HT-29-cellelinje

HT-29 er en human tarmkræftcellelinje med en bred vifte af anvendelsesmuligheder inden for kræft- og toksikologiforskning. Disse celler er f.eks. følsomme over for standard kemoterapeutiske behandlinger mod kolorektal cancer. Derudover er HT-29-cellelinjen en velkarakteriseret in vitro-model til at undersøge tarmepitelets reaktion på bakterieinfektion. HT-29-cellerne efterligner de modne tarmcellers egenskaber, dvs. enterocytter, og er derfor velegnede til fastgørelse og mekanistiske undersøgelser.

Denne artikel vil dække alle aspekter af HT-29-cellelinjen, som du har brug for at kende, før du arbejder med den. Den vil hovedsageligt omfatte:

HT-29-celler: Oprindelse og generel information
Oplysninger om celledyrkning af HT-29-cellelinjen
HT-29-celler: Fordele og begrænsninger
HT-29-celler: Anvendelser
Forskningspublikationer om HT-29-celler
Ressourcer til HT-29-celler: Protokoller, videoer og meget mere

1. HT-29-celler: Oprindelse og generel information

Før du bruger en cellelinje, bør du vide noget om cellelinjens generelle egenskaber og oprindelse. Dette afsnit vil hjælpe dig med at lære: Hvad er HT-29-cellerne? Er HT-29 en cellelinje til kolorektal cancer? Hvad er HT-29-cellernes morfologi?

Hvad er HT-29-cellelinjen? HT-29 er en kolorektal adenokarcinom-cellelinje, der blev etableret i 1964 af Trempe og Fogh. Cellerne stammer oprindeligt fra den primære tumor hos en kaukasisk kvinde (44 år gammel) med kolorektalt adenokarcinom [1]. Siden etableringen er denne cellelinje blevet brugt til at studere kræftformernes biologi.

Morfologi af HT-29-celler: HT-29-cellelinjen har generelt en epitellignende morfologi. Differentierede celler vokser i monolag, danner tætte celle-celle-forbindelser og har en apikal børstekant. Hvis disse celler dyrkes i glukosefattigt medium eller får induktorer som butyrat eller syre, udviser de enterocytlignende træk.

Cellestørrelse: Diameteren på HT-29-cellelinjen for kolorektal cancer er 11 μm.

Genom og ploidi: Det modale antal kromosomer for HT-29-cellelinjen er 71. Det kan variere fra 68-72. Desuden er det strømlinede kromosomtal for HT-29-celler hyper-triploid, hvor 2S-komponenten forekommer med en hastighed på 2,4 %.

Hvad er HT29 MTX? HT29 MTX er en methotrexatresistent cellelinje, der er isoleret fra den oprindelige HT-29 humane tyktarmskræftcellelinje ved tilpasning til 10 µM methotrexat. Disse celler har karakteristika som slimudskillende modne bægerceller.

Deling og bevægelse af kolorektale kræftceller under mikroskopet.

2. Information om celledyrkning af HT-29-cellelinjen

Hvis du kender til de grundlæggende krav til dyrkning af en cellelinje, kan det gøre dit arbejde med den lettere. Du bør vide: Hvad er fordoblingstiden for HT-29-cellelinjen? Hvad er udsåningstætheden for HT-29-celler? Hvilke medier til HT-29-celler?

Fordoblingstid	Den gennemsnitlige fordoblingstid for HT-29-cellelinjen er 24 timer.
Vedhæftende/suspension	HT-29 er en adhærent cellelinje.
Udsåningstæthed	Den anbefalede udsåningstæthed for HT-29-celler er 3 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. Dyrkede celler vaskes med 1 X PBS og løsnes efter inkubation med Accutase i 8-10 minutter. Der tilsættes friske medier, og cellerne centrifugeres. Cellepelleten resuspenderes, og cellerne fordeles i nye kolber med den anbefalede celletæthed.
Vækstmedie	Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) suppleret med 2,5 mM L-glutamin og 10 % FBS anvendes til optimal dyrkning af HT-29-celler. Mediet skal udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser	HT-29-celler kræver en humificeret inkubator med en temperatur på 37 °C og 5 %_{CO2-forsyning} for at vokse.
Opbevaring	Disse celler opbevares i dampfasen af flydende nitrogen ved under -195 °C.
Frysemedium og proces	Det frysemedium, der anvendes til HT-29-cellelinjen, er CM-1 eller CM-ACF. Cellerne nedfryses ved en langsom nedfrysningsproces, der medfører et temperaturfald på 1 °C og effektivt beskytter cellernes levedygtighed.
Optøningsproces	Frosne HT-29-celler optøs i et vandbad med en temperatur på 37 °C. Disse celler kan resuspenderes og hældes direkte ned i den friske vækstmediekolbe. I modsætning til dette kan de optøede celler centrifugeres for at fjerne frysemedieelementer, resuspenderes i frisk medium og dyrkes i kolber.
Biosikkerhedsniveau	Biosikkerhedsniveau 1 bruges til at håndtere og vedligeholde HT-29-cellelinjen.

HT-29-celler under 10x og 20x forstørrelse.

3. HT-29-celler: Fordele og begrænsninger

Hver cellelinje har unikke fordele og ulemper, der adskiller den fra andre cellelinjer. Dette afsnit dækker de vigtigste fordele og begrænsninger, der er forbundet med HT-29-celler.

Fordele og begrænsninger

De vigtigste fordele ved HT-29-celler er:

Nemme at dyrke
HT-29-cellelinjen er nem at håndtere og vedligeholde uden komplekse krav til dyrkning. Den dyrkes i vid udstrækning i forskningslaboratorier.
In vitro-model af tarmceller
HT-29-celler kan differentieres til modne tarmceller (enterocytter og slimproducerende celler) under specifikke dyrkningsbetingelser. De bruges som en cellulær model til at studere fødevarefordøjelse og biotilgængelighed.
Høj transfektionseffektivitet
HT-29 tyktarmskræftceller har en høj transfektionseffektivitet, hvilket gør dem velegnede til undersøgelser af genekspression og -regulering. Både forbigående og stabile transfektionseksperimenter kan udføres ved hjælp af forskellige metoder.
Følsomhed over for lægemidler
HT-29-celler er følsomme over for kemoterapeutiske stoffer som fluorouracil og oxaliplatin, der ofte bruges i behandlingen af tyktarmskræft. De bruges til at studere lægemiddelresistens og screene potentielle terapeutiske lægemidler til kolorektal karcinom.

Begrænsninger

Heterogenitet
HT-29-celler udviser ligesom andre kræftcellelinjer heterogenitet og danner måske ikke en ensartet cellepopulation. Det kan påvirke reproducerbarheden af resultaterne i visse analyser og føre til mindre variationer i forsøgsresultaterne.
Begrænset differentiering
HT-29-celler har et begrænset differentieringspotentiale. De differentierer ikke fuldt ud til tarm- eller tyktarmsceller, men udviser kun nogle få karakteristiske træk. Denne begrænsning kan begrænse deres anvendelse i studiet af mere komplekse biologiske processer.

4. hT-29-celler: Anvendelser

HT-29-cellelinjen dyrkes i vid udstrækning i forskningslaboratorier på grund af dens brede vifte af anvendelsesmuligheder. Dette afsnit dækker kun nogle få vigtige anvendelser af HT-29-celler.

Kræftforskning: HT-29 er en kolorektal adenokarcinom-cellelinje, så den bruges til at studere kræftprogression, udvikling og underliggende molekylære mekanismer. I en undersøgelse fra 2018 blev HT-29-cellelinjen brugt til at undersøge de cellemolekyler, der er ansvarlige for metastase. Studiet observerede, at vimentin- og CXCR4-gener regulerer cellemetastase. Transfektion af microRNA-193a-5p mimic kan reducere mRNA-niveauerne af disse gener og med succes mindske kræftcellers metastase [2].

Toksikologisk forskning: HT-29-cellelinjen bruges i vid udstrækning i toksikologisk forskning. Disse kolorektale karcinomceller bruges til at vurdere toksiciteten af forskellige lægemiddelkandidater ved hjælp af forskellige assays. En undersøgelse udforskede f.eks. toksicitetspotentialet i et ethanolisk ekstrakt af planten Syzygium cumini på HT-29-cellelinjen. Resultaterne viste en betydelig undertrykkelse af HT-29-cellevæksten, hvilket indikerer ekstraktets lovende anticanceregenskaber [3].

Mikrobiologi: HT-29 kan bruges som værtscellesystem til at undersøge patogenesen af potentielle mikrober, dvs. bakterier og vira. Forskere kan inficere HT-29-celler med mikrober for at undersøge deres virulens og værtsrespons. En sådan undersøgelse brugte HT-29-celler til at udforske mælkesyrebakteriers probiotiske egenskaber [4]. En anden undersøgelse brugte HT-29-celler til at evaluere effektiviteten og sikkerheden ved bakteriofagbehandlinger [5].

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 300215

5. Forskningspublikationer om HT-29-celler

Dette afsnit vil belyse nogle bemærkelsesværdige publikationer om HT-29-celler, der vil hjælpe dig med at udtænke dit forskningsstudie.

Evaluering af den kræfthæmmende effekt af Syzygium cumini-etanolisk ekstrakt på HT-29 kolorektal cellelinje

Denne undersøgelse foreslog ethanolisk ekstrakt af Syzygium cumini som et potentielt anticancermiddel mod kolorektal cancercellelinje HT-29. Ekstraktet undertrykte væksten af kræftceller betydeligt.

Tetrandrin hæmmer væksten af tyktarmskræft HT-29-celler via Bcl-2/Caspase 3/PARP-vejen og G1/S-fasen

Denne publikation i Bioscience Reports testede anti-kræftaktiviteten af en forbindelse, Tetradrine, på HT-29-celler. Resultaterne afslørede, at tetrandrin hæmmer kræftcellers spredning og vækst via regulering af cellesignalveje.

microRNA-193a-5p hæmmer migrationen af humane HT-29 tyktarmskræftceller via undertrykkelse af metastasevejen

Denne undersøgelse foreslog, at miRNA-193a-5p potentielt kan regulere HT-29-cellers metastase ved at regulere metastaserelaterede gener.

Bakteriofager er mere virulente over for bakterier med humane celler, end de er i bakteriekulturer; indsigt fra HT-29-celler

Denne artikel er udgivet i Nature Scientific Reports i 2018. I denne undersøgelse blev HT-29-tumorigen cellelinje brugt som en cellulær tarmmodel til at evaluere effekten af den foreslåede bakteriofagbehandling.

Probiotiske egenskaber ved laktobaciller og deres evne til at hæmme enteropatogene bakteriers vedhæftning til Caco-2- og HT-29-celler

I dette studie brugte forskerne HT-29-celler til at undersøge mælkesyrebakteriers probiotiske aktiviteter. Interessant nok viste undersøgelsen, at laktobaciller forhindrer patogene bakterier i at klæbe til tyktarmens celler.

6. HT-29-celler Ressourcer: Protokoller, videoer og meget mere

Dette afsnit dækker nogle af de online-ressourcer, der er tilgængelige for HT-29-celler, og som kan hjælpe med at lære om deres vedligeholdelses-, dyrknings- og transfektionsprotokoller.

Protokoller for celledyrkning

Følgende ressourcer vil vejlede dig om subkulturering af HT-29-celler.

Dyrkning af HT-29-celler: Dette link giver grundlæggende viden om vækstmediet, optøning og subdyrkning af HT-29-celler.
Vedligeholdelse af HT-29-kulturer: Denne artikel indeholder alle nyttige oplysninger om dyrkning og vedligeholdelse af HT-29-celler.

Protokoller for transfektion

HT-29-cellelinjen har stor transfektionseffektivitet, og den bruges ofte i genekspressionsundersøgelser. Følgende ressourcer beskriver de mulige transfektionsprotokoller for disse celler.

Transfektion af HT-29: Dette webstedslink indeholder den detaljerede protokol for transfektion af HT-29-celler.
Transfektion af HT-29-cellelinjen: Dette dokument beskriver transfektionsprotokollen for HT-29-cellelinjen med plasmid-DNA.

Videoer relateret til HT-29-cellelinjen

Her er nogle videoer om dyrkning og vedligeholdelse af denne tumorigeniske cellelinje.

Passage af celler: Denne video viser protokol for cellepassage for adhærente cellelinjer.
Transfektion af HT-29-celler: Denne video vil vejlede dig om den transfektionsmetode, der anvendes til HT-29-celler.

Vi forventer, at oplysningerne i denne artikel er værdifulde og tilstrækkelige til, at du kan håndtere håndtering og vedligeholdelse af HT-29-cellelinjer. Hvis du planlægger at bruge HT-29-celler i dit studie, skal du bestille dem hos os.

Referencer

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles og I. Recio, HT29-cellelinje. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: s. 113-124.
Shirafkan, N., et al, microRNA-193a-5p hæmmer migration af humane HT-29 tyktarmskræftceller via undertrykkelse af metastasevejen. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al., Probiotiske egenskaber ved laktobaciller og deres evne til at hæmme enteropatogene bakteriers vedhæftning til Caco-2 og HT-29 celler. Probiotika og antimikrobielle proteiner, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al., Bakteriofager er mere virulente over for bakterier med humane celler, end de er i bakteriekultur; indsigt fra HT-29-celler. Videnskabelige rapporter, 2018. 8(1): p. 5091.