A431-celler - dybdegående analyse af epidermoide carcinomceller i dermatologisk forskning

A431 er en human epidermoid cancer-cellelinje. Den anvendes i vid udstrækning inden for biomedicinsk forskning, hovedsageligt inden for kræftbiologi, immunonkologi og toksikologiske undersøgelser. Desuden overudtrykker A431-celler EGFR (epidermal vækstfaktorreceptor) og bruges derfor som en værdifuld in vitro-model til at studere cellecyklus og kræftassocierede cellesignalveje.

Denne artikel vil forklare det grundlæggende i A431-cellelinjen. Du vil lære følgende:

A431-celler: Generelle karakteristika og oprindelse
A431-cellelinje: Information om dyrkning
Fordele og ulemper ved A431-cellelinjen
Forskningsanvendelser af A431-celler
Forskningspublikationer med A431-celler
Ressourcer til A431-cellelinje: Protokoller, videoer og meget mere

1. A431-celler: Generelle egenskaber og oprindelse

Denne del af artiklen vil hjælpe dig med at få de generelle oplysninger om A431-cellelinjen, som du har brug for at vide, før du arbejder med den. Hvad er f.eks. oprindelsen af Hvad er A431-cellelinjen? Hvad er A431-cellelinjens egenskaber? Hvad er A431-cellernes morfologi? Hvor kommer A431-cellerne fra?

A431, en human hudkræftcellelinje, blev udtaget fra epidermis fra en 85-årig kvindelig epidermoid carcinom-patient [1]. Den blev etableret af D.J. Giard et al, som udviklede mange andre cellelinjer fra solide tumorer.
A-431-celler har epitelial morfologi. De samler sig og danner celleklynger.
Hudkræftcellelinjen a431 er hypertriploid. Det modale kromosomtal for denne cellelinje er 74, hvilket forekommer i omkring 36 % af cellerne. Højere ploidier findes også i ca. 1 % af en cellepopulation.

Tumor, der vokser under huden og infiltrerer det underliggende væv.

2.a431-cellelinje: Information om dyrkning

Kendskab til en cellelinjes dyrkningskrav og -procedurer kan gøre håndteringen af den problemfri. Denne del af artiklen vil hjælpe dig med at lære de vigtigste punkter for dyrkning af A431-cellelinjen. Du vil f.eks. få at vide: Hvad er fordoblingstiden for A431-celler? Er A431-cellelinjen adhærent? Hvilket vækstmedium bruges til A431?

Nøglepunkter for dyrkning af A431-celler

Fordoblingstid:	Fordoblingstiden for A431-celler varierer fra 80 til 100 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	A431 er en adhærent cellelinje.
Udsåningstæthed:	1 x¹⁰⁴ ^celler/cm2 celletæthed er ideel for A431-cellelinjen. Det tager næsten 4 dage for cellerne at blive konfluerende ved denne tæthed. Vedhæftende celler vaskes med PBS (1x) og inkuberes med Accutase-passageringsopløsning. Bagefter blev cellerne resuspenderet i et kulturmedium og centrifugeret. De høstede celler blev igen resuspenderet og fordelt i nye kolber til vækst.
Vækstmedium:	DMEM-medium suppleret med 10 % føtalt kvægserum, 4,5 g/L glukose, 1,0 mM natriumpyruvat, 1,5 g/L NaHCO3 og 4 mM L-glutamin anvendes til dyrkning af A431-cellelinjen. Mediet skal udskiftes hver 2. til 3. dag om ugen.
Vækstbetingelser:	A431-cancerceller dyrkes i en befugtet inkubator udstyret med en 5 % CO2-kilde ved 37 °C.
Opbevaring:	Cellelinjen kan opbevares i en elektrisk fryser eller i dampfasen af flydende nitrogen ved en temperatur på under -150 °C, da det hjælper med at beskytte cellernes levedygtighed.
Fryseproces og medium:	CM-1 eller CM-ACF er de to stærkt anbefalede frysemedier, der bruges til A431-celler. Cellerne nedfryses ved hjælp af en langsom nedfrysningsmetode, der kun lader temperaturen falde med 1 grad pr. minut.
Optøningsproces:	Frosne A431-celler optøs i et 37 °C varmt vandbad, der indeholder et antimikrobielt middel, i 40 til 60 sekunder. Når der kun er en lille isklump tilbage, tilsættes cellerne kulturmedier og centrifugeres. De høstede celler resuspenderes og hældes i dyrkningskolber til vækst.
Biologisk sikkerhedsniveau:	Biosikkerhedsniveau 1 anbefales til håndtering og vedligeholdelse af A431-kulturer.

A-431 sfæroider ved forskellige celletætheder.

3.fordele og ulemper ved A431-cellelinjen

A431-cellelinjen har særlige egenskaber og byder på flere fordele og ulemper. Herunder har vi opsummeret nogle af dem.

Fordele og ulemper

De vigtigste fordele ved A431-cellelinjen er:

Overudtryk af EGFR	A431-celler overudtrykker epidermal vækstfaktorreceptor (EGFR). De fungerer som en positiv kontrol til undersøgelse af EGFR-signalering og dens betydning for kræft. De bruges også til at evaluere nye kræftbehandlinger.
Tumorigenicitet	A431-celler er tumorigeniske og har evnen til at danne tumorer. De kan bruges til at udvikle xenotransplantationsmodeller, som er værdifulde værktøjer til at studere tumorvækstdynamik og vurdere nye kræftbehandlinger.

Ulemper

Ulemperne ved A431-celler er:

Genetiske abnormiteter	A431 er en kræftcellelinje med genetiske mutationer og ændringer, der kan adskille den fra de oprindelige tumoregenskaber.
Mikrobiel kontaminering	A431 er tilbøjelig til mikrobiel kontaminering, primært bakteriel kontaminering. Opretholdelse af aseptiske standardbetingelser for dyrkning kan dog hjælpe med at forhindre en sådan kontaminering i A431-cellekulturer.

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 300112

4. Forskningsanvendelser af A431-celler

A431-cellelinjen bruges i vid udstrækning i kræftforskning. Et par lovende anvendelser af denne hudkræftcellelinje er listet her. Kræftbiologi: Hudkræftcellelinjen A431 er et fantastisk forskningsværktøj til at undersøge cellulære og molekylære mekanismer, der driver kræftvækst, udvikling, metastase og invasion.

Forskere har i vid udstrækning brugt denne cellelinje til intensivt at studere de cellesignaleringsveje, der er involveret i forskellige kræftcelleprocesser. For eksempel viste en undersøgelse fra 2018, at PI3K/AKT/mTOR-signalvejen er involveret i spredning af kræftceller, og at hæmning af denne vej fremkalder apoptose i hudtumorceller, A431 [2]. Desuden rapporterede en anden undersøgelse også PI3K/AKT/mTOR-signalvejens bidrag til hudkræftcellers metastase og epitelial til mesenchymal transition (EMT), hvilket indikerer dens afgørende rolle i kræftudvikling og -progression [3]. Testning og evaluering af lægemidler: A431-celler bruges til at evaluere virkningen og effektiviteten af potentielle lægemiddelkandidater mod kræft. Forskere fastslår lægemidlers effekt på kræftcellers spredning, metastase, invasion og apoptose ved at udføre flere laboratorieeksperimenter - forskning udført af Nurhidayah Ab. Rahim og kolleger brugte A431-celler og vurderede det terapeutiske potentiale af en biogent syntetiseret sølvnanopartikel fra Alstonia angustiloba-planten i 2022. Resultaterne viste, at angustiloba-AgNP'er udøvede antiproliferative effekter på hudens pladecarcinomceller [4]. Tumor-xenotransplantationsmodeller: A431-cellelinjen er tumorigenisk og kan danne tumorer, når den inokuleres i en musemodel. Derfor er den et nyttigt redskab til at udvikle xenotransplantationsmodeller til mus for at undersøge kræftbiologi in vivo. Flere studier har brugt A431-cellelinjen til at udvikle xenotransplantationsmodeller. Yu Jin Lim og hans team udviklede f.eks. en xenotransplantationsmodel for hudtumorer ved hjælp af A431-celler til at vurdere den antitumorale og strålesensibiliserende effekt af eksogen epidermal vækstfaktor (EGF) in vivo [5]. 5. Forskningspublikationer med A431-celler Her er nogle vigtige forskningspublikationer med A431-hudkræftcellelinjen. Effektiviteten af biopolymeriske PVA-AuNPs og PCL-Curcumin-belastede elektrospundne nanofibre og deres anticanceraktivitet mod A431-hudkræftcellelinjen Denne artikel blev offentliggjort i Materials Today Communications i 2020. Undersøgelsen evaluerede anticancerpotentialet af poly-ε-caprolacton curcumin-loaded elektrospundne nanofibre og polyvinylalkohol-AuNPs mod A431-cancerceller. miRNA-221 fremmer progression af kutant pladecellecarcinom ved at målrette PTEN Denne undersøgelse offentliggjort i Cellular & Molecular Biology Letters (2019) foreslog, at microRNA-221 spiller en onkogen rolle i kutant pladecellecarcinom ved at målrette PTEN-genet. Svampevincristin fra Eutypella spp-CrP14 isoleret fra Catharanthus roseus inducerer apoptose i humant pladeepitelkarcinomcellelinje-A431 Denne forskning i BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) tyder på, at vincristin, en sekundær metabolit isoleret fra en svamp, Eutypella spp - CrP14, inducerer apoptose i A431-celler. Overekspression af CDC42SE1 i A431-celler reducerede celleproliferation ved at hæmme Akt-stien Denne undersøgelse blev offentliggjort i 2019 i tidsskriftet Cells. Denne forskning foreslog CDC42SE1-genet som en vigtig biomarkør for progression af hudkræft, da dets nedregulering letter tumorigenese. Metformin hæmmer spredningen af A431-celler ved at modulere PI3K/Akt-signalvejen Denne forskning blev offentliggjort i Experimental and therapeutic medicine i 2015. Den foreslog, at metformin undertrykte spredningen af hudkræftcellelinjen a431 ved at regulere PI3K/Akt-signalvejen. 6. Ressourcer til A431-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere Her er nogle online-ressourcer med hudkræftcellelinjen A431. Transfektion af A-431-celler: Dette link giver en trinvis vejledning i transfektion af A431-cancerceller. Følgende link indeholder oplysninger om celledyrkning af A431-celler. A431 kræftcellelinje: Dette link indeholder nødvendige oplysninger om celledyrkning for A431-cellelinjen. Det omfatter dyrkningsmedier, celletæthed, håndtering af kryopræserverede og proliferative kulturer osv. A431-celledyrkning: Denne hjemmeside indeholder en kort protokol til dyrkning af A431-cellelinjen.

Referencer

Quadri, M., et al, Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models. Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Anticanceraktivitet af koffeinsyre n-butylester mod A431 hudkarcinomcellelinje sker via induktion af apoptose og hæmning af mTOR/PI3K/AKT-signalvejen Tilbagetrækning i / 10.3892/mmr. 2021.12011.

Rapporter om molekylær medicin, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al., Eucalyptol retter sig mod PI3K/Akt/mTOR-vejen for at hæmme metastase af hudkræft.

Carcinogenesis, 2022. 43(6): s. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: s. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumorvækstundertrykkelse og forbedret radiorespons ved en eksogen epidermal vækstfaktor i xenograftmodeller med mus med A431-celler.

Kræftforskning og -behandling: Officielt tidsskrift for den koreanske kræftforening, 2015. 47(4): p. 921-930.