HL-60-celler: Grundlæggende viden om forskning i akut myeloid leukæmi
HL-60 er en udødelig human leukæmicellelinje. Den bruges i vid udstrækning til at studere kræftbiologi og til at undersøge effektiviteten af kræftmedicin. Desuden kan den også bruges til at forstå forskellige cellulære og molekylære mekanismer, der er involveret i leukæmiske cellers proliferation og differentiering.
- Vækstmedium
- Se produktsiden
- Fordoblingstid
- Se produktsiden
- Væksttype
- Adhærent
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-1
- Fås hos
- Cytion — Bestil HL-60
- HL-60-cellelinje: Oprindelse og generel information
- Oplysninger om HL-60-cellekultur
- HL-60-celler: Fordele og ulemper
- Anvendelser af HL-60-cellelinjen i forskning: Fra kræft til immunologi og videre
- HL-60-cellelinjen til din forskning
- HL-60-celler: Forskningspublikationer
- HL-60-cellelinje – ressourcer: Protokoller, videoer og mere
- HL-60-cellelinjen: Vigtige ofte stillede spørgsmål til forskere
- Referencer
- Ofte stillede spørgsmål
HL-60-cellelinje: Oprindelse og generel information
HL-60-cellelinjen fungerer som en afgørende model inden for hæmatologisk forskning og giver dyb indsigt i karakteren og behandlingen af akut promyelocytisk leukæmi. Dette blogindlæg dykker ned i HL-60-cellelinjens oprindelse og særlige kendetegn og belyser dens afgørende rolle i medicinsk forskning og terapeutisk udvikling.
HL-60 blev først etableret ud fra leukæmiceller fra en 36-årig kaukasisk kvinde, der var diagnosticeret med akut promyelocytisk leukæmi. Dette banebrydende arbejde blev udført af S.J. Collins og hans team og markerede et betydeligt gennembrud, da HL-60 var den første myeloide leukæmicellelinje, der med succes blev isoleret og dyrket i suspension. Denne præstation har banet vejen for talrige forskningsmuligheder inden for studiet af leukæmi og andre relaterede sygdomme. Med hensyn til fysiske egenskaber udviser HL-60-celler en lymfoblastisk morfologi og er kendt for at vokse i suspension, hvor de fremstår runde i form. Størrelsen på disse celler varierer, med diametre fra 9 til 25 μm, hvilket afspejler deres heterogenitet. På genomisk niveau er HL-60-cellelinjen overvejende pseudodiploid med et modalt kromosomantal på 43. Interessant nok udviser en lille procentdel (6,2 %) af cellerne en 2S-komponent, hvilket tilføjer endnu et lag af kompleksitet til deres genetiske sammensætning [1].
At forstå disse grundlæggende aspekter af HL-60-celler forbedrer ikke kun vores viden om leukæmi på celleniveau, men understøtter også de igangværende forskningsbestræbelser på at afdække nye behandlingsformer. I de følgende afsnit vil vi undersøge, hvordan de unikke egenskaber ved HL-60-cellelinjen har bidraget til betydelige fremskridt inden for medicinsk forskning.
Oplysninger om HL-60-cellekulturer
HL-60-cellekultivering er enkel og nem. Dette afsnit vil gøre dig fortrolig med grundlæggende emner såsom: Hvad er fordoblingstiden for HL-60-cellelinjen? Er HL-60 en adhærent eller en suspensionskultur? Hvad er udsåningstætheden for HL-60-cellelinjen? Hvilket medium bruges til vækst af HL-60?
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for HL-60-celler er ca. 36 til 48 timer.
Adhærent eller i suspension:
HL-60-celler vokser som suspensionskulturer.
Udsåningstæthed:
Disse celler udsættes med en tæthed på 1 x 106 celler/ml ved subkultivering og 2 x 105 celler/ml, når en ny kultur startes.
Vækstmedium:
RPMI 1640-vækstmedium tilsat 10 % FBS og 2,5 mM L-glutamin anvendes til dyrkning af HL-60-celler. Mediet bør fornyes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:
HL-60-celler dyrkes i en befugtet inkubator ved 37 °C og 5 % CO2-tilførsel.
Opbevaring:
HL-60-celler opbevares ved en temperatur under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen for at bevare et maksimalt antal levedygtige celler.
Frysemedium og -proces:
CM-1- eller CM-ACF-frysemidler anvendes til frysning af HL-60-celler. En langsom frysemetode foretrækkes til frysning af HL-60-celler.
Optøningsproces:
Det frosne hætteglas med HL-60-celler omrystes hurtigt i et vandbad indstillet til 37 °C. Derefter centrifugeres cellerne for at fjerne frysemediet. Der tilsættes nyt dyrkningsmedium, og cellerne resuspenderes for at blive overført til en kolbe til vækst.
Biosikkerhedsniveau:
Biosikkerhedsniveau 1 anbefales til håndtering af HL-60-kulturer.
HL-60-celler: Fordele og ulemper
Inden du arbejder med en cellelinje, kan det være en god idé at kende dens fordele og ulemper. Dette afsnit af artiklen vil gennemgå nogle af fordele og ulemper ved at bruge HL-60-celler.
Fordele
Nogle af de væsentligste fordele ved HL-60-cellelinjen er:
- Alsidighed: HL-60-celler har evnen til at differentiere sig til flere celletyper, herunder monocytter, makrofager og granulocytter, under passende vækstbetingelser. Dette gør dem nyttige til at studere cellulær differentiering og andre celleprocesser.
- Let at dyrke: HL-60-celler er lette at dyrke og vedligeholde i suspensionskulturer, hvilket gør dem til et praktisk redskab til at studere flere celleprocesser.
- In vitro-model for leukæmi: Disse celler stammer fra en patient med akut myeloid leukæmi og har derfor genetiske og molekylære egenskaber, der ligner sygdommen.
Ulemper
Ulemperne ved HL-60-cellelinjen er:
- Begrænset differentieringspotentiale: HL-60 kan differentiere sig til nogle myeloide linjer som reaktion på stimuli, men deres differentieringspotentiale er begrænset sammenlignet med primære celler.
Anvendelser af HL-60-cellelinjen i forskning: Fra kræft til immunologi og videre
HL-60-cellelinjen, der stammer fra en patient med akut promyelocytisk leukæmi, er blevet en hjørnesten i medicinsk forskning på grund af dens alsidighed og lette dyrkning. Disse vedligeholdelsesvenlige kulturer er afgørende i en lang række forskningsanvendelser, og vi har til hensigt at udforske nogle af de mest betydningsfulde ved at inddrage en bred vifte af undersøgelsesnøgleord for at give et omfattende overblik.
Kræftforskning
Inden for onkologi har HL-60-cellelinjen været afgørende for at afdække de indviklede mekanismer i kræftcellers signalering, fremme vores forståelse af onkogenekspression og fremme opdagelsen af nye terapeutiske mål. Denne cellelinje udgør en del af det panel af leukæmicellelinjer, der anvendes til screening af nye kemoterapeutiske midler. Et slående eksempel er brugen af HL-60-celler til at fastslå de antileukæmiske egenskaber ved forbindelser udvundet fra marine organismer, hvilket afslører både antiproliferative og pro-apoptotiske effekter [2]. Desuden har cellelinjen gjort det lettere at undersøge centrale signalveje såsom JAK/STAT og deres indflydelse på leukæmicelleproliferation, samtidig med at man har vurderet det terapeutiske potentiale af bioaktive forbindelser som Thymoquinone [3].
Immunologi
HL-60-celler er et robust in vitro-system til at undersøge forskellige immunresponser, herunder den komplekse proces kemotaksi og reguleringen af ekspressionen af centrale immunmediatorer. Disse celler kan differentiere sig til myeloide celler, der ligner makrofager og neutrofiler, og fungerer dermed som en alsidig model til undersøgelse af inflammatoriske signalveje. For eksempel blev HL-60-afledte makrofaglignende celler anvendt til at udforske det antiinflammatoriske potentiale af fytokemikalier fra slægten Brassica [4]. I en anden undersøgelse gjorde differentieringen af HL-60-celler til neutrofil-lignende celler det muligt for forskerne at identificere gener, der er afgørende for cellulær differentiering og relaterede immunfunktioner [5].
Lægemiddeludvikling
HL-60's myeloide differentieringsegenskaber er også blevet udnyttet i lægemiddeludvikling, især til at identificere kandidater, der potentielt kan modulere differentieringsvejen, hvilket er afgørende i behandlingen af leukæmi. Dette illustreres af undersøgelser, der har anvendt HL-60-cellelinjen til at evaluere naturprodukters potentiale som kræftmidler [6].
Derudover anvendes HL-60-cellelinjen til at undersøge forskellige aspekter af myeloide cellelinjers biologi, såsom at forstå, hvordan behandling med midler som retinsyre kan føre til monocytisk differentiering, eller hvordan disse celler efterligner primære neutrofiler ved dannelsen af ekstracellulære fælder. Modelens anvendelse til at belyse de molekylære begivenheder ved hæmatologiske maligniteter udvides yderligere ved dens anvendelse i mutation-cellepanelundersøgelser, især i forbindelse med p53-hotspot-analyse af leukæmi.
For dem, der undersøger den cellulære mekanik, HL-60's fordoblingstid og deres respons på elektroporering i mikrofluidiske kanaler, tilbyder cellelinjen en pålidelig platform til undersøgelse.
HL-60-cellelinjen til din forskning
HL-60-celler: Forskningspublikationer
Der findes adskillige forskningsstudier om HL-60-celler. Her har vi opført nogle bemærkelsesværdige eksempler:
Denne forskningsartikel foreslår en antitumorvirkning af et stof, Stigmast-5-en-3-ol, på HL-60-leukæmiceller og MCF7-brystkræftceller.
Denne undersøgelse beskriver JAK/STAT-signaleringens rolle i proliferationen af HL-60-celler. Derudover undersøger forskerne det terapeutiske potentiale af forbindelsen thymoquinon ved hjælp af denne leukæmicellelinje. Forbindelsen hæmmer celleproliferation og inducerer celledød ved at genoplive ekspressionen af negative regulatorer af JAK/STAT-kaskaden.
Denne undersøgelse anvendte HL-60-celler til at udlede en makrofaglignende cellemodel fra undersøgelsen af den antiinflammatoriske aktivitet af planteforbindelser fra Brassica.
Denne undersøgelse, der blev offentliggjort i tidsskriftet International Immunopharmacology, udviklede en neutrofilcelle-efterligning fra HL-60-cellelinjen ved hjælp af dimethylsulfoxid. Undersøgelsen observerede, at ERK-genet er involveret i differentieringen af disse celler.
Denne forskningsartikel undersøger det kræftbekæmpende potentiale af plantepolyfenolforbindelser, dvs. gallussyre og ellaginsyre, på lægemiddelfølsomme og resistente HL-60-leukæmiceller.
HL-60-cellelinje Ressourcer: Protokoller, videoer og mere
Der findes flere online undervisningsressourcer om HL-60-cellelinjen. Dette afsnit vil omhandle nogle få ressourcer, der beskriver dyrkning og transfektion af denne cellelinje.
Protokoller til cellekultivering
Ressourcerne, der beskriver metoder til dyrkning af HL-60-celler, er:
- Formering af HL-60: Dette dokument indeholder oplysninger om subkultivering af HL-60-celler.
- HL-60-cellelinje: Denne hjemmeside indeholder grundlæggende oplysninger om HL-60-celler og protokoller, herunder dyrkning, nedfrysning og optøning af celler.
Transfektionsprotokoller
Her er nogle ressourcer, der beskriver transfektionsmetoder, der er valgt til HL-60-celler.
- Transfektion af HL-60-celler: Dette link indeholder en detaljeret transfektionsprocedure for HL-60-leukæmiceller.
- Transient transfektion af HL-60-celler: Dette dokument indeholder nyttige oplysninger om cellelinjen og giver en detaljeret protokol for transient transfektion af HL-60-celler.
Videoer relateret til HL-60-cellelinjen
Der findes meget få videoressourcer om HL-60-celler.
- Passering af HL-60-celler: Denne video forklarer protokollen for subkultivering af HL-60-celler.
Vi forventer, at denne artikel giver dig grundlæggende oplysninger om dyrkning og vedligeholdelse af HL-60-cellelinjen. Derudover kan den øge din viden om fordelene ved at bruge disse leukæmiceller i forskning. Hvis du planlægger at bruge denne cellelinje, kan du bestille den hos os.
HL-60-cellelinjen: Vigtige ofte stillede spørgsmål til forskere
HL-60-cellelinjen er en promyelocytisk leukæmi-cellelinje, der stammer fra en patient med akut promyelocytisk leukæmi. Denne cellelinje anvendes i vid udstrækning i forskning til at undersøge differentiering af myeloide celler og ekspression af onkogener.
Retinsyre fremkalder differentiering i HL-60-cellelinjen, hvilket får cellerne til at modnes til granulocytlignende celler. Denne proces er afgørende for undersøgelsen af de mekanismer, der ligger til grund for myeloid differentiering.
Serum er en afgørende bestanddel af væsken til hæmatopoietiske celler og leverer de væsentlige vækstfaktorer og næringsstoffer, der er nødvendige for, at HL-60-cellerne kan formere sig og opretholde deres tilstand i kultur.
Ja, HL-60-cellelinjen er i stand til at udvise kemotaksi, hvilket er cellers bevægelse som reaktion på kemiske stimuli. Dette gør dem velegnede til kemotaksis-assays og til at forstå cellemigration.
HL60-cellelinjen, som udviser ekspression af cellulære onkogener, fungerer som et modelsystem til at undersøge reguleringen af onkogenernes ekspression og deres rolle i udviklingen af leukæmi.
HL-60-cellelinjen er af uvurderlig betydning i cellebiologiske undersøgelser, især når det gælder undersøgelser af cellecyklussen, celledifferentieringsprocesser og de molekylære begivenheder, der fører til leukæmi.
Paneler af leukæmicellelinjer muliggør sammenlignende undersøgelser af forskellige leukæmicellelinjer, herunder deres genetiske sammensætning, mutationsprofiler, respons på lægemidler samt de molekylære signalveje, der er involveret i leukæmiudviklingen, såsom MAPK-signalvejen.
Analyse- og oprindelsescertifikater kan som regel downloades eller rekvireres hos den leverandør eller det arkiv, der stiller HL-60-cellelinjen til rådighed, hvilket sikrer, at forskerne modtager verificerede og kontaminationsfri celler til deres undersøgelser.
HL-60-cellelinjen kan differentieres, så den får egenskaber, der ligner primære neutrofiler, herunder evnen til at danne ekstracellulære fælder, hvilket giver forskerne mulighed for at anvende den som en surrogatmodel til at undersøge neutrofilernes adfærd og funktion.
HL-60-celler anvendes som in vitro-model til undersøgelse af akut promyelocytisk leukæmi, myeloide cellelinjers biologi samt virkningen af forskellige forbindelser på differentiering og proliferation. De benyttes desuden i forsøg, der undersøger cellulære reaktioner såsom kemotaksi, onkogenekspression og mutationers indvirkning på cellulære processer.
Forkortelsen "HL-60" står for "Human Leukemia 60". Den henviser til den 60. cellelinje, der blev etableret ud fra patienter med leukæmi på det tidspunkt, hvor den blev udviklet. "HL" angiver, at der er tale om humane leukæmiceller.
Halveringstiden for HL-60-celler er ca. 36 til 48 timer under optimale vækstbetingelser. Dette kan dog variere afhængigt af dyrkningsbetingelserne og cellernes passageantal.
Når HL-60-celler behandles med phorbol-12-myristat-13-acetat (PMA), differentieres de typisk til en celletype, der ligner makrofager eller monocytter. Denne differentiering indgår i undersøgelsen af monocytiske differentieringsveje og i forståelsen af mekanismerne bag differentieringen af myeloide celler.
Referencer
- Fleck, R., S. Romero-Steiner og M. Nahm, Anvendelse af HL-60-cellelinjen til måling af opsonisk kapacitet hos pneumokokantistoffer. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): s. 19-27.
- Fernando, I.S. et al., Apoptotiske og antiproliferative effekter af Stigmast-5-en-3-ol fra Dendronephthya gigantea på humane leukæmi-HL-60-celler og humane brystkræft-MCF-7-celler. Toxicology in Vitro, 2018. 52: s. 297-305.
- Almajali, B., et al., Thymoquinon undertrykker celleproliferation og fremmer apoptose af HL60-leukæmiceller gennem re-ekspression af JAK/STAT-negative regulatorer. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): s. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analyse af det antiinflammatoriske potentiale af bioaktive forbindelser fra Brassica i en human makrofaglignende cellemodel afledt af HL-60-celler. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: s. 112804.
- Wang, D., et al., ERK er involveret i differentieringen og funktionen af dimethylsulfoxid-inducerede HL-60-neutrofil-lignende celler, som efterligner inflammatoriske neutrofiler. International Immunopharmacology, 2020. 84: s. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-leukæmisk aktivitet af bioaktive forbindelser afledt af Brassica i HL-60 myeloide leukæmiceller. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): s. 13400.