BxPC-3-cellelinje
BxPC-3 er en cellelinje for kræft i bugspytkirtlen, der stammer fra mennesker. Den anvendes bredt i kræftstudier. Forskere bruger primært disse celler til at studere biologien i bugspytkirtelkræft, identificere terapeutiske mål og udvikle lægemidler mod kræft.
Denne artikel indeholder vigtige oplysninger om BxPC-3-cellelinjen, som kan hjælpe dig med at arbejde med den. Hovedsageligt vil den diskutere:
- Generel information og oprindelse af BxPC-3-cellelinjen
- Dyrkning af BxPC-3-celler
- BxPC-3-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
- Anvendelser af BxPC-3-celler i forskning
- Forskningspublikationer om BxPC-3-celler
- Ressourcer til BxPC-3-cellelinje: Protokoller, videoer og meget mere
1. generel information og oprindelse af BxPC-3-cellelinjen
Kendskab til en cellelinjes oprindelse er afgørende for dens anvendelighed i forskning. Kendskab til dens egenskaber, herunder morfologi, cellestørrelse og ploidi, gør brugen af den mere ligetil og praktisk. Her vil du lære om BxPC-3-cellers oprindelse og generelle egenskaber: Hvad er BxPC-3-celler? Hvad er BxPC-3-cellelinjen? Hvad er oprindelsen til BxPC-3-cellelinjen? Hvad er BxPC-3's morfologi?
- BxPC-3, humane bugspytkirtelkarcinomceller, stammer fra en 61-årig europæisk kvinde med adenokarcinom i bugspytkirtlen i 1986. Disse celler blev bekræftet tumorigeniske, selv efter at patienten havde gennemgået flere radio- og kemoterapisessioner. Den etablerede cellelinje er således en uvurderlig model til at studere kræftudvikling og -progression.
- BxPC-3-celler har en epitelcellelignende morfologi.
- Det modale kromosomnummer for BxPC-3 er 59. Disse celler har en homozygot deletion på kromosom 18q, som koder for SMAD4/DPC4-proteinet. Desuden mangler cellelinjen BxPC-3 kras-mutationen, der er almindelig blandt bugspytkirteltumorer. BxPC-3 braf-deletion findes også i disse kræftceller i bugspytkirtlen.
Hvad er forskellen mellem BxPC3 og Pancodinio-1?
BxPC-3 PADC (pancreatic ductal adenocarcinoma) og Pancodinio-1 celler er primære kræftcellelinjer i bugspytkirtlen med en epitelial morfologi. Her har de første celler mere epitel-lignende egenskaber, mens de senere udviser mere mesenkymale egenskaber [1].
2. dyrkning af BxPC-3-celler
BxPC-3-cellelinjen bruges i vid udstrækning i kræftforskningslaboratorier. Du skal kende følgende nøglepunkter for at kunne dyrke denne cellelinje til kræft i bugspytkirtlen effektivt. Det vil du lære: Hvad er fordoblingstiden for bxpc3? Hvordan dyrker man BxPC-3-cellelinjen?
Nøglepunkter for dyrkning af BxPC-3-celler
|
Populationens fordoblingstid: |
Fordoblingstiden for BxPC-3-celler varierer mellem 48 og 60 timer. |
|
Vedhæftende eller i suspension: |
BxPC-3 er en adhærent cellelinje. |
|
Opdelingsforhold: |
BxPC-3-celler subkultiveres i et forhold på 1:2 til 1:4. Cellerne vaskes med 1 x PBS og inkuberes med en passageløsning kaldet accutase. Efter 8-10 minutter tilsættes frisk medie til cellerne, og cellerne centrifugeres. Pelleten resuspenderes igen i mediet, og cellerne hældes i en ny kulturbeholder til vækst. |
|
Vækstmedie: |
RPMI 1640-mediet bruges til dyrkning af BxPC-3-cellelinjen. Det er suppleret med 10 % føtalt kvægserum, 2,1 mM stabil glutamin og 2,0 g/L NaHCO3 for at opnå ideel cellevækst. Mediet skal udskiftes 2 til 3 gange om ugen. |
|
Vækstbetingelser: |
BxPC-3-cellekulturer vedligeholdes i en 37 °C befugtet inkubator, der er tilsluttet en 5 % CO2-forsyning. |
|
Opbevaring: |
Frosne celler opbevares generelt ved en temperatur på under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen for at beskytte cellernes levedygtighed. |
|
Fryseproces og medium: |
CM-1 eller CM-ACF kan bruges til at fryse BxPC-3-cellekulturer. En langsom fryseproces, der kun tillader et fald i temperaturen på 1 °C, følges for at forhindre, at cellerne får et chok. |
|
Optøningsproces: |
Frosne BxPC-3-celler optøs i et forudindstillet 37 °C vandbad i 40 til 60 sekunder. Når der er en lille isklump tilbage, tilsættes cellerne frisk dyrkningsmedie og centrifugeres for at fjerne elementer fra frysemediet. Derefter resuspenderes cellepelleten, og cellerne fordeles i kolben til vækst. |
|
Biosikkerhedsniveau: |
BxPC-3-cellekulturer vedligeholdes i laboratorier på biosikkerhedsniveau 1. |
3. bxPC-3-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
BxPC-3 er en velkendt cellelinje for adenokarcinom i bugspytkirtlen, som er forbundet med flere fordele og begrænsninger. De vigtigste fordele og ulemper ved cellelinjen er listet her.
Fordele og ulemper
De vigtigste fordele ved BxPC-3-celler er:
-
In vitro-model af kræft i bugspytkirtlen
BxPC-3-celler, der stammer fra patienter med adenokarcinom i bugspytkirtlen, udviser relevante egenskaber, hvilket gør dem til en velegnet model til undersøgelse af bugspytkirtelkræfts adfærd in vitro.
-
Tumorigen cellelinje
BxPC-3-celler har tumorigeniske egenskaber og kan danne tumorer, når de indsprøjtes i nøgne eller immunkompromitterede mus. Disse tumorer ligner meget primære adenokarcinom-tumorer i bugspytkirtlen, hvilket gør BxPC-3-xenograftmodellen ideel til at studere kræftvækst og -progression.
Begrænsninger
Begrænsningerne i forbindelse med BxPC-3-cellelinjen er:
-
Krydskontaminering
BxPC-3-cellelinjen indebærer som alle andre en risiko for krydskontaminering. Forskere bør udvise forsigtighed og overholde strenge protokoller til forebyggelse af kontaminering, når de håndterer disse celler.
-
Langsom væksthastighed
BxPC-3-celler udviser en relativt langsom spredningshastighed med en fordoblingstid på mellem 48 og 60 timer. Denne egenskab kan kræve længere inkubationsperioder for specifikke eksperimenter og potentielt forårsage forsinkelser i forskningen.
4. anvendelse af BxPC-3-celler i forskning
BxPC-3-celler har mange anvendelsesmuligheder inden for kræftforskning. De mest almindelige anvendelser er:
- Forskning i kræft i bugspytkirtlen: BxPC-3-celler efterligner adenokarcinom i bugspytkirtlen og bruges derfor til at udforske de genetiske og molekylære mekanismer, der ligger til grund for tumorudvikling og -vækst. Desuden afdækker forskerne nye biomarkører og terapeutiske mål ved hjælp af disse celler. Desuden udtrykker BxPC-3-celler i høj grad angiogene faktorer, dvs. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) og vaskulær endotelial vækstfaktor (VEGF), som gør dem velegnede til at studere angiogenese. Her er angiogenese en afgørende proces, der er forbundet med kræftvækst og metastase. En undersøgelse offentliggjort i 2022 viste, at overekspression af laminin-5 gamma-2 (LAMC2) i BxPC3 PDAC (pancreatic ductal adenocarcinoma) forbedrer tumorigenesen via regulering af BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR-signalvejen [2].
- Opdagelse og udvikling af lægemidler: BxPC-3-cellelinjen fungerer som en uvurderlig model til test af lægemidler mod kræft. Forskere undersøger potentielle lægemidlers cytotoksiske, anti-metastatiske og apoptotiske virkninger på BxPC3 PDAC. En undersøgelse udført af Alexandria Turner og kolleger i 2020 udforskede de apoptotiske egenskaber af frugtekstrakter fra Elaeocarpus reticulatus i BxPC-3-pancreascancerceller [3]. På samme måde blev der i 2020 udført forskning, der fastslog anti-kræftpotentialet i et methanolisk ekstrakt af en plante kaldet Oxialis obtriangulata i BxPC-3-celler. Desuden undersøgte forskerne også den cellemekanistiske rute, hvorigennem planteekstraktet udøvede terapeutiske virkninger [4].
5.forskningspublikationer om BxPC-3-celler
Dette afsnit viser nogle af de mest citerede og interessante publikationer med BxPC-3-cellelinjen.
Licocoumarone inducerer BxPC-3 pancreas adenocarcinom celledød ved at hæmme DYRK1A
Denne publikation i Chemico-Biological Interactions (2020) undersøgte de apoptotiske virkninger af et naturprodukt, licocoumarone, på BxPC-3-pancreascancerceller.
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i Anticancer Research (2022). Undersøgelsen foreslog, at hydroxyklorokin forårsager BxPC3-celledød ved at hæmme BCL-XL-genet.
Denne forskning blev offentliggjort i 2020 i Journal of Cellular Biochemistry. Undersøgelsen viser, at en naturlig forbindelse, salidroside, udviser anti-cancer-aktiviteter i BxPC-3-celler ved at regulere HIF-1α (hypoxia-inducible factor) og LOXL2-signalkaskaden.
Denne artikel i Biomedicine & Pharmacotherapy antyder, at ibrutinib kan bruges som et godt radiosensibiliserende middel hos patienter med kræft i bugspytkirtlen. In vitro-undersøgelser af BxPC-3-celler viser, at det reducerer BxPC3 EGFR-fosforylering og ekspression af pAKT og downstream-gener, der opreguleres af strålebehandling.
Chelidonin inducerer apoptose via GADD45a-p53-regulering i humane bugspytkirtelkræftceller
Denne undersøgelse i Integrative Cancer Therapies foreslog, at et naturprodukt, chelidonin, udøver apoptotisk aktivitet i humane bugspytkirtelceller BxPC-3 via regulering af BxPC3 p53 og GADD45a-signalering.
6. ressourcer til BxPC-3-cellelinje: Protokoller, videoer og meget mere
BxPC-3-cellelinjen har mange fængslende fordele, der gør den velegnet til forskningsbrug. Mange online-ressourcer om BxPC-3-cellelinjen nævner dens håndtering, vedligeholdelse og transfektionsprotokols.
- BxPC3-transfektion: Denne video er en trinvis vejledning til at lære transfektionsprotokollen for BxPC-3-celler.
Denne del af artiklen indeholder nogle links, der forklarer protokoller for BxPC3-celledyrkning.
- BxPC3-celledyrkning: Dette websted hjælper dig med at lære protokoller til subkulturering og håndtering af kryopræserverede og proliferative BxPC-3-kulturer.
Referencer
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overekspression af laminin-5 gamma-2 fremmer tumorigenese af pancreas ductal adenocarcinoma gennem EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus frugtekstrakter reducerer levedygtigheden og inducerer apoptose i kræftceller i bugspytkirtlen in vitro. Molekylærbiologiske rapporter, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Oxialis obtriangulata's anticancerpotentiale i bugspytkirtelkræftceller gennem regulering af den ERK/Src/STAT3-medierede vej. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.