CAL27-celler - Fokuseret indsigt i hoved- og halskræft ved hjælp af CAL27-celler
CAL27 er en af de mest anvendte cellelinjer til oral pladecellekarcinom i biomedicinsk forskning. Det er et værdifuldt værktøj til at studere de indviklede aspekter af pladecellekræft, herunder tumorvækst, udvikling og underliggende cellulære og molekylære mekanismer. Desuden letter det også lægemiddelscreening og testning til udvikling af lægemidler mod kræft.
Denne artikel vil give dig værdifuld indsigt i CAL27-cellelinjen og vil dække følgende emner:
- CAL27-cellernes oprindelse og generelle karakteristika
- Information om dyrkning af CAL27-cellelinjen
- CAL27-cellelinjen: Fordele og ulemper
- Anvendelser af CAL27-celler i forskning
- Publikationer med CAL27-cellelinje
- Ressourcer til CAL27-cellelinje: Protokoller, videoer og meget mere
1. CAL27-cellernes oprindelse og generelle karakteristika
Det første, du skal vide om en cellelinje, er dens oprindelse og generelle karakteristika, der adskiller den fra andre cellelinjer. Denne del af artiklen indeholder primær information om CAL27-celler. Det vil du lære: Hvad er CAL27-cellemodellen? Hvad er CAL27 HPV? Hvad er CAL27 HER2-status? Hvad er CAL27-cellelinjens oprindelse? Hvad er CAL27-cellernes morfologi? Hvad er CAL27-cellestørrelse?
- Cellelinjen for oral pladecellekræft, CAL27, blev udviklet fra tungevæv fra en 56-årig hvid mand med pladecellekræft i tungen. Cellelinjen blev etableret i 1982 af Gioanni og hans kolleger [1].
- CAL27-cancercellerne udviser en epitel-lignende morfologi.
- Disse celler har en aneuploid karyotype. De har et modalt kromosomtal på 43.
2.information om dyrkning af CAL27-cellelinjen
For at kunne vedligeholde cellelinjen på en nem og gennemførlig måde skal du kende dens vigtigste krav til celledyrkning. Dette afsnit dækker de vigtige koncepter for celledyrkning af CAL27-cellelinjen. Det bør du vide: Hvad er fordoblingstiden for cellelinjen CAL27? Hvad er CAL27-cellemediet? Hvad er subkultiveringsforholdet for CAL27-cellelinjen? Hvad er CAL27-dyrkningsbetingelserne? Hvordan dyrker man CAL27-celler?
Nøglepunkter for dyrkning af CAL27-celler
|
Fordoblingstid: |
CAL27-cellerne udviser en moderat væksthastighed med en populationsfordoblingstid på ca. 45 timer. |
|
Vedhæftende eller i suspension: |
Disse polygonale CAL27-celler klæber til overfladen af dyrkningsbeholderen og vokser til monolag. |
|
Opdelt forhold: |
CAL27-celler subkultiveres i et splitforhold på 1:2 til 1:4. Ved subkultivering vaskes de klæbende celler med magnesium- og calciumfri fosfatbuffersaltvand (1x). Derefter inkuberes cellerne med Accutase (passageløsning) ved omgivelsestemperatur i 8 til 10 minutter. Løsrevne celler tilsættes friske medier og centrifugeres. Den opsamlede pellet blev derefter omhyggeligt resuspenderet og hældt i nye kolber, der indeholder vækstmedier. |
|
Vækstmedie: |
DMEM-medier suppleret med 10 % FBS, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 og 1,0 mM natriumpyruvat bruges til at dyrke CAL27-cellelinjen. Mediet skal udskiftes 2 til 3 gange om ugen. |
|
Vækstbetingelser: |
CAL27-cellekulturer opbevares ved 37 °C i en befugtet inkubator med 5 % CO2-forsyning. |
|
Opbevaring: |
Frosne CAL27-celler opbevares enten i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C i en ultra-lav fryser i længere tid. |
|
Fryseproces og medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysemedium anbefales til nedfrysning af CAL27-celler. Til dette anbefales en langsom fryseproces, der kun tillader et fald i temperaturen på 1 °C pr. minut for at beskytte cellernes levedygtighed. |
|
Optøningsproces: |
Frosne celleglas anbringes i et vandbad, der er indstillet til 37 °C, i 40-60 sekunder, indtil der er en lille isklump tilbage. Cellerne tilsættes frisk medium og centrifugeres. Herefter fjernes frysemediet, og cellepelleten tilsættes frisk vækstmedium og resuspenderes omhyggeligt. Cellerne fordeles derefter i nye kolber til vækst. |
|
Biosikkerhedsniveau: |
Laboratorieindstillinger på biosikkerhedsniveau 1 er nødvendige for håndtering og vedligeholdelse af CAL27-cellekulturer. |
3.cAL27-cellelinjen: Fordele og ulemper
CAL27 er en meget udbredt cellelinje til oral pladecellecarcinom. Dette afsnit vil fremhæve nogle væsentlige fordele og ulemper i forbindelse med disse kræftceller.
Fordele og ulemper
De vigtigste fordele ved CAL27-cellelinjen er:
|
Tumorigenicitet |
CAL27-cellelinjen har tumorigenisk potentiale. Disse celler kan udvikle tumorer, når de injiceres i nøgne eller immunkompromitterede mus. Det kan hjælpe forskere med at forstå tumorbiologi og mikromiljø i dybden. |
|
Genetiske mutationer |
CAL27-celler har specifikke genomiske ændringer, såsom CAL27 P53, der ofte forekommer i oral pladecellekarcinom. Derfor kan CAL27 være en fordel for forskere, der undersøger disse mutationers indvirkning på kræftvækst, -udvikling og -progression. |
|
Let at dyrke |
Den orale pladecelle-linje, CAL27, har ingen krævende krav til celledyrkning. Den er derfor nem at dyrke og vedligeholde i forskningslaboratorier. |
Ulemper
Ulemperne forbundet med CAL27-cellelinjen er:
|
In vitro-model |
CAL27-celler fungerer som en in vitro-model af oral pladecellekarcinom. Det er dog vigtigt at bemærke, at de måske ikke nøjagtigt afspejler de oprindelige pladecelletumorers egenskaber og kompleksitet. |
4.anvendelse af CAL27-celler i forskning
CAL27-cellelinjen har en bred vifte af anvendelsesmuligheder inden for biomedicinsk forskning. Nogle af de vigtige forskningsanvendelser er listet her.
- Kræftbiologi: CAL27-celler er blevet brugt i vid udstrækning til at udforske de molekylære og cellulære mekanismer, der ligger til grund for udvikling og progression af oral pladecellekarcinom (OSCC). Forskere undersøger også genetiske mutationer, signalveje og vigtige biomarkører relateret til pladecelletumorer. Et studie udført i 2021 brugte CAL27-celler og undersøgte CD147's rolle i udviklingen af oral pladecellekræft. Undersøgelsens resultater viste, at CD147-knockdown forårsagede hæmning af CAL27-celleproliferation, migration og invasion. Desuden hæmmer nedreguleringen også udviklingen af lægemiddelresistens i kræftceller [2].
- Udvikling af lægemidler: CAL27-cellelinjen fungerer som et værdifuldt værktøj til screening og test af antitumorlægemidler. Forskere bruger disse celler til at teste effekten af forskellige kemoterapeutiske midler, målrettede terapier og eksperimentelle lægemidler til at hæmme orale kræftcellers spredning, vækst og levedygtighed. Desuden er den modulerende effekt af de potentielle kræftmidler også blevet vurderet på de dysregulerede kræftcellers signalveje. Det kan hjælpe med at udvikle effektive og skræddersyede behandlinger til at bekæmpe sygdommen. Et studie undersøgte zinkoxid-nanopartiklers antitumorpotentiale ved hjælp af CAL27-celler. Undersøgelsens resultater afslørede, at zinkoxid-nanopartikler havde cytotoksiske virkninger og også inducerede PINK1/Parkin-vejmedieret mitofagi i CAL27-tungekræftceller [3]. På samme måde observerede forskere doxorubicins og dets nanoformulerede forms (Doxil) anticancerpotentiale på CAL27 oral pladecellecancer [4].
5.publikationer med CAL27-cellelinjen
Denne del af artiklen dækker nogle få interessante og mest citerede publikationer om CAL27-cancerceller:
Denne forskning blev offentliggjort i Frontiers in Oncology (2020). Studiet undersøgte de anti-orale pladecellekræftvirkninger af vismodegib eller itraconazol ved hjælp af CAL27-celler.
PLAU fremmer celleproliferation og epitelial-mesenkymal transition i pladecellekræft i hoved og hals
Denne artikel i Frontiers in Genetics (2021) foreslog, at plasminogenaktivator, urokinase (PLAU)-protein, fremmer spredning, migration og epitelial til mesenchymal transition (EMT) af CAL27-celler.
MicroRNA-145-5p forværrer celleapoptose og oxidativ stress i pladecellekarcinom i tungen
Denne artikel i Experimental and Therapeutic Medicine (2021) fandt, at miRNA-145-5p forværrer CAL27-cellers oxidative stress og død og undertrykker PI3K/AKT-signalvejen.
Antitumoraktivitet af planteekstraktet morin i pladecellekarcinomceller i tungen
Dette studie i Oncology Reports (2018) udforskede anti-kræftaktiviteten af et bioflavonoid kaldet morin ved hjælp af CAL27-celler.
Denne artikel i Journal of Ethnopharmacology (2023) undersøgte det terapeutiske potentiale af Rosmarinus officinalis L. og Taraxacum off icinale-ekstrakter på CAL27-celler.
6.ressourcer til CAL27-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere
Der er begrænsede tilgængelige ressourcer om CAL27-cellelinjen. I dette afsnit har vi listet nogle generelle protokoller, som også kan hjælpe dig med at håndtere CAL27-celler:
- CAL27-celletransfektion: Denne video hjælper dig med at lære en generel protokol til transfektion af plasmid-DNA.
- Subkultur af adhærente celler: Denne video giver dig en omfattende vejledning i subkulturering af adhærente cellelinjer.
Følgende link indeholder protokollen for CAL27-celledyrkning.
- CAL27-cellelinje: Dette websted indeholder oplysninger om CAL27-medier, såningstæthed, fordoblingstid osv. Desuden indeholder den en protokol til subkulturering og håndtering af prolifererende og kryopræserverede kulturer.
Referencer
- Liu, X., et al., LINC00472 undertrykker vækst i oral pladecellekarcinom ved at målrette miR-455-3p/ELF3-aksen. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
- Pan, S., et al., Knockout af CD147 hæmmer spredning, invasion og lægemiddelresistens hos CAL27-celler fra human mundhulekræft in vitro og in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
- Wang, J., et al., Zinkoxid-nanopartikler fremkalder toksicitet i CAL 27-mundkræftcellelinjer ved at aktivere PINK1/Parkin-medieret mitofagi. International Journal of Nanomedicine, 2018: s. 3441-3450.
- Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen og A.M.S. Eldeen, Liposom-coated nano doxorubicin inducerer apoptose på orale pladecellekarcinom CAL-27-celler. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47-54.