BEWO-cellelinje

BeWo er en human choriocarcinom-afledt cellelinje, der i vid udstrækning anvendes i biomedicinsk forskning. Den fungerer som en værdifuld in vitro-model til at udforske den komplicerede proces med placentaudvikling og syncytialisering af humane trofoblaster. Forskere bruger også disse celler til at studere trofoblastcellers adfærd, hormonproduktion og transport af stoffer gennem moderkagen. Desuden kan BeWo-celler også anvendes i studier af toksikologi, infektion og sygdomsoverførsel.

Denne artikel indeholder grundlæggende viden om BeWo-celler, som kan hjælpe dig med at håndtere dem i din forskning. Den vil omfatte:

Generelle karakteristika og oprindelse af BeWo-celler
BeWo-cellelinjen: Information om dyrkning
Fordele og ulemper ved BeWo-cellelinjen
Forskningsanvendelser af BeWo-celler
Forskningspublikationer med BeWo-celler
Ressourcer til BeWo-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

1. BeWo-cellernes generelle egenskaber og oprindelse

Forudgående viden om en cellelinjes oprindelse og generelle karakteristika er afgørende for dens brug i din forskning. Denne del af artiklen udforsker BeWo-cellelinjens oprindelse, karakteristiske træk og meget mere. Her vil du lære: Hvad er BeWo choriocarcinom-cellelinjen? Hvad er BeWo-syncytialisering? Hvor kommer BeWo-cellerne fra? Hvad er BeWo-cellernes morfologi? Hvad er ploidien i BeWo?

Placentacellelinjen BeWo stammer fra et malignt choriocarcinom fra en mandlig føtal placenta i 1968 [1]. Den fungerer derfor som en uvurderlig model for forskning i moderkagen.
BeWo-celler udviser en epitel-lignende morfologi.
BeWo-celler er relativt små, mellem 20 og 30 µM [2].
BeWo-celler udviser en stabil karyotype. Deres stamlinjetal er hypo-tetraploid. Det modale kromosomtal for BeWo-celler er 86. Det kan variere fra 71 til 178.
BeWo-celler producerer flere hormoner, f.eks. humant chorionisk somatomammotropin, humant chorionisk gonadotropin (hCG) og steroidhormoner.
BeWo-celler udtrykker molekylære markører, herunder CK 7, E-cadherin og VE-cadherin.

B30-underlinje

B30 er en underlinje af BeWo-celler. Den bruges til at undersøge optagelsen og transporten af næringsstoffer. Dette tilskrives deres kraftige vækst på porøse membraner.

BeWo og JEG-3

BeWo JEG-3-cellelinjer stammer fra choriocarcinomer og bruges i placentaforskning. BeWo-celler producerer hormoner på lavere niveauer end JEG-3, f.eks. humant choriongonadotropin (hCG) og østradiol.

Time-lapse-visualisering af fertiliteten af menneskelige æg, der illustrerer stadierne i blastocystdannelsen, som de ses under et mikroskop.

2. BeWo-cellelinje: Information om dyrkning

Det kan være svært at vedligeholde en cellekultur, hvis man ikke kender de vigtigste detaljer. F.eks: Hvad er fordoblingstiden for BeWo? Hvad er BeWo-cellemediet? Hvordan dyrker man BeWo-cellelinjen, og hvordan nedfryser man BeWo-celler?

Nøglepunkter for dyrkning af BeWo-celler

Fordoblingstid:	Populationsfordoblingstiden for BeWo-celler er ca. 30 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	BeWo er en adhærent cellelinje.
Tæthed for udsåning af celler:	Den anbefalede udsåningstæthed for BeWo-celler er 1 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. Ved udsåning fjernes gammelt medie fra cellerne, og cellerne skylles med 1 x PBS. Herefter tilsættes Accutase (passageløsning), og cellerne inkuberes i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Derefter tilsættes løsrevne celler med kulturmedier og centrifugeres. De høstede celler resuspenderes derefter og hældes i en ny kolbe.
Vækstmedium:	Ham's F12K-medie, der indeholder 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat og 2,5 g/L NaHCO3, bruges til at dyrke BeWo-celler. BeWo-cellemediet skal udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:	BeWo-celler vedligeholdes i en befugtet inkubator ved 37 grader Celcius og med en CO2-tilførsel på 5 %.
Opbevaring:	Frosne BeWo-celler opbevares ved under -150 °C i en elektrisk ultra-lavtemperaturfryser eller i dampfasen af flydende nitrogen.
Fryseproces og medium:	Det anbefales at nedfryse BeWo-celler i CM-1 eller CM-ACF frysemedium. Cellerne nedfryses ved hjælp af en langsom nedfrysningsmetode. Denne metode tillader kun et fald i temperaturen på 1 grad pr. minut, hvilket forhindrer cellerne i at få et chok og beskytter cellernes levedygtighed.
Optøningsproces:	Frosne celler optøs ved at nedsænke dem i et forudindstillet 37°C vandbad i 40 til 60 sekunder, indtil der er en lille isklump tilbage. Derefter tilsættes frisk vækstmedie, og cellerne centrifugeres for at fjerne komponenterne fra frysemediet. Den opsamlede cellepellet resuspenderes og fordeles i en kulturkolbe til vækst.
Biosikkerhedsniveau:	Et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1 er nødvendigt for at håndtere og vedligeholde BeWo-cellekulturer.

Optagelse af den epiteliale, polygonale morfologi og ø-lignende vækst af den humane choriocarcinom-cellelinje, BEWO, gennem 10x og 20x forstørrelse under mikroskopet.

3. Fordele og ulemper ved BeWo-cellelinjen

BeWo-celler har unikke egenskaber og kommer med specifikke fordele og ulemper. I dette afsnit vil vi udforske nogle af de mest bemærkelsesværdige.

Fordele og ulemper

De vigtigste fordele ved BeWo choriocarcinom-cellelinjen er:

In vitro placentacellemodel
BeWo-celler giver en in vitro-model til at studere trofoblastcelleadfærd og syncytialisering af moderkagen, hvilket replikerer processer, der er udfordrende at observere in vivo.
Produktion af hormoner
BeWo-celler udskiller hormoner som hCG og placentalaktogen, hvilket gør dem værdifulde til studier af hormonel regulering og forskning i reproduktionsbiologi.

Ulemper

Ulemperne ved BeWo trofoblastceller er:

Kræftcellelinje
BeWo-celler stammer fra choriocarcinom, som er en moderkagetumor. Denne oprindelse repræsenterer muligvis ikke fuldt ud normal placentacellefunktion.

4. Forskningsanvendelser af BeWo-celler

BeWo-cellelinjen bruges i vid udstrækning til forskning i moderkager. Her nævnes nogle få specifikke anvendelser af denne cellelinje:

Moderkage- og graviditetsrelateret forskning: BeWo-celler er centrale i placenta- og graviditetsrelateret forskning. Forskere bruger f.eks. disse celler til at undersøge transporten af stoffer, herunder lægemidler, næringsstoffer og toksiner, over placentabarrieren. Desuden undersøger de også produktionen og reguleringen af hormoner, herunder humant choriongonadotropin (hCG), placentalaktogen og steroidhormoner. Det er vigtigt for at forstå de hormonelle forandringer under graviditeten. Forskning udført i 2018 undersøgte effekten af bromerede flammehæmmere (BFR'er) på aktiviteten af sulfotransferase i den humane trofoblastiske cellelinje (BeWo). Dette enzym er involveret i reguleringen af de intracellulære niveauer af skjoldbruskkirtelhormonet [3].
Forskning i infektioner og sygdomme: BeWo-celler bruges også til at undersøge samspillet mellem patogener og placentaceller. Denne forskning er værdifuld for at forstå sygdomme, der kan overføres fra mor til foster, og for at udvikle strategier til at beskytte fosterets sundhed. Desuden hjælper denne cellelinje forskere med at undersøge komplikationer, der opstår under graviditeten, såsom præeklampsi. For eksempel brugte en undersøgelse udført af Michalina Bralewska i 2023 BeWo-trofoblastcellemodellen og fandt ud af, at både Chromogranin A (CgA) og det peptid, der stammer fra det, catestatin (CST), kan spille en rolle i den indviklede proces med præeklampsi (PE)-patogenese [4]. En anden undersøgelse udforskede trichosanthins anticancerpotentiale ved hjælp af BeWo choriocarcinom-cellelinjen. Forskningen gjorde også en ekstra indsats for at finde biomarkører ved at udføre sammenlignende proteomanalyse før og efter eksperimentet [5].

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 300123

5. Forskningspublikationer med BeWo-celler

Her er nogle vigtige forskningspublikationer med BeWo trofoblastceller.

AMPK-signalering regulerer mitofagi og mitokondriel ATP-produktion i den humane trofoblastcellelinje BeWo

Denne undersøgelse i Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) foreslog, at AMPK-signalering aktiverer mitofagi i BeWo-trofoblastceller via FUNDC1 og PRKN-faciliterede mitofagi-veje. Som følge heraf hjælper mitofagi med at opretholde ATP-produktionen og mitokondriernes membranpotentiale.

Ethylparaben inducerer apoptotisk celledød i humane placenta BeWo-celler via Caspase-3-vejen

Denne artikel blev offentliggjort i Animal Cells and Systems (2020). Undersøgelsen foreslog, at ethylparaben medierer BeWo-cellers apoptose via regulering af caspase 3-vejen.

Karakterisering af Xenobiotic og Steroid Disposition Potential of Human Placental Tissue and Cell Lines (BeWo, JEG-3, JAR, and HTR-8/SVneo) by Quantitative Proteomics

Denne undersøgelse i Drug Metabolism and Disposition (2023) anvendte placentacellelinjer, herunder BeWo, JAR, JEG-3 og HTR-8/SVneo, til at undersøge xenobiotika og steroidaflejring i celler.

Apelin og apelinreceptor i human placenta: Ekspression, signalvej og regulering af trofoblast JEG-3- og BeWo-cellers spredning og cellecyklus

Denne forskningsartikel i International Journal of Molecular Medicine (2020) foreslog, at Apelin, liganden for APJ-receptoren, fremmer BeWo-celleproliferation gennem APJ- og ERK1/2-, stat3- og AMPK-signalering. Det kan således være et vigtigt adipokin, der regulerer udviklingen af moderkagen.

Anfaldsmedicin og føtale næringsstoffer: effekter på kolintransportører i en human placentacellelinje

Denne undersøgelse i Epilepsia (2021) udforskede virkningerne af føtale næringsstoffer og antiepileptika på kolintransportører i den humane trofoblastiske cellelinje, BeWo.

6. Ressourcer til BeWo-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Her er nogle tilgængelige online-ressourcer om BeWo-cellerne:

In vitro-transfektion: Denne video hjælper dig med at lære in vitro plasmid-DNA-transfektionsprotokollen for adhærente celler.

Følgende link indeholder oplysninger om celledyrkning for BeWo-celler:

BeWo-celler: Dette websted indeholder vigtige oplysninger om celledyrkning for BeWo-cellelinjen. Det omfatter oplysninger om cellemedier og dyrkningsbetingelser. Der er også protokoller for subkulturer og håndtering af kryopræserverede og proliferative kulturer.

Referencer

Weber, M., et al, Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
Kolokol'tsova, T., et al., Characteristics of trophoblasts in long-term culture. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment (Reduktion i CgA-afledt CST-proteinniveau i HTR-8/SVneo og BeWo trofoblastiske cellelinjer forårsaget af det præeklamptiske miljø). International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y., et al., Sammenlignende proteomisk analyse af tilsætning af stoffet trichosanthin til BeWo-cellelinjen. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.