NCI-H460 fordoblingstid, NCI-H460 dyrkningsmedium og grundlæggende celledyrkningsprocedurer for NCI-H460 lungekræftceller.
Nøglepunkter for dyrkning af NCI-H460-celler
|
Fordoblingstid: |
NCI-H460's fordoblingstid er ca. 33 timer. |
|
Vedhæftende eller i suspension: |
NCI-H460-lungekræftcellerne er adhærente. |
|
Sub-kultiveringsforhold: |
Det anbefalede opdelingsforhold for NCI-H460-cellelinjen er 1:2 og 1:4. Efter fjernelse af det gamle medium skylles de adhærente celler med 1 x fosfatbuffersaltvand. Herefter inkuberes cellerne med Accutase-passageringsopløsning i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Dissocierede celler resuspenderes i et kulturmedium og centrifugeres. De høstede celler resuspenderes igen og hældes i den nye kolbe til dyrkning. |
|
Vækstmedium: |
RPMI 1640 bruges som NCI-H460-kulturmedium. Det er suppleret med 10 % føtalt kvægserum, 2,1 mM stabil glutamin og 2,0 g/L NaHCO3. Mediet skal udskiftes 2 til 3 gange om ugen. |
|
Vækstbetingelser: |
NCI-H460-kulturer holdes ved 37 °C i en befugtet inkubator med kontinuerlig tilførsel af 5 % CO2. |
|
Opbevaring: |
NCI-H460 lungekræftceller kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk ultra-lavtemperaturfryser på lang sigt. |
|
Fryseproces og medium: |
CM-1- eller CM-ACF-medium bruges til at fryse og opbevare NCI-H460-celler. En langsom nedfrysningsmetode anbefales for at beskytte cellernes levedygtighed. |
|
Optøningsproces: |
Frosne NCI-H460-celler optøs i et forvarmet vandbad (ved 37 °C) i 40 til 60 sekunder, indtil der er en lille isklump tilbage. Optøede celler tilsættes friske medier og centrifugeres for at fjerne frysende mediekomponenter. Den opsamlede cellepellet resuspenderes igen, og cellerne fordeles i nye kolber, der indeholder vækstmedier. NCI-H460-celler kan være næsten 24 timer om at sætte sig fast på overfladen af kolben. |
|
Biosikkerhedsniveau: |
NCI-H460 lungekræftceller håndteres og vedligeholdes i laboratorier på biosikkerhedsniveau 1. |
Fordele og ulemper ved NCI-H460-celler
NCI-H460 er en meget anvendt cellelinje i lungekræftforskning. Dette afsnit dækker de generelle fordele og ulemper ved NCI-H460-lungekræftceller.
Fordele og ulemper
Fordelene ved NCI-H460-cellelinjen til ikke-småcellet lungekræft er:
-
Tumorens oprindelse
NCI-H460-cellelinjen stammer fra en patient med storcellet lungekarcinom og repræsenterer denne særlige type lungekræft. De bruges som model til at studere lungekræftbiologi og udvikle nye og effektive behandlinger. NCI-H460-celler har tumorigenisk potentiale og kan injiceres i immundefekte mus for at skabe in vivo-tumormodeller til undersøgelse af tumorvækst, udvikling og effekt af potentielle lægemidler.
-
Høj proliferationsrate
NCI-H460 har højere vækstrater end andre cellelinjer for ikke-småcellet lungekræft, f.eks. A549. Denne fordel øger deres tilgængelighed og hjælper forskere med at udføre reproducerbare og tidsfølsomme eksperimenter.
Ulemper
Ulemperne forbundet med NCI-H460 lungekræftceller er:
-
Homogenitet
NCI-H460-celler er homogene, da de stammer fra en enkelt patients tumor. Derfor mangler de generelt den kompleksitet og heterogenitet, der observeres i patienttumorer.
Forskningsanvendelser af NCI-H460-celler
NCI-H460-lungekræftcellerne bruges i vid udstrækning i studier relateret til lungekarcinom. Her er nogle af de vigtige forskningsanvendelser af NCI-H460-celler:
- Forskning i lungekræft: NCI-H460-celler er en uvurderlig model til undersøgelse af celle- og molekylære mekanismer, der er involveret i tumorudvikling, vækst og metastase. Desuden bruges den til at studere imperative signalveje, molekylære mål og forskellige genetiske mutationer, der er forbundet med udviklingen af lungekræft. Der er udført flere undersøgelser på NCI-H460-celler for at studere disse faktorer effektivt. En undersøgelse fra 2019 foreslog, at overudtrykte nukleare allestedsnærværende kasein- og cyklinafhængige kinasesubstrater (NUCKS) er involveret i tumorcellevækst via regulering af PI3K/AKT-signalvejen [1]. På samme måde blev der i en in vitro- og in vivo-undersøgelse anvendt NCI-H460-celler til at undersøge eIF4E-genets rolle. Resultaterne afslørede, at eIF4E-genet er involveret i lungekarcinomvækst og angiogenese, og det kan målrettes til at udvikle lovende lægemidler mod lungekræft [2].
- Opdagelse og udvikling af lægemidler: NCI-H460, en menneskelig lungekræftcellelinje, bruges i vid udstrækning i undersøgelser af lægemiddelopdagelse og -udvikling. Forskere bruger disse celler til at undersøge toksiciteten og effekten af nye lægemiddelkandidater, målrettede terapier og behandlinger, der primært er rettet mod NCI-H460 KRAS-mutationer. En undersøgelse udført af Haoyue Hu og kolleger i 2023 anvendte NCI-H460-celler til at undersøge anlotinib-lægemidlets anti-kræftvirkninger. Resultaterne viste, at anlotinib delvist påvirkede væksten af KRAS-muterede lungekræftceller ved at hæmme MEK/ERK-signalkaskaden [3]. Ligeledes blev en phenolforbindelse, carnosinsyre, screenet for antiproliferative og proapoptotiske aktiviteter ved hjælp af NCI-H460-celler [4].
- Resistens over for lægemidler: NCI-H460-cellelinjen er ideel til at studere lungekarcinomets resistensmekanisme. Forskere bruger disse celler til at udvikle modeller for lægemiddelresistens for at identificere underliggende gener, molekylære faktorer og signalveje. I en undersøgelse udviklede man f.eks. pemetrexed-resistente NCI-H460-celler, et antifolatmiddel med flere målgrupper, for at undersøge de underliggende molekylære mekanismer for pemetrexed-resistens i ikke-småcellet lungekræftceller [5].
Køb NCI-H460-cellelinjen: Din indgang til forskning i lungekræft
Forskningspublikationer med NCI-H460-celler
Her er nogle interessante forskningspublikationer om NCI-H460 lungekarcinomcellelinjen.
Et naturligt glukan fra sorte bønner hæmmer spredning af kræftceller via PI3K-Akt og MAPK-vejen
Denne undersøgelse i Molecules (2023) foreslog, at et naturligt α-1,6-glucan, BBWPW, fra sorte bønner hæmmer spredningen af NCI-H460-celler via regulering af PI3K/AKT/MAPK-vejen.
Denne artikel i Phytomedicine (2019) undersøgte, at dioscin-6′-O-acetat, en ny naturlig forbindelse, udøver en antiproliferativ effekt på NCI-H460 lungekræftceller.
miRNA-425-5p øger væksten af lungekræft via PTEN/PI3K/AKT-signalaksen
BMC Pulmonary Medicine (2020) forskning siger, at microRNA-425-5p forbedrer lungekarcinom tumorigenese gennem PTEN/PI3K/AKT-vejen.
Denne artikel i Molecular Medicine Reports (2017) foreslår antitumorpotentialet og de underliggende mekanismer for quinalizarin-forbindelsen i NCI-H460 og andre lungekræftceller.
Denne forskning i Food and Function (2019) fremhæver den potentielle anticancereffekt af Eucalyptus globulus labill. ekstrakt ved hjælp af NCI-H460-celler. Resultaterne viste, at planteekstraktet viste disse effekter ved at øge NCI-H460 p53-ekspressionen og modulere cellecyklusprofilen.
Ressourcer til NCI-H460-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere
Her er nogle online-ressourcer med NCI-H460-lungekræftcellerne.
- Transfektion af NCI-H460-celler: Denne videovejledning er en trinvis guide til transfektion af NCI-H460-celler med plasmid-DNA.
De følgende links indeholder vigtige oplysninger om celledyrkning for H460-celler.
- NCI-H460-celler: Dette websted indeholder vigtige oplysninger om NCI-H460-cellemedier, subkulturer, nedfrysning og optøningsprocedurer.
- Passage af NCI-H460-celler: Dette dokument vil vejlede dig om passage og subkulturering af NCI-H460-cellelinjen. Desuden vil det også hjælpe dig med at lære transfektionsprotokollen for NCI-H460-celler.
Udforskning af NCI-H460-cellelinjen: Ofte stillede spørgsmål og indsigt
Referencer
- Hu, C., et al., NUCKS fremmer spredning, migration og invasion af lungekræftceller gennem Pi3k/Akt-signalvejen. Klinisk og undersøgende medicin, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, en ny eIF4E/eIF4G-interaktionsinhibitor, hæmmer lungekræftcellevækst og angiogenese gennem Ras/MNK/ERK/eIF4E-signalvej. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib udøver anticancereffekter på KRAS-muterede lungekræftceller ved at undertrykke MEK/ERK-vejen. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Etablering og karakterisering af pemetrexed-resistente NCI-H460/PMT-celler. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (tidligere Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.