DU-145-celler - en omfattende guide til forskere

DU-145 er en human prostatakarcinomcellelinje, der anvendes bredt i biomedicinsk forskning. Disse celler fungerer som en uvurderlig model til at studere prostatakræftbiologi, test af lægemidler og udvikling. Desuden bruger forskere også DU-145-celler til at undersøge molekylære mekanismer, der ligger til grund for udvikling, vækst og progression af prostatakræft.

Denne artikel vil give dig værdifuld indsigt i DU-145-prostatakræftcellerne. Den vil især dække:

Generel information og oprindelse af DU-145-cellelinjen
Dyrkning af DU-145-celler
DU-145-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
Forskningsanvendelser af DU-145-celler
Forskningspublikationer med DU-145-celler
Ressourcer til DU-145-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

1. Generel information og oprindelse af DU-145-cellelinjen

Det er vigtigt at forstå en cellelinjes grundlæggende egenskaber og oprindelse, før man begynder at arbejde med den. Dette afsnit giver en omfattende forståelse af DU-145-cellelinjens egenskaber og oprindelse. Du vil lære det at kende: Hvad er DU145-cancerceller? Hvad er DU145-cellernes morfologi? Hvad er forskellen mellem PC-3 og DU145?

DU-145, en human prostatakræftcellelinje, stammer fra hjernen på en kaukasisk mand (69 år gammel) med metastatisk prostatakræft. Disse celler blev første gang deponeret af K.R. Stone og kolleger i 1978.
Ligesom PC-3-prostatakræftceller udtrykker DU-145 også androgenreceptorer. Men når disse celler udsættes for androgenligandbehandling, udviser de ingen aktivitet af androgenreceptorresponsive gener og betragtes derfor som androgenuafhængige celler.
DU-145-celler har en epitelial morfologi.
DU-145-celler er hypotriploide og har et modalt kromosomtal på 64. De udviser flere markørkromosomer, såsom del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) og del (9) (p11).

PC-3 mod DU145

Begge cellelinjer for prostatakræft er androgenreceptor-uafhængige. De adskiller sig med hensyn til deres tumorigeniske og metastatiske potentiale. Når PC-3-cellelinjen injiceres i en immunkompromitteret mus, danner den et stærkt metastatisk adenokarcinom af grad IV. I modsætning hertil udvikler DU-145-cellelinjen prostatakræft med moderat metastatisk potentiale [1].

Afbrydelse af mikrofilamenter i humane prostatakræftceller PC-3.

2. dyrkning af DU-145-celler

DU-145-cellelinjen bruges i vid udstrækning i forskningslaboratorier for prostatakræft. Du bør lære følgende nøglepunkter for at gøre det nemmere og mere effektivt at dyrke den. Dette afsnit indeholder oplysninger om DU145-mediet, fordoblingstid, betingelser for celledyrkning og protokoller.

Nøglepunkter for dyrkning af DU-145-celler

Populationens fordoblingstid:	DU-145's fordoblingstid ligger mellem 30 og 40 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	DU-145 er en adhærent cellelinje.
Udsåningstæthed:	DU-145-celler udsås ved en anbefalet celletæthed på 2 x¹⁰⁴^celler/cm2. Ved denne tæthed giver cellerne et sammenflydende monolag på næsten 4 dage. Ved udsåning vaskes cellerne med 1 x fosfatbuffersaltvand og inkuberes med passageløsning, Accutase. Efter 8 til 10 minutters inkubation ved stuetemperatur tilsættes cellerne frisk dyrkningsmedie og centrifugeres. Den opsamlede cellepellet resuspenderes omhyggeligt, og cellerne hældes i nye dyrkningsflasker til vækst.
Vækstmedium:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) med medietilskud, dvs. 10 % føtalt kvægserum (FBS), 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS. Mediet fornyes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:	DU-145-kulturer opbevares i en 37 °C befugtet inkubator med en 5 % CO2-kilde.
Opbevaring:	DU-145-celler opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk fryser for at bevare cellernes levedygtighed i længere tid.
Fryseproces og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedier anbefales til DU-145 prostatacancerceller. En langsom frysemetode, der lader temperaturen falde gradvist med 1 °C, vælges til at fryse celler. Det forhindrer cellerne i at få et chok og hjælper med at bevare deres levedygtighed.
Optøningsproces:	Frosne DU-145-celleglas optøs hurtigt i et 37 °C varmt vandbad i 40 til 60 sekunder. Bagefter tilsættes cellerne kulturmedier og centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemedierne. De høstede celler resuspenderes i et vækstmedie og hældes i kolben til vækst. Genfrysning tager næsten 24 timer.
Biosikkerhedsniveau:	Der kræves indstillinger på biosikkerhedsniveau 1 for at dyrke den androgenreceptor-uafhængige cellelinje DU145.

DU-145 prostatakræftceller ved 10x og 20x forstørrelse.

3. dU-145 cellelinje: Fordele og begrænsninger

Ligesom andre cellelinjer er prostatakræftcellelinjen DU-145 forbundet med nogle fordele og ulemper. Disse egenskaber kan hjælpe dig med at beslutte, om den skal bruges i din forskning. De vigtigste fordele og ulemper ved DU-145-celler er nævnt nedenfor.

Fordele og ulemper

Fordelene ved DU-145-celler er:

Tumorigenicitet	DU-145 er en aggressiv tumorigenisk prostatacancercellelinje med moderat metastatisk potentiale. Bruges til at udvikle DU145-xenograftmodellen i immunkompromitterede mus til at studere prostatacancers biologi, udvikling og vækst in vitro og in vivo.
Uafhængighed af androgenreceptor	DU-145 prostatakræftceller er androgenreceptor-uafhængige. De er ikke afhængige af androgener for at vokse og viser ingen respons på celle- og molekyleniveau, når de behandles med androgener. Ideel til forskning i hormonuafhængige prostatakræftmekanismer.

Begrænsninger

Begrænsningerne ved DU-145-cellelinjen er:

In vitro-model

DU-145 er en in vitro-cellemodel af metastatisk prostatakræft, så den repræsenterer måske ikke fuldt ud kompleksiteten i primære prostatatumorer. Desuden repræsenterer den muligvis ikke alle typer og undertyper af prostatakræft på grund af specifikke egenskaber som f.eks. androgenreceptor-uafhængighed.

4. forskningsanvendelser af DU-145-celler

Prostatakræftcellelinjen DU-145 har en lang række forskningsmæssige anvendelsesmuligheder. Nogle få lovende anvendelser er nævnt her.

Prostatakræftbiologi: DU-145 er en relevant model til at studere prostatakræfts biologi. Forskere bruger disse celler til at undersøge molekylære mekanismer, der driver kræftudvikling, progression og metastase. Desuden udforskes genetiske ændringer, der ofte er forbundet med prostatakræft. Forskning udført i 2021 undersøgte DU-145-cellerne for at identificere potentielle biomarkører med henblik på effektiv diagnosticering og behandling. Undersøgelsen foreslog actin gamma 1 (ACTG1) som en potentiel biomarkør for prostatakræft, da den fremmer spredning af kræftceller og regulerer metastase via aktivering af MAPK/ERK-vejen [2].
Screening og udvikling af lægemidler: DU-145-prostatakræftceller bruges i vid udstrækning til at teste cytotoksiciteten og effekten af potentielle lægemidler mod kræft. Det hjælper forskere med at identificere nye lægemidler, forstå lægemiddelresistens og underliggende molekylære mekanismer. Et studie fra 2022 undersøgte den cytotoksiske effekt af en harpiksblanding, propolis eller bi-lim, i prostatakræftcellelinjen PC-3 og DU-145. Undersøgelsen viste væksthæmmende effekter af dette naturlige stof i begge cellelinjer og foreslog dets anti-cancer potentiale [3]. En anden undersøgelse blev udført i 2019, hvor man undersøgte de antiproliferative virkninger af et naturligt stof, betain, i DU-145-prostatakræftceller. Forskningen viste, at betain udøver antiproliferative aktiviteter ved at øge oxidativ stressmedieret celledød og inflammation i DU-145-celler [4].

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 300168

5.forskningspublikationer med DU-145-celler

Følgende er nogle forskningspublikationer om DU-145-cellelinjen.

Koncentrationsafhængige effekter af zinksulfat på DU-145 menneskelig prostatacancercellelinje: oxidative, apoptotiske, inflammatoriske og morfologiske analyser

Denne undersøgelse i Biological Trace Element Research, 2020, foreslog, at zinksulfat (_ZnSo4) udøver antiproliferative virkninger i DU-145-celler via inducering af apoptose, morfologiske ændringer, oxidativ skade og inflammation.

Selektiv cytotoksisk og anti-metastatisk aktivitet i DU-145 prostatakræftceller induceret af Annona muricata L. barkekstrakt og fytokemikalie, annonacin

Denne forskningsartikel blev offentliggjort i BMC Complementary Medicine and Therapies i 2020. Denne undersøgelse udforskede det cytotoksiske og anti-metastatiske potentiale i en plante, Annona muricata L. barkekstrakt, og dens bioaktive annonacin i DU-145-cellelinjen.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-relateretvej regulerer doxorubicin-resistens hos prostatacancer DU-145-celler

Denne publikation i IUBMB Life (2019) foreslog, at langt ikke-kodende RNA LOXL1-AS1-interaktion med miR-let-7a-5p og EGFR-vej regulerer doxorubicin-resistensen i DU-145-prostatakræftceller.

Nedregulering af DDR1 inducerer apoptose og hæmmer EMT gennem fosforylering af Pyk2/MKK7 i DU-145 og Lncap-FGC prostatakræftcellelinjer

Denne artikel i Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) anførte, at nedregulering af Discoidin Domain Receptor1 (DDR1)-genet forårsager DU-145-celledød og hæmmer epitelial til mesenchymal overgang (EMT) via aktivering af Pyk2/MKK7-vejen.

Casticin hæmmer human prostatakræft DU 145-cellers migration og invasion via Ras/Akt/NF-κB-signalveje

Denne undersøgelse i Journal of Food Biochemistry (2019) foreslog, at Casticin, en polymethoxyflavon, hæmmer migration og invasion af DU-145-celler ved at regulere Ras/Akt/NF-κB-signalering.

6. ressourcer til DU-145-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Der findes mange online-ressourcer om DU-145-cellelinjen til prostatakræft. I dette afsnit nævnes nogle få ressourcer, der forklarer håndtering, vedligeholdelse og transfektionsprotokol for disse celler:

DU-145-transfektion: Denne videovejledning er en trinvis guide til at lære protokollen for transfektion af DU-145-celler.

Protokollen for DU-145-celledyrkning er nævnt her.

DU-145 subkulturering: Dette link hjælper dig med at lære protokollen til subkulturering eller subkultivering af DU-145-celler.
DU-145-celler: Dette websted indeholder masser af nyttige oplysninger om DU-145-cellelinjen, herunder DU145-medium, protokol for subdyrkning og håndtering af proliferative og kryopræserverede kulturer.

Referencer

Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Videnskabelige rapporter, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al , Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancereffekter af propolisekstrakter opnået med koldseparationsmetoden på PC-3 og DU-145 prostatakræftcellelinjer. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betain undertrykker celleproliferation ved at øge oxidativ stressmedieret apoptose og inflammation i DU-145 menneskelig prostatakræftcellelinje. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.