MG-63 cellelinje: En detaljeret guide til MG-63-celler i osteosarkomforskning
MG-63-celler er fibroblastlignende humane osteosarkomceller, der tilbyder en bred vifte af forskningsapplikationer inden for det biomedicinske område. Det kan omfatte studier af knoglerelaterede processer som knogleudvikling, differentiering osv. Derudover fungerer MG-63-cellelinjen som en passende in vitro-model til at studere knoglecellers levedygtighed, spredning og vedhæftning.
Generelle karakteristika og oprindelse af MG-63-cellelinjen
Denne del af artiklen handler om MG-63-cellelinjens oprindelse og generelle karakteristika. Du vil lære: Hvad er MG-63-cellelinjen? Hvad er oprindelsen til MG63-cellelinjen? Hvad er MG-63-cellernes morfologi? Hvad er MG-63-cellens størrelse?
- MG-63 er en type osteoblastcellelinje, der stammer fra knoglen hos en 14-årig mandlig osteosarkompatient (kaukasisk). A. Billiau og hans kolleger deponerede denne cellelinje i 1977.
- MG-63-cellelinjen har en fibroblastcellelignende morfologi.
- Humane osteosarkomceller (MG-63) udviser hypo-triploidi. Det modale kromosomtal for disse celler er 66, hvilket forekommer i ca. 44 % af cellepopulationen. Højere ploidier er også rapporteret i næsten 2 % af cellepopulationen. Derudover er 18-19 markørkromosomer hyppigt forekommende i alle celler.
Oplysninger om dyrkning af MG-63-cellelinjen
Vigtige oplysninger om kravene til dyrkning af cellelinjer kan gøre dit arbejde lettere. Denne del af artiklen indeholder alle de vigtigste punkter, der er afgørende for dyrkning og vedligeholdelse af MG-63-celler. Her vil du lære: Hvad er fordoblingstiden for MG-63-celler? Hvilke vækstmedier bruges til MG-63-celler? Hvad er udsåningstætheden for MG-63-celler?
Nøglepunkter for dyrkning af MG-63-celler
|
Fordoblingstid |
Fordoblingstiden for MG-63-celler ligger mellem 28-38 timer, afhængigt af dyrkningsbetingelserne. |
|
Egenskaber for vækst |
MG-63 er en adhærent cellelinje. |
|
Udsåningstæthed |
der anbefales encelletæthed på 1 x104 celler/cm2 for MG-63-celler. De adhærente celler vaskes med 1 x PBS (phosphate buffer saline) uden magnesium og calcium. Disse celler inkuberes derefter med dissociationsopløsning (Accutase), tilsættes frisk medium og centrifugeres. Den opsamlede cellepellet resuspenderes i frisk medium og fordeles i den nye kolbe til vækst. |
|
Vækstmedium |
DMEM- eller Ham's F12-medier bruges til at dyrke MG-63-celler. Disse medier kan tilsættes 5 % føtalt kvægserum (FBS), 3,0 g/l glukose, 2,5 mM L-glutamin og 1,2 g/l NaHCO3 for at opnå optimal cellevækst. Medierne skal udskiftes 2-3 gange om ugen. |
|
Vækstbetingelser |
En befugtet inkubator ved 37 °C og en CO2-forsyning på 5 % er nødvendig for at dyrke MG-63-celler. |
|
Opbevaring |
Disse osteoblastlignende celler kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C for at bevare cellernes levedygtighed. |
|
Fryseproces og medie |
CM-1- eller CM-ACF-medier bruges til nedfrysning af MG-63-celler. En langsom fryseproces anbefales generelt for at forhindre, at cellerne får et chok, og for at beskytte deres levedygtighed. |
|
Optøningsproces |
Frosne celler inkuberes i 40 til 60 sekunder i et forvarmet vandbad (37 grader Celsius). Cellerne resuspenderes i friske vækstmedier og hældes i den nye kolbe. Efter 24 timers inkubation udskiftes mediet for at fjerne komponenter fra frysemediet. |
|
Biosikkerhedsniveau |
Laboratorieindstillinger på biosikkerhedsniveau 1 er nødvendige for håndtering og vedligeholdelse af MG-63-kulturer. |
MG-63 cellelinjen: Fordele og ulemper
MG-63 er en meget anvendt osteoblastcellelinje. Den har flere fordele og ulemper forbundet med sig. Her vil vi nævne nogle af de vigtigste fordele og ulemper ved MG-63-cellelinjen.
Fordele og ulemper
Fordelene ved MG-63-cellerne er:
-
Osteoblast-lignende egenskaber
MG-63-cellelinjen udviser osteoblastlignende egenskaber, hvilket gør den velegnet til at studere knoglerelaterede processer og sygdomme. Den kan også bruges til at undersøge celleadhæsion, proliferation og levedygtighed på titaniumoverflader [1].
-
Mulighed for transfektion
MG-63-celler bruges i vid udstrækning til transfektionsstudier, hvilket muliggør forskning i genekspression, funktion og cellulære processer.
-
Produktion af interferon på højt niveau
MG-63-celler er i stand til at producere interferon på højt niveau. De kan give 3,7 gange højere interferonudbytte pr. cm² end diploide fibroblaster, når de induceres med cycloheximid, polyinosinsyre-polycytidylsyre og actinomycin [2].
Ulemperne ved MG-63
Ulemperne forbundet med MG-63 B-celler er:
-
Heterogenitet
MG-63-celler udviser heterogenitet inden for cellepopulationen, hvilket kan påvirke reproducerbarheden.
-
Tumor-cellelinje
MG-63 er en kræftcellelinje og repræsenterer muligvis ikke fuldt ud normal celleadfærd og -fysiologi, hvilket begrænser dens anvendelse i visse laboratorieforsøg.
Bestil dine MG-63-celler i dag
Anvendelser af MG-63-celler
MG-63-celler er et fremragende forskningsværktøj. De har mange lovende anvendelsesmuligheder inden for forskning. Nogle få vigtige forskningsanvendelser af MG-63-celler er listet her.
- Undersøgelse af knoglerelaterede processer/sygdomme: MG-63-celler er osteoblastlignende (knogledannende) celler. Derfor bruges disse celler i vid udstrækning til at studere knoglesygdomme og cellulære processer, herunder udvikling, differentiering og mineralisering. Desuden bruges cellerne i vid udstrækning til at screene terapeutiske lægemidler til fremme af knogleheling. Forskningen brugte MG-63-celler til at undersøge det terapeutiske potentiale af grønne syntetiserede zinkoxid-nanopartikler fra Scutellaria baicalensis på knoglecelleproliferation, mineralisering og differentiering [3].
- Kræftforskning: MG-63-celler bruges i vid udstrækning i kræftforskning. Flere undersøgelser har brugt disse osteosarkomceller til at forstå kræftsignalveje og evaluere lægemidlers cytotoksiske og terapeutiske potentiale. Et studie fra 2019 undersøgte de antitumorale egenskaber af et naturligt stof, Tomentosin, ved hjælp af MG-63-celler. Resultaterne viste, at Tomentosin udviser anticancereffekter ved at udløse intracellulær produktion af reaktive oxygenarter (ROS) [4].
Forskningspublikationer med MG-63-celler
Følgende er nogle forskningspublikationer med MG-63, den osteoblastlignende cellelinje.
miR-192 øger følsomheden af methotrexat-lægemidlet i MG-63 osteosarkom-cancerceller
Denne artikel blev offentliggjort i tidsskriftet Pathology - Research and Practice i 2020. Denne forskning brugte MG-63-celler til at undersøge molekylære mekanismer, der er involveret i lægemiddelresistens i osteosarkomkræftceller (MG-63). Resultaterne afslørede, at miRNA-192 kunne være et nyttigt mål for at overvinde methotrexat-lægemiddelresistens i osteosarkom.
Denne forskning er offentliggjort i Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). Undersøgelsen rapporterede om anticancerpotentialet i grønne syntetiserede zinkoxidnanopartikler (ZnONP'er) fra Rehmanniae Radix mod knoglekræftceller (MG-63).
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i 2021 i tidsskriftet Materials Science and Engineering. Denne undersøgelse foreslog de knoglehelende egenskaber ved biosyntetiserede zinkoxid-nanopartikler fra Scutellaria ba icalensis-planten ved hjælp af MG-63-cellelinjen.
Denne undersøgelse blev offentliggjort i tidsskriftet Onco Targets and Therapy i 2021. Forskningen foreslog curcuminforbindelsens antitumoregenskaber mod osteosarkomceller. Forbindelsen udøvede disse terapeutiske virkninger ved at inaktivere kræftsignalvejen p-JAK2/p-STAT3.
Denne forskning blev offentliggjort i 2018 i International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Undersøgelsen viste, at biofeltenergi-behandlet D3-vitamin har en positiv indflydelse på knoglecellers spredning, modning og differentiering og forbedrer parametrene for knoglesundhed.
Ressourcer til MG-63-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere
Der findes flere ressourcer om MG-63-cellelinjen, som belyser dens celledyrknings- og transfektionsprotokoller.
- MG-63-celletransfektion: Denne video forklarer grundigt transfektionsprotokollen for MG-63-celler.
- Passage af klæbende celler: Denne video vejleder i subkulturering eller passering af adhærente cellelinjer. Den hjælper dig med at lære grundlæggende celledyrkningsprotokoller.
Følgende link giver dig dyrkningsprotokollen for MG-63-celler.
- Dyrkning af MG-63-celler: Dette websted giver en nem og detaljeret protokol til subkultur eller opdeling af MG-63-cellelinjen.
Ofte stillede spørgsmål om MG-63-celler
Referencer
- Wandiyanto, J.V., et al., The Fate of Osteoblast-Like MG-63 Cells on Pre-Infected Bactericidal Nanostructured Titanium Surfaces. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Human interferon: masseproduktion i en nyetableret cellelinje, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
- Tang, Y., et al., Osteogen differentiering og mineraliseringspotentiale af zinkoxidnanopartikler fra Scutellaria baicalensis på humane osteoblastlignende MG-63-celler. Material Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
- Lee, C.M., et al., Tomentosin viser anti-kræftfremkaldende effekt i humane osteosarkom MG-63-celler via induktion af intracellulære reaktive iltarter. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.